葡萄酒各种物化参数测定.docx

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葡萄酒各种物化参数测定

葡萄酒理化指标的测定

1酒精度的测定

密度计法

根据不同的酒精溶液所对应的比重不同的原理，将葡萄酒中的酒精蒸馏出来，通过用比重计测量其比重，计算出酒精溶液的浓度。

1  步骤

用100ml容量瓶准确量取20℃酒样倒入1000ml圆底烧瓶中，再用约100ml水冲洗容量瓶，洗液一齐倒入圆底烧瓶中，置600W电炉上加热蒸馏〔采用蛇形冷凝器〕开启冷却水，用原容量瓶接收蒸馏液〔以冷却水大小调节蒸馏温度，使蒸馏液的温度不超过25℃〕。

将蒸馏液摇匀倒入100ml量筒，选用适宜的精细酒精计，眼睛平视，读数读弯月面下缘，同时记录下温度，查酒精温度、浓度换算表，得到被测酒样的酒精度。

所得结果保存至1位小数。

2  结果的允许误差

平行实验测定结果绝对值之差不得超过0.1%〔v/v〕。

3  检验时考前须知

 被测样品酒精度在15%〔v/v〕以上时采用此方法。

 酒精计的分度值为或％〔v/v〕，所用酒精计必须经国家认可的计量部门检定。

 测定含气葡萄酒时需排气后再取样。

排气方法：

用低真空连续抽气2分钟。

 蒸馏液的温度应控制在20℃±5。

 为防止蒸馏过程中乙醇蒸汽的逃逸而影响测定结果的准确性，蒸馏前必须检查蒸馏仪器的接口处是否严密。

假设出现漏气，必须重新测定。

 对于挥发酸含量过高〔以醋酸计超过1g/l〕或二氧化硫含量过高的样品应根据总酸测定的结果，用1N的氢氧化钠对样品进展中和后再进展蒸馏。

2. 复原糖的测定

斐林法

 步骤

  预备试验

取斐林氏A、B液各5ml，置于250ml三角瓶中，加水50ml，参加酒样5ml，加热至沸腾。

在沸腾状态下，用0.25%的葡萄糖溶液滴定至淡蓝色，加2滴1%的次甲基兰指示剂，继续滴定至蓝色完全消失，记录所消耗的葡萄糖溶液的毫升数。

  正式试验

取斐林氏A、B液各5ml，置于250ml三角瓶中，加水50ml，参加酒样5ml。

然后参加比预备试验少1ml的0.25%的葡萄糖溶液，加热至沸腾并保持2分钟。

加2滴次甲基兰指示剂，在沸腾状态下，在1分钟内用葡萄糖溶液滴定至终点，记录消耗的毫升数，读数至小数点后两位。

  计算

复原糖〔以葡萄糖计，g/L〕＝［〔S－G×V〕/5］×F×1000

式中：

S－斐林氏A、B液各5ml，相当于葡萄糖的克数；

G－葡萄糖溶液的准确浓度，g/mL；

   V－〔两次滴定〕耗用葡萄糖溶液的平均体积，mL；

   5－取样体积，mL；

   F－制备含糖5～8g/L试样时，酒样的稀释倍数；

所得结果保存至1位小数。

  滴定结果的允许误差

平行实验测定结果绝对值之差不得超过。

  检验时考前须知

  测定的样品，含糖要在8g/L以下。

含糖量较高的样品要进展合理的稀释，最好稀释后样品的复原糖含量应在5～8g/L。

  样品要调整到20℃时取样。

  测定含气葡萄酒时需排气后再取样。

排气方法：

用低真空连续抽气2分钟。

  注意正式试验滴定时应在3分钟内完成。

  由于斐林氏A、B液的量对结果有影响，因此取样时一定要准确。

3 滴定酸的测定

指示剂法〔适用于白葡萄酒〕〔方法一〕

  步骤

用大肚吸管汲取调整至20℃的酒样5ml置于250ml三角瓶中，参加中性蒸馏水50ml，同时参加1％酚酞指示剂2滴，摇匀后立即用氢氧化钠溶液滴定至粉红色，30秒内不变色即为终点。

记录下氢氧化钠消耗毫升数。

读数至小数点后两位。

  电位滴定法〔适用于红葡萄酒〕〔方法二〕

  仪器

pH计

  步骤

    用大肚吸管汲取调整至20℃的酒样5ml置于100ml的烧杯中，参加中性蒸馏水50ml，同时参加1％酚酞指示剂2滴，放入磁力搅拌棒，将电极插入被测样液中，开搅拌器，立即用氢氧化钠溶液滴定至PH＝，即为终点，记录下消耗氢氧化钠的毫升数。

读数至小数点后两位。

  计算

总酸〔以酒石酸计，g/L〕＝（M×V1×0.075/V2）×1000

式中：

M－氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度，mol/L；

          V1－消耗的氢氧化钠毫升数，mL；

          V2－取样酒的体积，mL；

          －与氢氧化钠标准溶液相当的以克表示的酒石酸的质量。

S酒石酸＝； S苹果酸＝； S柠檬酸＝； S草酸＝

   S醋酸＝；   S琥珀酸＝； S乳酸＝；   S硫酸＝

所得结果表示至1位小数。

  结果的允许误差

平行实验测定结果绝对值之差不得超过。

  检验时考前须知

  滴定用容器〔三角瓶或烧杯〕应用中性蒸馏水冲洗干净。

  样品要调整至20℃时取样。

  测定含气葡萄酒时需排气后再取样。

排气方法：

用低真空连续抽气2分钟。

  滴定前应注意碱式滴定管排出气泡，滴定前后应注意滴定管尖充满溶液且滴定管尖不挂液滴。

  滴定时应注意滴定速度不能过快，接近终点时速度要放慢。

4挥发酸的测定

 蒸馏滴定法〔方法一〕

  仪器

挥发酸蒸馏装置见GB/T15038－94标准。

  步骤

准确汲取20℃酒样10ml于内芯B中，翻开冷凝水，将100ml容量瓶置于冷凝器下口接收蒸馏液，〔挥发酸蒸馏装置操作方法按GB/T  15038－94进展〕，待蒸馏液到达100ml时放松C，停顿蒸馏。

    将蒸馏液加热至沸腾，加1％酚酞指示剂2滴，以氢氧化钠溶液滴定至粉红色，30秒内不褪色即为终点，记录下消耗氢氧化钠的毫升数。

读数至小数点后两位。

  计算

挥发酸〔以乙酸计，g/L〕=〔M×V×〕×1000

式中：

M－氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度，mol/L；

          V－消耗氢氧化钠的体积，mL；

          －与氢氧化钠标准溶液相当的以克表示的乙酸的质量；10－取样体积，mL。

假设挥发酸含量接近或超过理化指标时，那么需进展修正。

    修正时，按下式换算：

酒中真实挥发酸〔以醋酸计，克/升〕＝实测挥发酸－修正挥发酸

修正挥发酸＝游离SO2〔克/升〕×＋结合SO2〔克/升〕×

式中：

－游离二氧化硫换算为乙酸的系数；

     －结合二氧化硫换算为乙酸的系数；

结合二氧化硫＝总二氧化硫－游离二氧化硫

所得结果表示至1位小数。

  结果的允许误差

平行实验测定结果绝对值之差不得超过平均值的5％。

  检验时考前须知

  测定含气葡萄酒时需排气后再取样。

排气方法：

用低真空连续抽气2分钟。

  蒸馏装置蒸馏效果鉴定方法

 以20mL蒸馏水为样品进展蒸馏，蒸馏出的水不应含有CO2。

以乙酸为样品进展蒸馏，其回收率应大于或等于％。

以乳酸为样品进展蒸馏，其回收率应大于或等于％。

5游离SO2的测定

  直接碘量法〔方法一〕

  步骤

汲取20℃的酒样25ml放入250ml碘量瓶中，参加少量碎冰块，参加1％淀粉指示剂1ml、1：

3硫酸溶液5ml，立即用的碘液滴定至淡蓝色，保持30秒不变色即为终点，记下消耗碘液的毫升数。

读数至小数点后两位。

  计算

          游离SO2〔毫克/升〕＝（M×V×32/25）×1000

式中：

M－碘标准溶液的摩尔浓度，mol/L；

          V－消耗的碘液的体积，mL；

     32－与碘标准溶液相当的以毫克表示的二氧化硫的质量；

          25－取样体积，mL。

所得结果表示至整数。

  结果的允许误差

    平行实验测定结果绝对值之差不得超过平均值的10％。

  检验时考前须知

 注意滴定时的滴定温度，滴定温度应保持在20℃以下，超过20℃应向

试液中参加少量冰块，然后再加硫酸酸化。

  试样应尽量防止与空气接触，以免二氧化硫溢出和被氧化。

  滴定颜色深的红葡萄酒时滴定终点不易于观察，可在碘量瓶旁放一强的黄光源，以易于观察终点。

但由于颜色深的红葡萄酒含有较高的单宁和色素会使碘液的消耗量明显增高，出现较大的正误差，故测定时最好不用此方法，应用方法二〔氧化法〕。

6总SO2测定

  直接碘量法〔方法一〕

  步骤

汲取氢氧化钠溶液25mL于碘量瓶中，用大肚吸管汲取20℃酒样25mL，管尖插入氢氧化钠溶液中，然后放出酒样，摇匀，盖塞，放暗处静置15分钟，参加少量冰块，再加1％淀粉指示剂1mL，1：

3硫酸10mL，用碘液迅速滴定至淡蓝色，30秒内不变即为终点，记录碘液消耗的毫升数，以水代替酒样作空白试验，操作同上。

读数至小数点后两位。

  计算

      总SO2〔mg/L〕＝[M×〔V1－V2〕×32/25]×1000

式中：

M－碘标准溶液的摩尔浓度，mol/L；

V1－测定酒样消耗碘标准溶液的体积数，mL；

V2－空白试验消耗碘标准溶液的体积数，mL；

32－与碘标准溶液相当的以毫克表示的二氧化硫的质量；

25－取样体积，mL。

所得结果表示至整数。

  结果的允许误差

    平行实验测定结果绝对值之差不得超过平均值的10％。

  检验时考前须知同上

7干浸出物的测定

  比重瓶法

  步骤

准确量取20℃酒样100或200mL于烧杯中，用蒸馏水屡次冲洗容量瓶，洗液一齐倒入烧杯中，置电炉上加热驱赶酒精。

待酒样蒸发至三分之一时，取下，冷却至19～20℃加水，定容至原体积。

将附温比重瓶彻底清洗，再依次用乙醇、乙醚洗涤吹干称量得附温比重瓶自重为G1；将煮沸30分钟并冷却至19℃蒸馏水注满比重瓶，装上附温度计〔瓶中无起泡〕，浸入20±℃恒温水浴槽中，至比重瓶温度计升至20℃，并稳定30分钟后，用滤纸除去溢出侧管的水，立即盖上小罩，擦干，称量得到附温比重瓶和水的共重，为G3；再将附温比重瓶洗净吹干，以需测样品代替水，按上述步骤称得样品和附温比重瓶共重为G2。

  计算

样品比重γ〔20/4〕＝〔G2－G1〕×〔G3－G1〕

式中：

－是γ〔20/20〕换算为γ〔20/4〕之系数；

G1－附温比重瓶的重量；

G2－样品和附温比重瓶的共重；

G3－水和附温比重瓶的共重。

    根据测得比重，查本方法附表A，得出总浸出物。

干浸出物〔g/L〕＝总浸出物－[〔总糖－复原糖〕×＋复原糖]

    所得结果保存至1位小数。

  结果的允许误差

平行实验测定结果绝对值之差不得超过／L。

  检验时考前须知

  每套附温比重瓶的G1和G3数值经测得后分别记录下来，作为不变常数，实际使用时只需测得G2，即可代入公式计算。

每套附温比重瓶的三个组件〔瓶身、温度计、小罩〕必须编号一致。

8总糖的测定

 斐林法

  步骤

    首先估计样品总糖的含量。

然后将样品稀释至大约含糖量为4～8g／L。

取稀释后的酒样50mL参加2mL〔1：

1〕盐酸，置于恒温水浴槽中，65～68℃水浴20分钟，取出后冷却，用氢氧化钠溶液中和至中性，20℃下定容至100mL，测定方法按2复原糖的测定进展。

计算出数值为总糖。

    所得结果保存至1位小数。

  滴定结果的允许误差

    平行实验测定结果绝对值之差不得超过。

  检验时考前须知

  测定总糖时对较高糖度的样品要正确计算其稀释倍数。

9单宁色素的测定〔高锰酸钾氧化值〕

  步骤

     用容量瓶取20℃酒样100mL，倾入蒸发皿中，置于沸水浴中，除去挥发物。

一般蒸发掉一半溶液即可，然后取下冷却至室温，返回原容量瓶中，洗涤蒸发皿3～4次，将洗液并入容量瓶中，定容摇匀，得处理液1。

用50mL容量瓶准确量取50mL处理液1于100mL烧杯中，参加2g左右粉末活性炭〔参加活性炭的量视酒的颜色而定，颜色深活性炭的两应大一些〕，用玻璃棒搅匀，静置5～10分钟，继而过滤，滤液搜集于三角瓶中。

要求滤液无色透明，否那么应再参加活性炭静置和过滤。

将所有滤液搜集50mL容量瓶中，重新定容至50mL，此液为处理液2。

    将处理液1用吸管汲取10mL置于1000mL三角瓶中，参加蒸馏水500mL及10mL靛胭脂指示剂，以的高锰酸钾溶液滴定至金黄色即为终点。

记下消耗的高锰酸钾的毫升数V1。

同样取处理液2，同上操作，记下消耗的高锰酸钾毫升数V2。

读数至小数点后两位。

  计算

单宁〔以没食子单宁酸计g/L〕=〔V1－V2〕×N××1000/Vs

式中：

V1－滴定试液中全部可氧化的复原物质的高锰酸钾溶液的用量，mL；

          V2－滴定试液中非单宁复原物质的高锰酸钾溶液用量，mL；

N－高锰酸钾标准溶液的当量浓度，N;

Vs－取样量，mL；

－与高锰酸钾标准溶液相当的以毫克表示的没食子单宁酸的质量，g。

所得结果保存至2位小数。

  结果的允许误差

    平行实验测定结果绝对值之差不得超过／L。

  检验时考前须知

  对于红葡萄酒滴定处理液1时终点较难判断，滴定时应注意观察终点。

10红葡萄酒色度的测定〔分光光度计法〕

  步骤

  测定酒样的PH值

       用pH计检测酒样的pH值。

  制备缓冲溶液

  A液：

磷酸氢二钠。

称取磷酸氢二钠定容至200mL。

  B液：

柠檬酸。

称取柠檬酸定容至200mL。

  制备缓冲液见附表B。

也可用混合A液和B液的方法用pH计直接测定pH值来制备缓冲液。

  用大肚吸管汲取2mL酒样于25mL比色管中，用与酒样一样pH值的缓冲液稀释至25mL，用1cm比色皿在分光光度计的λ620nm、λ520nm、λ420nm分别测吸光值〔以蒸馏水做空白〕。

  计算

将在分光光度计上测得的λ620nm、λ520nm、λ420nm吸光值三值相加后乘以稀释倍数，即为色度。

    结果保存1位小数。

  结果的允许误差

    平行实验测定结果绝对值之差不得超过。

  检验时考前须知

  染色品种可根据原酒颜色决定稀释的倍数。

  桃红酒色度较低，可不稀释直接用分光光度计比色。

  因澄清度不好的样品会影响色度结果，所以对澄清度不好的样品应先进展滤纸过滤或膜过滤后，再进展测定。

含气葡萄酒排气后再测定。

  待测样品应在比色槽中放置后15分钟后，观察比色皿中是否有气泡，假设有气泡趋赶后再开场比色。

11热稳定性检验

1 55℃三天保温法

  每批原酒冷冻过滤后待灌装的半成品酒，需做热稳定性检验。

  每批被测酒样过滤后需留比照样品，以备断定时参考。

  方法

取被测酒样过滤至澄清透明装入清洁的100mL比色管中，于恒温箱中55℃保温三天，取出后借助光源观察其透明度的变化〔与对照比拟〕。

然后，放置冷却至室温，借助光源观察其透明度的变化〔与对照比拟〕。

  合格断定

热稳后的样品（冷却至室温）与对照相比无变化，即为合格。

假如有絮状沉淀为不合格。

285℃15分钟保温法

 取被测酒样过滤至澄清透明装入清洁的100mL试管中，于85℃恒温水浴中保温15分钟,取出后借助光源观察其透明度的变化〔与对照比拟〕。

然后，放置冷却至室温，借助光源观察其透明度的变化〔与对照比拟〕。

 合格断定

热稳后的样品（冷却至室温）与对照相比无变化，即为合格。

假如有絮状沉淀为不合格。

12冷稳定性检验

  每批冷冻过滤后的半成品酒需做冷稳定性检验。

  方法

取被测酒样〔要求澄清透明无异物〕于750mL无色桃红酒专用瓶中，盖紧瓶塞于规定温度的恒温冰柜中保温三天，取出后借助光源观察其透明度。

葡萄酒和起泡酒以－4℃冷稳三天确定其冷稳定性。

白兰地酒以－15℃冷稳三天确定其冷稳定性。

  合格断定

冷稳后的样品在光源下澄清透明，无失光、无沉淀、无冒烟现象，即为合格。

试剂配制与标定

斐林氏溶液的配制与标定

  A液的配制方法

称取硫酸铜〔CuSO2·5H2O〕，用蒸馏水定容至1000mL，摇匀，过滤，储存于棕色试剂瓶中备用。

  B液的配制方法

称取酒石酸钾钠346g，氢氧化钠100g，用蒸馏水溶解，定容至1000mL，摇匀，过滤，储存于试剂瓶中，用橡胶塞塞紧备用。

  ％标准葡萄糖溶液的配制

将葡萄糖在105～110℃烘箱内烘干3小时，然后在枯燥器内冷却。

准确称取葡萄糖，用蒸馏水20℃定容至1000mL，摇匀，以无菌膜抽滤后于低温冰柜中冷藏保存。

注：

如葡萄糖标准溶液有絮状沉淀时应立即停顿使用。

  标定

汲取斐林氏A、B液各10mL，至于250mL三角瓶中，加水50mL，加制备好的葡萄糖溶液15mL，加热至沸腾。

在沸腾状态下，用同一葡萄糖溶液滴定至淡蓝色，加2滴1％次甲基兰指示剂，再继续滴定至蓝色消失即为终点。

从沸腾开场到滴定终点应在三分钟内完成。

平行试验三个，误差应小于10％，取平均值计算。

  计算      

S＝W/1000×V

     式中：

S－斐林氏A、B液各10mL相当于葡萄糖的克数

W－称取葡萄糖的重量，g。

          V－耗用葡萄糖溶液的总体积，mL。

  1％次甲基兰指示剂的配制方法

称取次甲基兰溶解于蒸馏水中，稀释至100mL。

           氢氧化钠溶液的配制与标定

  配制方法

称取2g氢氧化钠，加蒸馏水溶解，注入1000mL容量瓶内，用蒸馏水定容，过滤，放置两天后标定。

  标定方法

称取〔准确至〕基准苯二甲酸氢钾，于105～110℃烘干箱中烘干至恒重的基准苯二甲酸氢钾，溶于50mL不含二氧化碳的蒸馏水中，待全部溶解后，再参加1％酚酞指示剂2滴，用配制好的氢氧化钠溶液滴定至粉红色，保持30秒不变色即为终点，记录下所消耗的毫升数，同时作空白实验。

  计算：

M＝×〔V1－V2〕]

     式中：

         M－氢氧化钠溶液的实际摩尔浓度；

         W－苯二甲酸氢钾的重量，g；

         V1－耗用氢氧化钠溶液的体积，mL；

         V2－空白实验耗用氢氧化钠溶液的体积，mL；

         －每毫摩尔质量苯二甲酸氢钾的质量，g。

  1％酚酞指示剂配制方法

称取酚酞，溶于100mL95％中性酒精中。

注：

为保证氢氧化钠溶液的稳定性，应每月标定一次。

           硫代硫酸钠溶液的配制与标定

  配制方法

称取硫代硫酸钠〔Na2S2O3·5H2O〕，溶于1000mL水中，缓慢煮沸10分钟，冷却，于棕色瓶内放置两周后，过滤备用。

准确称取于120℃烘干至恒重的基准重铬酸钾，溶解于水，20℃定容成1000mL。

称取碘化钾30g，溶于100mL水中，配成30％碘化钾备用。

  标定方法

汲取重铬酸钾溶液15mL，于250mL碘量瓶中，参加30％碘化钾溶液2mL和硫酸20mL，摇匀，于暗处放置30分钟后，参加50mL，用配好的硫代硫酸钠溶液滴定至淡蓝色，加1％淀粉指示剂，继续滴定至蓝色消失，即为终点〔此时溶液呈三价铬离子的浅绿色〕，同时作空白实验。

  计算：

M＝W×15/1000/[〔V1－V2〕×0.04903]

     式中：

M－硫代硫酸钠溶液的实际摩尔浓度；

W－重铬酸钾的重量，g；

V1－耗用硫代硫酸钠溶液的体积，mL；

V2－空白实验中耗用硫代硫酸钠的体积，mL；

0.    04903－每毫摩尔质量重铬酸钾的质量，g。

           碘液的配制与标定

  配制方法

称取碘和碘化钾，于研钵内研细，参加少量水溶解后，继续研至完全溶解，定容至1000mL，保存于棕色瓶中。

  标定方法

汲取碘液10mL于250mL碘量瓶中，参加蒸馏水10mL，用已标定过的硫代硫酸钠溶液滴定至微黄色，然后参加淀粉指示剂2～3滴，继续滴定至蓝色消失即为终点。

  计算：

M＝M1×V/10

     式中：

          M－碘液的摩尔浓度；

          M1－硫代硫酸钠溶液的实际摩尔浓度；

          V－耗用硫代硫酸钠溶液的体积，mL；

          10－汲取碘液的体积，mL。

           硫酸溶液配制

  步骤

量取浓硫酸12mL，缓慢注入盛有200mL蒸馏水的烧杯中，搅拌，冷却后用蒸馏水稀释至1000mL。

〔1：

3〕浓硫酸溶液的配制

  步骤

取1体积浓硫酸注入3体积蒸馏水中，搅拌均匀。

           30％碘化钾溶液的配制

  步骤

称取30g碘化钾溶解于蒸馏水并稀释至100mL。

           1％淀粉指示剂的配制

  步骤

称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，然后注入100mL沸水中，煮沸呈完全透明，冷却备用。

           氢氧化钠溶液的配制

  步骤

称取氢氧化钠100g，用水溶解并稀释至1000mL。

  高锰酸钾溶液的配制

  步骤

称取分析纯的高锰酸钾于水中加热溶解，并煮沸30～40分钟，冷却后定容至1000mL，摇匀后静置一周，用细菌漏斗滤入深色瓶中贮存。

准确称取在烘干箱内枯燥至恒重的结晶草酸钠～两份，以200mL蒸馏水溶解，再参加浓硫酸5mL，在水浴上加热到60～70℃，然后用以上配好的高锰酸钾溶液滴定至粉红色，在1分钟内不褪色为止。

  计算：

N＝W/〔×V〕

      式中：

          N－高锰酸钾的摩尔浓度

          W－草酸钠的重量〔g〕

          －草酸钠的毫克当量质量

          V－滴定时耗用的高锰酸钾的毫升数

      葡萄酒色度测定方法中缓冲液的配制

  磷酸氢二钠的配制〔A液〕

         称取磷酸氢二钠定容至200mL

  柠檬酸的配制〔B液〕

         称取柠檬酸定容至200mL。

  缓冲液的配制

         配制缓冲液见附表B。

      醇－甲酸〔6:

4〕溶液的配制

  步骤

将6体积的甲醇和4体积的甲酸混合。

      0％柠檬酸溶液的配制

  步骤                                                                            称取20g柠檬酸，用100mL蒸馏水溶解。

      醇－氨溶液的配制

  步骤

取1mL氨水参加70％乙醇至100mL。

      0％冰乙酸的配制

  步骤

量取冰乙酸50mL，参加蒸馏水定容至100mL容量瓶中。

      酚兰－正丁醇试剂的配制

  步骤

称取溴酚兰，用正丁醇溶液溶解并定容于100mL容量瓶中。

      .05％美蓝的配制方法

  步骤

用的磷酸缓冲液配制％美蓝染色液。

磷酸缓冲液是用每升水参加约％磷酸于酸度计测得pH＝6。

称取美蓝〔次甲基兰〕用上述溶液溶解并定容。

生理盐水的配制

 步骤

称取9克分析纯氯化钠溶于蒸馏水中定容至1000mL。

  靛胭脂指示剂的配制

  步骤

称取靛胭脂指示剂溶于50mL硫酸中，用水定容至1L。

  ％过氧化氢溶液的配制

  步骤                                                                                 

汲取1mL30％过氧化氢〔开启后存于冰箱〕，用水稀释至100mL。

每天新配。

  25％磷酸溶液的配制

  步骤

量取295mL85％的磷酸，用水稀释至1000mL。

  甲基红-次甲基蓝混合指示剂

  步骤

将次甲基蓝乙醇溶液〔1g/L〕与甲基红乙醇溶液〔1