经典的抗原抗体反应.ppt

经典的抗原抗体反应.ppt

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病原生物与免疫学实验实实验室规则验室规则一.进入实验室必须穿护士服,不必需的物品不要携带入室，严禁在实验室进食、饮水。

二.保持实验室的安静和秩序,实验要严肃认真。

三.如有传染性材料的污染,及时报告老师。

四.实验过程中有仪器和器材的损坏要报告老师并登记。

五.实验后的材料要放到指定的位置。

六.离开实验室前,要用肥皂洗手,接触过传染性强的实验材料要用0.1%的新洁尔灭泡手1-2分钟七.值日生要作好值日工作,关好水,电,门窗,作好实验记录本的登记方可离开实验室。

抗原抗体反应Ab-Agreactions实验目的掌握血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的操作及结果的正确观察、判断；熟悉血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的原理；了解血型鉴定实验、免疫胶体金技术实验的用途。

抗原抗体反应的基础basisofAb-Agreaction抗原抗体反应的特点charactersofAb-Agreaction特异性Specificity抗原抗体反应的特点charactersofAb-Agreactions可逆性reversibility凝集反应Agglutinationreactions在一定浓度的电解质环境中，在一定浓度的电解质环境中，颗粒性抗原（红细胞、（红细胞、细菌、细菌、乳胶颗粒等）乳胶颗粒等）和相应抗体反应能够产生肉眼和相应抗体反应能够产生肉眼可见的凝集块。

可见的凝集块。

直接凝集直接凝集（directagglutination）间接凝集（间接凝集（indirectagglutination）间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验（inhibitionofindirectagglutination）直接凝集directagglutination-ABO-ABO血型的鉴定血型的鉴定identificationofABObloodtype概述overview血型系统BBllooooddggrroouuppssyysstteemm1901年发现的人类第一个血型系统-ABO血型系统发现者-奥地利细菌学家KarlLandsteinerABOABO血型系统的发现血型系统的发现DiscoveryofABObloodtype【实验原理】Experimentsmechanism血型是指红细胞的血型，是根据红细胞膜外表面存在的特异性抗原（镶嵌于红细胞膜上的糖蛋白和糖脂）来确定的，这种抗原或凝集原是由遗传决定的+【实验器材】Experimentsequipments1：

载玻片、采血针、牙签：

载玻片、采血针、牙签2：

抗A和抗B单克隆抗体、碘伏、棉签。

【操作步骤操作步骤】ExperimentsMethods1.在洁净的玻片两端用记号笔分别标上A、B，然后在A端滴一滴抗A单克隆抗体，B端滴一滴抗B单克隆抗体；2.用碘伏消毒手指；3.取无菌采血针，采血；4.用牙签一端蘸取少量血液，置于抗A单克隆抗体搅匀，换取另一根牙签蘸取少量血液，置于抗B单克隆抗体搅匀；5.轻轻转动玻片，使其充分混匀，静置数分钟后，观察结果。

注意：

两次取血的牙签一定不能混用。

注意：

两次取血的牙签一定不能混用。

（单克隆抗体克隆抗体+被被检者者红细胞）胞）被被检者血型者血型抗抗AA抗抗BBAA【实验结果实验结果】ExperimentsresultsBBABABOO【实验结果实验结果】Experimentsresults免疫标记技术immunolabelingtechniques简简介介免疫标记技术是指用荧光素、酶、放射性免疫标记技术是指用荧光素、酶、放射性同位素等对抗体或抗原进行标记，然后再同位素等对抗体或抗原进行标记，然后再通过检测标记物来观察抗原抗体反应的实通过检测标记物来观察抗原抗体反应的实验技术。

验技术。

分类classification免疫标记技术免疫标记技术放射物标记技术放射物标记技术免疫酶技术免疫酶技术免疫荧光技术免疫荧光技术免疫胶体金技术免疫胶体金技术酶联免疫吸附技术酶联免疫吸附技术酶免疫组化技术酶免疫组化技术双抗体夹心法双抗体夹心法竞争法竞争法双抗原夹心法双抗原夹心法间接法间接法双位点一步法双位点一步法免疫胶体金技术胶胶体体金金试试纸纸条条诊诊断断是是采采用用胶胶体体金金免免疫疫层层析析技技术术研研制制而而成成，该该技技术术是是9090年年代代初初在在免免疫疫渗渗滤滤技技术术的的基基础础上上建建立立的的一一种种简简易易快快速速的的免免疫疫学学检检测测技技术术，最最先先用用于于人人绒绒毛毛膜膜促促性性腺腺激激素素（HCGHCG）的的测测定定和和乙乙型型肝肝炎炎病病毒毒表表面面抗抗原原（HBsAgHBsAg）等检测。

等检测。

p胶胶体体金金（ColloidalColloidalgoldgold）是是氯氯金金酸酸（HAuClHAuCl44）的的水水溶溶胶胶，氯氯金金酸酸在在还还原原剂剂的的作作用用下下，聚聚合合成成特特定定大大小小的的金金颗颗粒粒，并并由由于于静静电作用成为一种稳定的胶体状态。

电作用成为一种稳定的胶体状态。

p胶胶体体金金标标记记的的原原理理：

胶胶体体金金在在碱碱性性条条件件下下带带负负电电荷荷，与与蛋蛋白白质质分分子子的的正正电电荷荷基基团团藉藉静静电电吸引而形成牢固结合。

吸引而形成牢固结合。

p胶胶体体金金标标记记技技术术（ImmunogoldImmunogoldlabelinglabelingtechniquetechnique）是是以以胶胶体体金金作作为为示示踪踪标标记记物物应应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。

用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。

胶体金试纸条诊断技术的原理胶体金试纸条诊断技术的原理以以硝硝酸酸纤纤维维素素膜膜为为载载体体，利利用用了了微微孔孔膜膜的的毛毛细细血血管管作作用用，滴滴加加在在膜膜条条一一端端的的液液体体慢慢慢慢向向另另一一端端渗渗移移，通通过过抗抗原原抗抗体体结结合合，并并利利用用胶胶体体金金呈呈现现颜颜色色（红红色色）反反应应，检检测测抗抗原原/抗体。

抗体。

最常用的是双抗夹心法检测抗原最常用的是双抗夹心法检测抗原胶体金试纸条示意图胶体金试纸条示意图检测线检测线质检线质检线吸收垫吸收垫样品垫样品垫硝酸纤维素膜硝酸纤维素膜连接垫连接垫（胶体金垫）（胶体金垫）背衬背衬（底板）（底板）【实验原理】Experimentsmechanism原理图原理图胶体金标记的鼠抗人hCG抗体抗人hCG抗体抗鼠IgG抗体hCG【操作步骤】ExperimentsMethods1.1.待测样品、检测试纸和其它检测材料等在室温后检测待测样品、检测试纸和其它检测材料等在室温后检测2.2.将测试纸有箭头的一端插入尿液标本容器中，将测试纸有箭头的一端插入尿液标本容器中，55秒钟秒钟后取出平放，后取出平放，55分钟内观察结果分钟内观察结果注意：

测试纸插入尿液深度不可超过注意：

测试纸插入尿液深度不可超过MAXMAX标志线标志线【实验结果】Experimentsresults阳性：

阳性：

阴性：

阴性：

无效：

无效：

实验报告testreport实验原理实验材料实验步骤实验结果及分析注意：

实验报告封面上各项一定填写完整。

注意：

实验报告封面上各项一定填写完整。