植物组织培养资料.docx
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植物组织培养资料
一、名词解释。
1、植物组织培养:
植物的离体器官、组织或细胞在人工制备的培养基上进行无菌培养,并在人工控制的环境条件下,使其发育成完整植株的科学技术。
2、脱分化:
指失去分裂能力的细胞回复到分生性状态并进行分裂,形成无分化的细胞即愈伤组织的现象。
3、再分化:
愈伤组织形成不定芽或不定根或胚状体。
4、外植体:
植物组织培养过程中从活体植株上切去下来的用于离体培养的一切材料。
5、愈伤组织:
原本指植物在受伤后于其伤口表面形成的一团薄壁细胞。
在组培中,则指人工培养基上由外植体形成的一团无序生长的薄壁细胞。
6、器官发生:
胚胎时期由胚层器官原基发育成器官的过程。
包括细胞分化和器官形成。
7、胚状体发生:
在植物细胞、组织或器官体外培养过程中,由一个或一些体细胞经过胚胎发生和发育过程,形成的与合子胚相类似的结构。
可进一步发育成植株。
8、细胞全能性:
指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力。
9、细胞分化:
一个尚未特化的细胞发育出特征性结构和功能的过程。
10、极性:
细胞内的一端与另一端在形态结构和生理生化上的差异。
11、试管苗:
通过组织培养产生的植株。
12、看护培养:
是指用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞,使其持续分裂和增殖的一种培养方法。
这块愈伤组织被称为看护组织。
13、固相化培养:
将细胞或原生质体固着在琼脂糖、藻(月元)酸盐或多聚赖氨酸中,然后将他们放入液体培养基中震荡培养。
这种培养方法既利用了振荡培养室营养物质和气体易于交换的优点,有利用了固相化使细胞免受振荡时剪切力的作用。
14、悬浮细胞培养:
将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增值的技术。
适用于大规模的培养,使细胞工程的基本平台。
15、离体授粉:
将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来,进行无菌培养,并以一定的方式授以无菌花粉,使之在试管内实现受精的技术,又称为离体受精或试管受精。
16、器官培养:
指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
17、植物种质:
物亲代通过生殖细胞或体细胞传递给后代的遗传物质,植物种质资源即为携带各种不同遗传物质的植物总称。
18、玻璃化现象:
指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化。
其苗称为玻璃化苗。
19、基本培养基:
包括大量元素和微量元素(无机盐类)、维生素和氨基酸,还有糖和水等。
20、完全培养基:
在基本培养基基础上,根据各种不同试验要求,添加各种植物生长调节物质以及其他复杂有机附加物,包括有些成分尚不完全清楚的天然提取物。
21、外植体褐变:
在组织培养过程中,外植体向培养基中释放褐色的物质(醌类)致使培养基逐渐变成褐色,培养材料也随之变成褐色而逐渐死亡的现象。
22、微体快繁:
利用植物组织培养技术进行的一种营养繁殖方法。
23、微体嫁接:
把极小的茎尖作为接穗嫁接到实生木上,然后将嫁接后的砧木接种到新培养基上培养。
24、敏感植物:
有些植物对病毒极为敏感,一旦感染病毒就会在其叶片乃至全株上表现特殊的病斑,如马铃薯病毒—千日红、黄烟花、心烟叶、毛叶蔓陀罗。
菊花病毒—矮牵牛。
25、固相化的方法:
凝胶包埋、表面吸附、网格及泡沫固定、膜固定。
26、悬浮细胞培养:
将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
27、固相化细胞培养:
把细胞固定在一种惰性基质,如琼脂、藻盐酸、聚丙烯酰胺、纤维或膜上面或里面,细胞不能运动,而营养液可以在细胞间流动,供应其营养。
28、条件培养:
在选用的培养基中,加入一定量以生长过组织或细胞的培养液称条件培养液。
用条件培养液培养细胞,即使接种的细胞密度低于最低有效密度,这些细胞也能生长和分裂。
29、植物胚胎培养:
指对植物的胚、胚胎、胚珠和子房的培养。
30、植物生长调节剂:
植物中调节生长及其他功能的激素类物质。
主要分为三类:
植物生长素类、细胞分裂素类和赤霉素类。
31、液体培养:
指在进行培养时,培养基中不加琼脂等凝固剂,一般需要通过振荡等方法解决培养基的通气情况。
32、细胞培养:
指从植物体中分离了单细胞,无人工条件下进行培养,使其生长增殖,甚至发育成完整植株的技术。
33、无病毒苗:
指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
34、原生质体融合:
指使分离下来的不同亲本的原生质体,在人工控制的条件下,像性细胞受精作用那样互相融合成一体,又称体细胞杂交。
35、胚状体:
体细胞在一定条件下所诱导形成的胚称为体细胞胚,即胚状体
36、原生质体:
指去掉细胞壁的由质膜包裹有生命活力的裸细胞。
37、单倍体植株:
只含有配子体染色体组数的植株。
38人工种子:
指通过组织培养技术,将植物的体细胞诱导在形态上和生理上均与合子胚相似的体细胞胚,然后将它包埋于有一定营养成分和保护功能的介质中,组成便于播种的类似种子的单位。
39、初代培养基:
是指用来第一次接种外植体的培养基。
40、MS培养基:
它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的。
是目前应用最广泛的培养基。
特点是无机盐离子浓度较高,有高含量的N、K,硝酸盐量大,营养丰富。
41、母液:
是欲配制液的浓缩液。
配成比所需浓度高10-100倍。
母液配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等。
好处:
①保证各物质成分的准确性②配制时的快速移取③便于低温保藏。
42、原生质体融合:
也称体细胞杂交,就是使分离下来的不同亲本的原生质体,在离体条件下通过诱导发生的质膜融合进而细胞核融合,像性细胞受精作用那样互相融合成一体的现象。
43、单细胞培养:
对分离的到的单个细胞进行培养,诱导其分裂增殖,形成细胞团,再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体,直至长成完整植株的技术。
44、次生代谢产物:
指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物,其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
45、继代培养:
愈伤组织在培养基上生长一段时间以后,由于营养物质枯竭,水分散失,以及代谢产物的积累,必须转移到新鲜培养基上培养。
这个过程叫做继代培养。
46、形态建成:
外植体细胞在适宜的培养条件下发生脱分化、再分化,产生芽和根,或者形成胚状体,发育成苗或完整植株。
47、植物器官培养:
是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术。
分为营养器官和繁殖器官培养。
48、植物分生组织培养:
是指对植物的分生组织进行离体培养的技术,包括植物根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养。
其中茎尖培养广泛应用于植物再生和脱病毒研究。
49、植物细胞培养:
是指对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞进行离体培养,形成单细胞无性系或再生植株的技术。
50、胚培养:
采用人工的方法将胚从种子、子房或胚珠中分离出来,再放在无菌的条件下,让其进一步生长发育,以至形成幼苗的过程。
51、胚乳培养:
是指将胚乳从母体上分离出来,放在无菌的人工环境条件下,让其进一步生长发育,以至形成幼苗的过程。
52、胚珠培养:
是指将胚珠从母体上分离出来,在无菌的人工环境条件下培养,使其生长发育形成幼苗的过程。
53、子房培养:
是指将子房从母体上分离出来,在无菌的人工环境条件下培养,使其生长发育形成幼苗的过程。
54、平板培养法:
是把单细胞悬浮液与融化的琼脂培养基均匀混合,平铺一薄层在培养基底上的培养方法。
二、选择题。
1、1974年我国朱至清等设计了(B)培养基,目前广泛应用在花药培养中。
A、马铃薯-2号B、N6C、W14D、c17
2、组培室应建立在安静、清洁,并且在该地长年主风向的(A)方向。
A、上风B、下风C、左风D、右风
3、制作每升固体培养基常用琼脂的用量为(B)克。
A、4—6B、6—10C、10—15D、15—20
4、下列培养类型不属于液体培养的是(D)
A、旋转培养B、纸桥培养C、振荡培养D、看护培养
5、进行茎尖培养脱毒时,通常以带1-3个幼叶原基的茎尖作外植体较合适。
则茎尖的长度约为(B)。
A0.1-0.3mmB0.3-0.5mmC、0.4-0.6mmD、0.6-0.8mm
6、下列现象中不属于离体培养容易出现的三大问题的是(C)。
A、污染B、褐变C、黄化D、玻璃化
7超低温种质保存的温度为(C)。
A、0~15℃; B、-80℃ C、-196℃; D、-280℃
8、在植物组织培养表面灭菌时,常用的酒精浓度为(A)。
A、70%-75%B、80%-85%C、90%-95%D、100%
9、一般来说,在愈伤组织培养时,幼年细胞和组织比成年细胞和组织(B)。
A、困难B、容易C、一样D、不一定
10、利用花粉或花药培养,进行单倍体育种选育一个新品种只需(C)年。
A、1-3B、2-4C、3-5D、4-6
11、细胞工程、(B)、酶工程、发酵工程是生物技术的主要范畴。
A、蛋白质工程B、基因工程C、微生物工程D、生化工程
12、配制(B)溶液时应先用10%的HCl溶解,再加蒸馏水定容。
A、2,4-DB、BAC、GA3D、IAA
13、炼苗的环境开始时和(A)相似,后期类似于田间栽培条件。
A、培养室条件B、无菌界室条件C、缓冲间条件D、准备室条件
14、离体培养常用的诱导生根的生长调节物质主要是(A)。
A、生长素B、细胞分裂素C、脱落酸D、乙烯
15、植物组织培养实验室需要定期用(A)进行熏蒸。
A、高锰酸钾和甲醛B、酒精和洗液C、高锰酸钾和酒精D、高锰酸钾和洗液
16、进行无菌操作前,工作人员可以不必(A)。
A、洗脸B、换拖鞋C、穿工作服D、洗手
17、电子天平的感量一般在(C)范围。
A、0.1g或0.01gB、0.01g或0.001gC、0.001g或0.0001gD、0.1g或0.0001g
18、配制微量元素母液时,浓缩了200倍保存在1升容量瓶内,当制作4升培养基时,应取用铁盐母液(D)ml。
A、50B、40C、30D、20
19、适合双子叶植物花药培养的培养基是(A)。
A、MS培养基B、B5培养基C、N6培养基D、White培养基
20、下列不属于原生质体培养的是(D)
A、平板培养B、液体浅层培养C、悬滴培养D、糖培养
21、为了减少污染,一般选择培养材料的大小,在(A)之间。
A、0.1-0.5cmB、0.5-1.0cmC、1.0-1.5cmD、1.5-2.0cm
22、世界上首次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是(B)。
A、MorelB、HaberlandtC、SchleidenD、White
23、在植物组织培养表面灭菌时,常用的氯化汞浓度为(A)。
A、0.1-1%B、0.2-2%C、0.3-3%D、0.4-4%
24、在细胞悬浮液成批培养过程中,细胞数目会不断发生变化,其中细胞数目迅速增加,增长速率保持不变的是(C)。
A、减慢期B、延迟期C、对数生长期D、静止期
25、下列不属于原生质体培养的是(D)
A、平板培养B、液体浅层培养C、悬滴培养D、糖培养
26、在愈伤组织培养时,一般双子叶植物比单子叶植物诱导愈伤组织(B)。
A、困难B、容易C、一样D、不一定
27、在进行花药和花粉培养时,最适宜的花粉发育时期是(B)。
A、成熟花粉粒B、单核花粉期C、二核花粉期D、三核花粉期
28、植物组织培养中大多数植物都适用的培养基是(A)培养基。
A、MSB、N6C、WhiteD、B5
29、下列现象中不属于离体培养容易出现的三大问题的是(C)。
A、污染B、褐变C、黄化D、玻璃化
三、填空题。
1、根据培养的材料,植物组织培养分:
愈伤组织培养 、 器官培养 、 细胞培养 、 原生质体培养 、悬浮培养等类型。
2、植物组织培养的发展分为三个阶段:
萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段。
3、1902年, Haberlandt提出了植物细胞 “全能性”学说 ,1934年,White出版了《植物组织培养手册》从而使植物组织培养为一门新兴学科。
4、组织培养实验室必要的设备有 超净工作台、 高压灭菌器 、 空调机 、 天平 、 显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等。
5、培养基成分主要包括 ①无机营养成分、 ②有机营养成分) 、 ③植物生长调节物质 、 ④碳水化合物 、 ⑤其它物质 。
6、培养基最常用的碳源是蔗糖,使用浓度在1%-5%常用3%。
7、糖在植物组织培养中是不可缺少的,它不但作为离体组织赖以生长的 碳源 ,而且还能维持 培养基渗透压 。
8、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物,一般用量为6-10g/L之间。
9、杂种植株的鉴定:
形态学鉴定;细胞学观察;DNA内切图谱分析;同工酶分析
10、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向,其比值
高:
有利于根的形成和愈伤组织的形成;
低:
有利于芽的形成。
11、培养基灭菌一般在108kPa的压力下,锅内温度达121℃,维持20-30min。
12、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小。
13、诱导胚状体比诱导芽的优点:
(1)数量多、
(2)速度快、(3)结构完整。
14、试管苗的生态环境:
高温且恒温、高湿、弱光、无菌。
15、培养基中加入活性炭的目的:
利用其吸附能力,减少一些有害物质的影响。
16、筛选培养基的方法:
单因子试验法、多因子试验法、光谱实验法。
17、植物培养技术:
灭菌、接种、培养、驯化四个环节
18、试管苗的驯化注意:
基质、温、光、水、肥、气的综合管理
19、绝大多数培养植物再生植株时都先经过愈伤组织阶段。
20、愈伤组织形成大致经历诱导期、分裂期和分化期三个时期。
21、使用植物生长调节物质时要注意:
种类和浓度生长素和细胞分裂素的比值。
22、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式。
23、组织培养细胞再分化包括四个水平:
细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化(器官发生)和植株水平的分化。
24、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养。
25、杂种细胞的筛选与鉴定:
互补选择;机械分离杂种细胞法;双荧光标记选择法。
26、花药和花粉培养时,花粉发育的最适宜时期是单核中、晚期(单核靠边期)。
27、离体叶培养是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。
28、在离体叶培养中,6-BA和KT利于芽的形成;2,4-D利于愈伤组织的形成
29、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养。
30、离体胚的培养分为二种类型:
成熟胚培养和幼胚培养。
31、花药和花粉培养的共同特点是利用花粉(小孢子)染色体数目的单倍性,培育出单倍体植株。
32、子房培养分授粉子房培养和未授粉子房的培养。
前者培养的目的是挽救杂种胚,后者培养的目的是获得单倍体植株。
33、离体授粉的类型有离体柱头授粉、离体子房授粉、离体胚珠授粉。
34、离体胚培养方法:
成熟胚和幼胚培养
35、花药培养一般选择花粉的单核期进行接种
36、较高浓度蔗糖可诱导花粉形成愈伤组织;较低浓度蔗糖可使愈伤组织分化成苗。
37、花药培养是器官培养,花粉培养属细胞培养。
38、花药培养前的预处理:
低温冷藏是最常用的方法。
39、压片染色法是检测花粉发育时期的简便有效方法,常用染色剂为醋酸洋红。
40、条件培养基是悬浮培养过一段时间组织或细胞的液体培养基。
41、花粉的四大发育途径包括:
营养细胞发育、生殖细胞发育、营养和生殖细胞同时发育及花粉均等分裂发育
42、细胞悬浮培养方法:
成批培养;连续培养
43、由植物叶片分离单细胞的方法有机械法和酶解法。
44、原生质体的分离方法有机械分离法和酶法分离法。
45、原生质体培养基常用的渗透剂是甘露醇和山梨醇。
46、原生质体的纯化方法有:
沉降法、漂浮法和界面法。
47、原生质体活力的测定:
形态识别;染色识别。
48原生质体培养方法:
液体浅层培养;平板法培养;悬滴法培养;双层培养法;饲喂层培养。
四、简答题。
1、培养基一般包括哪些基本成分?
答:
培养基的成份有:
(1)无机营养:
包括:
氧(O)、碳(C)、氢(H)、氮(N)、钾(K)、磷(P)、镁(Mg)、硫(S)和钙(Ca)等大量元素;铁(Fe)、铜(Cu)、锌(Zn)、锰(Mn)、钼(Mo)、硼(B)、碘(I)、钴(Co)、氯(Cl)、钠(Na)等微量元素
(2)有机营养:
氨基酸、天然提取物、维生素、糖类(3)植物生长调节物质:
主要包括生长素类和细胞分裂素类。
(4)其他:
包括水、活性炭、琼脂等。
2、培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌?
答:
培养基一般采用湿热灭菌,如果培养基中的有些成分高温易分解,则可采用过滤灭菌.培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌。
植物材料一般采用药剂浸泡灭菌,具体操作如下:
(1)外植体的预处理,对植物组织进行修整,去掉不需要的部分,并将外植体用流水冲洗干净。
(2)用70%的酒精浸润材料30s左右。
(3)用灭菌剂浸泡灭菌,灭菌时不时搅动,使植物材料与灭菌剂有良好的接触,若灭菌
过程中加入数滴吐温,则灭菌效果更好。
(4)植物材料用无菌水冲洗3--5次,以除去灭菌剂。
3、植物组织培养技术主要包括哪些环节?
各环节的主要工作内容是什么?
答:
(1)培养基配置技术:
包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌。
(2)培养材料制备灭菌技术:
供体植物材料选择、外植体的选择和处理。
(3)无菌接种技术:
包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌。
(4)培养技术:
主要是培养条件的控制,包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH、渗透压等各种化学环境条件。
4、愈伤组织的形态发生有哪两种情况?
并比较各自由此形成完整植株的不同。
答:
(1)愈伤组织的形态发生可通过两种途径实现,一种是根芽器官直接分化形成植株,即器官发生途径;另一种是产生具胚芽、胚根的胚状体结构再形成植株,即体细胞胚胎发生途径。
(2)在器官发生途径中,芽或芽原基起源于培养组织中比较表层的细胞,即外起源,而根原基则发生于组织较深处,呈现单向极性,所形成植株的维管组织与外植体的维管组织联在一起。
而在胚状体发生途径中,绝大多数体细胞胚起源于单细胞,形成的胚状体有双极性,维管组织与外植体没有联系。
5、简述酶法分离原生质体的步骤。
答:
叶片表面消毒→去除表皮,将叶片切成小块→叶碎片放入含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→摇床保温培养→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基
6、简述人工种子生产步骤?
答:
选取目标植物→从适合的外植体上诱导愈伤组织→将愈伤组织转移到液体培养基→愈伤组织在液体培养基中增生扩大→愈伤组织转移至无激素培养基→产生体细胞胚→包裹人工种皮→炼苗→温室(大棚)播种→获得目标植物
7、培养基的配制
答:
配制培养基时应做好下列准备工作:
(1)实验用具的准备
(2)试剂、药品的准备(3)根据培养基的配方、母液扩大倍数及需要配制的培养基体积计算所需的各种母液及其他附加物的量。
具体操作如下:
1,取规定数量糖原和凝固剂,加热使之溶解2,根据计算所需量依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质母液及其他特殊附加物,搅拌均匀3,加水定容至规定体积
8、无菌操作技术
答:
无菌操作技术分为物理灭菌—干热、湿热、射线处理,物理除菌—过滤,化学方法—消毒剂、抗菌素灭菌。
注意事项:
(1)瓶口要清洗干净
(2)培养瓶上的标记要擦净(3)冬季用热水溶解洗衣粉后再洗(4)洗过玻璃器皿要沥干或烘干(5)移液管之类的量具和计量仪器不直接烘烤。
实验室一般使用高压灭菌锅,是在0.105mpa压力下,锅内温度达到121℃,在此水蒸气温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。
9、热处理脱毒法
答:
原理:
(1)高于正常温度的环境时,组织内部的病毒部分或全部钝化
(2)热处理使病毒失去传染力。
方法:
1,适用于离体材料和休眠器官的处理。
在50℃左右温水浸渍10min至数小时2,热空气法:
盆栽植物移入温热疗室,35~40℃,适合茎尖,处理时间短则几十分钟,长可达数月。
局限性:
1并非所有的病毒都对热处理敏感2延长热处理时间,也可能会钝化,植物组织中的抗性因子3处理后只有一小部分植株能存活。
10、NAA的中文名称是什么?
有何作用和特点?
答:
NAA的中文名称叫萘乙酸,是一种人工合成的生长调节物质。
其在植物体内有促使茎和节间伸长、向性运动、顶端优势、器官脱落和生根的作用。
在组织培养中NAA被用于诱导细胞的分裂和根的分化,并能与细胞分裂素互作促进茎芽的增殖。
11、植物遗传转化的方法:
答:
1.通过载体系统:
病毒、细菌质粒2.非载体介导:
种质系统(自身生殖系统细胞,如花粉)、直接转化系统(基因枪、超声波)。
12、原生质体融合的原理和方法
答:
植物原生质体最大特性是去掉细胞壁的裸细胞无论来源如何都具有彼此融合的能力1.自发融合2.诱发融合:
a,NaNO?
处理b,高PH值—高浓度钙离子处理c,聚乙二醇(PEG)处理d,电融合3.化学融合
13、外植体消毒应注意的问题:
1.要考虑药剂对各类菌类的杀灭效果,从中选出最有效的杀菌剂;
2.考虑植物材料对杀菌剂的忍耐力。
14、快繁的基本程序:
答:
1.稳定无菌培养体系的建立时期;2.稳定培养系的增殖、生长和健壮时期;3.诱导茎芽生根形成小苗时期;4.生根小苗移栽和驯化时期;5.商品苗培育时期。
15、克服外植体褐变:
答:
选取适宜的外植体和培养条件;剪切时尽量减少伤口面积,剪切口尽量平整;连续转移(继代培养);加入抗氧化剂。
16、玻璃化苗产生原因:
答:
乙烯过饱和,引起解氨酶活性降低,阻碍木质化进程;细胞激动素或铵离子的过剩也是一种原因;植物的磷酸戊糖代谢途径与玻璃苗产生也有关。
17、不定芽与体胚芽比较:
答:
(1)体细胞胚最根本的特征是具有两极性
(2)体胚的维管组织与外植体的该组织无解剖结构上的联系,而不定芽或不定根往往总与愈伤组织的维管组织联系(3)体细胞胚维管组织的分布是独立的“Y”字形,而不定芽的维管组织无此现象。
18、控制玻璃化苗的措施:
答:
1.使用透气性好的封口材料,尽可能降低培养容器中空气的湿度,改善氧气的供应情况。
2.选择合适的激素种类和浓度,注意生长素和分裂素的配合,尽量兼顾繁殖系数。
3.采用固体培养基,适当增加琼脂含量,降低培养基中的水势。
4.高温季节培养室要有降温措施,避免培养基温度的突然升高。
5.改变供氮形态。
6.在培养基中适量地添加间苯三酚或根皮苷、青霉素G钾、活性炭、聚乙烯醇均可以有效的抑制玻璃苗的产生。
7.适当地延长光照培养皿的时间或增加自然光照,提高光照的强度,有利于克服玻璃