安捷伦1200实用标准操作规程.docx
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安捷伦1200实用标准操作规程
Agilent1200液相色谱仪操作规程
设备组成:
G1311A〔四元泵〕、G1329A〔标准型自动进样器〕、
G1316A〔柱温箱〕、G1314B〔VWD检测器〕、
G1315D〔DAD检测器〕。
根本操作步骤:
(一)、开机:
1、打开计算机,进入WindowsXP画面。
〔IP地址由BootpService程序写入〕
2、打开1200LC各模块电源。
3、待各模块自检完成后,双击“仪器1联机〞图标,或〔点击屏幕左下角的“开始〞,选择“程序〞,选择“AgilentChemstation〞,选择“仪器1联机〞〕化学工作站自动与1200LC通讯,进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图〞菜单中选择“方法和运行控制〞画面,点击“系统视图〞,“样品视图〞,使其命令前有“√〞标志,来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、手动旋开冲洗阀。
7、点击“泵〞图标,点击“设置泵〞选项,进入泵编辑画面。
8、设流速:
3-5ml/min,点击“确定〞。
9、点击“泵〞图标,点击“控制〞选项,选中“启动〞,点击“确定〞,如此系统开始冲洗,直到管线内〔由溶剂瓶到泵入口〕无气泡为止,切换通道继续冲洗,直到所有要用通道无气泡为止。
假如使用缓冲盐,要参加泵头冲洗〔seal-wash〕,点击“泵〞图标,点击“控制〞选项,选择“用于泵密封垫清洗的泵〞,开启清洗泵前要配制90%水+10%异丙醇,溶剂不能干涸。
10、点击“泵〞图标,点击“控制〞选项,选中“关闭〞,点击“确定〞关泵,手动旋紧冲洗阀。
11、点击“泵〞图标,点击“设置泵选项〞,设流速:
。
12、点击泵下面的瓶图标,选择“溶剂瓶添充量〞如如下图所示〔以四元泵为例〕,输入溶剂的实际体积和瓶体积。
也可输入停泵的体积,点击“确定〞。
〔二〕数据采集方法编辑:
1、开始编辑完整方法:
从“方法〞菜单中选择“编辑完整方法〞项,如如下图所示选中除“数据分析〞外的三项,点击“确定〞,进入下一画面。
2、方法信息:
在“方法注释〞中参加方法的信息〔如:
Thisisfortest!
〕。
点击“确定〞,进入下一画面。
3、泵参数设定:
〔以四元泵为例〕
在“流速〞处输入流量,如,停止时间:
10min。
在“溶剂B〞处输入70.0,(A=100-B-C-D),也可“插入〞一行“时间表〞,编辑梯度。
在“压力限〞处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
点击“确定〞,进入下一画面。
4、自动进样器参数设定:
〔以标准型G1329A为例〕
选择适宜的进样方式,如下列图,进样体积,洗瓶位置为6号。
“标准进样〞----只能输入进样体积,此方式无洗针功能。
“洗针进样〞----可以输入进样体积和洗瓶位置,此方式针从样品瓶抽完样品后,会在洗瓶中洗针。
“使用进样器程序〞---可以点击“编辑〞按钮进展进样程序编辑。
点击“确定〞,进入下一画面。
5、柱温箱参数设定:
在“温度〞下面的空白方框内输入所需温度,如:
40度。
并选中它,点击“更多信息>>〞键,如下列图,选中“与左侧一样〞,使柱温箱的温度左右一致。
点击“确定〞,进入下一画面。
6、VWD检测器参数设定:
在“波长〞下方的空白处输入所需的检测波长,如254nm,在“峰宽(响应时间)〞下方点击下拉式箭头,选择适宜的响应时间,如>0.1min(2s)。
G1314B:
最快采样速率。
在“时间表〞中可以“插入〞一行,输入随时间切换的波长,如1min,波长=300nm。
点击“确定〞,进入下一画面。
7、DAD检测器参数设定:
检测波长:
254nm,带宽=4nm,参比波长=360nm,带宽=100nm;
检测波长:
一般选择最大吸收处的波长。
样品带宽:
一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。
参比波长:
一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。
参比带宽:
至少要与样品信号的带宽相等,许多情况下用100nm作为缺省值。
峰宽〔响应时间〕:
其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。
狭缝-狭缝窄,光谱分辨率高;宽时,噪音低。
同时可以输入采集光谱方式,步长,X围,阈值。
选中所用的灯。
10、在“运行时选项表〞中,选中“数据采集〞,点击“确定〞。
11、从“方法〞菜单,选中“方法另存为〞,输入一方法名,如“测试〞,点击“确定〞。
12、从“视图〞菜单中,选中“在线信号〞,选中“信号窗口1〞,然后点击“改变〞钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点击“确定〞。
(如同时检测二个信号,如此重复10,选中“信号窗口2〞。
)
13、从“运行控制〞菜单中,选择“样品信息〞选项,如如下图所示,输入操作者名称,如“安装工程师〞;在“数据文件〞中选择“手动〞或“前缀/计数器〞。
区别:
手动--每次做样之前必须给出新名字,否如此仪器会将上次的数据覆盖掉。
前缀/计数器----“前缀〞框中输入前缀,在“计数器〞框中输入计数器的起始位,仪器会自动命名,如vwd数据0001,vwd数据0002。
14、点击“确定〞,从“仪器〞菜单项选择择“启动系统〞。
15、等仪器准备好,基线平稳,从“运行控制〞菜单中选择“运行方法〞,进样。
(假如无自动进样器,如此基线平稳后,进样并搬动手动进样阀,启动运行。
)
〔三〕、数据分析方法编辑:
1、从“视图〞菜单中,点击“数据分析〞进入数据分析画面。
2、从“文件〞菜单项选择择“调用信号〞,选中您的数据文件名,如如下图所示。
点击“确定〞,如此数据被调出。
3、做谱图优化:
从“图形〞菜单中选择“信号选项〞,如如下图所示。
从“X围〞中选择“满量程〞或“自动量程〞与适宜的时间X围或选择“自定义量程〞调整。
反复进展,直到图的比例适宜为止。
点击“确定〞。
4、积分:
从“积分〞菜单中选择“积分事件〞选项,如如下图所示。
选择适宜的“斜率灵敏度〞,“峰宽〞,“最小峰面积〞,“最小峰高〞。
从“积分〞菜单中选择“积分〞选项,如此数据被积分。
如积分结果不理想,如此修改相应的积分参数,直到满意为止。
点击左边“√〞图标,将积分参数存入方法。
5、打印报告:
从“报告〞菜单中选择“设定报告〞选项。
点击“定量结果〞框右侧的黑三角,选中“面积百分比〞,其它选项不变。
点击“确定〞。
从“报告〞菜单中选择“打印报告〞,如此报告结果将打印到屏幕上,如想输出到打印机上,如此点击“报告〞底部的“打印〞钮。
(五)、关机:
1、关机前,先关灯,用相应的溶剂充分冲洗系统。
2、退出化学工作站,依提示关泵,与其它窗口,关闭计算机〔用shutdown关〕。
3、关闭Agilent1200各模块电源开关。
(六)、Agilent1200LC维护保养:
1、色谱柱长时间不用,存放时,柱内应充满溶剂,两端封死〔乙睛/甲醇适于反相色谱柱,正相色谱柱用相应的有机相〕。
2、手动进样器,当使用缓冲溶液时,要用水冲洗进样口。
3、流动相使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水〔易长菌〕。
4、带seal-wash的1200,要配制90%水+10%异丙醇,开启seal-wash清洗泵,溶剂不能干涸。