安捷伦1200实用标准操作规程.docx

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安捷伦1200实用标准操作规程

Agilent1200液相色谱仪操作规程

设备组成：

G1311A〔四元泵〕、G1329A〔标准型自动进样器〕、

G1316A〔柱温箱〕、G1314B〔VWD检测器〕、

G1315D〔DAD检测器〕。

根本操作步骤:

（一）、开机：

1、打开计算机，进入WindowsXP画面。

〔IP地址由BootpService程序写入〕

2、打开1200LC各模块电源。

3、待各模块自检完成后，双击“仪器1联机〞图标，或〔点击屏幕左下角的“开始〞，选择“程序〞，选择“AgilentChemstation〞，选择“仪器1联机〞〕化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。

4、从“视图〞菜单中选择“方法和运行控制〞画面,点击“系统视图〞，“样品视图〞，使其命令前有“√〞标志，来调用所需的界面。

5、把流动相放入溶剂瓶中。

6、手动旋开冲洗阀。

7、点击“泵〞图标，点击“设置泵〞选项，进入泵编辑画面。

8、设流速：

3-5ml/min，点击“确定〞。

9、点击“泵〞图标，点击“控制〞选项，选中“启动〞，点击“确定〞，如此系统开始冲洗，直到管线内〔由溶剂瓶到泵入口〕无气泡为止,切换通道继续冲洗，直到所有要用通道无气泡为止。

假如使用缓冲盐，要参加泵头冲洗〔seal-wash〕，点击“泵〞图标，点击“控制〞选项，选择“用于泵密封垫清洗的泵〞，开启清洗泵前要配制90%水+10%异丙醇，溶剂不能干涸。

10、点击“泵〞图标，点击“控制〞选项，选中“关闭〞，点击“确定〞关泵，手动旋紧冲洗阀。

11、点击“泵〞图标，点击“设置泵选项〞，设流速：

。

12、点击泵下面的瓶图标，选择“溶剂瓶添充量〞如如下图所示〔以四元泵为例〕，输入溶剂的实际体积和瓶体积。

也可输入停泵的体积，点击“确定〞。

〔二〕数据采集方法编辑：

1、开始编辑完整方法：

从“方法〞菜单中选择“编辑完整方法〞项，如如下图所示选中除“数据分析〞外的三项，点击“确定〞，进入下一画面。

2、方法信息：

在“方法注释〞中参加方法的信息〔如：

Thisisfortest!

〕。

点击“确定〞，进入下一画面。

3、泵参数设定：

〔以四元泵为例〕

在“流速〞处输入流量,如，停止时间：

10min。

在“溶剂B〞处输入70.0,（A=100-B-C-D），也可“插入〞一行“时间表〞，编辑梯度。

在“压力限〞处输入柱子的最大耐高压，以保护柱子。

点击“确定〞，进入下一画面。

4、自动进样器参数设定:

〔以标准型G1329A为例〕

选择适宜的进样方式,如下列图，进样体积，洗瓶位置为6号。

“标准进样〞----只能输入进样体积，此方式无洗针功能。

“洗针进样〞----可以输入进样体积和洗瓶位置，此方式针从样品瓶抽完样品后，会在洗瓶中洗针。

“使用进样器程序〞---可以点击“编辑〞按钮进展进样程序编辑。

点击“确定〞，进入下一画面。

5、柱温箱参数设定:

在“温度〞下面的空白方框内输入所需温度,如：

40度。

并选中它，点击“更多信息>>〞键，如下列图，选中“与左侧一样〞，使柱温箱的温度左右一致。

点击“确定〞，进入下一画面。

6、VWD检测器参数设定:

在“波长〞下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm，在“峰宽（响应时间）〞下方点击下拉式箭头，选择适宜的响应时间,如>0.1min（2s）。

G1314B:

最快采样速率。

在“时间表〞中可以“插入〞一行，输入随时间切换的波长，如1min，波长=300nm。

点击“确定〞，进入下一画面。

7、DAD检测器参数设定:

检测波长:

254nm，带宽=4nm，参比波长=360nm，带宽=100nm;

检测波长：

一般选择最大吸收处的波长。

样品带宽：

一般选择最大吸收值一半处的整个宽度。

参比波长：

一般选择在靠近样品信号的无吸收或低吸收区域。

参比带宽：

至少要与样品信号的带宽相等，许多情况下用100nm作为缺省值。

峰宽〔响应时间〕：

其值尽可能接近要测的窄峰峰宽。

狭缝-狭缝窄，光谱分辨率高；宽时，噪音低。

同时可以输入采集光谱方式，步长，X围，阈值。

选中所用的灯。

10、在“运行时选项表〞中，选中“数据采集〞，点击“确定〞。

11、从“方法〞菜单，选中“方法另存为〞，输入一方法名，如“测试〞，点击“确定〞。

12、从“视图〞菜单中，选中“在线信号〞，选中“信号窗口1〞，然后点击“改变〞钮，将所要绘图的信号移到右边的框中，点击“确定〞。

（如同时检测二个信号，如此重复10，选中“信号窗口2〞。

）

13、从“运行控制〞菜单中，选择“样品信息〞选项，如如下图所示，输入操作者名称，如“安装工程师〞；在“数据文件〞中选择“手动〞或“前缀/计数器〞。

区别:

手动--每次做样之前必须给出新名字,否如此仪器会将上次的数据覆盖掉。

前缀/计数器----“前缀〞框中输入前缀，在“计数器〞框中输入计数器的起始位，仪器会自动命名，如vwd数据0001，vwd数据0002。

14、点击“确定〞，从“仪器〞菜单项选择择“启动系统〞。

15、等仪器准备好，基线平稳，从“运行控制〞菜单中选择“运行方法〞，进样。

（假如无自动进样器，如此基线平稳后，进样并搬动手动进样阀，启动运行。

）

〔三〕、数据分析方法编辑:

1、从“视图〞菜单中，点击“数据分析〞进入数据分析画面。

2、从“文件〞菜单项选择择“调用信号〞，选中您的数据文件名，如如下图所示。

点击“确定〞，如此数据被调出。

3、做谱图优化：

从“图形〞菜单中选择“信号选项〞，如如下图所示。

从“X围〞中选择“满量程〞或“自动量程〞与适宜的时间X围或选择“自定义量程〞调整。

反复进展，直到图的比例适宜为止。

点击“确定〞。

4、积分:

从“积分〞菜单中选择“积分事件〞选项，如如下图所示。

选择适宜的“斜率灵敏度〞，“峰宽〞，“最小峰面积〞，“最小峰高〞。

从“积分〞菜单中选择“积分〞选项，如此数据被积分。

如积分结果不理想，如此修改相应的积分参数，直到满意为止。

点击左边“√〞图标，将积分参数存入方法。

5、打印报告:

从“报告〞菜单中选择“设定报告〞选项。

点击“定量结果〞框右侧的黑三角，选中“面积百分比〞，其它选项不变。

点击“确定〞。

从“报告〞菜单中选择“打印报告〞，如此报告结果将打印到屏幕上，如想输出到打印机上，如此点击“报告〞底部的“打印〞钮。

（五）、关机:

1、关机前，先关灯，用相应的溶剂充分冲洗系统。

2、退出化学工作站，依提示关泵，与其它窗口，关闭计算机〔用shutdown关〕。

3、关闭Agilent1200各模块电源开关。

（六）、Agilent1200LC维护保养：

1、色谱柱长时间不用，存放时，柱内应充满溶剂，两端封死〔乙睛/甲醇适于反相色谱柱，正相色谱柱用相应的有机相〕。

2、手动进样器，当使用缓冲溶液时，要用水冲洗进样口。

3、流动相使用前必须过滤，不要使用多日存放的蒸馏水〔易长菌〕。

4、带seal-wash的1200，要配制90%水+10%异丙醇，开启seal-wash清洗泵，溶剂不能干涸。