植物组织培养教学大刚初稿.docx
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植物组织培养教学大刚初稿
中等农业职业学校农业技术推广专业
植物组织培养教学大纲
（初稿）
编写：
周忠学
扎兰屯农牧学校
2007年3月17日
《植物组织培养》课程基本要求
总学时：
52学分：
3
适用专业：
中等职业学校3年制农业技术推广专业。
一、课程性质和任务
本课程是中等职业学校种植专业的一门主干专业课程。
其任务是：
使学生具备从事农业生产所必需的植物组织培养的基本知识和基本技能，培养学生的专业技术能力和综合职业能力，增强适应职业变化的能力、继续学习的能力和创新能力。
二、课程教学目标
本课程的教学目标是：
本课程主要向学生传授组织培养技术的培养基制备、灭菌、各种器官的接种培养、脱毒苗接种培养及脱毒苗快繁等基本技能；主要经济植物的接种培养。
通过本课程的学习，使学生掌握组织培养的基本理论和相关操作原理和操作规范，并能较比较熟练地操作组织培养的相关技能，为将来从事农作物、蔬菜、花卉、水果、林木等各种经济植物组织培养工作打下良好基础。
同时要注重学生的思想道德教育，加强学生职业道德培养。
（一）知识教学目标
1、了解植物组织培养实验室的设备，掌握实验室的一般操作技术。
2、掌握植物组织培养的特点、原理和培养过程，掌握主要经济植物组织培养的实用技术。
3、了解植物病毒对农业生产的危害及植物脱毒原理，掌握植物脱毒方法、植物脱毒苗的鉴定。
（二）能力培养目标
1、能培养正确使用植物组织培养实验室常用设备。
2、能熟练进行植物组织培养实验室的一般操作。
3、能熟练掌握当地2~3种经济植物脱毒、优良种苗组织培养和快繁技术。
4、初步具有获取、处理和应用农业生物技术领域新技术的能力。
（三）思想教育目标
1.具有热爱科学、实事求是的科学态度和创新精神。
2.具有法制观念和职业道德意识。
三、学时分配建议
序号
教学内容
理论授课学时数
实训授课学时数
1
实验设备及培养条件
4
2
2
培养基
4
2
3
操作技术
8
4
4
植物组织培养的原理
4
5
植物器官及组织的培养
4
4
6
植物脱毒苗的培养及鉴定
4
2
7
大田作物组织培养
2
2
8
花卉的组织培养
2
1
9
蔬菜水果的组织培养
1
1
10
木本植物组织培养
1
小计
34
18
合计
52
四、教学内容
（一）理论教学
第一章实验设备
1、植物组织培养实验室的设置；
2、植物组织培养实验室常用设备、仪器的使用；
3、常用器皿的洗涤方法及洗液的配制。
第二章培养基
1、植物组织培养培养基的组成及各种营养成分的作用；
2、培养基母液的配制方法及MS培养基配制方法；
3、各种培养基基本类型和基本的特点；
4、植物组织培养所需的环境条件。
第三章植物组织培养的原理
1、植物组织培养、外植体、愈伤组织的概念，植物组织培养的类型；
2、植物组织培养的基本原理：
植物细胞的全能性、脱分化、再分化、再生作用；3、植物组织培养的特点、植物组织培养的发展简史；
4、植物组织培养在生产中的应用。
第四章植物组织培养的基本操作技术
1、植物培养材的选择与确定；
2、植物培养材料的表面灭菌、外植体接种；
3、外植体的的初代培养、继代培养与生根培养；
4、植物离体快繁等操作技术。
第五章植物器官培养
1、植物茎尖、茎段、叶片等营养器官培养；
2、植物胚、胚乳、胚珠和子房、花药和花粉培养生殖器官培养；
3、植物分生组织、愈伤组织培养。
第六章脱毒苗的培养
1、植物病毒危害和脱毒机理，病毒的传播方式；
2、植物脱毒方法；
3、植物茎尖脱毒的一般过程；
4、影响茎尖成活的因素；
5、脱毒苗的鉴定方法：
目测法、指示植物法、血清学检测法、电子显微镜法；
6、脱毒苗的扩繁：
组织培养增殖、生产扩繁。
第七章 几种经济作物的组织培养技术
1、马铃薯茎尖培养脱毒和快繁技术；
2、花卉组织培养：
菊花、月季、香石竹、矮牵牛；
3、蔬菜水果组织培养：
草莓、葡萄、大蒜、番茄；
4、木本植物组织培养：
松树、杨树。
（二）实训教学
1、实验目的与要求：
通过实验课的学习，在学生学习过植物组织培养的基本理论的基础上，使学生掌握基本的植物组织培养的实验技术。
要求掌握组织培养实验室主要仪器设备的使用原理及方法；掌握培养基配制及灭菌方法。
要求学生能独立进行植物组织培养的一般操作，掌握茎段培养、叶片培养、花器官培养的基本技术；掌握马铃薯茎尖脱毒的方法及脱毒苗快繁方法；熟悉主要花卉、水果、蔬菜、林木的组织培养技术。
2、实训内容：
（1）、植物组织培养实验室的卫生与灭菌；
（2）、MS培养基母液的配制：
药品的称量、母液的配制；
（3）、不同培养材料MS培养基的配制:
马铃薯茎尖脱毒培养基及脱毒苗快繁培养基的配制、矮牵牛初代培养基的配制、菊花叶片初代培养基的配制；
（4）、培养基的灭菌：
培养基的分装、高压灭菌锅的使用、高压灭菌；
（5）、外植体接种：
矮牵牛叶片组织培养接种、菊花叶片、茎段组织培养接种，马铃薯茎尖脱毒及脱毒苗快繁。
3、实训时间分配：
根据教学实际情况可安排实验实习或教学实习，实验实习和教学实习均可安排18学时。
五、教学建议
1、在教学中要转变教学观念，要以能力为本位，以学生为主体组织教学活动，积极改进教学方法，充分调动学生学习的主动性和积极性，德育教育要贯穿于教学的始终，注意学生职业能力的培养，提高学生的综合素质。
2、课堂教学应尽量采用直观教学法，充分利用实物和影视、图像以及多媒体计算机教学等媒体手段，以增加学生的感性认识；在教学内容上要注重理论联系实际，启迪学生科学思维，培养学生的创新意识和能力；要加强实验室和教学基地建设，为搞好实践性教学创造良好的教学现场。
3、根据课程设置安排，本课程有3天校内技能实训时间，各地可以根据当地农业生产发展的需要，在校内或到有关生产单位集中强化训练常用农业微生物生产工艺和优良种苗组织培养快繁技术。
强化学生分析问题和解决问题的能力，提高学生的全面素质和综合职业能力，增强学生毕业后的就业竞争能力和自主创业能力。
六、教学评价
1、教学评价的办法。
教学评价一般采用考核（考试、考查）的办法，考核可分为基本知识考核和基本技能考核。
要加强实践技能考核。
2、注意改革考核方式。
本着让学生循序渐进地掌握职业能力的原则，考核可以采用分阶段（或分单元、分技能项目等）方式进行。
具体方法可以采用实际操作、笔试、口试、作业、实验报告等形式完成阶段性考核，课程结束时进行综合性（包括基本知识和基本技能）考试。
在考核过程中，注意培养学生的独立工作能力和个性发展，科学地引导和支持学生的独立见解。
3、学习成绩评定方法。
阶段性的考核可以采用百分制或优、良、及格和不及格等形式评定成绩，综合性考核（包括基本知识和基本技能）一般采用百分制。
课程结束时按一定的比例计算总成绩。
对学习和应用上有创新的学生应特别给予鼓励。
七、说明
1、本课程教学内容分为理论教学和实践性教学两部分。
2、各地在执行本大纲时，可以根据本地区的具体情况进行适当的调整。
授课计划
理论教学部分
顺序
教学目的、任务及讲授内容
时数
1
全部教材教学目标：
1、掌握植物组织培养的概念、原理，了解植物组织培养的类型；
2、掌握植物组织培养过程中母液的配制方法、各种培养基的配制方法；
3、掌握植物组织培养中培养基的灭菌方法，以及培养材料接种的无菌操作方法；
4、掌握培养材料的初代培养、继代培养，以及试管苗移栽技术；
5、掌握植物脱毒方法，脱毒苗鉴定技术，了解植物脱毒在农业生产中的应用；
6、掌握常见植物的茎段、叶片等器官的组织培养技术；
7、初步掌握植物组织培养的常用制备和仪器。
第一章实验设备及仪器
教学目的：
一、初步掌握常用设备、仪器的使用方法；
二、熟悉常用器皿的洗涤方法。
1、掌握植物组织培养实验室的设置
2、掌握植物组织培养实验室常用设备、仪器的使用；
3、掌握玻璃器皿的洗涤方法及洗液的配制。
教学内容：
第一节植物组织培养实验室的设置及常用设备
一、组织培养实验室的设置
二、常用设备仪器及使用
2
2
第二节常用器皿的洗涤
一、初用器皿的洗涤二、使用过的器皿的洗涤
三、特殊洗涤四、洗液的配制
2
3
第二章培养基
教学目的：
1、掌握植物组织培养培养基的组成及各种营养成分的作用；
2、掌握培养基母液的配制方法及MS培养基配制方法；
3、了解各种培养基基本类型和基本的特点；
教学内容：
第一节植物组织培养所需的营养与环境
一、水分二、无机营养
三、有机营养四、生长调节物质※＄
五、其它物质六、植物组织培养所需环境条件※
4
第二节培养基的基本类型与培养基的配制
一、基的基本类型二、基本培养基的选择
三、母液的配制方法※＄四、MS培养基的配制方法※＄
2
5
第三章植物组织培养原理
教学目的：
一、掌握植物组织培养、外植体、愈伤组织的概念及植物组织培养的原理；
二、掌握植物组织培养所需的环境特点，
三、了解植物组织培养的特点、植物组织培养的类型植物组织培养的发展简史
四、植物组织培养在生产中的应用
教学内容：
一、植物组织培养的概念
二、植物细胞的全能性
三、脱分化与植物的再生作用
2
6
第四章植物组织培养的基本操作技术
教学目的：
一、掌握选择外植体的方法
二、掌握外植体的表面消毒方法
三、掌握外植体的接种方法
四、掌握培养材料的初代培养、继代培养、生根培养技术，以及试管苗移栽技术。
教学内容：
第一节外植体的选择与确定
一、外植体的选择
二外植体的大小
三、植物的生理状态
第二节植物培养材料的表面灭菌
一、采样
二、培养材料的表面灭菌
三、常用的表面灭菌剂
2
7
第三节外植体接种
一、准备阶段的无菌操作
二、接种阶段的无菌操作
2
8
第四节培养材料的初代培养
一、初代培养条件二、初代培养物的建立
三、形态发生和植株再生四、培养物的观察记载
第五节继代培养与生根培养
一、继代培养
二、试管苗的生根培养
三、试管苗的移栽与管理
2
9
第六节植物离体快繁
一、植物快繁的器官形成方式二、植物快繁的程序
三、影响离体快繁的因素第一次小测验第五节
2
10
第五章植物器官培养
教学目的：
1、掌握植物茎尖、茎段、叶片等营养器官培养操作技术；
2、了解植物胚、胚乳、胚珠和子房、花药和花粉培养生殖器官培养操作技术；
3、初步植物分生组织、愈伤组织培养操作技术。
教学内容：
第一节营养器官培养
一、根段培养
二、茎段培养
三、叶培养
2
11
第二节生殖器官培养
一、胚培养二、胚乳培养
三、胚珠和子房培养四、花药和花粉培养
2
12
第三节植物组织培养
一、分生组织培养、
二、愈伤组织培养
三、植物薄层组织培养
2
13
第五章植物脱毒
教学目的：
1、了解植物病毒的种类以及在农业生产中的危害；
2、掌握植物脱毒的各种方法。
3、了解脱毒苗的鉴定方法。
教学内容：
第一节植物病毒危害和脱毒机理
一、植物病毒分布与危害
二、植物病毒的传播方式
三、脱毒机理
第二节植物脱毒方法
一、物理方法二、生物方法※＄
三、综合方法
2
14
第二节植物茎尖脱毒的一般过程※＄
一、材料选择与灭菌二、茎尖剥离与接种
三、茎尖培养四、影响茎尖成活的因素
五、茎尖组织的发育与管理
第三节脱毒苗的鉴定
一、目测法二、指示植物法
三、血清学检测法四、电子显微镜法
第四节脱毒苗的扩繁
一、组织培养增殖
二、生产扩繁
2
15
第六章主要经济植物的组织培养技术
教学目的：
1、掌握植物的茎尖脱毒技术
2、掌握茎段和叶片的组织培养技术
教学内容：
第一节马铃薯茎尖培养脱毒和快繁技术
一、茎尖培养脱毒技术
二、病毒检测
三、脱毒苗快繁技术
第二节蔬菜花卉组织培养
一、大蒜二、番茄三、矮牵牛
四、菊花、五、月季六、香石竹
2
16
第三节水果木本植物组织培养
一、草莓二、苹果三、葡萄
四、杨树五、松树
2
实践教学部分
17
实训一植物组织培养实验室的卫生与灭菌
2
18
实训二MS培养基的配制
一、药品的称量二、母液的配制
2
19-20
实验三不同培养材料培养基的配制
一、马铃薯茎尖脱毒培养基的配制
二、矮牵牛初代培养基的配制
三、菊花叶片初代培养基的配制
4
21-22
实验四培养基的灭菌
一、培养基的分装
二、高压灭菌锅的使用
三、高压灭菌
4
23-25
实验五外植体接种
一、矮牵牛叶片组织培养接种
二、菊花叶片、茎段组织培养接种
三、马铃薯脱毒苗快繁接种
6
26
机动
2
说明：
重点：
※难点：
＄
植物组织培养复习题
一、名词解释
1、植物组织培养2、植物细胞的全能性3、植物的再生作用4、脱分化5、再分化6、黄化7外植体8、玻璃化苗、9、污染10、初代培养11、继代培养12、脱毒13、褐化14、非介体传播15、介体传播16、愈伤组织17、胚状体18、离体快繁19、试管微型薯20、不定芽21、丛生芽22、玻璃化苗23褐化24、黄化
二、填空
1、按切除的植物体来源和培养对象的不同可分为、、、、。
2、植物组织培养也叫和培养。
3、植物组织培养从本质上来说属于繁殖。
4、裸子植物和单子叶植物的脱分化比植物困难，成熟组织比组织困难，单倍体植物比植物困难。
5、植物组织培养所需的营养成分主要有、、几类。
6、植物组织培养所需的营养成分都是以形式存在的。
7、植物组织培养所需的大量元素为、、、、、六种。
8、在MS培养基中，N元素以和态氮的形式供应。
9、在植物组织培养中铁元素以和结合生成有机的螯合铁形式供应。
10、在植物组织培养中所需的微量元素、、、、、、七种元素。
11、在植物组织培养中应用的糖类主要有、、，在生产上常用的是商用，在进行实验研究中必须使用。
12、在植物组织培养中常用的维生素主要有、、、、。
13、植物生长调节物质主要有、两大类。
14、生长素类生长调节物质主要有、、。
15、细胞分裂素类生长调节物质主要、、、、。
16、在配制MS培养基时，1000ML培养基中应加蔗糖克，琼脂克。
17、大多数光培养的植物所需的环境条件为：
温度、光照时间小时、光照强度_LX。
18、植物茎段离体培养可能有、、、四种发育方向。
19、实验室灭菌的主要设备、仪器有、、。
20、植物组织培养常用的无菌操作设备主要有、。
21、植物组织培养高压灭菌的条件为、、。
22、配制培养基的母液时，要把钙离子与、镁离子与相互错开，以免产生沉淀。
23、NAA、IAA、6-BA、2.4-D在121°C的温度下都可存在。
24、培养基配制完毕后，PH值应调整为。
25、IAA、IBA、GA可溶于；NAA可溶于，也于；6-BA可溶于少量中。
26、外植体常用的表面灭菌药品有、、、、、六种，我校常用、作表面灭菌剂。
27、在植物组织培养中，生长素类生长调节剂与细胞分裂素类生长调节剂的比例高有利于的形成，比例适中有利于的形成，比例小有利于的形成。
28、植物茎尖组织的离体培养可能发育的方向、、、。
29、用MS培养基进行组织培养时，生根培养所用的基本培养基一般为或，另加适量的。
30、试管苗移栽后管理要做到、、。
31、植物脱毒的方法有、、、四种方法。
32、物理脱毒方法有、、三种方法。
33、生物脱毒方法有、、、、五种方法。
34、脱毒苗的检测方法有、、、、五种方法。
35、植物根段培养采用的光照条件，其培养基多采用含无机盐离子浓度的培养基。
36、植物器官的培养分、两类。
37、植物茎段培养的外植体包括、、在内的幼茎切段。
38、叶器官培养的外植体包括、、、、、。
39、植物叶片离体培养有、、三种发育可能。
40、植物组织培养包括、、三种类型。
41、下图是植物组织培养的简略表示。
据此回答：
①—脱分化—→②—再分化—→③——→④
（1）①表示 ，它能被培养成为④的根本原因是 。
（2）②表示 ，它与①相比分化程度 ，
（3）诱导③时，培养基中生长调节剂的添加比例为。
（4）④代表的是，培养基的特点是基本培养基为、生长调节剂为。
（5）由①发育为④，是植物 的表现。
42、下图是用月季叶片做外植体进行组织培养的某些过程示意图，请据图回答：
（1）请把组织培养的过程按正常顺序排列（以字母表示）_____________。
（2）图D上的细胞团是___________，它的特点是____________。
（3）图C的培养基______________。
（4）图A的培养物的变化是____________。
（5）从原理上讲，植物细胞有形成再生植株的可能性，这是________的表现。
43、植物离体快繁器官的形成方式有、、、、。
三、选择题
1、植物组织培养本质上属于是（）
A、有性繁殖B、无性繁殖C、配子繁殖D、孢子繁殖
2、植物组织培养初代培养条件建立后，培养材料的各种养分都是靠（）得到。
A、自养B、异养C、寄生D、腐生
3、植物组织培养中培养基内的各种营养成分都以（）形式存在。
A、化合物B、单质C、无机物D、有机物
4、植物组织培养是指将（ ）
A．离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织B．愈伤组织培育成植株
C．离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体 D．愈伤组织形成高度液泡化组织
5、植物细胞表现出全能性的必要条件是（ ）
A.给予适宜的营养和外界条件
B.脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件
C.导入其他植物细胞的基因
D.将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内
6、植物组织培养过程中的脱分化是指（ ）
A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞
B．未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C．植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程
D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程
7.下列植物细胞全能性最高的是（ ）。
A.茎尖分生区细胞B.韧皮部细胞 C.木质部细胞 D.叶肉细胞
8、植物组织培养中，由愈伤组织产生的芽叫（）。
A、不定根B、不定芽C、丛生芽D、以上都是
9、用于组织培养中的植物器官或组织，称为（）
A.组织切片B．原生质体 C．外植体 D．愈伤组织
10、使用净化工作中时，紫外线灯必须照射（）。
A、5minB、10minC、20minD、30min
11、广义的植物组织培养的外植体指的是（）
A、植物器官B、植物器官、植物组织、植物细胞和原生质体
C、植物细胞和原生质体D、分生组织
12、狭义的植物组织培养的外植体指的是（）
A、植物的器官B、植物细胞和原生质体
C、分生组织和成熟组织D、细胞核
13、植物组织培养的培养基的灭菌时间为（）
A、10min---12minB、15min----20min
C、25min----30minD、30min以上。
14、植物组织培养的培养基的灭菌温度（）
A、111℃B、121℃C、131℃D、141℃
15、植物组织培养的培养基的灭菌条件为（）
A、111℃、15min----20min、108kPa
B、121℃、25min----30min、108kPa
C、125℃、25min----30min、108kPa
D、121℃、15min----20min、108kPa
16、电子天平预热的时间为（）
A、3-5minB、13-15minC、20-30minD、以上都对
17、进行固体培养时，外植体必须（）
A、全部埋入培养基中B、部分与培养基接触
C、以上都对D、以上都不对
18、外植体脱分化后从愈伤组织上长出的是（）
A、不定芽B、丛生芽C、定芽D、不定根
19、一般情况下植物根段培养中根的直接增殖培养条件是（）
A、光培养，25℃--27℃B、暗培养，25℃--27℃
C、光培养，15℃--17℃D、暗培养，15℃--17℃
19、病毒随植物种子和无性繁殖材料传播而扩大分布属于（）
A、介体传播B、非介体传播C、外力传播D、自然传播
20、植物病毒的传播不是介体传播的介质是（）
A、昆虫B、线虫C、真菌D、土壤
21、植物病毒的传播不是非介体传播的介质是（）
A、机械传播B、无性繁殖材料C、种子和花粉D、莬丝了
22、1/2MS培养基中指的是（）
A、所有药品、物质的用量都减少一半
B、维生素类减少一半
C、矿物质元素物质用量减少一半
D、矿物质、维生素类减少一半，蔗糖、琼脂量不减少，生长调节剂根据需要添加
24、一般情况下植物组织培养基所添加的糖类重量为（）
A、10g/L-15g/LB、20g/L-30g/LC、35g/L-45g/LD、60g/L-70g/L25、植物组织培养基中不添加的糖类物质是（）。
A、纤维素B、葡萄糖C、果糖D、蔗糖
26、外植体的修剪和清洗在（）中进行。
A、在田间和实验室B、田间和超净工作台
C、田间D、超净工作台
27、外植体的表面灭菌在（）中进行。
A、准备室B、人工培养箱C、田间D、超净工作台
28、叶片做外植体进行固体培养时，一般情况下（）与培养基接触。
A、将叶片的正面B、将叶片的反面
C、将叶片埋入培养基内D、以上都不对
29、一般情况下植物组织培养的培养基的PH值为（）
A、4.8B、5.8C、6.8D、7.8
30、诱导愈伤组织时培养基的生长素类与细胞分裂素类的比例为（）
A、生长素类与细胞分裂素类的比例适中
B、生长素类与细胞分裂素类的比例高
C、生长素类与细胞分裂素类的比例低
D、以上都不对
31、进行芽诱导时培养基的生长素类与细胞分裂素类的比例为（）
A、生长素类与细胞分裂素类的比例适中
B、生长素类与细胞分裂素类的比例高
C、生长素类与细胞分裂素类的比例低
D、以上都不对
32、进行根诱导时培养基的生长素类与细胞分裂素类的比例为（）
A、生长素类与细胞分裂素类的比
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