06.肠道杆菌.ppt

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第七章第七章肠道杆菌肠道杆菌肠道杆菌是一群生物学性状相似的G杆菌，多寄居于人和动物的肠道中，故名广泛存在于自然界,多为肠道正常菌群,也可引起多种条件性感染，少数为病原菌肠道杆菌细菌种类繁多根据生化反应抗原构造核酸杂交和序列分析，目前至少有44个菌属，170个种以上肠道杆菌的共同特性肠道杆菌的共同特性11形态与结构形态与结构为G中等大小杆菌，无芽胞，多数有周身鞭毛，某些细菌有荚膜或微荚膜（K或Vi抗原）。

大多数细菌有菌毛，需氧或兼性厌氧22培养培养在普通培养基上生长良好，形成中等大S型菌落，灰白色，液体培养基中呈均匀混浊生长。

在SS琼脂等鉴别培养基上，非致病菌分解乳糖产酸，形成红色菌落；而致病菌大多不分解乳糖，形成无色菌落。

33生化反应生化反应生化反应活泼，不同种细菌分解糖类或蛋白质形成不同产物，以此可区分各菌属和菌种例如：

肠杆菌科中的致病菌一般不分解乳糖；而非致病菌多分解乳糖44抗原结构抗原结构肠道杆菌抗原构造较为复杂，主要有菌体抗原（O抗原）、鞭毛抗原（H抗原）、荚膜或包膜（K或Vi）抗原及菌毛抗原等，这些抗原均通过血清学试验检出（11）OO抗原抗原为细胞壁的LPS最外层，耐热，与相应的抗体呈颗粒状凝集，凝块形成慢，不易摇散，具有种特异性初次自病人标本中分离的细菌，富含O特异多糖，菌落为S型。

经多次传代后特异性寡糖链丢失，菌落变为R型。

即发生S-R变异。

R型菌株致病性亦降低。

O抗原刺激机体产生IgM型抗体。

（2）

（2）HH抗原抗原为鞭毛抗原,成分为蛋白质,不耐热即被破坏,细菌失去鞭毛后发生变异,动力也消失。

H-O变异。

产生IgG抗体。

（3）（3）荚膜或包膜抗原荚膜或包膜抗原位于O抗原的外面,性质为多糖,能阻止O抗原发生凝集现象,重要的有Vi抗原和K抗原（44）肠道杆菌共同抗原（肠道杆菌共同抗原（ECAECA）存在于肠道杆菌的表面，为氨基糖聚合物。

非肠道杆菌一般不产生此抗原（5）（5）菌毛抗原菌毛抗原存在于菌毛蛋白中，能阻止O凝集55抵抗力抵抗力对热的抵抗力不强，湿热60经30min即被杀死对低温有耐受力,对一般消毒剂如漂白粉、酚、甲醛等均敏感致病性肠道杆菌耐胆盐、煌绿等染料,但对非致病性肠道杆菌有抑菌作用,此特性已被用于制作鉴别培养基或选择培养基第二节埃希菌属埃希菌属（Escherichia）有6个种，只有大肠埃希菌（E.coli）是临床最常见、最重要的一个菌种。

大肠埃希菌是肠道中重要的正常菌群；在宿主免疫力下降或细菌侵入肠外组织器官后即可成为机会致病菌，引起肠道外感染；一些血清型的大肠埃希菌具有致病性，能导致人类胃肠炎；在环境卫生和食品卫生学中常被用作粪便污染的卫生学检测指标。

一、生物学性状一、生物学性状（一一）形态染色形态染色G短杆菌，周鞭毛，有动力，周身有菌毛大肠杆菌鞭毛扫描电镜

（二）

（二）培养和生化反应培养和生化反应E.coli在普通培养基上形成中等大小的光滑型菌落；在SS培养基上，菌落呈红色本菌生化反应活泼，分解葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇等多种糖类，产酸产气，大肠埃希菌于普通营养平板培养生长的菌落大肠埃希菌于普通营养平板培养生长的菌落二二致病性致病性

（一）致病物质

（一）致病物质11.定居因子定居因子，又称黏附素能使细菌紧密黏附在肠道和泌尿道黏膜上皮细胞上，避免因肠蠕动和尿液的冲刷作用而被排出体外。

22.外毒素外毒素

（1）不耐热肠毒素（LT）肠细胞内cAMP，引起腹泻

（2）耐热肠毒素（ST）细胞内cGMP，引起腹泻（3）志贺样毒素（SLT）由溶源性噬菌体介导产生，可致血性腹泻；也可能与溶血性尿毒综合症有关（4）肠聚集耐热毒素（EAST）引起腹泻（二二）所致疾病所致疾病1.1.肠道外感染肠道外感染多为机会感染，以泌尿道感染最多见。

常由一些特殊血清型的E.coli所致（如O1、O4、O6及075等血清群），称为尿路致病性E.coli。

其致病因子为黏附素、溶血素、LPS、荚膜等。

在机体抵抗力降低、外伤或E.coli离开肠道侵入组织器官时致病；也可引起多种化脓性感染，如烧伤感染、胆囊炎、腹膜炎、肺炎、脑膜炎及败血症等，甚至导致内毒素休克2.2.肠道感染肠道感染引起肠道感染的大肠埃希菌分成5组，即

（1）肠产毒型E.coli、

（2）肠致病型E.coli、（3）肠侵袭型E.coli、（4）肠出血型E.coli及（5）肠集聚型E.coli，五种致病菌的致病机制、引起腹泻临床表现、致病物质有所不同

（1）

（1）肠产毒性大肠埃希菌（肠产毒性大肠埃希菌（ETECETEC）是旅游者腹泻和儿童腹泻的常见病因，由食入污染食物或水而致病。

ETEC胃在小肠粘膜上粘附定植产生LT、ST，或二者共同致病LT的作用与霍乱毒素相似，LT激活肠粘膜上皮细胞的腺苷环化酶;ST激活鸟苷环化酶，使细胞内的cAMP或cGMP升高，肠液大量分泌引起腹泻无菌毛的菌株，不会引起腹泻（22）肠致病性大肠埃希菌肠致病性大肠埃希菌（EPEC）EPEC）是婴幼儿腹泻的重要病原菌，能造成新生儿严重感染，死亡率很高本菌不产生肠毒素及其他外毒素，主要在十二指肠、空肠、回肠上端，细菌粘附于绒毛后大量繁殖，引起小肠刷状缘破坏，肠绒毛呈中等萎缩，引起上皮细胞排列紊乱和功能受损，严重干扰对肠道中液体的吸收功能，导致严重腹泻（33）肠侵袭性大肠埃希菌肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）EIEC）较少见，主要侵犯较大儿童和成人，粪-口途径感染本菌不产生肠毒素，细菌侵入大肠粘膜上皮细胞内生长繁殖，导致粘膜炎症和溃疡，病人有粘液脓血便、里急后重，症状也与菌痢相似，故易误诊为细菌性痢疾（4）（4）肠出血性大肠埃希菌肠出血性大肠埃希菌（EHEC）EHEC）引起出血性结肠炎，主要的血清型为O157H7。

EHEC的主要毒力因子有质粒编码的菌毛和噬菌体编码的志贺样毒素（SLT）。

SLT使肠上皮细胞死亡脱落、肠道出血、肾远曲小管和集合管变性以及血小板聚集和损伤内皮细胞EHEC感染包括出血性肠炎、溶血性尿毒综合征和血栓性血小板减少性紫癜1996年EHECO157H7曾在日本暴发流行，感染者达万人，死亡11人IntimateAdherenceofEHECtoEpithelialCells（55）肠集聚型大肠埃希菌）肠集聚型大肠埃希菌（EAEC）EAEC）是儿童持续性腹泻的病因之一。

引起婴儿持续性腹泻、脱水偶有血便其致病因子有粘附素、毒素、LPS、荚膜和血清抵抗因子等三三、微生物学检查法、微生物学检查法

（一）标本标本肠外感染采取中段尿、血液、脓液、脑脊液等；胃肠炎则取粪便。

2.2.分离培养与鉴定分离培养与鉴定肠道外感染除血标本外，均应涂片镜检；分离培养（用血平板）然后作生化鉴定。

泌尿道感染患者的尿标本还应做细菌总数测定，每毫升细菌超过105个细菌有诊断意义肠道内感染粪便标本可直接接种鉴别培养基，37培养18-24h,观察生长菌落并作涂片染色，镜检。

初步鉴定依据IMViC（+）IMViC：

吲哚（I）,甲基红（M）,VP（V）,枸橼酸盐利用（C）试验3.3.卫生细菌学检查卫生细菌学检查在环境卫生学和食品卫生学中，常以细菌总数和大肠菌群作为粪便污染的检测指标饮用水饮用水指指标标限限值值总大肠菌群不得检出耐热大肠菌群不得检出大肠埃希氏菌不得检出菌落总数（CFU/mL）100第三节志贺菌属志贺菌属是人类细菌性痢疾的病原菌，俗称痢疾杆菌。

当前细菌性疾痢仍然在世界很多国家流行本属细菌包括痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌和宋内志贺菌4个群，在我国菌痢以福氏和宋内志贺菌引起感染较为多见一生物学性状

（一）形态染色

（一）形态染色G-杆菌，2-3m0.5-0.7m无鞭毛，无荚膜，有菌毛（二二）培养及生化反应培养及生化反应在普通琼脂培养基上形成半透明光滑型菌落，分解葡萄糖，产酸不产气，仅宋内志贺菌迟缓发酵（48h）乳糖（三三）抗原构造与分类抗原构造与分类1.1.抗原类型抗原类型志贺菌属无H抗原，其抗原结构主要由O抗原和K抗原组成

（1）K抗原新分离的某些株表面带有此种抗原，不耐热，湿热100经1h即被破坏

（2）O抗原耐热，根据O抗原不同将其分为4个群（种）40余个血清型（四四）抵抗力抵抗力本属细菌对理化因素抵抗力较弱，对酸性环境也较敏感，在粪便中也很快死亡。

日光直接照射30min、湿热50-6010min即被杀死，在1%石炭酸中15-30min内死亡。

所以用于志贺菌分离的粪便标本应迅速送检。

二致病性与免疫性（一一）致病物质致病物质主要有菌毛,内毒素,有的还能产生外毒素。

侵袭力是志贺菌的主要致病因素1.1.侵袭力侵袭力菌毛细菌经口进入肠道，借菌毛粘附在回肠末端和结肠的粘膜上皮细胞表面，继而穿入上皮细胞内增殖。

一般在粘膜固有层繁殖形成感染灶偶尔引起败血症。

志贺菌一般不侵犯其他组织2.2.毒素毒素

（1）

（1）内毒素内毒素各群志贺菌都能形成强烈的内毒素内毒素作用机制：

*破坏肠粘膜上皮，造成粘膜下层炎症，并有毛细血管血栓形成，以致坏死、脱落，形成溃疡，出现粘液脓血便*使肠壁通透性增高，促进毒素吸收，引起一系列毒血症的症状，如发热、神志障碍，甚至中毒性休克*作用于肠壁植物神经，使肠蠕动失调并痉挛，尤以直肠括约肌受累明显，因而发生腹痛、腹泻、里急后重等症状

（2）

（2）外毒素外毒素A群志贺菌型和型能产生志贺外毒素（ST）,ST能引起Vero细胞病变,故也称Vero毒素（VT）ST组成:

由1个A及5个B亚单位组成。

B亚单位是毒素与靶细胞表面糖脂受体结合的单位；A亚单位链为毒性部分能抑制蛋白质的合成STST的作用的作用ST具有细胞毒素、肠毒素和神经毒素3种生物学活性肠毒素性此毒素有类似E.coli和霍乱肠毒素的作用能引起腹泻与呕吐细胞毒性使蛋白质合成中断，细胞变性坏死神经毒性在痢疾志贺菌引起的重症感染者可作用于中枢神经系统，造成昏迷或脑膜炎

（二）所致疾病

（二）所致疾病引起细菌性痢疾传染源：

病人和带菌者传播途径：

粪-口途径细菌随饮食经口进入肠道引起感染，潜伏期为数小时-7d，多数为1-2d。

少至200个细菌就可使人致病临床类型临床类型急性细菌性痢疾发病急,病程短，常有发烧、腹痛、里急后重并有粘液脓血便，若经及时治疗预后良好急性中毒性菌痢多见于小儿，以高热、休克、中毒性脑病为主要表现，死亡率高慢性细菌性痢疾病程在两个月以上，急性细菌性痢疾治疗不当，可转为慢性（三三）免疫性免疫性感染后可获得一定程度的免疫力，但免疫期短，也不稳固。

这可能与菌型多以及型别间缺乏交叉免疫有关志贺菌属的感染主要限于肠道，细菌很少入血。

所以其抗感染免疫主要依赖肠道粘膜局部sIgA形成等。

sIgA能阻止志贺菌吸附，于病后3d左右出现，但维持时间短三、微生物学检查法

（一）标本

（一）标本取粪便脓血或黏液部分，避免与尿混合；在使用抗生素前采样；标本应新鲜；若不能及时送检，宜将标本保存于30甘油缓冲盐水或专门送检的培养基内。

中毒性痢疾者可取肛拭。

（二）分离培养与鉴定

（二）分离培养与鉴定标本接种于肠道杆菌选择培养基或鉴别培养基上，常用S-S培养基。

37培养18-24h，取可疑菌落进行生化反应和血清鉴定，以确定菌群和菌型（三三）快速诊断法快速诊断法1.免疫染色法将粪便与志贺菌抗血清混匀，在显微镜观察有无凝集现象2.免疫荧光菌球检查法在含有荧光素标记的志贺菌属免疫血清的液体培养基中接种标本，培育4-8h后发现带有荧光的菌球为阳性3.协同凝集试验用含有SPA的葡萄球菌标记志贺菌属抗体，测定病人粪便中或增菌培养液中细菌及其可溶性抗原另外，还有乳胶颗粒凝集试验和PCR检测技术等四防治原则1早期发现、早期隔离和早期彻底治疗病人外，查出带菌者2切断传染途径，包括加强粪便管理、水源管理及食品卫生监督等第三节沙门菌属沙门菌属细菌种类繁多，有2500多个血清型。

多数对动物致病，对人