超敏反应性疾病及其免疫检测_精品文档.ppt

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超敏反应超敏反应/变态反应变态反应Hypersensitivity/AllergyHypersensitivity/Allergy定义：

定义：

机体机体接触接触到到某种某种抗原抗原并且致敏后，再次受到并且致敏后，再次受到相同抗原刺激时相同抗原刺激时，出现，出现生理功能紊乱生理功能紊乱或或组织细胞损组织细胞损伤伤的异常适应性免疫应答。

的异常适应性免疫应答。

变应原变应原（Allergen）:

（Allergen）:

引起超敏反应的抗原引起超敏反应的抗原超敏反应分为四型超敏反应分为四型（依发生机制和临床特点）（依发生机制和临床特点）：

型超敏反应型超敏反应（速发型超敏反应速发型超敏反应）型超敏反应型超敏反应（细胞溶解型或细胞毒型细胞溶解型或细胞毒型）型超敏反应型超敏反应（免疫复合物型或血管炎型免疫复合物型或血管炎型）型超敏反应型超敏反应（迟发型超敏反应迟发型超敏反应）型超敏反应型超敏反应特点：

特点：

1.1.发生快，恢复快；发生快，恢复快；2.2.常引起生理功能紊乱，一般无组织损伤；常引起生理功能紊乱，一般无组织损伤；3.3.由由IgEIgE介导，介导，肥大细胞肥大细胞和和嗜碱性粒细胞嗜碱性粒细胞参与参与有明显的个体差异和遗传背景。

有明显的个体差异和遗传背景。

型超敏反应型超敏反应一一.参与参与型超敏反应的成分型超敏反应的成分（一一）变应原变应原药物或化学物质药物或化学物质-青霉素、磺胺等青霉素、磺胺等吸入性变应原吸入性变应原-花粉、屋尘花粉、屋尘（尘螨、皮屑、尘螨、皮屑、真菌的孢子等真菌的孢子等食物变应原食物变应原-鱼、虾、肉、蛋、牛奶等鱼、虾、肉、蛋、牛奶等接触性变应原接触性变应原-工业产品及合成物工业产品及合成物型超敏反应型超敏反应（二二）抗体IgEIgE（三三）细胞细胞肥大细胞和嗜碱性粒细胞肥大细胞和嗜碱性粒细胞IgEIgEFcFc受体受体嗜酸性粒细胞嗜酸性粒细胞预先存在的介质预先存在的介质预先存在的介质预先存在的介质（脱颗粒）（脱颗粒）（脱颗粒）（脱颗粒）组织组织胺胺胺胺（histaminehistamine）趋趋化化化化因子因子因子因子激激激激肽肽原原原原酶酶蛋白水解蛋白水解蛋白水解蛋白水解酶酶白三白三白三白三烯烯（LeucotrienesLeucotrienes，LTsLTs）前列腺素前列腺素前列腺素前列腺素（PGD2PGD2）即即即即刻刻刻刻早早早早期期期期晚晚晚晚期期期期II型超敏反应发生的机制型超敏反应发生的机制血小板活化因子血小板活化因子血小板活化因子血小板活化因子（PlateletactivityfactorPlateletactivityfactor，PAFPAF）新合成的介质新合成的介质新合成的介质新合成的介质型超敏反应的常见疾病型超敏反应的常见疾病

（一）过敏性休克

（一）过敏性休克药物过敏性休克药物过敏性休克血清过敏性休克血清过敏性休克

（二）呼吸道过敏反应

（二）呼吸道过敏反应过敏性鼻炎过敏性鼻炎（枯草热枯草热）、支气管哮喘、支气管哮喘（三）消化道过敏反应（三）消化道过敏反应（四）皮肤过敏反应（四）皮肤过敏反应荨麻疹、湿疹、荨麻疹、湿疹、血管血管神经性水肿。

神经性水肿。

荨麻疹荨麻疹湿湿疹疹结膜炎结膜炎哮喘病哮喘病II型超敏反应免疫学检测项目型超敏反应免疫学检测项目皮肤试验实验原理：

变应原致敏者皮肤Ag+IgE（M、B）皮肤挑刺、划痕皮内注射释放生物活性介质20-30m局部皮肤出现红晕、红斑、风团阳性皮肤试验皮内试验方法皮肤消毒变应原提取液注入前臂内侧皮内（0.01-0.02ml）2-3mm的皮丘两种间距2.2-5.0cm15-25分钟观察结果阴性对照-生理盐水阳性对照-盐酸组胺皮肤试验假阳性原因假阳性原因变应原稀释液偏酸或偏碱患者有皮肤划痕症抗原不纯和被污染抗原量注射过多假阴性原因假阴性原因变应原抗原性丧失或浓度过低患者皮肤反应较低受试者正使用抗组胺类药或激素类药注射部位过深或注射量太少型超敏反应型超敏反应临床意义寻找变应原预防药物或疫苗过敏应用评价过敏原有限食物过敏与皮肤试验相关性较差选择过敏原应结合实际情况型超敏反应型超敏反应血清总IgEIgE检测常用方法：

免疫比浊法化学发光免疫法酶联免疫吸附法-适用于中小实验室临床意义：

升高见于型超敏反应性疾病，寄生虫感染，IgE型多发性骨髓瘤应用评价：

应建立当地人群IgEIgE水平的参考区间临床实验室常用型超敏反应型超敏反应特异性IgEIgE检测（sIgE）放射变应原吸附试验免疫印迹测定法斑点酶免疫印迹法斑点酶免疫印迹法实验原理实验原理用用NCNC膜膜作作为为固固相相支支持持物物，检检测测区区的的不不同同区区域域包包被被有有特特异异性性的的过过敏敏原原。

检检测测时时将将稀稀释释的的病病人人血血清清加加入入反反应应槽槽内内，血血清清中中的的sIgEsIgE与与NCNC膜膜上上的的相相应应过过敏敏原原结结合合，再再加加入入酶酶标标记记的的抗抗人人IgEIgE抗抗体体，此此抗抗体体会会与与检检测测区区NCNC膜膜上上的的sIgEsIgE结结合合，然然后后加加入入底底物物显显色色。

通通过过显显色色区区带带确确定定血血清清中中含含有有哪哪种种sIgEsIgE，进而判断待检者对哪种过敏原过敏。

，进而判断待检者对哪种过敏原过敏。

稀释好的洗液将检测条要充分浸透，放在摇床上摇稀释好的洗液将检测条要充分浸透，放在摇床上摇10分钟分钟倒掉洗液，加入稀释好的测试者血清，放于摇床室温反应倒掉洗液，加入稀释好的测试者血清，放于摇床室温反应1.5小时小时倒掉小槽中的血清，依次加入洗液，震荡倒掉小槽中的血清，依次加入洗液，震荡10分钟，重复三次分钟，重复三次每槽加入碱性磷酸酶标记的抗人每槽加入碱性磷酸酶标记的抗人IgE，放于摇床上室温反应，放于摇床上室温反应30分钟分钟将碱性磷酸酶标记的抗人将碱性磷酸酶标记的抗人IgE倒掉，用洗液洗三次，每次倒掉，用洗液洗三次，每次10分钟分钟加入碱性磷酸酶底物，放于摇床，避光反应约加入碱性磷酸酶底物，放于摇床，避光反应约10分钟分钟去掉底物溶液，用纯水洗三次，每次去掉底物溶液，用纯水洗三次，每次5分钟分钟操作步骤操作步骤将检测条放在干燥纸上，等检测条完全干燥后判定检测结果将检测条放在干燥纸上，等检测条完全干燥后判定检测结果结果分析结果分析通过显色区带确定血清中含有哪种通过显色区带确定血清中含有哪种sIgE，进而判断，进而判断待检者对哪种过敏原过敏。

待检者对哪种过敏原过敏。

临床意义临床意义slgE测定是体外检测变应原的重要手段，主要用于测定是体外检测变应原的重要手段，主要用于型型超敏反应的诊断。

该检测条包被有多种特异性过敏原，通过超敏反应的诊断。

该检测条包被有多种特异性过敏原，通过检测血浆（血清）中过敏原检测血浆（血清）中过敏原slgE，筛查待检者对何种过敏原，筛查待检者对何种过敏原过敏，为临床进行脱敏治疗奠定基础。

过敏，为临床进行脱敏治疗奠定基础。

IIII型超敏反应型超敏反应定义：

定义：

II型超敏反应又称细胞毒型（cytotoxictype）或细胞溶解型（cytolytictype）超敏反应，它是由靶细胞表面的抗原与相应IgG或IgM类抗体结合后，在补体、巨噬细胞和NK细胞参与下，引起的以细胞溶解或组织损伤为主的病理性免疫反应。

IIII型超敏反应型超敏反应特点：

特点：

1.直接或间接与细胞有关直接或间接与细胞有关2.IgG或或IgM介导介导3.补体、吞噬细胞、补体、吞噬细胞、NK细胞参与细胞参与4.造成细胞溶解或功能紊乱造成细胞溶解或功能紊乱IIII型超敏反应型超敏反应靶细胞：

正常组织细胞、改变的自身组织细胞、修饰的自身组织细胞抗原：

同种异型抗原、共同抗原、变性自身抗原、外来抗原抗体：

IgG和IgM类抗体参与细胞损伤的物质：

补体、吞噬细胞、NK细胞变应原输血反应（输血反应（transfusionreaction）新生儿溶血（新生儿溶血（hemolyticofthenewborn）自身免疫性溶血性贫血（自身免疫性溶血性贫血（autoimmunehemolyticanemia）药物过敏性血细胞减少药物过敏性血细胞减少甲状腺机能亢进（甲状腺机能亢进（Gravesdisease）链球菌感染后肾小球肾炎链球菌感染后肾小球肾炎TypeIIHypersensitivityReactions:

TypeIIHypersensitivityReactions:

ExamplesofDiseasesExamplesofDiseases甲状腺机能亢进甲状腺机能亢进（Graves病病）55IIII型超敏反应免疫学检测项目型超敏反应免疫学检测项目患者红细胞患者红细胞Coombs试剂试剂检测红细胞上不完全抗体检测红细胞上不完全抗体直接直接Coombs试验试验试管法操作步骤试管法操作步骤用生理盐水配用生理盐水配5%红细胞悬液红细胞悬液取洁净小试管取洁净小试管2支，支，1管加管加1滴滴5%红细胞悬液，另一管加生理盐红细胞悬液，另一管加生理盐水作对照水作对照在生理盐水和在生理盐水和5%红细胞悬液中分别加入诊断试剂一滴，使其红细胞悬液中分别加入诊断试剂一滴，使其混匀，室温稍待片刻混匀，室温稍待片刻1000r离心离心1min或或3000r离心离心15s。

取出试管先以肉眼观察有无溶血，再轻轻摇动试管，如有凝集，取出试管先以肉眼观察有无溶血，再轻轻摇动试管，如有凝集，则为阳性结果；如无凝集，应在室温延长则为阳性结果；如无凝集，应在室温延长1530min的反应时间，的反应时间，再离心看结果。

再离心看结果。

结果分析结果分析生理盐水对照不应发生凝集，为均匀浑浊的乳状液。

生理盐水对照不应发生凝集，为均匀浑浊的乳状液。

在红细胞悬液中，如红细胞凝集成片状，边缘皱褶如花在红细胞悬液中，如红细胞凝集成片状，边缘皱褶如花边状或边缘松散为阳性。

如与对照相同，为阴性。

边状或边缘松散为阳性。

如与对照相同，为阴性。

临床意义临床意义直接直接Coombs试验用于检测患者红细胞上不完全抗体，试验用于检测患者红细胞上不完全抗体，Coombs试验阳性可见于自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素试验阳性可见于自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素综合征、药物诱发的免疫性溶血性贫血、新生儿同种免疫性综合征、药物诱发的免疫性溶血性贫血、新生儿同种免疫性溶血病、某些高球蛋白血症患者，如系统性红斑狼疮、类风溶血病、某些高球蛋白血症患者，如系统性红斑狼疮、类风湿、恶性肿瘤等。

湿、恶性肿瘤等。

患者血清靶红细胞致敏红细胞Coombs试剂检测血清中的抗红细胞抗体检测血清中的抗红细胞抗体间接间接Coombs试验试验微柱法操作步骤微柱法操作步骤撕开微柱凝胶卡密封纸，标记撕开微柱凝胶卡密封纸，标记加加1%筛选红细胞筛选红细胞50l及受检者血清及受检者血清25l37孵育孵育15min离心机离心离心机离心10min，1000r/min观察结果，如红细胞悬浮在反应管顶部或凝胶中，则为阳性观察结果，如红细胞悬浮在反应管顶部或凝胶中，则为阳性结果；反之，如红细胞沉于凝胶底部（管底尖部），则为阴结果；反之，如红细胞沉于凝胶底部（管底尖部），则为阴性结果。

性结果。

结果分析结果分析-100%的红细胞沉在微管的底部的红细胞沉在微管的底部+/-100%的红细胞沉在微管的下端的红细胞沉在微管的下端1/3之内之内1+80%的红细胞沉在微管的下端的红细胞沉在微管的下端2/3之内之内2+80%的红细胞沉在微管的上端的红细胞沉在微管的上端2/3之内之内3+80%的红细胞沉在微管的上端的红细胞沉在微管的上端1/3之内之内4+凝集的细胞全部处于微管的顶部凝集的细胞全部处于微管的顶部d.p.双群双群Hemo.溶血溶血反应格局及判断标准反应格局及判断标准临床意义临床意义间接间接Coombs试验用于检测患者游离血清中的不完试验用于检测患者游离血清中的不完全抗体。

此实验多用于检测母体全抗体。

此实验多用于检测母体Rh（