微生物技能考核实用标准.docx
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微生物技能考核实用标准
显微镜的使用与维护
班级:
姓名:
学号:
一、实操部分(80分)
序号
内容
评分标准
分值
得分
1
准备(满分10分)
材料准备充分,中途不得取用非操作台材料
5
显微镜取用姿势准确,安放位置合理
5
2
低倍镜使用(满分25分)
插上电源,打开光源,用拇指和中指移动旋转器(切忌手持物镜移动
5
使低倍镜对准镜台的通光孔,放置载玻片,标本中间对准通光孔,并用压片夹夹好
5
调节焦距,从一侧看着向上调节载物台,粗准焦螺旋调节物镜与载物台至最小距离处
5
双眼视目镜,调节粗准焦螺旋至有模糊的像,然后调节细准焦螺旋至清晰的像,二者不得来回交替使用,且光线强弱适宜(2分)。
10
3
高倍镜使用(满分10分)
将观察对象调至视野中央,转动转换器至高倍镜,防止撞到玻片
5
调节细准焦螺旋至清晰的像,光线调节至强弱适宜
10
4
油镜的使用(15分)
转动转换器,使高倍镜头离开通光孔,在需观察部位的玻片上滴加一滴香柏油,然后慢慢转动油镜,在转换油镜时,从侧面水平注视镜头与玻片的距离,使镜头浸入油中而又不以压破载玻片为宜。
5
如果不出现物象或者目标不理想要重找,在加油区之外重找时应按:
低倍→高倍→油镜程序。
在加油区内重找应按:
低倍→油镜程序,不得经高倍镜,以免油沾污镜头(3分),至调出清晰的像。
10
擦拭目镜和物镜上的油污,擦镜纸、二甲苯、(0.5)擦拭方法均要正确
(1)
15
取下玻片,拔下电源,关上开关,载物台调至最大距离处,物镜八字摆开,罩上防尘罩,并认真填写使用记录。
5
5
计时
不得超过5分钟,超过者倒扣分,最多扣5分
简单染色评分标准
班级:
姓名:
学号:
序号
考核项目
评分要素
配分
评分标准
检验结果
得分
备注
1
准备(10分)
着装整洁;实验用物齐全适用,放置合理
10
少选多选1件扣5分
2
制片(40分)
无菌操作取菌
20
无菌操作正确规范,错1处扣5分,涂片区域圆形,直径1cm左右
3
干燥固定
5
不可过热、固定操作的规范性,错1处扣2分
4
染色、水洗
15
染液滴加的量;染色时间,水洗操作的规范性,错1处扣5分
5
镜检(35分)
显微镜的预备
5
显微镜的检查;正确放置打开光源,光路对准,错1处扣2分
6
涂片镜检
10
低倍到高倍,到油镜,物镜的转换;物象调节,错1处扣2分
7
镜检结果
15
菌体分布均匀,密度合适,明暗合适,对比度合适。
错1处扣3分
8
显微镜的整理
5
镜头的擦拭;物镜的“八字形”转换;将载物台降到最低,错1处扣2分
9
其他(5分)
清理用物,环境卫生
5
清扫实验台及收拾产生垃圾,少1环节扣1分
10
时间(10分)
操作时间
15
要求10分钟内完成,每超过1分钟,扣5分。
总分
制备无菌平板评分标准(时间5分钟)
班级:
姓名:
学号:
项目
考核内容
分值
评分细则
扣分
备注
得分
准备(10分)
物品准备、摆放及酒精擦拭
8
物品摆放合理、酒精擦手正确,材料准备齐全,得8分
中途不得取用任何物品,取1次扣4分
摆放的物品影响操作,扣2分
取菌前未用酒精擦拭,扣2分
贴标签(培养皿)
2
贴标签且位置合理,得2分
每漏贴一个,扣1分
每错贴一个,扣1分
三角瓶操作(15)
开塞、瓶口灭菌、持法、盖塞
15
三角瓶操作正确,得15分
未灼烧,开塞不正确,塞子放置不正确,均扣5分
盖塞前瓶口和塞子不灼烧,均扣5分
三角瓶的瓶口开口处位置不对,扣5分
以上几项合计最多扣15分
倒平板
(40分)
加培养基(培养皿持法、加入量、污染皿壁、混匀、)
40
正确(单手持皿,平端,两指自如开合皿盖,另一只手持培养基瓶),平板效果优秀,得40分
培养基温度不适宜,皿盖上方水汽过多,扣5分
平板未铺全或高于培养皿高的2/3,一个扣5分,
培养基污染皿壁,一个扣10分
三角瓶口接触平皿,一个扣5分
培养基倾斜,一个扣5分
培养基有凝块、不透明,一个扣5分
无菌操作(15)
酒精灯附近区操作
15
在酒精灯无菌区操作,得15分
所有开口处均应在酒精灯无菌区,出无菌区1次扣5分
操作情况(10分)
操作熟练程度
10
熟练,得10分
较熟练,得8分
一般,得6分
不熟练,得0分
无菌检查(10分)
培养48h,有无微生物生长
10
无杂菌生长,且平板无开裂,无干枯部位,得10分
培养皿有杂菌,每个扣5分
平板开裂,共扣5分
平板干枯,共扣5分
血球计数板计数(时间:
30min)
班级:
姓名:
学号:
项目
考核内容
分值
考核记录(以"√"表示)
备注
得分
准备(3分)
物品摆放及酒精擦手
0.5
物品摆放合理、酒精擦手正确,得0.5分
摆放的物品影响操作,扣0.5分
取菌前未用酒精擦手,扣0.5分
显微镜的取用
0.5
显微镜的取用与摆放方式准确,得0.5分
取用与摆放方式不正确,扣0.5分
血球计数板的放置与检查
1
正确放置血球计数板于载物台上,得1分
没用压片夹夹住,扣0.5分
没有放在计数区内,扣0.5分
1
进行检查或经清洗后确定清洁,得1分
没有进行检查扣1分
清洗后干燥方法不合理,扣1分
加样(2分)
添加酵母菌悬液于血球计数板上
2
能够正确添加酵母菌悬液2分
加样前未摇匀菌悬液扣1分
未用滤纸吸除多余菌液扣0.5分
盖好玻片后有气泡扣1.5分
显微镜调节(3分)
调整显微镜找到血球计数板上计数网格
3
40倍镜下找到最左上角的大网格,并将显微镜调清晰,给监考老师看,得3分
未从低倍到高倍转换,扣0.5分
未给监考老师看扣2.5分
未找到最左上角的大网格扣2分
找到最左上角的大网格但不清晰扣1分。
计数(2分)
准确计数,并写出原始数据
2分
准确计数,并写出原始数据,得2分
没有原始数据,扣2分
数据不准确,扣1分
原始数据不合理,扣1分
计算,报告(6分)
计算公式、过程
4
准确计算,得出菌悬液浓度,得4分
数据处理过程不正确,扣4分
数据处理结果不正确,扣4分
数据不合理,扣1分
报告结果规范、正确
2
报告清楚、准确、无涂改,得2分
结果报告不准确,扣0.5分
报告填写每改1次,扣0.5分
清洗(2分)
血球计数板清洗,归位
2
血球计数板清洗,并干燥归位2分
清洗方法不正确,扣1分
干燥方法不合理,扣1分
未将血球计数板归位,扣1分
文明操作(2分)
实验后台面整理,设备归位
2
整理,得2分
显微镜未整理,扣1分
台面未整理,扣1分
血球计数板损坏,扣2分
盖玻片损坏,扣0.5分
完成时间(0分)
共用( )分钟
开始:
结束:
0
提前,不加分不扣分
按时,不加分不扣分
超时:
每超1分钟,扣1分(最多扣5分)
合计
平板划线分离考核标准
班级:
姓名:
学号:
序号
项目
内容
满分(100分)
评分细则
扣分
总分
1
实验前的准备
准备全所需的所有实验材料
15分
3
材料准备充分,中途取用物品扣3分
贴标签
4
未贴扣4分,贴错扣2分;信息不完整扣2分
酒精棉球擦拭手与工作台面
4分
未擦拭扣4分
擦手不彻底最多2分
擦台面不彻底最多2分
接种针的灼烧是否彻底,拿法是否科学
4分
灼烧不彻底,最多扣3分
接种环拿法不对,扣1分
未灼烧4分
2
从试管中取样接入培养皿中
试管中取菌(15分)
50分
3
试管口未灼烧,扣3分
2
持塞手法不正确,扣2分
3
接种环未冷却,扣3分
4
塞塞子时未灼烧塞子与管口,扣4分
3
试管口离开无菌区,扣3分
手法是否标准(5分)
1
持平板的手法不当扣1分
4
开口过大扣4分
分区接种(30)
5
有离开5cm酒精灯无菌区1次扣2分,最多扣5分
离开无菌区10cm以上一次扣5分
5
划完1区未灼烧,扣5分
5
灼烧完未冷却,扣5分
5
单手旋转平板,有明显的分区操作
10
划破平板,最多扣10分
3
接种完毕,台面的处理以及培养等
台面的整理:
酒精灯熄灭,各试验器材归位(4分)
10分
1分
熄灭方式不对,扣1分
3分
未归位,扣3分;未整理,扣2分
未带走垃圾,扣2分。
最多扣3分
置入培养箱中倒置培养,以及最适培养温度的设置(4分)
4分
未倒置,扣2分
培养温度和时间写在标签上,未注明扣2分
完成实验,酒精棉球擦拭手或者洗手(2分)
2分
未擦拭手或洗手1
4
结果检查
分离效果
20分
10分
10个以上单菌落,少1个扣1分
分区效果
5分
无明显分区,只有一个区,扣5分
平板无菌落区按占的比例扣分
污染情况
5分
有其他杂菌污染,扣5分
5
用时
5
5分钟,超过1分钟扣1分
平板涂布分离考核标准(20min)
班级:
姓名:
学号:
项目
考核内容
分值
考核记录(扣分)
备注
得分
准备(10分)
物品摆放及酒精擦手
5
物品准备合适,不多不少,得3分
物品摆放合理、酒精擦手正确,得2分
摆放的物品影响操作,扣1分
取菌前未用酒精擦手,扣1分
编号(试管、培养皿),贴标签
5
都编号且正确,得5分
每漏编(贴)一个,扣1分
每错编一个,扣1分;标签信息不全,一个扣1分
样品稀释
(30分)
样品混匀(原始样品、稀释样品)
10
进行且操作正确(平摇样品瓶、手心震摇试管),得10分
原始样品没有混匀,扣2分
稀释样品没有混匀,一个扣2分
手心震摇试管时没塞塞子,扣2分
移液过程其他问题,一次扣2分
吸管或移液器使用(打开方式、取液、调节液面、放液、稀释顺序)
10
吸管或移液器使用正确,得5分
打开吸管包扎纸时手碰到管尖至吸管的1/3处,一次扣2分;枪头盒每取一次都要迅速盖上,注意无菌操作,未盖一次扣2分
放液时若吸管(或移液器)外壁碰到试管口却没有灼烧试管口,一次扣2分
吸取刻度不准确,一次扣2分
稀释时将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中,一次扣2分
移液过程中液体流滴在试管外面,一次扣2分
试管、三角瓶操作(开塞、管口灭菌、持法、盖塞)
10
试管三角瓶操作正确,得10分
菌种试管三角瓶开塞未灼烧,扣2分
开塞不正确,一次扣2分
盖塞不正确,一次扣2分
持法不正确,一次扣2分
盖塞未灼烧,扣2分
平板涂布(25分)
加样
5
操作正确,得5分
将移取过高浓度菌液的吸管插入到低浓度试管中进行接种,一次扣1分
吸管外壁碰到培养皿壁,一次扣1分
漏接培养皿,一个扣1分
试管被污染,每根扣1分
涂布
10
涂布棒使用正确,涂布效果好,得10分
涂布棒上酒精未灼烧彻底,扣2分
涂布棒未冷却,一次扣2分
涂布方法不对,扣2分
涂布使平板破,扣4分
单手持皿,平端,两指自如开合皿盖,错误扣2分
酒精灯附近区操作
3
在酒精灯附近区操作,得3分
未在酒精灯附近区操作,扣3分
空白
4
进行,得4分
未进行,一个扣2分
操作熟练程度
3
熟练,得3分
较熟练,得2分
一般,得1分
不熟练,得0分
培养(3分)
培养
3
正确培养,得3分
培养时未翻转培养皿,一个扣2分
将培养时间与培养温度写在标签上,错误或漏写均扣1分
文明操作
(2分)
实验后台面整理
1
整理,得1分
未整理,扣1分
器皿破损
1
未破损,得1分
破损,扣1分
完成时间(0)
共用( )分钟
开始:
结束:
0
提前,不加分不扣分
按时,不加分不扣分
超时:
每超1分钟,扣1分(最多扣5分)
合计
结果观察
结果判断(30分)
培养结果观察
10
菌落无片状,空白无菌落,得10分
有10个以上单菌落,少一个扣1分
空白平板有菌落,一个平板扣5分
精密度
极差与平均值之比(%)
(以计数平板进行计算)
12
≤10%
得12分
10~15%
得9分
15~20%
得6分
20~30%
得3分
>30%
得0分
准确度
(以计数平板进行计算)
8
≤10%
得8分
10~20%
得4分
20~30%
得2分
>30%
得0分
培养基的制备与灭菌
班级:
姓名:
学号:
项目
考核内容
分值
考核记录(扣分)
备注
得分
题目
配制50mL牛肉膏蛋白胨培养基,全部分装入试管中,灭菌完毕摆斜面
准备(10分)
药品准备
2
药品齐全,类别准确
天平准备
4
水平,干净
其他
4
操作所需所有物品,均齐全合适
计算(5分)
准确
5
所有物品均计算准确,且称量准确
称量(25分)
加水
3
加水量适宜
顺序准确
2
按照配方顺序加入样品
方法正确
5
牛肉膏的称取方法正确
5
蛋白胨迅速,不至潮解
操作文明
10
不得有药品撒入天平中,一次扣5分
溶解与
定容(10)
药品溶解
5
按顺序溶解样品,不糊不溢
准确定容至要求的体积
5
体积准确,定容方法准确
调节pH(10分)
调制要求值
5
pH试纸使用准确
5
调节准确,不过量,不回调
分装(15分)
分装试管,将所有培养基分装完
5
装量适宜,过大或过小一支扣1分
5
分装时培养基沾染在试管口上,一支1分
5
分装过程培养基凝固
灭菌(5分)
高压蒸汽灭菌
5
温度时间设定合适,写在标签上
灭菌锅使用熟练
摆斜面5分
摆接种斜面
5
长短适宜
表面整齐
熟练程度(5分)
操作熟练程度
5
熟练,得5分
较熟练,得3分
一般,得2分
不熟练,得0分
文明操作
(5分)
实验后台面整理
3
整理,得3分
未整理,扣3分
器皿破损
2
未破损,得2分
破损,扣2分
完成时间(5)
共用( )分钟
开始:
结束:
0
提前,不加分不扣分
按时,不加分不扣分
超时:
每超1分钟,扣1分(最多扣5分)
合计
高压蒸汽灭菌锅的使用与维护
班级:
姓名:
学号:
序号
内容
分值
评分标准
扣分与备注
得分
1
材料准备
5
所需菌种、材料齐全,中途无任务新增材料
操作准备
5
水量适宜、物品摆放合适
10
加盖方式正确,各旋钮调节适当
2
灭菌
5
放气方法准确,时间恰当
旋钮调节
15
灭菌过程中各旋钮调节准确
压力旋钮
5
设置改变压力旋钮,方式准确
3
灭菌结束
5
灭菌结束,各旋钮和开关调节恰当,维护方法准确
4
故障处理
10
在灭菌过程中随机提出问题,