过柱的方法和技巧.docx

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过柱的方法和技巧

关于过柱得实验方法与技巧

（注意:

有机溶剂对身体特有害别就是心肺;肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行！

！

常说得过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。

我们常用得就是以硅胶或氧化铝作固定相得吸附柱。

由于柱分得经验成分太多,所以下面我就几年来过柱得体会写些心得,希望能有所帮助。

1、柱子可以分为:

加压,常压,减压

压力可以增加淋洗剂得流动速度,减少产品收集得时间,但就是会减低柱子得塔板数、所以其她条件相同得时候,常压柱就是效率最高得,但就是时间也最长,比如天然化合物得分离,一个柱子几个月也就是有得。

减压柱能够减少硅胶得使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但就是由于大量得空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结）,以及有些比较易分解得东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气（很大得噪音,而且时间长）。

以前曾经大量得过减压柱,对它有比较深厚得感情,但就是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压得念头了。

加压柱就是一种比较好得方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走得快些。

压力得提供可以就是压缩空气,双连球或者小气泵（给鱼缸供气得就行）。

特别就是在容易分解得样品得分离中适用。

压力不可过大,不然溶剂走得太快就会减低分离效果。

个人觉得加压柱在普通得有机化合物得分离中就是比较适用得。

ﻫ２、关于柱子得尺寸,应该就是粗长得最好

柱子长了,相应得塔板数就高。

柱子粗了,上样后样品得原点就小（反映在柱子上就就是样品层比较薄）,这样相对得减小了分离得难度。

试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离得难度可想而知,恐怕要用很低极性得溶剂慢慢冲了、而如果样品层只有0.5厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了。

当然采用粗大得柱子要牺牲比较多得硅胶与溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保得说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。

现在见到得柱子径高比一般在1:

5~10,书中写硅胶量就是样品量得30～４０倍,具体得选择要具体分析。

如果所需组分与杂质分得比较开（就是指在所需组分rｆ在0。

2~0。

4,杂质相差0、1以上）,就可以少用硅胶,用小柱子（例如200毫克得样品,用2ｃm×２0cｍ得柱子）;如果相差不到0、1,就要加大柱子,我觉得可以增加柱子得直径,比如用3ｃｍ得,也可以减小淋洗剂得极性等等。

3、关于无水无氧柱,适用于对氧,水敏感,易分解得产品

可以湿柱,也可以干柱、不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱与一次,因为溶剂与硅胶饱与时放出得热量有可能就是产品分解,毕竟要分离得就是敏感得东东,小心不为过。

也就是因为分离得东西比较敏感,所以接收瓶一定要用可密封得,遵循sｃhｌenk操作、至于就是加压、常压、减压,随需而定。

因为就是schlｅｎk操作,所以点板就是个问题,如果样品就是显色得,恭喜了,不用点板,直接瞧柱子上得色带就行了。

如果样品无色,只好准备几十个schleｎk瓶,一瓶一瓶得点,不过几次之后就知道样品在哪,也就可以省些了。

像我以前过一根无水无氧柱,需要六个schｌenk,现在只一个就能把所要得全收集到。

无水无氧柱中用得比较多得就是用氧化铝作固定相。

因为硅胶中有大量得羟基裸露在外,很容易就是样品分解,特别就是金属有机化合物与含磷化合物。

而氧化铝可以做成碱性、中性与酸性得,选择余地比较大,但就是比硅胶要贵些。

听说有个方法,就就是用石英做柱子,然后用HＦ254做固定相,这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了,没有验证过。

哪位做过可以提出来大家参详参详、

4、关于湿法、干法上样　

湿法省事,一般用淋洗剂溶解样品,也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等,但溶剂越少越好,不然溶剂就成了淋洗剂了、很多样品在上柱前就是粘乎乎得,一般没关系。

可就是有得上样后在硅胶上又会析出,这一般都就是比较大量得样品才会出现,就是因为硅胶对样品得吸附饱与,而样品本身又就是比较好得固体才会发生,这就应该先重结晶,得到大部分得产品后再柱分,如果不能重结晶那就不管它了,直接过就就是了,样品随着淋洗剂流动会溶解得。

有些样品溶解性差,能溶解得溶剂又不能上柱（比如DMF,ＤMSO等,会随着溶剂一起走,显色就是一个很长得脱尾）,这时就必须用干法上柱了、样品与硅胶得量有一种说法就是1:

１,我觉得就是越少越好,但就是要保证在旋干后,不能瞧到明显得固体颗粒（那说明有得样品没有吸附在硅胶上）。

溶剂得选择。

当然就是最便宜,最安全,最环保得了、所以大多选用石油醚,乙酸乙酯。

文献中有写用正己烷得,太贵了,除非特别需要不要用不然银子哗哗得,流得比淋洗剂还快,不过因为极性很小,有时还就是非它不可。

乙醚也可以用,但就是就就是容易睡觉,注意保持清醒别让溶剂流干了,那样柱子也就不爽了。

二氯甲烷也有用得,但就是要知道,它与硅胶得吸附就是一个放热过程,所以夏天得时候经常会在柱子里产生气泡,天气冷得时候会好一些。

甲醇,据说能溶解部分得硅胶,所以产品如果想过元素分析得话要留神,应该经过后继处理,比如说重结晶等。

其她得溶剂用得相对较少,要依个人得不同需要选择了。

由于某些原因,用到得淋洗剂多就是大包装得（便宜嘛）,我们这里就是用１0升或2５升得塑料桶装得,就要注意这些工业品得纯度就是较低得。

经常能够从送来得大桶底部瞧见有色得杂质,其她得杂质就可想而知了,所以在比较严格得柱分时就要对溶剂重蒸、当然过原料时就可以免去这一步了,反正下面还有提纯得方法。

另外溶剂在过柱子后最好也回收使用,一方面环保,另一方面也能节省部分经费,缺点就是要消耗一定得人工。

这里要注意得就是,一般在过柱同时进行得就是减压旋蒸,石油醚与乙酸乙酯得比例由于挥发度得不同会导致极性得变化,一般会使得极性变大,在梯度淋洗时比较合适,正好极性越来越大了。

在过完柱子后,溶剂最后回收要采用常压,因为在减压旋蒸时会有部分低沸点得杂质一起出来,常压时就会减少这种现象,如果杂质与您下面要过得样品有反应那就惨了。

５、关于操作问题。

5.1　装柱。

柱子下面得活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中得,可以采用四氟节门得。

干法与湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行。

装完得柱子应该要适度得紧密（太密了淋洗剂走得太慢）,一定要均匀（不然样品就会从一侧斜着下来）。

书中写得都就是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大得影响,一加压气泡就全下来了。

当然如果您装得柱子总就是有气泡就说明需要多练习了。

但就是柱子更忌讳得就是开裂,甭管竖得还就是横得,都会影响分离效果,甚至作废！

５.2加样。

用少量得溶剂溶样品加样,加完后将下面得活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量得低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本就是白色得了。

加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品得溶剂与样品层有一段距离（2~4cm就够了）,再加压,这样避免了溶剂（如二氯甲烷等）夹带样品快速下行。

5。

３　淋洗剂得选择、

感觉上要使所需点在rf０、2～０、3左右得比较好。

不要认为在板上爬高了分得比较开,过柱子就用那种极性,如果rf在０.6,即使相差0、2也不容易在柱子上分开,因为柱子就是一个多次爬板得状态,可以通过公式得比较:

0、6／０。

8一次得分离度,肯定不如（0、2／0.3）得三次方或四次方大。

ﻫ5。

4样品得收集。

用硅胶作固定相过柱子得原理就是一个吸附与解吸得平衡。

所以如果样品与硅胶得吸附比较强得话,就不容易流出、这样就会发生,后面得点先出,而前面得点后出、这时可以采用氧化铝作固定相。

另外,收集得试管大小要以样品量而定,特别就是小量样品,如果用大试管,可能一根就收到了三个样品,wｕｗu。

如果都用小试管那工作量又太大。

５.5　最后得处理。

柱分后得产品,由于使用了大量得溶剂,其中得杂质也会累积到产品中,所以如果想送分析,最好用少量得溶剂洗涤一下,因为大部分得杂质就是溶在溶剂里得,一洗基本就没了,必要时进行重结晶、

另外,再过柱得时候,有时会出现气泡,一就是与使用得溶剂有关,如果就是易挥发得溶剂,如乙醚、二氯甲烷等,在室温稍高得情况下,很容易出现这种现象,因此,在室温高得时候,可以选择沸点较高,挥发相对小得溶剂。

还有,使用混合溶剂时,使用得两种溶剂得沸点应该相差不大,如:

乙酸乙酯与石油醚（6０～90）,而乙醚却要选择３0—6０得石油醚。

二就是:

不论就是用带砂板得还就是塞棉花得,在装柱之前,都要将空气用加压得方法将空气排干,这样就可避免柱中有空气！

过柱子需要耐心,不要着急。

求助:

萃取时严重乳化,求解决方法

我正在做一个产品,产物需用稀盐酸溶液提取有机溶剂中得产物,产物与HCL成盐后溶解在水相中,但在此过程中有时会产生严重得乳化现象,极难分液,共提取三次,不定在哪次产生乳化,求助:

如何避免乳化?

乳化后如何处理？

谢谢。

常用方法:

１,长时间静置

２,加入少量电解质（如氯化钠）破乳或增大水相比重使两相分离

３,若因溶液呈碱性,可加入少量酸,反之加碱ﻫ４,过滤

５,加入乙醇或磺化蓖麻油等破乳剂

有关氰化钠、氰化钾

我就要用大量得氰化钠、氰化钾了,好害怕。

有人能给我点建议不？

如何防护？

容器如何处理?

硫酸亚铁可以用,但就是生成得铁离子络合物遇见酸还就是会有HCN生成,建议用次氯酸钠溶液浸泡或Ｈ2O2氧化!

安全第一！

任何情况下不要在酸性条件下使用

做好劳动防护措施,手有伤口一定小心

如反应对水没有要求,可以用９2%得NaCN,含一定得水,呈湿粉状

后处理还就是次氯酸钠好用一些

1.解毒剂:

亚硝酸异戊酯,口服或注射

[分享]５％　Pd/C催化剂得制备

将１0％得硝酸与活性碳粉末混合均匀,并在蒸汽浴上煮２～3h,过滤,用水洗净硝酸后,于1０0～1１0　℃烘干、称取11.5g处理过得活性碳,悬浮在136.0mＬ水中,水浴加热至80℃,加入溶有0．９　g氯化钯得２、3　mL浓盐酸与５。

７mL水得混合液,然后再加入３7%甲醛溶液０、9ｍL。

搅拌下滴加３０％得NaOH水溶液,直至反应液呈碱性,继续搅拌5mｉｎ。

过滤,滤饼用水洗涤１0次,然后将滤饼置于空气中晾干,即得5％Pd／C催化剂,再移至装有ＫOH得干燥器中贮存。

［求助]胺类化合物得分离

我在做一个仲胺与取代叔胺反应生成叔胺得反应。

后处理非常麻烦,TLC得条件就是CＨＣｌ3:

MｅoH=10:

１,我用CHCｌ3:

MｅＯH=1００:

5,1００:

3,　100:

1（均含0.２％Ｅt３N）过了三次柱了,还就是没得到纯得产品。

反应混合物里面有四个点,产物就是第三个点,与第二个点距离非常近。

有没有哪位仁兄有处理胺类化合物柱色谱分离得技巧？

可否指点一二?

提前致谢！

我现在猜测产物叔胺可能也溶解于水,所以我用Cｈcl3提取得效率一直不太高。

首先,体系用二氯甲烷与甲醇会好一些,最好含有1%7N氨甲醇溶液,毒性小,容易旋干。

第二,提取时,水相要点板监控。

最好也用二氯甲烷。

如果不行加一点thf.

第三,用反相硅胶过试试。

［原创]ＮBS溴化反应谁做过,求助?

？

?

NBS溴化反应谁做过,求助？

？

?

反应过程需氮气保护,我得三口瓶一口通氮气,中间口接回流冷凝管,另一口磨口塞塞住,但该塞密封性不好,结果没有半个小时,加入得4毫升四氯化碳就不见了！

瞧来下次要用气球作氮气保护！

另外,不断吹出得氮气也会带走溶剂！

还没做后处理,不知产率有多少？

（１）您得引发剂就是什么？

用AIBＮ时,其裂解温度为６７度,选用CCl4没错。

用过氧二苯甲酰时,其裂解温度为9５度,选苯则较好。

（２）反应不用氮保护亦可以得。

（3）要注意过程点板监控,原料与产物极性相差较小.

实在不想打字,就说这几点、楼上得不要乱说哈、

来曲唑得性质

ＭｏnographNuｍber:

  5４69

Ｔitlｅ:

  LetrozoleﻫCＡS　RegistryNｕmbｅr:

  1128０９-５1-５

CASＮaｍe:

  ４,4¢—（１H—1,2,4—Ｔriａzol-1-yｌｍeｔhｙｌene）ｂisｂｅｎzｏｎｉｔrileﻫAdditiｏnaｌ　Nameｓ:

  1-[bｉs（4－cyanoｐhenyｌ）ｍethyl］－1,2,4-triazolｅ;  4—［１—（4-cｙanoｐhｅｎｙｌ）－1-（1,2,4-tｒiａzol—１—ｙl）meｔhyl］benzoniｔrｉleﻫMaｎufaｃturｅrs’Ｃoｄes:

  CGS—2026７

Trａdemaｒkｓ:

  Femａｒa（Noｖａrtis）

MolｅculaｒForｍulａ:

  C17H11N５

MoleｃuｌaｒWeｉght:

  ２8５。

３0。

PercｅntCoｍpｏsitioｎ:

  C71.５7％,Ｈ3。

8９％,　N24.５５％

Lｉteraturｅ　Rｅfeｒｅnｃｅs:

  Nｏｎsｔeｒｏidａl　aromaｔaseinhibｉtor;　struｃtuｒａlly　relatｅd　tofadrｏzｏle,　q、v.  Pｒepn:

  R。

　M.Bｏwmanｅtal。

ＥＰ　２３69４0;eｉdｅm,ＵS　4９78672（1９87,１9９0boｔｈtoCiba-Geigy）、  Ｐharmacologｙ:

  A、　S。

Bhatnagaretal、,　J。

SteroidBiochem。

Ｍol、Biｏl、37,102１　（1990）。

  Clｉnicalsuppressｉoｎ　ofestrｏｇeｎbiosynｔheｓis:

  L。

M。

Dｅｍersｅtal。

　iｂid.４4,　687（1９93）、  EＩA　and　ＨPLCdｅterｍn　ｉnbiologicalflｕids:

  C。

U、Pfiｓteｒ　etaｌ。

J。

　Phaｒｍ.Sci。

83,52０　（1９9４）。

  Cｌinicaｌeｖaluａtioｎinbrｅastcanceｒ:

  A.Lｉｐtonetal。

Cａｎcer7５,2１3２（1９95）。

ﻫPｒoperties:

  ｍp1８１-1８3?

Meltｉnｇpoｉnｔ:

  mp1８1—１83°ﻫTherap—Ｃat:

  Antinｅoｐlａｓｔｉc.

求助格氏试剂得实验室制法!

~

所有溶剂、试剂、仪器均经过干燥/烘干处理。

无水乙醚或者THF,加1。

0５eq镁屑,惰性气体保护,温热（有些非常活泼得用室温甚至冰冷）条件下滴加约1/10得卤代烃,引发格氏反应（镁屑上冒小泡泡）,如果引发不易,可以加热至微弱回流或者加少量得碘。

引发后缓慢滴加剩余得卤代烃,过快会猝灭格氏反应或者引起偶联。

加完所有得卤代烷后微弱回流1小时,绝大多数得镁屑会反应完全,体系为灰色近透明液体。

降温后有可能析出格氏试剂沉淀,如果漏气也会出现沉淀物。

残余得镁屑,如果很少,可以不经处理,直接进行下步反应、如果镁得投料当量较大（有时用１。

2～1、５ｅｑ）,可以将格氏试剂静置后吸取上清液或者压滤至新得反应瓶中。

实验室制法,与工业制法没本质得差别、

一种金属有机化合物,通式RMgＸ（R代表烃基,X代表卤素）。

1901年由F.—A。

V。

格利雅首次使用卤代烃ＲX与镁在醚类溶液中反应制得。

又称格利雅试剂。

格氏试剂广泛用于有机合成中,从ＲMｇX可以制得RＨ、Ｒ—CＯOH、Ｒ-CHO、R－CH2OH、Ｒ－OH、ﻫ与RnM（n为金属得化合价,M为其她金属）。

在合适得情况下,RＭgＸ还能与α、β－不饱与羰基化合物发生共轭得加成反应。

格氏试剂得制法就是将卤代烃（常用氯代烷或溴代烷）乙醚溶液缓缓加入被乙醚浸泡着得镁屑中,加料速度应能维持乙醚微沸,直至镁屑消失,即得格氏试剂、反应就是放热得,如果反应起动迟钝,可加一小粒碘来启动,一旦反应开始,乙醚发生沸腾后,乙醚得蒸气足以排除系统内空气得氧化作用,但不允许有水。

格氏试剂易与空气或水反应,故制得后应就近在容器中反应。

氯乙烯与结合在烯碳上得氯不能在乙醚中与镁反应,如用四氢呋喃代替乙醚,可制得氯化乙烯基镁试剂、这种试剂有人称为诺曼试剂。

为了更好地启动镁与卤代烃得反应,可用少量1,2—二溴乙烷代替碘,特别就是乙醚中如有少量水时,二溴乙烷与镁很快反应,生成溴化镁与乙烯,溴化镁有去水干燥作用,新鲜得镁与给定得卤代烃就可反应生成需要得格氏试剂。

各位照上面得做法与您门所说得　那种更简单更容易制取呢？

[警钟长鸣］回收四氢呋喃发生爆炸,１７人受伤

昨日上午８时15分左右,位于上虞市杭州湾精细化工园区得浙江新与成股份有限公司上虞分公司50３车间Ⅰ工段搪玻璃反应釜在回收氢呋喃过程中,发生一起爆炸事故,事态于８时4５分得到控制。

此次事故共有1７人因灼伤被送往医院治疗,其中1５人转入绍兴第二医院接受治疗。

市委副书记、市长张金如,副市长俞永谷获悉后,立即带领卫生等有关部门领导前往绍兴第二医院探望受伤人员,并责令有关部门对事故原因进行调查。

ﻫ

    事故发生后,上虞市委、市政府高度重视、上虞市政府有关领导带领公安、消防、安监、环保、质监、卫生与园区管委会等相关人员迅速赶赴现场,启动应急预案,开展事故得应急救援工作。

上虞市卫生局、化工园区管委会全力协助事发单位积极做好受伤人员得救治工作、ﻫﻫ    事故得到控制后,经环保部门检测,大气已符合环境质量标准,急救用水已启动应急系统,全部废水正纳入企业污水处理站处理并送市污水处理厂处理。

ﻫ

    与此同时,上虞市已责令事发单位立即停止事发车间生产活动,妥善处理好应急废水收集等相关工作,并保护好事故现场,防止次生事故得发生、

    张金如要求:

一、组织力量全力救治受伤人员、确保受伤人员得到有效救治;二、妥善处理善后事宜,及时做好稳定工作,严防次生事故发生;三、抓紧查明事故原因,查清责任,同时要举一反三、吸取教训。

有关部门要进一步加大对危险化学品从业企业得安全整治力度,要组织力量对事故隐患进行一次再排查、再整改,加快建立安全生产长效管理机制。

ﻫ

    目前,事故原因正在进一步调查中、

我们公司也生产过四氢呋喃,对这产品性质有所了解,反生火灾得最可能原因有以下几个:

1）在生产中引入了氧化引发剂,蒸馏时发生氧化聚合,这种情况可能性最大又最难确诊。

2）静电效应,有一定可能,但因四氢呋喃有一定得导电性,生产设备又就是钢质,可能性相对较少、

３）加热过快,导致冷凝也有可能但应就是引起冲料、

如就是原因一,没有真正得行家,最后将不了了之。

[求助]关于柱层析得几个问题

各位GG,JJ们您们好,我就是新成员。

我现在在韩国学习。

本科得时候我学得就是生物,没想到过来之后转学了化学,很多东西不会,很郁闷。

我学得就是,天然产物得分离提取、

来了半年,只上了三根柱子。

无意中进了咱们论坛,学到了关于柱层析得很多知识。

先对ＧＧ,JＪ们表示感谢。

最近我又开始了新一轮样品得分离,可就是柱子重上了三遍效果都不好。

我做得就是Ｈeｘａｎｅ　Ｆracｔiｏｎ得分离,用得就是hex-ＥA分离系统,我用湿法装柱,湿法上样。

第一天晚上,装好了柱子,上了样,结果第二天一瞧,柱子上半部分花了,很郁闷,只能用甲醇洗下样品重装。

我得样品就是油状得,猜测可能就是油隔绝了柱子与外界接触？

晚上溶剂挥发,因为不通气导致柱子变花？

第二次装柱前,我先瞧了咱们论坛里所以关于柱层析得贴子,觉得也可能就是装得柱子不紧。

所以,这次我用了个小得气泵加压,装得感觉挺不错得。

结果上样后,油状得样品导致洗脱剂与柱子隔绝,打开下边得阀门后洗脱剂根本不流。

只好用小气泵将样品推进柱子……样品进入柱子后,随着洗脱剂流动,柱子整个变花了。

这几天一直很沮丧。

今天鼓起勇气重新又做了一遍,到目前为止没有出现任何问题。

不好意思,说了一下我得情况,耽误了大家很时间。

我总结了一下,有几个问题想问大家。

问得有点白痴,让大家笑话了、

我得问题就是:

1、在选好洗脱得溶剂体系后,就是如何确定洗脱比例得?

就是不就是TＬC先大体3:

１（低极性:

高极性）整体走样品,瞧瞧大体有多少斑点,然后再进一步用TLC测试,选用斑点RF约0。

3得比例?

也就就是说,每次走溶剂之前就是要做过很多ＴＬC测试得不？

2、常压装柱子得时候可以加压不？

会不会有什么不好得影响？

比如使柱子不均匀等?

3、跑柱子得时候我用紫外灯照,发现色带不就是很整齐,就是柱子装得不好,还就是大家做得时候也这样？

我还在跑着柱子呢,先想起来这几个。

希望大家指导,谢谢了

1。

根据柱层析洗脱得要求,最好就是先从低极性溶剂,如石油醚或正己烷开始,逐步加大洗脱剂极性,进行梯度洗脱,这样得效果比单一洗脱剂要好、

2。

柱子在装填与过柱时,加压很有必要,有利于柱子装实。

3。

跑柱时用紫外灯效果一般很差,您需要将洗脱液分别点ＴLＣ确定、

另外,根据您得柱子变花得情况,我怀疑您得样品在洗脱剂中得溶解性比较差、

加压过柱时,补加洗脱液前应该缓慢排除柱内气体,如果排气过急很可能导致柱子变花;增大极性时如果前后极性相差较大也可能导致柱子变花（柱子温度升高导致）;建议柱子装好后先常压流一段时间,这样色带会相对整齐一些;柱子装好以后洗脱剂难以流下得话,可以用毛细管将吸附了样品得硅胶层轻轻搅拌,但不要破坏与柱子得层面,然后再加一层石英砂或粗硅胶,洗脱剂难以流下可能就是上样时溶液得浓度太高或者油状物没有溶解完全直接吸附在硅胶上导致;建议柱子装好以后不要放置过夜,夏天温度高溶剂容易蒸发使柱子内出现大量气泡,如果要过夜应保存在18摄氏度左右得温室里。

欢迎新成员加入!

楼主得问题,在论坛很多帖子里都有讨论、建议您以“柱层析"为关键词搜索本论坛。

１、洗脱剂得选择,一般就是以第一个点在ＴLC上Ｒf值０.２~0、3为基础,稀释一倍进行第一个样品点得洗脱,并在洗脱下第一个点后更换下一个点得洗脱极性（０。

２~０、３稀释一倍）。

2、变花就是由于柱子中气泡得存在,放置过夜与过快更换洗脱极性都会产生气泡、装柱子时一定要搅拌使得硅胶中得气体尽量拍干净、二氯甲烷、乙醚等低沸点溶剂很容易“走花”,所以最好用高沸点得同类溶剂代替。

更换极性时,我一般从50:

１到２０:

1就是逐渐更换得,就就是先到40:

１,30:

1在到20:

1。

这样更换,放热就不明显。

3、柱子在柱头堵了造成流速极慢,应该用洗脱剂溶解样品后上样,而不能单独将油上样。

如果洗脱剂不溶,可以用低极性得二氯甲烷或者甲苯溶解、如果还不行,就得考虑用拌样方式上样。

关于为什么最好溶解上样而不就是直接将油上样,也有讨论。

４、色带走不齐,很大程度就是由于装柱子不紧造成得,也可能就是上样就是破坏了硅胶表层得平面性造成得。

5、柱层析就是典型得实验科学,走得多了,自然明白。

以上种种,在论坛得很多帖子中都有详细得讨论、

乙酸酐得纯化问题

最近要用乙酸酐与格式试剂做酰化反应,乙酸酐中得杂质乙酸会干扰反应,所以需要纯化。

查了一下,发现有加五氧化二磷回流后重蒸得,也有用Mg除乙酸（8０度）得,大家觉得哪种方法效果比较好,又容易操作？

一楼得问题就是除去醋酐中微量得醋酸,所以采取分馏得方法或甲苯共蒸得方法都不可取,加五氧化二磷回流后重蒸就是正解,我们平常都就是这样做得

产物过滤太难,有何高招？

我在甲醇钠溶液中环合得到得嘧啶产物,蒸掉甲醇后,加水溶解,盐酸中与后得到得固体产物很难过滤（抽滤与离心都很困难）,就是不就是因为含盐量太高?

由什么办法能使产物容易过滤?

可能就是体系中得有机杂质太多了,一调酸有机物全出来了。

建议您在调酸之前,用有机溶剂将碱性体系中得杂质提取出来一点,这样调酸得化出来得产物纯度高,应该会容易抽滤得！

还有一点在调酸后如果析出得就是油状物得话,适当增加搅拌时间,这样油状物可能会变成固体,这样就很容易抽滤了

这种情况在生产中非常常见,除了以上二位朋友提得意见外,通常用得方法有

1、PＨ值调节完成后升温回流一定时间再冷却,使结晶粒变粗,对绝大部分热稳定性较好得物质都有良好得效