生物化学实验指导110330.docx
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生物化学实验指导110330
生物化学实验指导
温州医学院检验医学院、生命科学学院
2011年3月
第一部分生物化学常用技术及原理
一、常用生物材料的处理
二、
三、生物化学实验中一些基本操作
四、
第二部分实验记录报告及实验设计简介
一、实验记录
二、
三、实验报告
四、
五、实验设计简介
六、
第三部分实验
实验一血清白蛋白的分离与纯化
实验二蛋白质的醋酸纤维薄膜电泳
实验三SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量
实验四等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点
实验五双缩脲法测定血清蛋白质量
实验六考马斯亮兰法测定血清蛋白质
实验七酵母细胞核酸的提取、鉴定
实验八淀粉酶的动力学实验
实验九碱性磷酸酶米氏常数的测定
实验十乳酸脱氢酶同工酶分离及鉴定
实验十一葡萄糖耐量试验
实验十二Folin-吴法测定血糖
第一部分生物化学实验常用技术及原理
一、常用生物材料的处理
在生物化学实验中，无论是分析组织中各种物质的含量，或是探索组织中的物质代谢过程，皆需利用特定的生物样品。
由于实验的特殊要求，往往需要将获得的样品预先做适当处理。
掌握此种实验样品的正确处理与制备方法是做好系列化实验的先决条件。
基础系列化实验中，最常用的人体或动物样品是全血、血清、血浆及无蛋白血滤液。
有时也采尿液做实验。
组织样品则常用肝、肾、胰、胃粘膜或肌肉等组织制成组织糜、组织匀浆、组织切片或组织浸出液等，常用于各种生化实验。
关于这些样品的制备方法，扼要介绍如下：
1、血液
全血无论收集动物或人体血液时，一方面要注意仪器的清洁与干燥，另一方面要及时加入适当的抗凝固。
一般在血液取出后，迅速盛于含有抗凝剂的试管内，同时轻轻摇动，使血液与抗凝剂充分混合，以免形成凝血小块。
取得的全血如不立即进行试验，应储存于冰箱中。
常用的抗凝剂有草酸盐、柠檬酸盐、氟化钠或肝素等，可视实验要求而定。
一般情况下，用廉价的草酸盐即可，但在测定血钙时不适用。
氟化钠可做为测定血糖时的良好抗凝剂，因其兼有抑制糖酵解的作用，以免血糖分解。
但氟化钠也能抑制脲酶，故用脲酶测定尿素时不能用。
肝素虽好，但价格较贵，尚不能普通应用。
抗凝剂用量不应过多，以免影响实验结果。
通常每毫升加1-2mg草酸盐或5mg柠檬酸钠或5-10mg氟化钠，肝素仅需要0.01-0.02mg，最好将抗凝剂制成适当浓度的水溶剂，然后取0.5ml置于准备盛血的试管中，再横放蒸干（肝素不宜超过30℃），则抗凝剂在管壁上形成一层薄膜，使用时较为方便，效果也好。
血浆上述抗凝的全血在离心机中离心，则血球下沉，上清液即为血浆。
如需应用血浆分析，必须严格防止溶血，故要求采取血液时一切用具（注射器、针头、试管等）皆需清洁干燥，取出血液也不能剧烈振摇。
血清收集的血液不加抗凝剂，在室温下约5-20分钟即自行凝固，通常经3小时，血块收缩而分出血清。
为促使血清分出，必要时可离心分离，或置37℃水浴中，这样可缩短时间，并取得较多的血清。
制备血清也要防止溶血，一方面仪器要干燥，另一方面，血块收缩后，及早分离出血清，因为放置过久，血块中血球也可能溶血。
无蛋白血滤液许多系列化分析要避免蛋白质的干扰，往往先将其中蛋白质沉淀然后去除，制成无蛋白血滤液。
如血液中的非蛋白氮、尿酸、肌酸等测定需先把血液制成无蛋白血滤液后，再进行分析测定。
蛋白质沉淀剂如钨酸，三氯醋酸或氢氧化锌皆可用于制备无蛋白血滤液，可根据不同的需要而加以选择。
血液样品的保存血液成分容易发生变动，原则上应尽快进行分析。
如必须暂保存时，应放入冰箱。
全血最不稳定，可做成除蛋白滤液保存。
血浆应及时与血细胞分离，血清也应与凝块分开，单独保存。
2、尿液
（1）采尿
尿液成分及浓度生理变动较大。
按实验目的不同，可用不同的尿液。
许多定性实验可用随时采取的一次尿样。
清晨第一次尿样，比较稳定，便于比较，也常采用。
为定量实验常需采用全日尿样。
全日尿亦即由第一天某时开始到第二天同一时间的24小时尿，具体采法如下：
在第一天晨6时排尿一次弃去以后的尿液全部收集到加有适当防腐剂的容器中，到次晨6时，不论有无尿意，再计尿量多者应另有准备。
采尿中间不可有异物混入。
采尿完了后，把全部尿液充分混匀，最后记录总体积及其他必要项目，然后留取一部分供实验用。
（2）防腐
为防止采尿过程中及暂保存中尿液成分变化，需要加适当的防腐剂。
选用不影响实验目的的防腐剂。
常用的有甲苯，全日尿中加2-5ml，它成一薄层盖在尿液表面上，适用于一般测定。
另外，也常用冰醋酸（约10ml）、浓盐酸（约10ml）等。
3．组织
根据实验目的不同则选用组织和处理方法亦不同。
许多实验中常用肝脏或肌肉，这是因为其量多且含酶类较全，尤其肝脏代谢机能广泛，且其组织易于处理，是最常选用的材料。
组织材料的处理过程中最重要的原则是勿使待分析物质发生变化或损失。
（1）动物的处理
一般常用兔、鼠、蛙等，可用打击头部使急速死亡。
鼠亦常用脱颈椎方法致死，必要时立即断头放血。
然后迅速采出所需组织，尽可能在冰冷条件下，除去其他组织，洗去血液，用滤纸吸干，称重供用。
（2）匀浆的制备
进行组织或细胞内酶活性的测定或某些成分的定量时，多使用组织匀浆。
制备匀浆一般常用研钵。
把组织剪碎，放研钵中，（必要时加少量玻璃砂）研磨，加入一定量液体以做成一定稀释倍数的匀浆（如10%匀浆，即指匀浆中含组织湿重10%）。
但研磨中一次加入较多液体，不便于细研，可先加少量。
研细后，最后加入全量研匀。
为制备匀浆并提取组织成分，常用的溶液有生理盐水、缓冲液等。
在分析某些细胞成分时使用0.15M的KCl或0.25M蔗糖液等。
有时为使蛋白沉淀并提取某些成分，用5~10%三氯醋酸等。
在分析酶活性或某些易变物质（如ATP等）分离细胞内各组分进行研究时，特别要注意保持冰冷条件，迅速处理。
制备匀浆中，一方面采取冷却手段，防止变化。
另外也可改进方法加速操作。
为此，可采用匀浆器（Homogenizer），使用电动匀浆器不仅加快了研磨速度，也提高了匀浆的均匀程度。
常用的装置是通过小电动机转动的玻璃匀浆器，匀浆管内放组织及提取液，其杵上接电动机，杵壁与管壁间有一定间隙，杵底有磨齿，杵转动时把组织撕开并在杵壁与管壁间磨碎，且管迅速上下移动，可使组织相继通过与管壁摩擦被磨碎。
研磨效果与间隙及转速有关。
匀浆管外面可放冰等，在冷却条件下研磨。
二、系列化实验中一些基本操作
生物化学实验中除了有一些特殊的操作和方法使用某些特殊仪器外，整个实验的绝大部分是由各种常用的基本操作组成的。
而基本操作的掌握是否正确和熟练往往是决定实验成败的关键。
因此在每一次实验中均应注意基本操作是否正确，并且应有意识地加强这方面的练习。
下面是生化实验中的一些基本操作。
系统化实验中操作技术与一般化学实验大致相同，这里不仅将系列化实验室中经常要作用到的一些基本操作法温习如下：
（一）玻璃仪器的洗涤：
只有使用清洁的仪器和实验材料才能免除杂质的污染，从而得到符合实验的实验结果。
各种不同性质的实验，要求清洁程度各不一样，比如：
一般定性的实验对仪器的清洁要求，只要仪器表面不含有干扰本实验的杂质就行；定时分析的实验要求严格得多，应达到不影响分析结果；至于观察酶活性的实验、作代谢研究的实验，仪器的清洁要求更严格，要防止微量杂质（如某些离子、重金属化合物、细菌代谢产物等）的干扰。
1、一般定性、定量实验所用的玻璃敞口仪器如试管、离心管、烧杯、烧瓶等的洗涤，可先作蘸有肥皂或合成洗涤剂的手刷擦洗，对表面有牢固地附着的污染物的玻璃仪器可用去污粉擦洗。
某些难除去的污物应针对其化学本质采用相应的清除法，如以上方法去除不干净，可根据具体情况试用热的碱溶液洗。
用浓盐酸可先去除附着在器壁上的某些氧化物、碳酸盐、铁锈等，然后用自来水冲洗干净，最后用少量去离子水或蒸馏水淋洗内壁三次即可。
洗干净的玻璃仪器对着光看，其表面应是光洁的，淋洗的水成片的从仪器上流下来，不应有水珠附在内壁。
2、精密的容量仪器，如量瓶、滴定管、吸管等的洗涤，其要求是洗去杂质同时清除附在容器表面的微量油污，以使试液在容器内壁能光滑地流下，不形成液滴挂在容器内壁上，不致造成读数错误。
洗涤容量分析器应尽可能不使内壁与硬器接触，以免造成器壁擦伤使容量不准。
洗涤时一般可水洗，或用一些合成洗涤剂，经水冲洗后尽量沥干。
然后置浓的铬酸洗液中浸泡15分钟以上，利用铬酸洗液的强氧化性除去器壁上附有的微量油污（这种微量油污可以是从空气中飘来的），然后将铬酸洗液倒回贮器中以备下次再用。
经洗液浸过的仪器再用大量的自来水冲洗，最后用去离子水或蒸馏水洗三次备用。
大的容量分析仪器如量瓶、滴定管等不能浸在洗液中，可将洗液灌入容器中，如洗液量较少可经常倾侧容器使洗液浸湿器壁即可达到去油污的效果。
使用铬酸洗液清洁容器应注意以下几点：
（1）水可使洗液中的硫酸被稀释以致铬酸析出同时洗液的氧化力下降，甚至失效，因此用铬酸洗液时待洗的容器应尽量沥干。
（2）Hg2+、Ba2+、Pb2+等离子与铬酸洗液作用可生成不溶的化合物沉积在器壁上，因此凡接触过含有此等化合物的容器应先除去这些离子（可和硝酸、EDTA钠等先行清除），用水冲洗后再用铬酸洗液洗。
（3）有机化合物、油类、有机溶剂均可使铬酸洗液还原失效，因此器壁如附有大量油类，有机物等，应先除去然后再用铬酸洗液。
（4）铬酸洗液有很强的酸性和氧化性、皮肤衣服接触到即可致损伤毁坏，使用时应仔细，以免造成损失。
（5）铬酸洗液还原为硫酸铬时，洗液由原来的深棕色变为绿色，此时洗液不具有氧化性，不能继续使用。
滴定管的洗涤与吸管的洗涤要领基本相似。
塑料器皿（如洗瓶、塑料试剂瓶、塑料离心管等）一般不宜用试管刷刷洗，以免擦伤。
附：
铬酸洗液的配制法：
取K2Cr2O7（工业用或试剂四级）3克，置一容积150ml以上的烧杯中，加入冷水10ml。
将烧杯置火焰上徐徐加热至沸，冷却后K2Cr2O7可又部份重新结晶析出。
用量筒取比重1.84的浓硫酸（工业用）100ml，慢慢沿烧杯壁加入，一边加一边用玻璃捧搅动，如发热很猛应暂停加酸继续搅拌，待浓硫酸全部加入时应得到棕褐色浓稠的洗液。
冷却后倒入洗液瓶（大口试剂瓶）中加盖保存备用。
3．酶学实验和代谢研究实验所用的玻璃仪器清洁要求很严，要特别注意微量重金属离子、细菌和细菌代谢物的干扰，仪器可用硝酸、盐酸多次反复洗涤，然后用去离子水或蒸馏水（某些要求特别严的实验需用重蒸馏水，甚至三蒸馏水）洗涤，洗净的仪器应及时烘干，必要时需经灭菌，然后妥善保存以免污染。
对使用过的仪器的应养成及时洗的习惯，特别是血液分析时用的血液样本的吸管，用过后应当立即用水将所沾的血液冲去否则放置过久，血液干燥硬结，就很不容易清除。
（二）玻璃仪器的干燥：
一般的玻璃仪器均可于洗净后倒置架上，让其水分蒸发自然干燥，如需迅速干燥者应按仪器的不同类型按下棕不同方法处理：
试管、离心管、烧杯、烧瓶等普通器皿可置烘箱中100~105℃烘烤，如同时需灭菌者可升至180℃以上烘烤，少量仪器如需急用也可在电炉上或酒精灯上烘烤。
烘烤时应将器皿时时转动，务使受热缓慢且均习，并将管口（或杯口）倾斜向下，以便水蒸气凝成水滴，顺口流出，不致使水滴接触烘热了的器壁而使仪器爆裂。
使用电吹风干燥一般玻璃仪器也很便利常用。
下列玻璃仪器应避免烘烤：
（1）各种容量分析仪器如量瓶、量筒、吸管、滴定管等。
因烘烤时温度较高，容易造成器壁变形而致容量不准。
（2）厚壁玻璃皿和器壁厚薄不等、差别较大的器皿。
此等仪器容易因壁受热不匀而破裂。
（3）烧结玻璃仪器，如烧结的方形比色杯、各种烧结砂芯滤器等，此等仪器也易在烘烤时发生破裂。
容量分析仪器以室温自然干燥或用试液灌洗为宜，如必须使用干燥的可用抽气（强制通风）干燥，实验室中常用流水泵抽气，如需更快的干燥，可先用少量95%乙醇润洗器壁除去水分，倒去乙醇后再用少量乙醚洗内壁，沥干后抽气除去剩余的乙醚蒸气即可得到干燥的仪器，此法常用于干燥吸管之类小型容量分析仪器。
学生对实验中所用的吸管哪些必须干燥的，哪些不一定用干燥的应心中有数。
（三）吸管的作用
吸管是生化实验中最常应用的容量分析仪器，用于准确移取试液，其精密度按不同的容积可达移取量的0.1~1%。
操作时以右手拇指和中指夹管身，把吸管的尖端伸入液体中，把液体吸入吸管内至刻度以上，迅速以右手食指按住吸管的上口控制试液的泄放（见图1），不应用拇指控制管口，尽量少用口吸以免管口脱空而把液体吸入口中。
吸液手应将吸管持正，保持垂直位置，使右眼与刻度等高，然后稍微放松食指或轻轻转动吸管，使得液面缓慢降落，到管内液面弧线的最低点与刻度线齐（注：
将吸管斜持读数的操作是错误的，因可造成很大的读数误差）。
如所吸取的试液颜色很深，不易看清液面最低点，则最好选用分刻度吸管放取两个刻度之间的容积的方法。
此时可改以液面的边缘与刻度对齐。
但在单刻度的吸管一次放出所标明的全量时不能这样做，仍尽可能看清液面弧线的最低点。
此外，生化实验中因大多数分析属微量分析，吸取试液的最往往很小，如不除去吸管外壁所沾液体可造成很大误差，一般应用干净的碎滤纸片试净吸管外壁然后放出管内液体。
吸管的类型很多，在使用上也有某些差别，因此应先了解所持吸管的类型，掌握正确用法，现将常用的吸管类型及其特点分述如下：
1、移液吸管：
为化学定量分析实验所常用，用作移取吸管所标明数量的试液。
常见的有50ml、25ml、10ml、5ml、2ml、1ml等容量规格。
试液自管内放出时，管身须直立，管尖靠在受器的内壁上，放松食指，令液体自由流出，等液体不再流出时，还要贴靠15秒钟，最后管的尖端一点残液不应吹出，因该类吸管的刻度一般表示液体的泄出量。
2．分刻度吸管：
分刻度吸管常见的容量有10ml、5ml、2ml、1ml、0.5ml、0.1ml等。
通常将管身标明的总容量分刻为100等分，因此10ml总量的此类吸管有0.1ml的分格。
有效读数至0.01ml，1ml总量的此类吸管有0.01ml的分格，其余类推。
这类吸管常用作移取非整数量的试液，有刻度到尖端和刻度不到尖端的两种，刻度到管尖的最上刻度线与管尖之间的容量为管身所标明的容量，并在这之间100等分。
这两类吸管的刻度因生产厂家不同有零点在上和零点在下两种刻法，在使用前应先认明以免发生错误，使用时如系刻度不到尖端的，应用食指控制液体泄放至最下刻度线，如为刻度到尖端的，于液体放出后应将残留管内最后一点试液沿容器壁轻轻吹出（国产年级类吸管有的厂家在管身上刻有“吹”字）。
3、奥氏（Ostward）吸管：
此种吸管的管身有一橄榄形玻璃泡，其特点是各种类型的同一容量的吸管中此类吸管的内表面积最小，使用时吸管内壁粘附的试液也最少，因此特别适用于粘稠的液体，如血液、蛋白质溶液及油脂等的吸取，血液化学分析中用于血样的吸取。
此种吸管常见的有10ml、5ml、2ml、1ml和0.5ml几种容量的。
用时应该注意缓慢将试液放出，最后一点试液要轻轻吹出（国产奥氏吸管口上刻有“吹”字样）。
4、微量吸管：
为吸取小量试液设计的特种毛细吸管，有单刻度也有分刻度的。
临床化验室作血球计数的稀释吸管也是一种微量吸管。
生化测定中常见的微量吸管的容量有0.2ml（200μl）、0.1ml（100μl）、0.05ml（50μl）、0.02ml（20μl）、0.01ml（10μl）等，此类吸管移取试液时均须缓慢地将试液吹出。
如果移取毒物或具有腐蚀性的药品时，可用橡皮球吸液。
使用时，先将橡皮球捏扁，接在吸管上口，然后慢慢放松橡皮球，此时液体即被吸入吸管内，移去橡皮球，如前述方法握待吸管，用食指堵住吸管上口并泄放所需容积。
作用时注意橡皮球不能骤然放松，以免试液吸入球内。
附：
定性实验中量取试液的方法：
定性实验对取量的准确度要求不严，一般在取小量试液时可以滴数估计。
可将滴管口锉大或用火焰烧灼使缩小，校正至每滴大致相当于1ml。
数毫升的试液可用估计法直接用试管量取，学员可于平时实验中注意锻炼自己以视力估计容器中液量的能力，熟能生巧，尤其是试管中液量的估计更为常用，应该熟练。
可在一列试管中用吸管分别量入1ml、2ml、3ml、5ml、10ml水，注意其高度与管径的关系，多次训练不难掌握1~10ml内液量大致准确的估计，定性实验中较大量液体可用量筒量取。
取用试剂时应养成瓶塞不离手的习惯，以免盖错。
（四）过滤方法
生化实验室中所作的过滤除与定量分析化学操作相同者外，很多实验中的过滤往往因不可使滤液稀释而使用干滤纸过滤。
为了增快过滤速度常把滤纸摺成“菊花形”以增大过滤表面（见图）。
并且在漏斗上盖表面皿，以避免滤液蒸发浓缩。
除了用滤纸过滤之外，对于粗的过滤也可使用脱脂棉球替代滤纸。
有些实验可改用离心沉淀来替代过滤，以节省时间。
（五）试管及离心管中液体的混匀操作
使试管中先后加入的几种试剂充分混匀往往是实验成败的关键之一。
由经验得知，不少学生实验的失败其原因是未能在反应前将试管内容物混匀，应引起充分注意。
常用于混匀试管及离心管内液体的方法有以下几种：
（1）少量液体的混匀可简单地将试管轻轻振摇或摇动即可；
（2）较多的液体用振摇、摇动不易混匀时，可一手持试管，另一手轻轻扣击或拨动试管底使管内液体搅动发生漩涡而达到混合的目的；（3）在试管中盛有多量液体以上述方法难于使之混合时，可试用手持试管作圆周转动，使管内液体也作漩涡运动而混合之（见图1）；（4）如以上方法均不能使之混合的情况可考虑是否允许用玻璃棒搅拌混匀，或采用管口衬一清洁塑料薄膜，以手掌按住反复颠倒混匀的方法。
用拇指直接堵住试管口作颠倒混匀的操作是错误的，在任何情况下均不应采用。
图1
（六）离心及离心机
离心法是利用离心力将不同质量的物质进行分离。
离心力与转速（每分钟转数）的平方、物质质量及旋转半径成正比。
电动离心机转速快，分离效果高可以迅速地使溶液中悬浮物沉积下来，得出上清液及沉淀，供进一步分析。
液体粘稠或过少，难以过滤或不适于需时较长过滤的，皆可离心。
再有，需要反复沉淀和洗涤以及需要收集最少的沉淀进行分析者，更需要离心。
此外，离心法也用于某些液体的分离。
离心作用离心机（Centrifuge）。
作用离心机时特别要注意对称位置上离心力的平衡。
其次，注意防止离心过程中离心管的破裂及保证离心效果。
虽然转速愈快时间愈长，则离心作用愈大，但这也增加仪器负担和打坏离心管的危险。
一般实验，常用转速为每分钟5000转（每分钟转数roundperminute，常用符号rpm表示）以下，在多数情况下，约2000rpm5~15分钟即可达到目的。
某些实验，按规定的转速及时间作用，转速不可过高，时间不可拖长。
一般电动离心机的作用方法及注意事项如下：
1）检查离心管套管：
如有玻璃碎片等异物，必须彻底清除，套管底放好适当的缓冲用棉花或胶垫。
2）平衡对称位置的重量：
用粗天平，平衡对称位置上的套管、离心管与内容物的总重。
一侧放检品管，向另侧离心管内加水。
若二侧均为检品管，则向轻侧套管内加水，直至平衡。
3）套管等放入离心机的对称位置后，离心管不得过高，否则必须重新处理。
最后盖上离心机盖。
4）先将调速旋钮转到零位，然后再正确连接电源（注意电压，严防接错）。
逐步转动旋钮，渐渐加快转速，待机钮指示或转速指示器的标示达到所需转速时为止，并记时间。
5）到定时间时，逐渐地转回旋钮到零位，拨下电源插销，等待转动自然停止，决不可用手强制地使之突然停转。
然后开盖，取出离心管。
注意事项：
1）离心机需放在牢固平衡的台面上，保持水平位置。
2）使用离心机，关键问题是对称位置上的离心力相等，不仅对称的要总重相等，而且重心所在位置也应该对称。
只有这样才能保证仪器高速正常运行和得到好的离心效果，否则在高度旋转中产生的离心力会有很大差别，发生震动影响沉降效能，并且容易使离心管破碎。
甚至会出伤害事故。
一般使用较低转速时可两侧都放待离心液体，为对称平衡向较轻侧离心管套管之间加水，但使用转速较高时，应当取前述的另侧离心管中加水的方法。
向离心管与套管间加水虽然两侧可以等重，但旋转后两者重心所在位置不同，即旋转半径不同，高速旋转时仍会产生离心力的不同。
等重并不一定离心相等，平衡的原则是要求对称位离心力相等。
3）起动及停机过程都必须是逐渐地，起动时或离心过程中出现异常声响时，要及时停机进行检查处理。
4）注意，切勿使液体流溅于离心机内浸蚀机体应保持机腔内干燥清洁。
第二部分实验记录报告及实验设计简介
一、实验记录
要使用专用的实验记录本。
实验课前要预习，将实验名称、目的要求、原理、实验内容、操作方法和步骤等简单扼要地写在记录本上。
记录本上不要涂改，更不能撕页，写错时可注明，重写。
实验中所观察到的现象、结果与数据，应及时直接记录。
绝对不可用单片纸记录。
记录应详尽、准确、简练、清楚。
记录应客观，切忌夹杂主观因素。
连续观察过程中的数据，即使相同，也应如实记录。
数据的计算应在记录本中记录，总之，实验过程中的每个结果均要正确无遗漏地做好记录。
实验中所使用的仪器类型，编号，以及试剂的规格、化学式、分子量、准确浓度，均应记录清楚，以便于核对，和作为查找成败原因的参考依据。
总之，记录应如实、及时、准确、无遗漏，在学习阶段就应养成一丝不苟的严谨科学作风。
二、实验报告
实验结束后，应及时整理和总结实验结果，写出实验报告。
内容可分为定性和定量实验二大类，下面列举二类报告的格式，供参考。
1、定性实验报告
实验编号实验名称日期
（一）目的和要求
（二）原理
（三）操作
（四）结果与讨论（包括实验结果，对观察现象的小结，对实验中遇到的问题和思考题进行探讨或写个人体会等）
（五）试剂与仪器（可略去）
2、定量实验报告
实验编号实验名称日期
（一）目的和要求
（二）原理
（三）试剂与仪器（可略去）
（四）操作方法
（五）实验结果（包括原始数据及其处理表格，计算过程，标准曲线图及实验组与对照组的结果比较图表，另外还包括针对实验结果进行必要的说明和分析）
（六）讨论（包括关于实验方法或操作技术方面有关问题，如实验的正常结果、临床意义；异常现象解释，推理；针对思考题进行探讨；以及对实验设计的认识体会与建议等。
）
对于学生，操作方法一项往往照书抄书，一般情况下，这是不可取的。
最好的办法是在预习时将实验操作过程简化成工艺流程图方式，或自行设计的表格来表示，既简单明了，一目了然，又能培养总结，归纳的能力。
当然，以上指的是一般实验报告格式。
但绝非千篇一律，我们同样反对墨守成规。
只要能说明问题，既全面又准确地反映了实验的全过程，如实地阐述了实验结论和你的观点，都是符合要求的。
三、实验设计简介
科学是实验的科学，如不能掌握科学的基本知识和思维的技巧，很可能阻碍甚至扼杀科研工作者的天赋与才华，所以说实验设计在一定意义上是一门专门的学科，各自然学科都有各自的实验设计的特殊性，以下仅介绍初学者进行生化实验设计的一些基本知识。
系列化实验设计包括选题、方法的确定、实验的具体设计（包括对照组设立，随机的原则和平行的原则等），预实验、正式实验、实验资料的统计分析，总结与论文撰写等。
这里仅就选题与实验的具体设计加以介绍。
（一）选题首先要考虑该题是否具有理论意义和经济实用意义，其次要查清该题是否新颖的。
若属前人从未涉足的，开拓性课题，当然是最好的，若是前人已经从事过的，但广度或深度还有待发展，在前人研究的基础上能加以创新或更新的，也应该说是新颖，而且这一部分课题是大量的。
为此，在选题的同时就必须充分查阅文献，例如：
化学文摘（CA），生物学文摘（BA）等有关文献，以免机械重复别人的工作，劳而无功。
在此基础上，就可以进行此课题的可行性研究，如经费，实验试剂，器材、动物、方法技术、人员配套等。
特别是生化实验，要考虑到一些重要的工具酶，放射性同位素和特殊试剂；有些在理论上很常见，很简单，但实际上供应都很困难，而且相当
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