心无忧胶囊对主要研究结果的总结及评价汇总Word文件下载.docx
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6
1.5
表2、正交试验设计表
4
5
7
9
取每正交样品175g，按上述正交试验设计表设计加水量、煎煮次数、煎煮时间，分别煎煮提取，滤过，滤液合并，静置，取上清液浓缩成稠膏，置烘箱内干燥至恒重。
以干膏作为评价指标。
表3、正交试验结果分析表
因素
干膏重（g）
A
B
C
22.8
41.2
42.7
25.0
38.5
34.9
25.2
31.8
37.2
K1
106.7
73.0
89.5
K2
98.4
111.5
103.4
K3
94.2
114.8
106.4
k1
35.6
24.3
29.8
k2
32.8
34.5
k3
31.4
38.3
35.5
R
4.2
14.0
5.7
以干膏量为考察指标，由上表极差R值大小显示，各因素作用主次为B＞C＞A;
以A1B3C3组合为佳。
由于提取三次与提取二次相差很小，加热2小时与加热1.5小时亦相差不大，为了节时省能，并考虑到实际生产因素，故确定药材加水煎煮二次，第一次加水10倍量煎煮2小时，第二次加水8倍量煎煮1.5小时。
验证实验：
按处方量配伍两份药材，每份药材为射干25g、川芎37.5g、瓜蒌皮12.5g、茵陈37.5g、细辛25g、土木香37.5g，分别于3000ml烧瓶中回流提取二次，第一次加水1750ml，回流提取2小时;
第二次加水1400ml，回流提取1.5小时，滤过，滤液合并，静置，取上清液浓缩成稠膏，置烘箱内干燥至恒重。
表4、验证实验结果分析表
批次
投料量
干膏量（g）
出膏率
1750
42.5
24.3%
24.4%
平均
42.6
由上表数据看出，射干、川芎、瓜蒌皮、茵陈、细辛、土木香加水煎煮二次，第一次加水10倍量煎煮2小时，第二次加水8倍量煎煮1.5小时，所得干膏量与正交试验结果吻合，重复性好。
说明工艺可行。
3.丹参、黄杨木提取工艺研究
由于丹参药材中既含有丹参酮等脂溶性成分，又含有丹参素、原儿茶醛、原儿茶酸等水溶性成分；
故拟采用选用95%乙醇作为第一次提取溶剂，用50%乙醇作为第二次提取溶剂，回收乙醇，药渣加水进行第三次提取。
黄杨木药材中主要含有黄杨星D等脂溶性有效成份，还含有部分水溶性有效成份，拟先选用95%乙醇提取，再用水提取。
由于丹参、黄杨木均是先用乙醇提取，再用水提取，为节约能源，降低生产成本，拟将丹参、黄杨木药材共同提取。
取丹参、黄杨木适当粉碎，按处方量配伍，制备正交试验工作样品，每正交试验工作样品重175g，其中黄杨木50g、丹参125g。
表5、因素水平表L9（33）正交表头
A加95%乙醇量（倍）
B回流次数（次）
C回流时间（小时）
0.5
表6、正交试验设计表
A（倍）
B（次）
C（小时）
3
取每正交样品175g，按上述正交试验设计表设计加乙醇量、回流次数、回流时间，分别提取，滤过（xxxx目筛），滤液合并，静置，回收乙醇浓缩成稠膏，置真空干燥烘箱内干燥至恒重。
取干膏适量,研细,取约0.1g，精密称定，置50ml棕色量瓶中，加甲醇至近刻度，超声处理30分钟，放冷，加甲醇稀释至刻度，混匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
精密吸取20μl，注入液相色谱仪，测定，计算，即得。
以干膏中含丹参酮ⅡA的总量为评价指标。
表7、正交试验数据表
正交号
丹参酮ⅡA含量（mg/g）
丹参酮ⅡA总量（mg）
4.9
18.57
90.99
12.4
7.74
95.98
14.5
8.28
120.06
8.5
10.35
87.98
9.1
11.64
105.92
12.1
7.02
84.94
10.4
9.42
97.97
10.9
6.98
76.08
9.4
8.12
76.33
表8、正交试验结果分析表
丹参酮ⅡA（mg）
90.9995.98
76.08
76.33
307.03
276.94
252.01
278.84
277.98
260.29
250.38
281.33
323.95
102.34
92.31
84.00
92.95
92.66
86.76
83.46
93.78
107.98
18.88
1.47
23.98
以干膏中含丹参酮ⅡA的量为考察指标，由上表极差R值大小显示，各因素作用主次为C＞A＞B;
由于提取三次与提取二次及一次相差很小，为了节时省能，以及实际生产因素，故确定药材加95%乙醇10倍量回流提取2小时；
考虑到其他有效成份的提取利用，第二次加50%的乙醇8倍量回流提取1小时，药渣加10倍量水再煎煮2小时。
故确定将药材提取工艺暂定为：
回流提取二次，第一次加95%乙醇10倍量回流提取2小时，第二次加50%乙醇8倍量回流提取1小时；
药渣加10倍量水再煎煮2小时。
按处方量配伍两份药材，每份药材为黄杨木50g、丹参125g，分别于2500ml烧瓶中回流提取二次，第一次加95%乙醇1750ml，回流提取2小时;
第二次加50%乙醇1500ml，回流提取1小时；
合并两次回流提取液，滤过，滤液回收乙醇，药渣加水1750ml再煎煮2小时，滤过，滤液与上述药液合并，浓缩成稠膏；
干燥至恒重。
表9、正交验证实验数据表
投料量（g）
丹参酮ⅡA量（mg/粒）
175
23.4
13.3%
5.14
120.28
0.120
23.7
13.6%
5.07
120.16
由上表数据看出，验证实验与正交试验结果吻合，重复性好，工艺可行。
（四）成型工艺研究
1、胶囊剂工艺筛选
心无忧胶囊应符合心无忧胶囊质量标准（草案）和《中华人民共和国药典》20xx年版一部的规定，主要检测【鉴别】，【检查】
（项目有水分、装量差异、崩解时限），【含量测定】【微生物限度】等项目。
根据《药剂学》、《实用药物制剂技术》等教科书，及我公司生产胶囊剂的多年经验，拟选用淀粉、预胶化淀粉为稀释剂，与提取的两种稠膏混合，干燥，粉碎，喷入土木香和细辛的挥发油，外加硬脂酸镁混匀，装入胶囊，铝塑泡罩包装，即得。
（1）药粉的制备
A、按处方量的2倍投料、按上述工艺制备浸膏，两种稠膏混合后，称重（360g）均分为10等份，每2份为一组，分别摊在烘盘中，厚度约5mm,放至热风循环烘箱中，分别在60℃、70℃、80℃、90℃、100℃干燥。
经考察，浸膏中丹参酮ⅡA的含量随温度的升高而下降，细粉色泽加深。
为保证产品质量，温度控制在80℃以下，但干燥时间太长，无法工业化生产，结合我公司多年生产中药制剂的实际经验，拟采用浸膏与辅料混合后80℃以下共同干燥的方法。
B、按处方量投料、按上述工艺制备浸膏，两种稠膏混合后称重（约180g），加入适量淀粉，制成适宜软材，（经实验加入约100g淀粉，制备的软材较适宜，“手握成团，轻压即散”）。
均分为6等份，每2份为一组，分别摊在烘盘中，厚度约10mm,放至热风循环烘箱中，分别在60℃、70℃、80℃干燥，经考察浸膏与辅料混合后80℃以下共同干燥的方法能够保证药品质量，考虑到生产劳效、能耗等因素，决定采用浸膏与辅料混合后80℃共同干燥的方法。
（2）填充试验
结合我公司多年生产胶囊的实际经验，本品拟采用稠膏干燥后粉碎成细粉，喷入挥发油，混匀，密封4小时，加入适量辅料，半成品检验后，将药粉分装至3号空心胶囊。
由于淀粉和预胶化淀粉的吸湿性相似，25℃及相对湿度65%时，平衡吸湿量为13%，为增加药物的稳定性和粉末的流动性，填充胶囊时多选用干预胶化淀粉、干淀粉（干淀粉或干预胶化淀粉的制备方法：
称取淀粉或预胶化淀粉100Kg，置GFG-120型沸腾干燥机中，控制进风温度100±
5℃、出风温度40±
5℃，烘干30min,控制水分≤6.0%）。
药粉的制备：
按处方量的1倍量投料、按上述工艺制备浸膏，两种稠膏混合后加与一倍量的淀粉共同干燥后粉碎，得细粉160g（测丹参酮ⅡA总量为120.14mg，每粒应含丹参按丹参酮ⅡA（C19H18O3）为0.120mg），将药粉分为四等份（250粒/份），按下表进行填充实验。
表10、填充试验水平表
处方
（1）
处方
（2）
处方（3）
处方（4）
称取药粉40g、干淀粉5g、干预胶化淀粉5g、过80目筛网，混合均匀
称取药粉40g、干淀粉5g、干预胶化淀粉5g、硬脂酸镁0.2g过80目筛网，混合均匀
称取药粉40g、干淀粉2.5g、干预胶化淀粉7.5g、硬脂酸镁0.2g过80目筛网，混合均匀
称取药粉40g、干淀粉7.5g、干预胶化淀粉2.5g、硬脂酸镁0.2g过80目筛网，混合均匀
表11、填充实验结果表
装量差异
含量
备注
0.1641g、0.1613g、0.1648g、0.1561g、0.1613g、0.1793g、0.1615g、0.1556g、0.1798g、0.1439g
平均：
0.1627g
上限：
0.1790g下限：
0.1464g
每粒含丹参按丹参
酮ⅡA（C19H18O3）计，
为0.098mg
流动性差
装量差异不符合规定
崩解时限符合规定
含量低于处方量
0.1802g、0.1823g、0.1753g、0.1892g、0.1756g、0.1829g、0.1757g、0.1881g、0.1802g、0.1832g
0.1813g
0.1994g下限：
0.1632g
为0.108mg
流动性较好，
装量差异符合规定
0.2036g、0.1959g、0.1955g、0.2063g、
0.2109g、0.2058g、0.1997g、0.1996g、
0.2097g、0.2083g
0.2035g
0.2239g下限：
0.1832g
为0.121mg
流动性好，
含量与处方量相当
0.1793g、0.1944g、0.1798g、0.1824g、0.1902g、0.1554g、0.1573g、0.1782g、
0.1936g、0.1581g
0.1769g
0.1946g下限：
0.1592g
为0.105mg
流动性差，
填充实验结果表明：
处方1、4，细粉的流动性均较差，装量差异均不符合规定，且丹参酮ⅡA的含量均低于处方量（0.120mg/粒），不予采用；
处方2细粉的流动性较好，装量差异符合规定，但丹参酮ⅡA的含量为0.108mg/粒，略低于处方量（0.120mg/粒），为保证产品质量，不予采用；
处方3细粉的流动性好，装量差异符合规定，丹参酮ⅡA的含量为0.121mg/粒，与处方量（0.120mg/粒）相当，予以采用。
验证试验：
取药粉制备B实验所得的细粉160g，（丹参酮ⅡA计0.122mg/粒），喷入挥发油0.6ml混合均匀，密封4小时；
然后分成两份，每份细粉80g。
按以下处方进行填充试验:
细粉80.0g
干淀粉5.0g
干预胶化淀粉15.0g
硬脂酸镁0.4g
制成500粒
表12、填充验证实验结果表
0.2058g、0.2102g、0.2062g、0.2017g、0.2094g、0.2093g、0.1991g、0.2038g、0.2042g、0.1965g
0.2046g
0.2251g下限：
0.1841g
为0.123mg
流动较好，
0.2034g、0.2023g、0.2056g、0.1982g、0.2046g、0.xxxx2g、0.2050g、0.2126g、0.1992g、0.2091g
0.2040g
0.2244g下限：
0.1836g
为0.122mg
由上表可以看出，细粉的流动性较好，装量差异符合规定，丹参酮ⅡA的含量与处方量（0.122mg/粒）相当，重复性也较好，说明该处方该工艺可行。
心无忧胶囊的规格暂定为:
每粒装0.2g，每粒含丹参按丹参酮ⅡA（C19H18O3）计，应不低于0.10mg。
2、处方
药物细粉160.0g
挥发油0.6ml
干淀粉10.0g
干预胶化淀粉30.0g
硬脂酸镁0.8g
制成1000粒
3、工艺规程:
（1）、称取预胶化淀粉100Kg，置GFG-120型沸腾干燥机中，控制进风温度100±
5℃、出风温度30±
5℃，烘干30min，控制干淀粉的水分≤6.0%。
得干预胶化淀粉。
（2）、称取淀粉100Kg，置GFG-120型沸腾干燥机中，控制进风温度100±
5℃，烘干30min，控制干淀粉的水分≤6.0%,得干淀粉。
（3）、药粉、干预胶化淀粉、干淀粉、硬脂酸镁分别过80目筛网。
（4）、称取药粉，喷入挥发油混匀，密封4小时。
（5）、按处方量，将上述药粉与干预胶化淀粉、干淀粉、硬脂酸镁混合均匀。
（6）、半成品检验后，用NCJ-800型全自动胶囊填充机将药粉分装至3号空心胶囊，控制
装量为0.2g±
5%。
（7）、铝塑泡罩包装即得。
由以上试验可总结本品制法为：
以上八味，黄杨木粉碎成粗粉，丹参切片，混合加热回流提取二次，第一次用10倍量乙醇加热回流2小时，第二次用8倍量50%乙醇加热回流1小时，合并两次回流提取液，滤过，滤液回收乙醇，药渣加10倍量水煎煮2小时，滤过，滤液与上述药液合并，浓缩成稠膏；
土木香、细辛提取挥发油，药渣与其余射干等四味加10倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩成1.35的稠膏；
将以上两种稠膏混匀，加入适量辅料混匀干燥，粉碎，喷入土木香和细辛的挥发油，加入适量辅料，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
（六）经三批中试生产考核工艺稳定性
取处方十倍量药材，在中试设备上试验，考核工艺稳定性，三批数据表明，工艺稳定，具可重复性。
根据中试制成品量，确定本品每处方量制成1000粒。
二、质量研究试验资料及文献资料
心无忧片收载于《卫生部药品标准中药成方制剂十三册》（WS3-B-2491-97）,心无忧胶囊是根据心无忧片改变剂型的中药8类新药（减免临床研究），现将质量标准起草说明报告如下：
【名称】心无忧胶囊
【处方】与原标准一致。
【制法】
土木香、细辛提取挥发油，药渣与其余射干等四味加10倍量水煎煮二次，第一次2小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩成稠膏；
将上述两种稠膏混匀，加入适量辅料，混匀，干燥，粉碎，喷入土木香和细辛的挥发油，混匀，装入胶囊，制成1000粒，即得。
本品工艺与原工艺无质的改变，按新的工艺实际条件描述。
【性状】以三批中试产品的实际性状描述。
除剂型外，与原标准一致。
【鉴别】
（1）为处方中丹参的薄层鉴别，经与丹参酮ⅡA对照品、缺丹参阴性对照样品对照，斑点显色清晰，Rf值适宜，专属性强。
予以采用。
（2）为处方中川芎的薄层鉴别，经与阿魏酸对照品、缺川芎阴性对照样品对照，斑点显色清晰，Rf值适宜，专属性强。
（3）还进行了黄杨木的薄层鉴别，参考文献取本品5g，置分液漏斗中，加水和氢氧化钠试液各10ml，摇匀后，加氯仿20ml，振摇提取10分钟，静置，分取氯仿层，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。
另取环维黄杨星D对照品，加氯仿制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（中国药典20xx年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-二乙胺（25：
20：
2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
经试验，样品加入水和氢氧化钠试液各10ml，摇匀后溶液呈胶体状，无法萃取及过滤，故改用氯仿超声处理30分钟制备供试品，按上述方法展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。
供试品色谱中，样品没有显示与对照品相同的斑点。
暂没有找到合适的方法。
（4）还进行了处方中射干的薄层鉴别，参考文献取本品10g，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。
另取射干对照药材1g，同法制成对照药材溶液。
照薄层色谱法（中国药典20xx年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄
层板上，以氯仿-丙酮-甲醇（3：
1：
1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀三氯化铝试液，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
经试验，样品中没有显示与对照药材相应的斑点，改用GF254薄层板，以氯仿-丙酮-甲醇（3：
1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，缺射干阴性对照样品中，亦显示与样品及对照药材相应位置上的相同斑点，不予采用，暂无合适方法。
【检查】依照中国药典20xx年版一部附录ⅠL的有关规定对三批中试产品检查，均符合药典有关规定。
重金属取本品2.0g，精密称定，置己炽灼至恒重的坩锅中，缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5～1.0ml使恰湿润，低温加热至硫酸蒸气除尽后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸气除尽后，放冷，在590℃炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至对酚酞指示液显中性，再加醋酸盐缓冲液（xxxxH3.5）2ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加水稀释成25ml；
另取配制供试品溶液的试剂，置瓷皿中蒸干后，加醋酸盐缓冲液（xxxxH3.5）2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加标准铅溶液1ml，再用水稀释成25ml，上述两管中各加硫代乙酰胺试液各2ml,摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，样品管中显示出的颜色与标准铅溶液管比较，不得更深。
三批中试产品重金属含量均低于百万分之五，暂不设定重金属检查项。
砷盐检查取本品2.0g，精密称定，置己炽灼至恒重的坩锅中，缓缓炽灼至完全炭化，在590℃炽灼使完全灰化，放冷，加盐酸3ml与适量水使成30ml，分取溶液10ml，依中国药典20xx年版一部（附录ⅨH第二法）检查,三批中试产品砷盐含量均低于百万分之二，暂不设定砷盐检查项。
表13、重金属及砷盐检查结果表
批号
重金属xxxxxxxxm
砷盐xxxxxx
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