磷酸盐缓冲液配制方法Word格式文档下载.docx
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取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO4,即可。
然后只需将0.2MPB（pH=7.4）按相应比例适当
稀释即可，如：
0.1MPB（PH=7.4）:
取500ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。
0.01MPB（PH=7.4）：
取50ml0.2MPB，加水稀释至1000ml即可。
0.02MPB（PH=7.4）:
取100ml0.2MPB，力口水稀释至1000ml即可。
若需要NaCl的话，加入NaCl至0.9%（g/100ml）即可。
另：
其它各种另PH值的0.2MPB（100ml）配方：
pH0.2MNaH2PO4（ml）0.2M
Na2HPO4（ml）
5.793.5
6.5
5.892
8
5.9
10
6.0
12.3
6.1
15
6.2
18.5
6.3
22.5
6.4
26.5
31.5
6.6
37.5
6.7
43.5
6.8
49
6.9
87.7
85
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
56.5
55
7.0
62
7.1
67
7.2
72
7.3
77
7.4
81ml
7.5
84
7.6
87
7.7
90.5
7.8
91.5
7.9
93
8.0
33
28
23
19ml
16
13
10.5
8.5
5.3
94.70.01M磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法
称取8gNaCI、0.2gKCI、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCI调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15Ibf/in2（1034X105Pa）高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4C冰箱中。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。
如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。
PH
H2O
1000
NaCl
&
5
Na2HPO42.22.22.22.2
NaH2PO40.10.20.30.4
根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）。
所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影
响实验结果，甚至可能导致阴性。
所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。
每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。
PBS缓冲液
称取NaCl8g,KCI0.2g,Na2HPO4?
12H2O3.63g,KH2PO40.24g,溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L，常温保存备用。
PBST缓冲液
取300卩lTween-20加入PBS100ml中，混匀后即刻使用。
现用现配。
如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸。
不能用盐酸调。
虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。
十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值。
不需要其它任何处理。
这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~
PH8.0的PBS配方详细
1.NaCI137mmol/L,KCI2.7mmol/L,Na2HPO4
4.3mmoI/L，KH2PO41.4mmoI/L
2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加浓盐酸将pH值调节至8.0,然后加入去离子水将溶液定容至1L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：
上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mM
MgCl2。
0.05mol/LPBS（磷酸缓冲液PhosphateBufferSolution,PBS）的配制：
甲液：
0.05mol/LNa2HPO4溶液：
称取磷酸氢二钠9.465g7.099g加蒸馏水至1000ml;
乙液：
0.05mol/LKH2P04溶液：
称取磷酸二氢钾,9.07g6.803g加蒸馏水至1000m1。
将甲乙液分装在棕色瓶内，于4C冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表：
5.292.597.5
5.59
5.0
95.0
5.91
10.0
90.0
6.24
20.0
80.0
6.47
30.0
70.0
6.64
40.0
60.0
6.81
50.0
6.98
7.17
7.38
7.73
8.04
你要配制pH=6.8的PBS,可用甲、乙液各50ml混合即可。
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