植物生理生化试题材料Word格式.docx
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指种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力。
16、抗逆性:
植物对逆境的抵抗与忍耐能力,简称为抗性。
17、呼吸速率:
单位时间鲜重或干重植物组织或原生质释放的CO2或吸收O2的量来表示
18、光合速率:
单位时间、单位叶面积吸收CO2或放出O2的量。
19、无土培养:
不用土壤,用溶液培养植物的方法,包括水培与沙培等。
20、超氧化物歧化酶（SOD）:
普遍存在动,植物体内,就是一种清除超氧阴离子自由基Ｏ2的酶。
21、硝酸还原还原酶:
就是植物氮素同化的关键酶,它催化植物体内的硝酸盐还原为亚硝酸。
22、诱导酶:
又称适应酶,指植物体内本来不含有,但在特定外来物质的诱导下诱导生成的酶。
如硝酸还原酶可为NO3-所诱导生成。
23、活性氧:
较O2的化学性质更为活泼的O2的代谢产物或由其衍生的含氧物质,包括
、O2-、、OH、H2O2等
24、生物自由基:
泛指通过生物体自身代谢产生的一些不稳定的、带有多余电子的、化学活性很高的基团或分子。
二、填空:
1、测定植物可溶性蛋白质含量时,绘制标准曲线就是标准蛋白质浓度为横坐标,以_吸光值为纵坐标。
2、常用的测定植物可溶性蛋白质含量的方法有:
Folin-酚试剂法（Lowry法）、考马斯亮蓝法与紫外分光光度法
3、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸含量时,茚三酮溶液与氨基酸共热生成_氨,氨__与茚三酮与还原性茚三酮反应,生成蓝紫色的二酮茚胺。
该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成_正比_,可通过测定____570nm处的光密度,求出氨基酸的含量。
4、用滴定法测Vc含量时,若样品本身带有颜色,则需先将样品用_________处理。
5、测定淀粉酶活性时,3,5－二硝基水杨酸试剂（DNS）的作用就是__与还原糖显色生成棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸与终止酶活性。
6、在测定淀粉酶的活性时:
α－淀粉酶不耐__酸__,β－淀粉酶不耐_____热___。
7、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中,电泳存在三大效应,分别就是浓缩效应、分子筛效应与电荷效应
8、测定硝酸还原酶活性的方法有__活体法与离体法。
。
9、用活体法测定硝酸还原酶的材料,取样前叶子需进行一段时间的光合作用,以积累光合产物,产生更多NADH加速硝酸盐的还原。
10、植物呼吸速率常用的测定方法有__红外线法CO2气体分析法与改良半叶法等。
11、叶绿素吸收光谱有红光与蓝紫光区两个最强吸收区。
12、类胡萝卜素吸收光谱最强吸收区在
蓝紫光区,它不仅可以吸收传递光能,还具有
保护叶绿素_的作用。
13、叶绿素溶液在透射光下呈
绿色,在反射光下呈___暗红色。
14、缺N与缺Fe都能引起缺绿病,二者区别在于缺氮老叶发病,缺铁嫩叶发病。
15、水培时要选用黑色容器装营养,这就是为了防止藻类滋生。
16、常用_水溶液培养法法确定植物生长的必需元素。
17、缺钙症首先会表现于植物的__嫩______叶上。
18、缺乏必需元素镁、氮、钾等,均可引起植物产生缺绿病。
19、植物光合速率测定方法有__该良半叶法与___CO2气体分析法______________等。
三、选择:
1、某蛋白质pI为7、5,在pH6、0的缓冲液中进行自由界面电泳,其泳动方向为（）
A、向负极移动B、向正极移动C、不运动D、同时向正极与负极移动
2、进行酶活力测定时:
（A）
A、底物浓度必须极大于酶浓度B、酶浓度必须极大于底物浓度,
D、酶能提高反应的平衡点C、与底物浓度无关
3、蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸。
它们具有吸收紫外光的性质,其吸收高峰在（D）波长处
A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm
4、Folin-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质浓度时,用（B）波长比色,测定光密度值。
A、260nmB、650nmC、540nmD、280nm
5、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳比一般电泳的分辨率高,就是因为具有下列哪种效应？
（ABC）
A、浓缩效应B、电荷效应C、分子筛效应D、粘度效应
6、硝酸还原酶与亚硝酸还原酶（D）
A、都就是诱导酶
B、硝酸还原酶不就是诱导酶,而亚硝酸还原酶就是
C、都不就是诱导酶D、硝酸还原酶就是诱导酶,而亚硝酸还原酶不就是
7、酶的分离提纯过程中,不正确的操作就是（C）。
A、需在低温下进行,一般在0～5℃之间
B、酶制剂制成干粉后可保存于4℃冰箱中
C、需经常使用巯基乙醇以防止酶蛋白二硫键发生还原
D、提纯时间尽量短
8、在提取叶绿素时,研磨叶片时加入少许CaCO3,其目的就是（D）
A、使研磨更充分
B、加速叶绿素溶解
C、使叶绿素a、b分离
D、保护叶绿素
10、一般而言,正常植物叶片的叶绿素与类胡萝卜素的比值为（B）
A、2:
1
B、3:
C、1:
2
D、1:
3
11、测定叶绿素总量时,分光光度计选用的波长就是（B错）应（D652nm）
A、663nm
B、645nm
C、430nm
D、652nm
12、叶绿素卟啉环的中心原子就是（C）
A、Cu
B、Fe
C、Mg
D、Mn
13、植物的幼嫩部分,亏缺下列哪种元素时,缺素症首先表现出来。
（B）
A、K
B、Ca
C、P
D、N
14、下列元素中,属于必需的大量元素有（B）
A、铁B、氮C、硼D、锌
15、高等植物的老叶由于缺少某一种元素而发病,下面元素属于这一类的有（A）
A、氮B、钙C、铁
16、呼吸作用的底物为（A）。
A、有机物与O2B、CO2与H2OC、有机物与CO2
17、光合作用的底物为（B）。
18、在95%提取液中,叶绿素a在红光区的最大吸收峰为（D）。
A、470nmB、649nmC、656nmD、665nm
19、小蓝子法测定呼吸强度生成的白色沉淀就是（A）
A、BaCO3B、Ba（COO）2C、Ba（OH）2D、CaCO3
20、TTC法测定种子生活力的试验中,活种子的现象为（A）。
A、种胚全部染成红色B、种胚全部未染色
C、种胚全部染成黑色D、种胚非关键部位染色,而胚根与胚芽的尖端都不染色
21、小篮子法测定呼吸强度中,若在滴定时,外界CO2进入呼吸测定装置内,会使测得的结果（A）。
A、偏大B、偏小C、不变D、不一定
三、简答题
1、怎样提高样品测定的准确性?
答:
①正确采集代表性样品②选择合适的测定方法③减少测定误差④正确记录与处理测定数据。
2、植物材料的取样有哪些方法？
答:
①原始样品的取样法:
随机取样、对角线取样。
②平均样品的采样法:
混合取样法、按比例取样法。
3、简述分光光度计的使用方法。
①检查721A型分光光度计的旋钮与开关,使其回复零点。
②按要求接通电源,按下“T键”,打开暗盒盖与电源开关,指示灯亮。
预热20分钟。
③调节波长旋钮至所需波长。
④取比色皿分别盛装B、S、U液,置入检测室（比色皿先用蒸馏水洗后,再用比色液润洗才能装比色液）。
B液对准光路。
⑤调节面板“零位细调”,使指示为00、0,即透射比“T”的零点,同时“一”号闪跃。
⑥合下检测室盖、调节“光量粗、细调”电位器,使指示为100、0,须反复5、6两点操作达到稳定。
⑦按下“A”键,指示为“、000”同时“一”闪跃,如果指示读数不就是比值时,应调节“消光调零“电位器,使其达到要求。
⑧拉出或推入拉杆,使U、S液分别置于光路读取A值,然后移动拉杆,读B管A值,如为0,则前述A值有效。
⑨在稳定时,重复读数一次,并按下“T”键。
⑩打开检测室盖,取出比色皿,倾去比色液于水槽中,用自来水冲洗干净,倒置于表面皿（铺有滤纸）中。
（11）关上电源开关,拔出电源插头,取出比色皿架,检查检测室内就是否有液体溅出,并擦净。
检测室内放入硅胶袋,合上盖,套上仪器罩。
4、请介绍3种常用的可溶性蛋白质的测定方法。
目前常用的有以下几种方法:
双缩脲法、Lowry法（Folin-酚试剂法）、Bradford法（考马斯亮蓝法）、紫外吸收法。
（186-194页）
5、简述斐林－酚试剂法测定植物可溶性蛋白质的原理。
（188页）
Folin-酚试剂法也称Lowry法,斐林（Folin）一酚试剂法结合了双缩豚试剂与酚试剂与蛋白质的反应,其中包括两步反应:
第一步就是在碱性条件下,蛋白质中的肽键与铜试剂作用生成紫红色的蛋白质一铜络合物（双缩脲反应）;
第二步就是此络合物以及蛋白质中酪氨酸与苯丙氨酸等芳香族氨基酸的残基使磷钼酸-磷钨酸试剂（Folin试剂）还原,产生磷钼蓝与磷钨蓝的深蓝色混合物质,在一定的条件下,颜色深浅与蛋白含量成正相关。
因此,可利用其在650nm波长下的特定吸收进行比色测定。
6、植物组织可溶性蛋白质含量的测定中,斐林－酚试剂法、考马斯亮蓝法两种方法各有何优缺点？
①斐林－酚试剂法其优点就是:
由于加入了Folin-酚试剂后使蛋白质肽键显色效果增强,从而减少了因蛋白质种类引起的偏差。
其灵敏度比双缩豚法高100倍。
此法操作简便,适于蛋白质含量较微小的样品测定。
可检测的最低蛋白质含量达5ug,通常测定范围5～100ug。
0、02～0、50mg/mL蛋白质,也可用于酪氨酸与色氨酸的定量测定。
缺点就是操作烦琐,耗时较长,要精确控制操作时间,标准曲线不就是严格的直线形式,且专一性差,干扰物质（酚类、柠檬酸、Tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等）较多。
（189页的注意事项）
②考马斯亮蓝法就是灵敏度更高的一种方法,优点有:
灵敏度高,比lowry法高4倍左右,最低检测达1－5微克;
测定快速、简便,染色稳定;
干扰物质少。
缺点就是用于不同蛋白质测定时有较大的偏差;
仍有干扰,如SDS、去污剂、Tritonx100等;
标准曲线有轻微的非线性。
7、Folin-酚试剂法测定植物可溶性蛋白质时受哪些因素的干扰？
Folin-酚试显色反应就是由络氨酸、色氨酸与半胱氨酸引起的,因此样品中若含有酚类、柠檬酸与巯基类化合物均有干扰作用。
此外,不同蛋白质音络氨酸、色氨酸含量的不同而使显色强度稍有差异。
8、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时,加入Vc的作用就是什么？
由于该反应的第一步就是茚三酮的还原,而还原型茚三酮在含氧量高的情况下很容易再氧化,对反应有干扰,因此,常在反应体系中加入还原剂,以阻止还原型茚三酮的再氧化。
所以,……
9、茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时为什么要除去蛋白质？
用10%乙酸除去蛋白质的原理就是什么？
由于蛋白质与多肽中的游离氨基酸也会产生同样反应,因此,对于含大量蛋白质与多肽的样品,应先用蛋白质沉淀剂将其除去。
常用的蛋白质沉淀剂有10%乙酸、磺基水杨酸（SSA）、三氯乙酸（TCA）、过氯酸（PCA）等,其中以乙酸提取总氨基酸的效果较好。
原理:
10%乙酸与蛋白质反应使之沉淀下来（?
）
10、用茚三酮显色法测定植物组织氨基酸时,为什么要用无氨蒸馏水？
氨基酸与茚三酮反应的实质就是还原型茚三酮与另一分子茚三酮与一分子氨的缩合脱水反应。
故,若蒸馏水中含有氨将使氨基酸含量增大。
带来误差。
11、测定植物组织中游离氨基酸总量有何生理意义？
测定植物体内游离氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。
12、测定淀粉酶活性时,3,5二硝基水杨酸试剂（DNS）的作用就是什么？
淀粉酶水解淀粉生成的麦芽糖,可用3,5–二硝基水杨酸试剂测定。
由于麦芽糖能将后者还原生成3–氨基–5–硝基水杨酸的显色基团,在一定范围内其颜色的深浅与糖的浓度成正比,故可求出麦芽糖的含量。
13、测定（α＋β）-淀粉酶总活力时,为什么要将淀粉酶原液稀释成淀粉酶稀释液后进行反应。
淀粉酶原液主要就是用于钝化β-淀粉酶,从而测定a-淀粉酶的活力。
而淀粉酶稀释液主要就是用于测出（α＋β）-淀粉酶总活力,从而可得出β-淀粉酶的活力。
14、测定淀粉酶活性时,为什么要将酶提取液与淀粉溶液分别放在40℃水浴中预保温？
因为a-淀粉酶的最适温度在40℃～50℃之间,在这一温度范围内a-淀粉酶的活性最强,催化淀粉的能力最强。
因此,将酶提取液与淀粉溶液分别放在40℃水浴中预保温,有利于淀粉酶活性的测定,减少误差。
15、测定硝酸还原酶活性的离体法与活体各有何特点？
（125页）
活体法步骤简单,适合快速、多组测定,重复性不好,应在4℃
离体法步骤复杂,但重复性较好。
需要在低温与NADH的条件下进行。
16、为什么用活体法测定硝酸还原酶的材料,在取样前要进行一段时间的光合作用？
因为测定前材料在进行光合作用,会积累能量物质,可促进硝酸还原酶的产生。
17、活体法测植物体内硝酸还原酶活力实验中,硝酸盐还原过程为何在黑暗中进行？
硝酸盐还原过程应在黑暗中进行,以防亚硝酸盐还原为氨。
18、活体法测植物体内硝酸还原酶活力实验中,如何判断真空抽气的终点？
真空抽气时,叶片完全软化沉入杯底,则代表叶片组织间隙的气体得以全部排除,那么就就是真空抽气的终点。
19、用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量时,为什么强调滴定时间不超过2分钟?
维生素C具有很强的还原性,如果滴定时间过长,维生素C就会被空气中的氧气氧化,从而减少维生素C的含量,最终影响到维生素C含量的测定。
0000000000
20、为什么用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量时,要在测定的同时进行2,6-二氯酚靛酚溶液的标定?
①就是为了知道此时2,6-D染料的滴定度（每ml染料相当于抗坏血酸的mg数）。
②就是因为2,6-D染料很不稳定,随着时间的推移,其滴定度一直在变化中,因此只能现测现用。
21、简述滴定法测定Vc含量的实验原理。
（267页）
还原型抗坏血酸还原染料2,6-二氯靛酚,该染料在酸性中呈红色,被还原后红色消失。
还原型抗坏血酸还原2,6-二氯靛酚后,本身被氧化成脱氢抗坏血酸。
在没有杂质干扰时,一定量的样品提取液还原标准2,6-二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
22、为了准确测定果蔬的抗坏血酸含量,在测定过程应注意些什么？
①验所用的蒸馏水必须就是无氨水。
②滤必须用干燥滤纸。
③格掌握加入抗坏血酸的含量。
④准曲线应在测定样品的同时做,以减少操作及反应条件的误差。
⑤定要水沸腾后才能将试管放入加热,而且水浴锅的水位一定要高于试管内试剂的高度。
⑥管从沸水浴中取出,一定要冷水迅速冷却后才能加入乙醇。
（因加热时形成的红色还原型茚三铜,在冷却过程被空气的氧氧化而褪色,而茚三铜与氨基酸的蓝紫色反应物仍留着,并变得更加明显。
）⑦铜与氨基酸反应生成的颜色在1小时内保持稳定,所以要抓紧时间比色。
⑧灵敏度在很大程度上与H离子浓度有关,最适pH4、5,应严格控制。
23、简述“过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳”实验中所用的过硫酸铵、四甲基乙二胺、蔗糖、溴酚蓝、H2O2等试剂的作用就是什么？
（181页）
①过硫酸铵的作用:
使丙烯酰胺（Acr）与交联剂甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合成聚丙烯酰胺凝胶。
②四甲基乙二胺（TEMED）的作用:
作为丙烯酰胺（Acr）与交联剂甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合的加速剂。
③蔗糖的作用:
使同工酶沉在点样孔底部,防止同工酶漂浮。
④溴酚蓝的作用:
可以作为电泳进度的指示分子,起指示作用。
⑤H2O2的作用:
作为氧化物,使过氧化物酶同工酶催化H2O2分解,从而来进行植物过氧化物酶同工酶的测定。
24、什么叫同工酶？
测定同工酶有什么意义？
①同工酶:
能催化同一种化学反应但其分子结构与带电性质不同的一组酶。
②（由于同一种酶可分布于多种脏器组织,它们之中的任何一个发生病变,都可引起酶在血清中的活力变化。
除了少数组织专一性的酶以外,大多数血清酶不能特异地反映某个特定组织的病变。
）而不同脏器或组织的同工酶谱型不同,当其发生病变后,释放到血清中的各种同工酶的比例也不一致,所以血清酶的同工酶谱型的改变能精确地反映出患病的部位与损伤的程度,提高了血清酶测定在反映组织病变上的专一性。
25、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中,电泳结束后如何进行染色？
电泳完毕,将电泳槽取出,倒去缓冲液,取下凝胶管,放入培养皿中。
用一个带有长针头的注射器,吸满水,将针头沿管壁插入,同时慢慢地将注射器中的水推出,并不断转动凝胶管,将凝胶管挤脱出来,也可用洗耳球挤压。
取0、5ml联苯胺母液＋H2O9、3ml＋0、2ml3％H2O2,混匀后倒入盛有凝胶条的培养皿。
此时可以瞧到胶条上出现蓝色或棕褐色环,即过氧化物酶带,约十min后用自来水冲洗,这时蓝色带也慢慢变成棕褐色。
26、简述聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质的原理?
聚丙烯酰胺凝胶由丙烯酰胺与交联剂甲叉双丙烯酰胺在催化剂作用下聚合而成,具有三维网状结构,其网孔大小可由凝胶浓度与交联度加以调节。
凝胶电泳兼有电荷效应与分子筛效应。
被分离物质由于所载电荷数量、分子大小与形状的差异,因此在电泳时产生不同的泳动速率而相互分离。
利用特异性的颜色反应使待测酶着色,这样就可在凝胶中展现出酶谱。
过氧化物酶就是植物体内常见的氧化酶。
植物体内许多生理代谢过程常与它的活性及其同工酶的种类有关。
利用过氧化物酶能催化H2O2把联苯胺氧化成蓝色或棕褐色产物的原理,将经过电泳后的凝胶置于有H2O2及联苯胺的溶液染色,出现蓝色或棕褐色部位即为过氧化物酶同工酶在凝胶中存在的位置,多条有色带即构成过氧化物酶同工酶谱。
27、为什么说无土培养就是研究矿质营养的重要方法?
无土栽培就是指不用天然土壤、而用营养液来栽培作物的方法,当前主要用于蔬菜、花卉与树木育苗。
目前生产上常用有水培、砂砾培等。
无土栽培与常规栽培的区别,就就是不用土壤,直接用营养液来栽培植物。
为了固定植物,增加空气含量,大多数采用砾、沙、泥炭、蛭石、珍珠岩、岩棉、锯木屑等作为固定基质。
其优点可以有效地控制花卉在生长发育过程中对温度、水分、光照、养分与空气的最佳要求。
由于无土栽培花卉不用土壤,可扩大种植范围,加速花卉生长,提高花卉质量,节省肥水,节省人工操作,节省劳力与费用。
缺点就是,一次性投资较大,需要增添设备,如果营养源受到污染,容易蔓延,营养液配制需要技术知识。
无土栽培的装置无土栽培所需装置主要包括栽培容器、贮液容器、营养液输排管道与循环系统。
28、比较溶液培养与砂基培养的优缺点。
29、进行溶液培养或砂基培养有时会失败,主要原因何在?
溶液培养时溶液就是水,没有固定性,无法给根系提供支撑作用;
溶液PH值会发生变化,抑制根吸收矿质元素;
容易造成污染,影响实验。
沙基培养常出现无充足的水分供应,而且沙基中容易含有矿质元素影响实验结果。
30、叶绿素a、b在蓝光区也有吸收峰,能否用这一吸收峰波长进行叶绿素a、b的定量分析？
为什么？
不能,因为类胡萝卜素的最大吸收带在400～500的蓝紫光区,不吸收红光,为了排除类胡萝卜素的干扰,所以选择叶绿素在红光区的最大吸收峰;
并且叶绿素的溶液呈绿色,易与蓝紫光产生遮光效果,混淆实验效果。
31、为什么提取叶绿素时干材料一定要用80%的丙酮,而新鲜的材料可以用无水丙酮提取？
因为叶绿素分子结构的“头部”就是亲水的,与蛋白质结合很牢,需经过水解作用才可被提取出来。
而干材料中没有水分,故提取叶绿素时干材料一定要用80%丙酮或95%乙醇提取,而新鲜的材料总含有水分,可以赢无水丙酮或乙醇提取。
32、测定呼吸速率有何意义？
33、影响呼吸速率测定的因素有哪些？
（同课本P136）
1.内部因素。
不同种类植物的呼吸速率不同,凡就是生长快的植物呼吸速率就高,生长慢的呼吸速率就低;
一般旱生植物,生长缓慢,呼吸速率比水生植物低;
阴生植物所处的光强度较弱,呼吸也较弱,呼吸速率比阳生植物低。
同一种植物在不同的生长发育时期,呼吸速率也不同,一般在幼苗期、开花期等生长旺盛期,呼吸速率增高。
同一种植物的不同器官,呼吸速率也不同,一般生殖器官比营养器官高,幼嫩组织器官比衰老的组织器官高,种子内胚的呼吸速率比胚乳高。
多年生植物的呼吸速率还表现出季节周期性变化,在温带生长的植物,春天呼吸速率最高,夏天略降低,秋天又上升,以后一直下降,到冬天降到最低点,这种周期性变化除了外界环境的影响外,与植物体的代谢强度、酶活性及呼吸底物的多寡也有密切关系。
2、外界因素对呼吸速率的影响。
（1）温度:
温度呼吸作用的影响主要表现为温度对呼吸酶活性的影响。
呼吸速率在一定范围内随温度的增高而增高,达到最高值后,继续增高温度,呼吸速率反而下降。
一般植物在0℃以下,呼吸作用很弱或几乎停止,呼吸作用的最适温度一般在25℃～35℃之间,呼吸作用的最高温度,一般在35℃～45℃。
呼吸作用的最低温度因植物种类不同有很大差异。
呼吸作用的最适温度总就是比光合作用的最适温度高。
（2）氧气:
氧就是有氧呼吸途径运转的必要因素。
从有氧呼吸来瞧,在氧浓度较低情况下,呼吸速率与氧浓度成正比,达到氧饱与点以后,则无促进作用。
氧浓度过高或过低都会对植物产生毒害。
根系缺氧会抑制根尖细胞分裂,影响根系内物质的运输
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