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与MHC-II分子以中等亲和力结合转变为CD4+CD8-(识别外来Ag-自身MHC-II复合物.bT-C发育的阴性选择,胸腺中通过阳性选择的细胞,如果与自身Ag-MHC分子复合物高亲和力结合,被激活而发生程序性死亡,称为克隆排除或克隆存在但受抑制不能活化称之为克隆不应答。

不能识别该复合物的胸腺细胞则能继续发育成成熟的能识别外来抗原的单阳性T细胞(CD4-CD8+细胞和CD4+CD8-)。

亚群:

Th辅助性T细胞(协助B-C活化产生抗体)Ts抑制性T细胞阻止产生Ab;

Tc细胞毒性T细胞(Th和Ts的比例起着稳定调节免疫反应的作用);

TD迟发性超敏反应T细胞介导迟发性超敏反应。

T细胞的表面标记(细胞表面具有特殊结构和功能的蛋白质分子):

表面抗原CD4、CD8;

表面受体。

B-C的个体发育过程1(抗原非依赖期)在骨髓中未成熟B细胞表面表达BCR能识别自身抗原的B细胞克隆以其BCR与骨髓中的自身抗原结合产生负向调节信号诱使该未成熟B细胞克隆发生凋亡,为B细胞的阴性选择。

2(抗原依赖期)在外周淋巴器官接受抗原刺激后活化B细胞,大量增殖并经历体细胞突变突变后的B细胞,凡与抗原以低亲和力或不能结合的发生凋亡,为阳性选择;

凡与抗原以高亲和力结合的B细胞进一步发育成浆细胞和记忆B细胞。

BCR膜表面抗体IgG的Fc受体;

补体C3受体。

NK-C自然杀伤细胞功能1直接杀伤靶细胞速发效应无需预先致敏4小时内可发挥作用2.参与ADCC作用3分泌细胞因子发挥免疫调节作用产生IL-1等细胞因子发挥作用。

辅助细胞是能捕捉加工处理能将抗原提呈给抗原特异性淋巴细胞的一类免疫细胞又称抗原提呈细胞APC。

种类1专职APC单核吞噬细胞系统树突状细胞B细胞等2非专职APC内皮细胞上皮细胞等。

免疫系统的特点1广泛分布于全身各部位2能精确地识别“异已”排除“异已”3能接受储存加工传递和记忆与免疫有关的信息。

功能1免疫防御正常防御病原微生物侵害中和毒素,异常反应过高引起变态反应反应过低引起免疫缺陷病,反复感染2自我稳定正常清除体内自然衰老或损伤的细胞,异常识别紊乱造成自身免疫疾病3免疫监视正常清除复制错误或突变细胞,异常功能失调时导致细胞癌变或持续性感染。

完全抗原指能单独刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞又能与之在体内外发生特异性结合的抗原。

半抗原是单独不能刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞但与载体蛋白结合后即可成为完全抗原;

化学成分为寡糖类脂和一些简单的化学物质;

载体蛋白是皮肤角蛋白血清蛋白红细胞或其他细胞成分;

半抗原性质的药物主要有青霉素类抗生素头孢类抗生素磺胺药解热镇痛药安眠镇静药;

只有与初次免疫反应相同的载体结合才能引起再次反应;

由B-C识别半抗原的决定簇而由T-C识别载体决定簇并由记忆细胞发挥作用。

抗原特性:

免疫原性反应原性。

特异性既表现在免疫原性也表现在反应原性;

物质基础是抗原表位或抗原决定簇(存在于抗原分子中决定抗原特异性特殊化学基团;

表位是免疫细胞识别的标志及免疫反应具有特异性的物质基础)表位的类型1构象表位(功能性表位)BCR/Ab识别的决定簇2线性表位(隐蔽性表位)多数可被T细胞识别,B细胞也可识别分子表面的顺序决定基。

抗原结合价:

能和相应抗体结合的功能性表位的数目半抗原为单价完全抗原为多价。

抗原抗体反应的特异性小结1含有不同化学基团的复合抗原只能与相应抗体特异性结合2同种化学基团由于连接位置不同所获得抗体也只能与相应抗原发生强结合反应3同种化学基团的空间构象不同特异性亦不同。

抗原的研究意义1用作诊断分析的材料或试剂2作为动、植物、微生物分类鉴定(检疫)的材料3 

作为防止传染病的疫苗4作为机体免疫功能及免疫细胞表面标志的研究。

构成免疫原的条件1异己性2具有一定的理化性质a化学性质天然抗原多为大分子有机物b分子量大小一般在10.0kD以上c化学结构复杂性较复杂化学组成和特殊化学基团(要含有大量的芳香族氨基酸)d物理状态聚合状态的蛋白质较其单体免疫原性强颗粒性抗原强于可溶性抗原e分子结构和易接近性3抗原进入机体的方式和途径能确保其完整。

共同抗原:

两种不同生物间由于存在相同或相似的抗原决定簇,所存在的在血清学上能起交叉反应(一种Ag刺激产生的抗体可与另一种Ag发生结合)的抗原;

分类1类属抗原:

存在于两种或两种以上的亲缘关系较近的生物之间的共同Ag2异嗜性抗原:

存在于两种或两种以上的无亲缘关系或亲缘关系较远的生物之间的共同Ag;

产生原因:

动物、植物及微生物之间除自身特异性成分外还存在相同或相似成分;

研究意义1如无害抗原与有害抗原有共同抗原可利用无害抗原制备抗体来鉴定有害抗原2通过交叉吸收反应鉴定亚因子。

构成有效决定簇的条件1有几种或多种氨基酸残基(lysphetyr)2分布在抗原表面3有一定的空间构型(由氢键和二硫键连接)。

O型血是万能的供血者,AB型是万能的受血者?

不对,O型者的红细胞上虽没有抗原但其血清中有抗A和B的抗体,同理AB型血虽没有抗体但却含A和B两种抗原,二者若与其他血型相接触均会发生凝血现象故这句话是错的。

抗原的分类:

化学性质1蛋白质多糖类脂物核酸元素抗原;

抗原的获得方式1天然抗原人工抗原(合成抗原结合抗原)基因工程抗原;

血清学检测方法可溶性抗原颗粒性抗原;

抗原是否在细胞内合成外源性抗原内源性抗原。

Rh抗原:

这些人红细胞与恒河猴红细胞有共同抗原根据红细胞表面有无Rh抗原区分为Rh阳性Rh阴性。

超抗原:

可直接结合抗原受体只需极低浓度即可激活2%-20%T细胞或B细胞克隆并诱导强烈免疫应答的物质。

抗体是免疫球蛋白,但免疫球蛋白不一定是抗体。

免疫球蛋白多肽链类型组合:

基本结构单位2条H链2条L链(分κ型和λ型)链间二硫键糖类。

木瓜酶水解IgG1Fc组成:

二个半条重链及糖基(由二硫键连接)功能:

补体结合种属Ag决定簇与具有Fc受体细胞(B-CMφSPA等)结合通过胎盘2 

Fab组成:

一条轻链半条重链功能:

结合Ag独特型Ag决定簇。

胃蛋白酶水解IgG1F(ab’)2组成:

2条轻链2个半条重链;

结合二个抗原有2个独特型Ag决定簇2水解剩下部分无生物活性。

功能区:

各同源区由二硫键连接成球形结构担负一定免疫学功能。

VH和VL为抗原结合部位CH1为遗传标志所在CH2为补体结合部位CH3与细胞表面的Fc受体结合。

结合部位:

高变区抗原结合部位Ig独特型(Id)抗原决定簇互补决定区。

多克隆Ab:

常规的用体内免疫的方法所获得抗血清是针对天然抗原分子上多个抗原决定簇产生的抗体。

单克隆Ab:

小白鼠免疫脾细胞骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞能产生只作用于某一抗原决定簇抗体。

基因工程Ab:

应用DNA重组技术和蛋白质工程技术按人们意愿在基因水平组装成的新型抗体。

五类免疫球蛋白1IgG出现顺序第2分4亚类占血清中Ig总量的75-80%单体可通过胎盘;

生物学活性:

参与调理作用ADCC作用中和毒素和通过经典途径激活补体系统等是抗毒素抗感染如抗菌抗病毒的主要抗体2IgA出现顺序第三占总量10-20%单体、双体或三体分型血清型存在于血清中主要为单体分泌型在分泌液中多为双体;

黏膜局部免疫作用抗菌抗病毒中和毒素3IgM出现顺序第一占总量6-10%存在形式;

膜表面为单体分泌型为五聚体,由J链连接(为免疫耐受性受体)功能:

IgM含10个Fab段具有比IgG更强的抗原结合能力促吞噬及凝集作用比IgG高500-1000倍。

IgM含5个Fc段比IgG更易激活补体参与II、III型变态反应4IgD单体占总量的0.2-1%功能:

可能与某些超敏反应有关如青霉素和牛奶过敏性Ab其它性质不稳定容易被酶类降解膜IgD为B细胞成熟重要标志IgM被认为是耐受性受体IgD为激活性受体5IgE单体占总量的0.008%功能a介导I型变态反应花粉过敏者在花粉季节血清IgE会升高某些真菌金黄色葡萄球菌等感染后血清IgE也会升高b抗寄生虫:

通过ADCC作用杀死寄生虫。

Ig的生物学活性1识别并与抗原特异性结合2结合补体3与细胞表面Fc受体结合a调理作用相应菌体Ag+IgG+MφFc受体加强吞噬bADCC作用抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用相应菌体Ag(个体较大)+IgG+NK-C(Mφ)Fc受体—靶细胞被杀伤c协同凝集相应小颗粒Ag+IgG+SPAFc受体协同凝集反应4介导Ⅰ型超敏反应IgEFc段可与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的高亲和力IgEFc受体结合并诱导这些细胞合成和释放多种生物活性物质诱导Ⅰ型超敏反应5IgG可以通过胎盘进入胎儿血循环内在胎儿和新生儿体内发挥抗感染免疫作用sIgA可通过呼吸道和消化道黏膜在黏膜局部发挥重要免疫作用6免疫调节作用自我识别是抗体分子参与免疫调节的另一种重要的方式即独特型网络调节7Ig免疫原性有双重性既可显示抗体活性也可显示抗原免疫原性(Fab段和Fc段)。

抗体产生一般规律1初次反应过程:

潜伏期→开始形成Ab→高潮→下降→消失(抗原→抗原提呈细胞→Th-C→B-C→Ab)特点抗体产生慢抗体量少维持时短,颗粒体Ag:

一周开始产生Ab2-3周达到高潮,可溶性Ag2-3周开始产生Ab一个月或40天达到高潮2二次反应过程潜伏期→Ab下降→Ab量开始回升→高潮→下降→消失,特点抗体产生快抗体量多维持时长在初次反应的Ab未消失前进行的免疫3回忆反应过程潜伏期→Ab量开始产生→高潮→下降→消失,特点抗体产生快抗体量多维持时间长在初次反应的Ab消失后进行免疫。

影响抗体生成的因素1机体的免疫功能a遗传因素(应答者)A种类的影响B品系的影响C个体免疫差异b生理因素c病理因素d外源性理化因素2抗原的性质(应具有构成免疫原的条件)和剂量适量剂量多少与抗原性强弱动物种类大小及免疫途径等有关3免疫次数间隔时间可引起再次反应和回忆反应IgM→IgG4免疫途径5混合Ag免疫竞争性抑制性协同作用或相加作用。

抗血清制备目的1被动免疫预防和治疗2免疫学诊断试剂3鉴定用Ab。

抗血清制备过程1动物选择商品制剂用大动物实验室用中小动物品系兔(大耳白)2-3kg健康公兔或未孕雌兔小白鼠(BALB/C)同一胎2抗原制备BtH-AgO-Ag制备病毒-Ag等制备3免疫:

Bt-Ag兔耳静脉46次间隔23天每次13ml(3-10亿/ml)体外培养脾B-C+Ag→4-5天产生Ab4采血保存:

末次注射一周后静脉(耳静脉颈静脉尾静脉)动脉(颈动脉股动脉)心脏眼囊等部位采血血液斜置一小时冰箱(4度)清分离加腐剂分装保存。

佐剂:

和抗原一同注射或预先注射能增强抗原的免疫原性或改变免疫应答类型的物质。

佐剂的种类复合佐剂生物佐剂(微生物及代谢产物)化合物佐剂。

佐剂的作用机理1作用于抗原A增强抗原性浓集AgB延长Ag剌激机体的时间C保护Ag不易被体液血液中的蛋白酶水2作用于机体A非特异性剌激Mф、淋巴细胞增殖B皮下形成“肉芽肿”出现Mф淋巴细胞浆细胞聚集加速Ab形成。

六章补体:

正常人和动物血清中存在的一组不耐热的球蛋白能补充协助和加强抗体的免疫作用同时具有独特的生物学作用。

补体系统的理化性质1补体系统由近40种成分组成多数组分为糖蛋白包括固有成分13种C1qC1rC1sC2—C9D因子及B因子;

调节蛋白10种补体受体10种等2无特异性3不稳定性不耐热不易保存4正常生理情况下,通常各成分以非活化形式酶原存在。

补体系统的激活三条途径经典途径旁路途径MBL途径。

经典途径:

激活剂:

Ag-Ab复合物(由IgG1IgG2IgG3和IgM与相应抗原结合)补体结合部位结合C1q使其变构再激活各成分。

参与成分C1qC1rC1s—C9等11种成分参与激活过程识别阶段活化阶段膜攻击阶段激活顺序为C1q-C1r–C1s-C4-C2-C3-C5-C6…C9识别阶段:

Ag-Ab复合物--C1q--C1r活化--C1s活化2.活化阶段C3转化酶和C5转化酶的形成3.膜攻击阶段膜攻击复合体(C5b6789n)形成C4b2b3b--C5--C5b+C5a+C6+C7--C5b67+C8---C5b678+C9---C5b6789n(膜攻击复合体)细胞裂解。

旁路途径(交替途径):

特点1不经C1C4C2激活而是由C3B因子D因子参与的激活过程2必须提供一个吸附或结合补体C3b成分的载体表面-激活剂如酵母多糖细菌脂多糖肽聚糖细胞膜多糖成分或凝集的IgG4IgAIgE等激活顺序为:

C3-C3b(B因子)-C3bB-(D因子)C3bBb-C3bBb3b-C5-C6-C7-C8-C9凝集素途径:

凝集素途径类似于经典途径重要区别在于起始成分为C4而无C1成分参与1活化物质(MBL)的产生过程细菌诱导—巨噬细胞产生IL-6—促使肝细胞合成、分泌急性期蛋白(包括甘露聚糖结合凝集素,mannan-bindinglectin,MBL)2活化顺序MBL与细菌(或病毒)表面甘露糖蛋白结合(结合点为甘露糖残基)再与丝氨酸蛋白酶结合—结合物MBL-相关丝氨酸蛋白酶(MASP)表现出丝蛋白酶活性(具有C1q相似的作用)—使C4和C2激活—产生C3转化酶—以后的活化步骤与经典途径相同。

补体的生物学活性1MAC(MembraneAttackComplex)的生物效应细胞裂解作用2活化补体片段的生物效应调理作用免疫粘附作用炎症介质作用中和、溶解病毒作用。

五章非特异性免疫特点无特异性有遗传性作用快广无回忆反应和再次反应(无记忆细胞)。

机制1屏障结构2非特异性细胞防护作用:

血小板NK细胞吞噬细胞(噬中性粒细胞单核吞噬细胞)吞噬作用及炎症反应3正常体液非特异性防护作用。

特异性免疫:

当机体受到抗原刺激后机体中与抗原相对应的淋巴细胞活化从而导致的一系列的免疫应答反应。

特点有特异性无遗传性作用慢窄有再次反应和回忆反应。

体液免疫B细胞在Ag物质直接或间接剌激下转化为浆细胞并分泌AbAb又与该Ag发生特异反应。

过程1感应阶段A胸腺依赖性Ag(主要为蛋白质)Ag初次进入机体→抗原提呈细胞(如MΦ)吞噬加工处理→提呈Ag(MHCII-免疫活性多肽复合物)→Th细胞(CD3)→B-C;

B非胸腺依赖性Ag(主要为多糖脂类和核酸)不需T细胞参与→直接激活B细胞2反应阶段:

→B-C→分化增殖→浆母细胞→浆细胞→Ab;

淋巴结增大一级滤泡-二级滤泡(生发中心)3效应阶段:

Ab+Ag(或带Ag的靶细胞)-发挥免疫效应。

结果免疫防护损伤。

生物学效应1中和作用2抗体介导的补体依赖的细胞毒作用3免疫调理Fc与巨噬细胞(或嗜中性粒细胞)上的Fc受体结合促吞噬作用4ADCC5引起I、II、III型超敏反应。

超敏反应:

当机体被某抗原致敏当再次接触相同的抗原时所引起的特殊的免疫应答因免疫应答引起的组织损伤。

1抗体参与的超敏反应:

I型-速发型(IgE)II型-细胞毒型(IgGIgM)III型-免疫复和物型(IgG)2细胞介导超敏反应:

IV型-迟发型(Th1TDTH)。

细胞免疫:

T细胞在抗原的剌激下分化增殖形成致敏淋巴细胞和淋巴因子细胞因子并出现特异性免疫效应的过程1感应阶段抗原提呈细胞(APC)摄取加工和提呈Ag-抗原特异性多肽+MHC分子(呈递到细胞膜上)与TCR+CD3+辅助因子(CD4CD8等)+共剌激分子(由巨噬细胞等Ag提呈细胞提供)作用于T-C2反应阶段休止的成熟的Th-C的受体在识别抗原提呈细胞提呈的抗原辅助分子共剌激分子的协同作用下接受抗原提呈细胞分泌的细胞分裂素IL-1的剌激作用而开始活化自体细胞分泌的IL-2与其受体结合Th-C达到完全活化开始分裂大量增殖,同时分化出一部分记忆细胞大部分分化成具有免疫效应的效应细胞3效应阶段细胞免疫的免疫效应分别由两个不同亚群来执行(CD4和CD8细胞)其中Th、Ts细胞行使免疫调节功能Tc(CD8+)细胞可直接杀伤靶细胞TD(CD4+)产生迟发型超敏反应淋巴细胞再循环以T-C为主。

生物学效应1细胞毒作用:

细胞毒性T细胞对带有特异性抗原的靶细胞具有直接杀伤作用的T细胞亚群(CD8+Tc细胞亚群)aTc细胞活化b靶细胞溶解破坏2IV型超敏反应(迟发型超敏反应)。

抗感染抗肿瘤抗移植物参与IV型变态反应。

特异性免疫与非特异免疫的相互配合:

补体协助抗体的溶解作用(Ab-CDC作用)调理作用ADCC作用。

体液免疫与细胞免疫的关系:

协同作用体液免疫清除血液体液中的病毒结核杆菌细胞免疫清除细胞内的病毒及结核杆菌等。

抑制作用:

体液免疫抑制细胞免疫抗体封闭肿瘤上的决定簇Tc细胞无法对肿瘤细胞发挥毒杀作用。

免疫耐受性:

在某些特殊情况下,机体对抗原剌激所表现的特异性无反应状态。

天然免疫耐受:

机体免疫系统对自身抗原呈无反应性也叫自身免疫耐受(胚胎发育时在中枢淋巴器官中形成的通过中枢免疫耐受来实现和维持的)获得性耐受:

由外来抗原诱导产生的或人工诱导的(主要在外周淋巴器官中形成)。

影响免疫耐受形成的因素:

抗原因素(可溶性Ag易颗粒性Ag难静脉注射最易腹腔注射次之皮下和肌肉注射最难Ag剂量不适易Ag剂量适宜难)机体因素(年龄或机体发育程度:

一般在胚胎期最易新生期次之成年期最难;

动物品系:

;

耐受剂量。

免疫耐受意义1理论上机体如何识别“自身”和“非自身”是免疫学理论研究的核心问题之一。

免疫耐受的研究在理论上较好地解释了免疫系统识别“自身”和“非自身”的机制2医学实践中免疫耐受的维持和诱导防治超敏反应自身免疫性疾病和器官移植排斥反应免疫耐受的终止:

对某些传染性疾病和肿瘤,则可通过解除免疫耐受激发免疫应答来促进机体对病原体的清除和肿瘤的控制。

7章免疫学技术的用途A诊断:

肝炎、艾滋病、梅毒、SARS炭疽病菌等各种肿瘤的诊断;

妊娠、血型、法医血痕诊断。

(凝集实验、康氏试验(絮状沉淀)、间接凝集抑制试验、ELISA、ELISA-PCR、Westernblot、免疫荧光方法、免疫传感器和抗体芯片等)。

B预防、治疗:

制备疫苗(基因工程疫苗)。

预防性抗体(肌注人丙种球蛋白预防传染性肝炎,麻疹等病毒性疾病)抗体靶向治疗肿瘤(单克隆抗体,基因工程抗体)2动物检疫禽病禽流感病毒、鸡痘病毒、禽腺病毒等猪的流行性腹泻病毒、猪囊虫牛的口蹄疫、疯牛病病毒的检测酶免疫测定法,Westernblot。

3植物病毒检测用ELISA方法4生物学上的应用A物种的分类鉴定:

血清学反应鉴定抗原的不同。

B免疫印迹,免疫亲和层析等免疫分析和分离技术。

C建立血清库用到荧光抗体标记测定技术)。

5食品、药品的检测食物中毒的病原菌,毒素,残留农药;

抗哮喘的药物茶碱、抗生素庆大霉素ELISA方法。

6、环境保护中夹心免疫法免疫生物传感器检测污染物;

固定化的单链抗体处理污染物。

沉淀反应可溶性抗原与相应抗体混合后在适量的电解质存在的条件下发生特异性结合,形成抗原抗体复合物并出现可见的反应(沉淀或沉淀线)的过程。

液相环状沉淀反应(相应Ag\Ab以不同浓度相混使两种溶液形成界限清晰的两层在液相界面处出现白色沉淀环。

免疫血清效价初步测定)毛细管沉淀反应絮状沉淀反应(用于辅助诊断梅毒的康氏试验)免疫浊度法(光学测定仪)。

半液相琼脂扩散实验免疫电泳。

单向琼脂扩散水平板上原理是指可溶性抗原在含相应抗体的琼脂板上的扩散,比例合适处形成抗原抗体复合物,出现白色沉淀环为一种抗原定量试验。

用途主要用于检查标本中各免疫球蛋白和血清中补体各成分的含量灵敏度较高。

双向琼脂扩散过程制凝胶板—打孔—加抗原抗体—保温保湿1天—结果观察。

用途定性分析半定量分析抗体效价测定组份分析。

免疫电泳测定法原理免疫电泳为区带电泳与免疫双扩散的结合。

先利用区带电泳技术将不同电荷和分子量的蛋白抗原在琼脂内分离然后在与电泳方向平行的方向上开槽加入抗血清37℃下使两者扩散各区带蛋白在相应的位置与抗体反应形成弧形沉淀线。

用途定性纯度检查不同组分分析。

对流免疫电泳原理:

是定向加速的免疫双扩散技术在琼脂凝胶中打两排孔抗原在阴极端抗体在阳极端。

用途定性鉴别抗原或抗体普查。

优点较双扩时间短灵敏度高检查样品多。

火箭免疫电泳原理:

是单扩散与免疫电泳的结合在碱性条件下抗原向正极扩散与凝胶中的抗体形成抗原抗体复合物比例合适时沉淀形成峰状的沉淀区,峰形似火箭,因此称火箭免疫电泳峰高与抗原浓度成正比。

用途定性定量分析灵敏度较高时间短。

双向免疫电泳用途对复杂的抗原样品进行定性定量避免了免疫电泳各个蛋白成分出现重叠的现象。

凝集反应颗粒性抗原或可溶性抗原,直接或在载体参与下,与相应抗体混合后,在一定合适的电解质存在下出现的凝集现象。

直接凝集反应原理是指细菌红细胞和螺旋体等颗粒性抗原与相应的抗体在适量的电解质存在的条件下经一定时间后凝聚成肉眼可见的凝集物。

玻片法定性分析在传染病中病原微生物的鉴定,如伤寒杆菌和痢疾杆菌等肠道杆菌的鉴定血型鉴定。

试管法用途:

效价测定,定性:

用于某些传染病的辅助诊断及流行病学调查。

间接凝集反应先将可溶性抗原(或抗体)吸附在一种与免疫无关的载体表面再与相应抗体(或可溶性抗原)混合在一定条件下出现的凝集现象。

正向间接凝集反应原理以抗原致敏载体以检测标本中相应抗体。

过程A抗原与载体结合(红细胞致敏)B致敏红细胞与相应抗体反应用途:

抗体的定性定量分析,抗毒素的检测。

反向间接凝集试验原理以特异性抗体致敏载体以检测标本中的抗原。

补体结合试验在补体参与下以绵羊红细胞和溶血素为指示系统的抗原抗体反应。

两个系统指示系统和反应系统5种成分绵羊红细胞溶血素待测抗原待测抗体补体。

标记免疫分析技术原理是将抗原抗体反应与标记技术结合起来用于检测抗原或抗体的方法。

免疫荧光技术原理以荧光素标记抗体(或抗原)与相应抗原(或抗体)反应后形成荧光AgAb结合物,利用被检物质在反应体系中特异结合位点荧光的强弱,用荧光显微镜进行定性定量和定位分析的技术。

最常用的荧光标记物质有异硫氰酸荧光素FITC罗丹明TMRITC。

)特点免疫学的特异性荧光的敏感性与显微镜学的精密度相结合。

应用1动物植物昆虫组织抗原及微生物抗原的定位2在临床诊断上的应用。

分类(直接法间接法和补体法)步骤1荧光抗体的制备2抗原标本的制备3抗原与荧光抗体反应4荧光显微镜观察。

放射免疫测定法利用放射性同位素标记的抗原和待测抗原与特异性抗体竞争结合来测定未知抗原的过程。

特异性与敏感性结合灵敏度高。

免疫酶技术先用酶标记抗体(或抗原)与被检样中的相应抗原(或抗体)结合后,可形成抗原-抗体-酶复合物在相应底物作用下产生可溶或不溶有色反应产物此产物颜色深浅与标本中的抗原(或抗体)的结合量成正比。

辣根过氧化物酶HRP碱性磷酸酶AP。

酶联免疫吸附测定法ELISA利用酶标记的抗原或抗体在固相载体上进行的抗原或抗体的测定。

基本方法有直接法间接法双抗体夹心法和抗原竞争法。

直接ELISA测定抗原最常用的方法,待测抗原(Ag)吸附于固体载体(塑料微量滴定板)加酶标抗体(Ab*)加底物加终止剂比色计定量测定(酶联检测仪测定)。

间接ELISA测定抗体最常用的方法,将已知抗原吸附于固相载体加人待检标本(含相应抗体)与之结合洗涤后加人酶标抗球蛋白抗体(酶标抗抗体)和底物进行测定。

夹心ELISA测

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