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2.6参考资料错误！
未定义书签。
2.7国家药品检定当局指南18
致谢20
参考书目20
附录一乙型脑炎的传代历史23
附录二猴体神经毒力试验24
1.概述
1.1乙型脑炎疫苗
乙型脑炎病毒是亚太地区最主要的病毒性脑炎的引发因素，每年报道的病例中超过16000例都是由乙型脑炎病毒导致的，造成5000人死亡。
乙型脑炎病毒是一种藉由蚊虫传播的黄病毒科病毒的传染病。
过去的25年来，乙型脑炎病毒在一些国家肆意传播泛滥，引发的疾病已经波及到了原先亚洲的非感染区和澳大利亚北部地区。
乙型脑炎的死亡率高，即便是幸免生存下来，也容易引起病后神经精神方面的后遗症，因此，乙型脑炎是到影响人类健康的重大威胁。
举例来说，在泰国曾经进行过一项对照研究，即为携带乙型脑炎病毒的患者提供先进的治疗护理措施，其中使用了地塞米松（右旋安非他明硫化氢），结果为25％的患者死亡，还有45％的患者在诊断后3个月内出现了神经后遗症。
另外，根据一份对乙型脑炎造成的长久性伤残的最为完整的研究资料表明，对1947年关岛爆发乙脑疾病后进行10年的记录，乙脑患者中有40%的幸存者存在神经后遗症，并且其中11％的人情况还相当严重。
然而上面提到的两项研究都没有统计出精神运动性迟滞、协调运动能力丧失和行为能力异常病例所占的比重。
乙型脑炎病毒在包括库蚊和脊椎动物（特别是猪）的循环中增殖。
如果没有自然感染免疫或接受接种免疫，任何年龄层的人群都易受到乙脑病毒的感染。
有证据表明，有效的乙脑疫苗可以帮助人畜抵抗疾病，接种后的家畜就不可能成为乙脑病毒潜在的扩增寄主。
尽管在某些情况下消除蚊虫、为家猪接种是行之有效的措施，但是要想预防人类感染乙型脑炎，这些措施还是不够实际。
还有重要的一点，人体也是偶然的寄主。
疫苗是有效的预防办法，因此，所有可能接触乙脑病毒的人群都必须接受疫苗注射。
乙脑病毒在来自脊椎动物和节肢动物的各种培养细胞中进行复制。
上个世纪60年代以来，已经开发出了减毒活疫苗和灭活疫苗，两种疫苗都可提供抗乙型脑炎病毒的免疫功能。
这两种疫苗的开发标志着人类在控制乙脑病毒传染方面取得了巨大的进步，从而减轻了乙型脑炎给社会造成的负担。
日本和中国分别于1935年和1949年从患者体内分离出了乙脑病毒的NaKayama株、北京株和P3株，今天它们主要被用于生产灭活乙型脑炎疫苗。
中国（台湾省）、日本和韩国进行的全国性的接种规划都采用的符合国际要求
（2）的一种鼠脑源的灭活疫苗，并且已经将乙脑疾病控制在彻底消灭的边缘。
但是在其他国家，由于生产这种疫苗的费用和复杂程度，加之需要重复地注射，这种乙脑疫苗的使用也就受到了限制。
除了多剂量的问题外，用这种疫苗注射保护旅行者还引起了超敏反应的事件，包括脊髓脱髓鞘病变的后遗症，在北美、澳大利亚和欧洲已经报告了此类事件。
因此，一种灭活疫苗的替代品――乙型脑炎减毒活疫苗（SA14-14-2-PHK病毒株）在中国研制成功。
乙型脑炎（减毒活疫苗）自1988年在中国取得产品许可证以来，已经为国家年度接种规划生产了超过3亿支的儿童乙脑疫苗。
对乙型脑炎病毒肆虐的国家而言，减毒活疫苗是极其有意义的，但是直到2000年，没有在世界上广泛地获得许可。
1.2SA14-14-2减毒活疫苗的开发历史以及疫苗株的特性
野生型亲本病毒，SA14，是通过在鼠脑中11次传代从中国西安尖音库蚊幼虫中分离出来的。
SA14-14-2病毒株起源则是用经验的方法、经过一系列的，主要是在原代地鼠肾细胞上的传代研制出来的。
结果表明：
在这种方法下，病毒复制增强了免疫了，通过持续平稳的神经毒力减毒的作用既能保证它的安全性，又能确保免疫原性，从而达到了一种很好的平衡。
疫苗病毒株谱系中的病毒克隆，从性质上反映了乙脑病毒减毒本身的微妙。
早期的12-1-7病毒株表现出低致病性，然而在鼠脑内传代一次或在原代地鼠肾细胞内传代几次，12-1-7病毒株就变得不稳定起来，神经毒力出现返祖。
9-7病毒株是12-1-7在老鼠和猴子体内减毒得来，且不会因为在鼠脑或地鼠肾细胞中的传代而恢复毒性，但是它仅使不到10％的接种儿童出现了血清转化。
为了增强病毒株的免疫性，将病毒株在地鼠上口服传代，并在原代鸡胚中进行噬斑纯化，得到5-3病毒株。
这种克隆复制虽然具有减毒特性，但是接种儿童中只有65％产生了免疫力。
进一步在乳鼠上传代并在原代地鼠肾细胞上进行噬斑纯化获得了14-14-2病毒株，这种病毒株具有稳定的减毒性，而且能85％－100％的接种儿童获得免疫力。
与其亲本株相比，SA14-14-2在断奶后小鼠、叙利亚仓鼠、以及用环磷酰胺进行免疫抑制处理的小鼠中进行腹腔和脑腔注射都是无毒力的；
对于裸鼠，仅脑内注射是有毒力的。
即便如此，它的潜伏期也要比其亲本病毒的潜伏期长。
通过丘脑和脊柱两种途径接种的猴子出现了无症状性感染。
对其进行的神经病理检查发现，只是在针刺轨迹部位出现轻微的炎症反应，仅伴随极少的神经细胞感染和死亡。
在生产人员可控的感染的条件下（如：
感染的多样性和孵化温度），至少要进行23次的原代地鼠肾细胞传代,才能保持小空斑形态和神经毒力减毒。
分子研究显示神经毒性亲本SA14病毒株的序列与57种核苷酸的排列不同，因此产生了24种氨基酸变化。
>
研究还表明在原代地鼠肾细胞额外的传代之后，SA14-14-2疫苗病毒E蛋白质基因八种氨基酸替代品不会发生变化。
以上几点有力证明了原代地鼠肾细胞基质中SA14-14-2疫苗病毒具有遗传的稳定性。
在一个用SA14-14-2株适应原代狗肾细胞的初始尝试中，仅再传9代就会进一步减毒，且在接种后免疫原性下降到40%。
SA14-14-2株的完整的传代历史在附录1中列出。
由于SA14-14-2株的传代历史包括在地鼠肾和小鼠中的传代，特别注意的是需要证明疫苗毒种库中不能检测到这两个物种的外源因子。
对于任何疫苗，当知道新的传染因子或检测方法时，外源因子的检测范围就需扩大。
SA14-14-2株在PHK细胞上生长时，滴度可大于107，并产生细胞病变，在涂板时产生小的噬斑。
使用PHK细胞进行乙脑疫苗的常规生产无疑是有效的，但是同时它还引起特别的细胞基质问题（见1.4节）。
替代现行的疫苗生产体系的另一种战略（包括以下列举的广泛的试验措施），就是要在现有病毒种中再次得到主毒种。
这种方法需要对新病毒种的特性有清晰的认识，还要预计其在临床方面的安全性和功效。
但是，在生产过程中的检测就可大大减少。
1.3临床前研究
在豚鼠身上，单剂SA14-14-2诱导的免疫可显著减少病毒攻击造成的病毒血症水平。
脾细胞或血清都能被动地传递免疫。
在攻击实验中，比较减毒疫苗和灭活疫苗的在小鼠中的免疫，可见到减毒疫苗诱导出更强细胞免疫反应的证据。
在脑内攻击实验里，尽管产生的循环中和抗体的滴度相同，但事先用活疫苗免疫的存活率显著高于用死疫苗免疫的存活率。
对活疫苗免疫小鼠进行环磷酰胺的免疫抑制处理并不改变对致死病毒攻击的抵抗力，而与之相对的是死疫苗免疫的小鼠存活率下降了90%。
在疫苗免疫/攻击研究中，对于来自P3株、Nakayama株、以及12个在中国分离的野毒株的攻击，经过一针活疫苗免疫的小鼠存活率显著高于两针鼠脑死疫苗和PHK细胞死疫苗的存活率。
实验也显示对于注射了一剂活疫苗的小鼠，其中的90％－100％可产生保护力抵抗印度、印度尼西亚、日本、菲律宾、泰国和越南等国分离出的病毒株的攻击。
[3]。
虽然到目前为止在三带喙库蚊体内SA14-14-2病毒的生长情况还没有能够评估，但从具有类似显型的同种血统中分离出来的减毒SA14-1-8复制过程，却在试验中（4）没有表现出传播性。
相反，SA14亲本病毒在蚊虫中却出现传播现象，传播率达75%－78％.最近的一项试验对接种SA14-14-2病毒株后可检测到的病毒血症的范围进行了研究。
结果显示，接种后9天内，乙脑病毒是检测不到的。
这一结果与之前公布的几份报告的内容是一致的。
根据那几份报告，即在感染的有症状的人身上，未检测到野生型JE病毒并且JE病毒未在人类中扩增。
鉴于以上试验结果并且根据估计蚊虫的血浆里必须含有10万到100万个病毒体才足以使被叮咬的人将病毒传播给其他人群（5），因此，认为一个刚刚接种的人被蚊虫叮咬就能将SA14-14-2病毒传播给其他人，是几乎没有可能的。
尽管如此，我们还需进一步的研究有关SA14-14-2疫苗病毒株的传播问题。
1.4关于细胞基质
如何预防病毒种、细胞基质以及在生产过程中使用的血清或胰酶外源感染的传播，是所有活性病毒疫苗面临的普遍问题。
对于SA14-14-2疫苗来说，在减毒活疫苗中使用PHK细胞缺乏先例是一个特殊的问题。
。
可是，对于灭活乙脑疫苗和汉坦病毒疫苗（肾综合征出血热（HFRS）疫苗），PHK细胞被认为是可以接受的细胞基质。
目前的检测覆盖了主要的啮齿类病毒的可能污染。
适当的时候，有必要引进最为先进的技术成果。
采用检验的方法时，还需要考虑所用检测的验证问题，例如对PHK细胞应用逆转录病毒的检测。
另外，应鼓励使用健康动物来降低外源因子进入生产过程风险的原则。
最好使用一个分隔的常规监测的无特别病原的种群来作为制备PHK细胞的材料来源。
与所有活病毒疫苗的生产相同，排除生产中所用胰酶和血清潜在污染（包括牛和猪特有的病毒，以及可传染的海绵状脑病因子）的步骤，将被期待。
在PHK细胞培养上进行的疫苗生产所显示的一致性也是重要的。
到2000年，在中国有3个在PHK细胞上进行疫苗生产的厂家，分别拥有12、6和1年的经验。
可监测的标准包括细胞生长方面如形态特征和days-to-platingconfluency。
病毒产量的稳定性可以用精确和可重复的病毒滴定来评价，另外还可检测基因型和表现型的标记。
对于新的生产厂家，在生产放大和大规模生产的条件下的，要求进行稳定性的测试。
在第二或第三水平上创建具良好特性的PHK主细胞库是提高批-批稳定性和简化质量检验的潜在途径在一家生产商获得的初步经验显示原代细胞冻融后，平板效率下降40%，但这并不意味着这一方法在将来不可行。
可以预计SA14-14-2株适应其它细胞培养的尝试将会导致生物学特性的根本改变，并且使用MRC-5，原代鸡、鸭胚细胞，原代狗肾细胞的尝试是不成功的（见上所述）。
初步的研究显示SA14-14-2株能够适应Vero细胞株并且在小鼠身上保持神经减毒，但是同PHK细胞生产的SA14-14-2疫苗的临床前和临床等效性仍需要证明。
1.5神经毒力试验
在开发SA14-14-2株的过程中，一些JE病毒克隆已经证明可以达到减毒和缺乏神经毒力返祖的特性。
这一结论是建立在大规模的小鼠实验的基础上的，其中使用了三种不同类型的试验：
神经毒力实验、神经毒力返祖试验和嗜神经性试验。
所以有必要证明主种子、工作种子、疫苗批也已经保留了最初的SA14-14-2株的减毒特征。
在疫苗开发中所用的检测将在这一指南后面的章节详细描述。
那么也有必要证明检测能可靠地将适合的原料从不适合的原料中区分出来。
应鼓励参与合作研究，进行使用相同程序的平行研究，检测中中包含通用的参考制品等。
这是特别有效的做法。
1.6临床安全性
一些小规模的研究已经对疫苗的安全性做出了论证，中国也有两次较大规模的后期市场研究，也证明了疫苗是安全可靠的。
一次是：
588512名年龄在1到15周岁的儿童及青少年注射了同一家疫苗生产厂家的产品；
另一次是对6万名儿童接种了另一家厂家的疫苗，结果没有出现脑炎病症的报道。
注射疫苗可能出现的副作用最常见的就是发烧，但就目前已知的数据，这只占到全部接种儿童的0.2％以下，其次是较低比率的皮疹和其他全身病症。
针对发烧（>
38︒C），对867名被接种儿童的每日检查显示发病是低比率的且随机发生在21天的观测期中，而原先所预想的是如果发病是与特殊的潜伏期有联系的话应集中发生。
在大多数病例中，温度升高仅限于一天。
对1946个1到6岁的被接种儿童的非对照观测中，仅报导2例短时间发烧及伴有呼吸系统感染。
在全部被接种者中，局部反应发生率为6.2%。
在接种过灭活乙脑疫苗的年纪稍大的儿童中，局部反应的发生相对常见些。
之后，对近15万年龄分别在1至6岁的接种儿童做了一次长期的研究，历时5年，没有发现一例后期发作的并发症【如视神经萎缩（6）】的病例。
另一项新近研究（7），涉及230名年龄在13－15周岁的儿童，为他们接种后，分别在1个月、2个月、2个半月和3个月时对他们的临床和血清反应进行了观测。
没有发现神经症状或其他医疗后遗症。
目前最好的一次研究是在中国西南的成都，由洛克菲勒基金会赞助并主持进行的。
这一研究对随机封闭的超过13000名被接种儿童及超过12500名乙脑疫苗接种被延期一个月的儿童进行了并比较了他们的住院治疗、特定疾病和症状（8）.1至2岁的儿童首次接种后跟踪观察一个月。
在回访中，对这些婴儿的父母们调查在这一个月中这些孩子是否因病住院或是有特殊疫病发生，包括脑炎和脑膜炎以及惊厥发作。
根据反馈情况，在这两组中，都没有发现中枢神经系统疫病的病例的报告，而其它的发生率，如最近的惊厥发作、因病住院、持续3天以上的发烧、其它疾病如腹泻、呼吸道感染、过敏反应等在两组中也无显著差异。
266名下分小组的接种儿童，在接种后的1天、2天、3天、7天分别接受了副作用检查。
观察到了不同的局部及全身病症，但是所占比例都较低。
5％的接种儿童出现了发烧症状。
这一研究充分证明，SA14-14-2疫苗在产生免疫力后的30天内具有短期的安全性。
但是，同时研究人员也担心，对于这种源自致脑炎病毒的活疫苗即便是进行了对26000名儿童进行了研究，也许并不能达到必要的研究的高敏感度。
接种后的一个月没有出现任何病例的观察期已经超过了感染性脑炎的潜伏期，上限为95％的可信区间表明接种了SA14-14-2疫苗后，出现脑炎的可能性不会超过0.23‰.
1988年中国开始使用SA14-14-2疫苗，自那时至今，已有1亿2千万的儿童接受了近3亿支疫苗注射。
每年的3月和4月是疫苗的普种期。
如果有的话，疫苗相关脑炎的病例预期应在4、5月发生，因此应该在因乙脑住院的正常的季节曲线上出现另一个起伏。
然而对资料的初步检查中未观察到这样的起伏。
在中国鼓励对试验数据进行进一步的观察改进，这项工作已在稳步开展当中。
还有其他流行性疾病可以用于检验疫苗安全性的，也应当予以考虑。
对于SA14-14-2疫苗益处和风险的评估是确定该疫苗适当用途的重要因素，并且在将该疫苗引入其它国家之前还应该评估乙型脑炎所致的卫生负担。
1.7儿童中的免疫原性
在儿童中的免疫原性遵循剂量-应答梯度，在1988年后，在接受106PFU单位中国制造的SA14-14-2疫苗的人中，抗体应答率>
92%。
在所有接受第二针接种的人中可以看到抗体应答。
在所有对初次免疫有应答的人中，可检测水平的中和抗体至少可保留三年。
根据在中国、尼泊尔、韩国各种族的疫苗有效性和免疫原性的资料，疫苗的免疫应答看起来不受被接种者种族背景的影响。
1.8有效性的临床研究1
四个现场试验显示SA14-14-2疫苗对超过300000名1-10岁儿童提供了保护。
在每一个现场中，单针的有效性>
95%，并且在其中一个地区，对儿童接种后5个传染季节的跟踪调查，在此期间有效性>
98%。
1999年，对尼泊尔台拉河（Terai）地区超过220000的居民接种一针SA14-14-2疫苗以试图减少乙型脑炎流行带来的影响。
根据一项病例对照研究的结果，疫苗的有效性达到99.12％。
.
上述试验实施的方式会造成被接种疫苗者和未接种疫苗者暴露风险的不同。
可是，当一种完全有效的疫苗得到许可并已投入使用后，使用安慰-对照现场实验重新研究疫苗有效性，在伦理学角度上是不许可的。
一个可靠的、灵敏的、精确的利用无意的疫苗免疫过失的替代方法（通常是误过了疫苗接种），是采用病例-对照实验，即通过比较病例的疫苗免疫史和对照来进行实验。
洛克非勒基金会曾在中国四川主持了一项研究，在此研究中，挑选同年龄组的血清学证实的乙型脑炎病例的乡村儿童作为对照，研究发现两针免疫的有效性为98%，一针为80%（95%可信限（CI），44-93%）。
随后评价的较宽的可信限估计值表明这一区间的试验对象人数较少。
试验结果证明了前文提到的先前对SA14-14-2疫苗的研究结论，同时还扩展了其他的关于疫苗有效性的研究范围，即在实地给药、储药、和药品管理的条件下研究疫苗的疗效。
2.范围
本指南的范围涉及在PHK细胞中使用SA14-14-2病毒生产乙脑活疫苗的过程。
而对于利用其他病毒株和细胞株生产疫苗，本指南没有做出规定。
指南涉及以下面三方面的质量控制：
－起始原料；
－制造过程；
－成品。
药品（10）和生物制品（11）生产质量管理规范中包含的通用的制造要求适用于乙脑活疫苗的生产，除此以外，疫苗生产还应遵循以下要求：
所有直接参与乙脑活疫苗生产和检测的人员必须通过适当的血凝拟制反应试验或中和抗体试验来证明具有抗乙脑病毒的免疫力。
乙脑活疫苗的制备及试验中的标准操作程序的描述性文字，应同每一成产步骤的验证证明文件一起，递交给国家药品检定当局批准，这是申请许可证的必要环节。
如果生产和/或对比控制方法需要进行修改，必须将修改申请报国家药品检定当局批准同意方能执行。
2.1起始原材料的质量控制
2.1.1动物
10到14天的金黄地鼠做为肾源用于细胞培养。
来源于一个封闭、健康种群的地鼠种经过国家药品管理局批准方可作为组织培养的来源。
一个封闭种群是指拥有一个共同的环境及它们自己专门饲养员的一群动物，且饲养员未接触其它动物种群。
动物应按照规定的程序检测以确保无特异病原和这些病原的抗体。
当种群建立时，所有动物都应该检测，以证明无以下病原抗体：
汉坦病毒、Kilham大鼠病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒、鼠细小病毒、鼠肝炎病毒、鼠脊髓灰质炎病毒、鼠肺炎病毒、呼吸道肠孤病毒（REO）3、仙台病毒（副流感病毒1）、猿病毒5和ToolansH-a病毒。
对于地鼠的生产、小鼠和大鼠病毒的抗体的检测也应该进行。
对于逆转录病毒的检测，应该包括使用灵敏的基于多聚酶链反应（PCR）法的逆转录酶（Rtase）分析法。
由于逆转录酶活性不只是逆转录病毒所独有，也可能是来自其它来源如类逆转录病毒因子，所以这些实验的结果应该谨慎解释的（12）.核酸扩增试验也可用于检测逆转录病毒。
为了选择合格的种群，检测地鼠多瘤病毒的PCR试验应用于检测一定数量的地鼠组织，尤其是肾，并且此后应定期重试。
当新动物引入到种群中时，它们应隔离饲养在具防虫仓的检疫区至少2个月，以证明无这些特殊的病原。
用于组织培养的动物的双亲应饲养在防虫舱中。
这些地鼠的双亲和其后代都不应该曾经用于实验目的，特别是用于涉及传染因子的实验。
种群应该定期按规定的程序监测污染迹象和zoonotic病毒。
一旦确定了试验动物群类，就要抽取其中至少5％的动物代表用于试验监测，在国家药品检定当局认可的时间间隔期内，对挑选的试验动物进行抽血试验。
举例来说，生产麻疹疫苗时要用到鸡胚纤维原细胞，而提供这种细胞的禽类抽血的频度为每月一次（13）。
另外，种群还应按照国家药品管理局的规定筛查病原细菌，包括分枝杆菌、真菌和支原体。
筛查的程序应按照国家药品管理局的规定在限定的时间内检测100%的动物。
一旦种群建立后，应监测包含至少5%的动物代表动物群，这些动物应该在国家药品管理局接受的时间间隔内采血。
例如，在麻疹疫苗生产中，用于生产鸡胚成纤维细胞的禽类应每月采血。
任何死去的动物都应调查死亡原因。
如果种群显示存在传染性因子的话，应该通知国家药品管理局，并停止乙脑活疫苗的生产。
在这种情况下，制造商必须在彻底调查完成以后并且对出现在产品中的传染性因子的采取预防措施之后，且得到国家药品管理局的许可后方可恢复生产。
采集肾脏之前，应检查动物是否出现任何的异常状况。
若查出动物的肾脏异常或是尤其他的病状，就不应该将其用于乙脑疫苗的生产。
在所有测试，特别是外源因子检测完成以前，每一组来源于某一单个种群动物的用于生产单一病毒收获物的培养物的对照培养物，应该保持可识别性。
2.1.2病毒繁殖的细胞培养
2.1.2.1原代地鼠肾细胞
依照2.1.1里面规定的条件，选取符合规定的动物，按照国家药品检定当局的要求的条件，提取其肾脏并切至大小相同的颗粒。
加入胰酶消化肾脏颗粒，形成原代细胞悬液，再将悬液连同生长培养基基一起注入到细胞培养器皿中。
整个生产过程不要使用青霉素和其它β-内酰胺类抗生素。
若国家药品检定当局允许，可以使用适当的抗生素，如卡那霉素，但是浓度必须保持在最小范围内。
2.1.2.2细胞培养基中使用的血清
应根据《1973年生物制品无菌状态通用要求》（1973年版1995年修订）（14）中A部分的5.2、5.3节的规定，检测乙脑疫苗生产中细胞繁殖所用的血清应不含细菌、真菌和支原菌，并且经证明没有传染病毒的存在。
在一些国家，还检测用于疫苗生产的血清有无特定的噬菌体
牛血清也应得到国家药品检定当局的批准认可，来源渠道应为经证实没有发生传染性海绵状脑病的国家或牛群，而同时还要遵守《动物细胞在生物制品生产用体外基质中使用的管理规定》（15）以及世界卫生组织公布的人畜传播性脑病的医学和其他相关产品的咨询报告（16）。
对于其他疫苗，部分国家规定，生产所使用的牛血清必须要来自于没有喂养过反刍动物蛋白质的兽群。
在1999年的口服脊髓灰质炎疫苗生产和检测建议附录1中给出了检测血清中牛病毒所需做的实验（17）.
如果使用了人血白蛋白，它应符合1992年的血液、血液成分、血浆产品采集、加工和质量控制规程的要求（18）以及现行的人传染性脑病的相关指南的要求（16）。
此外，如果使用了人血白蛋白，应使用PCR检测来证明无人免疫缺陷病毒（HIV）和丙肝病毒核酸存在。
2.1.2.3制备细胞培养所用的胰酶
用于细胞培养的胰酶需通过检测，证明无可培养的细菌、真菌、支原体和传染性病毒，特别是牛或猪细小病毒。
检测方法应由国家药品监管机构批准
如果使用牛胰蛋白酶，其来源应经过国家药品监管机构批准而且应符合《生产生物制品用体外培养动物细胞规程》（15）的要求以及现行的人、动物传染性脑病的相关产品指南的要求（16）.
2.1.3病毒种
生产乙型脑炎疫苗（活性）使用的病毒主种子批和工作种子批，应通过适当的实验室检验（第2.1.3.2.1，2.1.3.2.2和2.2节），证明其安全和免疫原性。
2.1.3.1病毒株的认证
乙脑病毒SA14-14-2PHK株须经国家药品监管机构批准方可用于疫苗生产。
每一毒株应有详细的历史记录，包括来源信息、灭活方法和经临床研究证明了有效性、安全性、免疫原性和减毒特性
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