中国科学院生物化学与分子生物学Word格式.docx

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②一种RNA；

③一种蛋白质；

④一种多糖

4．胰岛素等激素的受体以及上成或表皮生长因子的受体都是一种：

　①激酶；

②脱氢酶；

③转氨酶

5．在酶的可逆抑制剂中，不影响酶的二级常数（Kcat/Km）的是：

①竞争性抑制剂；

②非竞争性抑制剂；

③反竞争性抑制剂；

④都不是

6．所谓"

多酶体系"

是指一个代谢过程中几个酶殗了一个反应链体系，多酶体系中的酶通常具有以下性质。

①只是在功能上相互有联系，在结构上互不相关，不存在相互作用；

②不仅在功能上相互有联系，在结构上也有相互联系，形成复合体；

③上述两种情况都存在。

7．所谓"

代谢物"

指的是下面哪一条？

①特指代谢反应中的反应物；

②特指代谢反应中的产物；

③特指代谢反应中的中间物；

④所有代谢反应中的反应物、中间物和产物都称为代谢物。

8．有的酶存在多种同工酶形式，这些同工酶所催化的反应：

①并不完全相同；

②完全相同，而且反应的平衡常数也相同；

③完全相同，但由于每种同工酶活性不同，反应平衡常数可以不相同。

9．脂肪肝是一种代谢疾病，它的产生主要是由于：

①肝脏脂肪水解代谢障碍；

②肝脏蛋白不能及时将肝细胞脂肪排出；

③肝脏细胞摄取过多游离脂肪酸；

④肝脏细胞膜脂肪酸载体异常

10．线粒体ATP/ADP交换载体在细胞内的作用是：

①需能传送；

②促进传送；

③ATP、ADP的通道；

④ATP水解酶

11．辅酶Q是线粒体内膜：

①NADH脱氢酶的辅酶；

②琥珀酸脱氢酶的辅酶；

③二羧酸载体；

④呼吸链的氢载体

12．线粒体蛋白的跨膜传送是一种：

①类似细胞膜的吞噬作用；

②蛋白质解折叠后传送；

③通过对各个蛋白质专一的载体传送；

④膜内外同类蛋白质交换

13．Polyd（A-T）的Tm值较polyd（GC）为：

①高；

②低；

③相同

14．反密码子为IGC，可识别密码子：

①GCA;

;

②GCG;

③ACG

15．RNA形成二级结构的碱基对，除了A-U和G-C外，还有：

①AC；

②AG；

③GU

16．RNA用强碱水解，产生：

①2'

和5'

核苷酸混合物；

②2'

和3'

③3'

17．能与受体结合，形成激素受体复合物，进入细胞核调节基因表达的激素是：

①甲状腺素②肾上腺素；

③溏皮质激素；

④前列腺素

18．原核生物基因转终止子在终止点前均有：

①回文结构；

②多聚A序列；

③TATA序列；

④多聚T序列

19．能专门水解DNARNA杂交分子中RNA的酶是（）

①DNA聚合酶I：

②逆转录酶；

③RnaseA；

④核酸外切酶III

20．真核生物中，存在于核仁中的RNA聚合酶是：

①RNA聚合酶I；

②RNA聚合酶II；

③RNA聚合酶III

三、填空题：

9题，每空格答对1分，共15分

1．已知三种超二级结构的基本组合形式＿＿＿，＿＿＿，＿＿＿。

2．Western印迹法的原理是用＿＿＿鉴定蛋白质的一种方法。

3．酶容易失活，如何保存酶制品是一个很重要的问题。

通常酶制品的保存方法有＿＿＿和＿＿＿等。

4．红细胞膜带3蛋白是一种＿＿＿。

5．肝素是一种＿＿＿＿，它的主要药理作用是＿＿＿＿。

6．细胞核内除了DNA外，还发现至少有二类小分子RNA，它们是核小分子RNA和＿＿＿＿。

7．核酸变性时，紫上吸收值增高，叫＿＿＿效应。

8．限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文结构，形成末端有粘性末端和＿＿＿末端。

9．内质网分为两种类型，一种是粗糙内质网，为＿＿＿＿＿＿＿＿的场所；

另一种为光滑型内质网，与＿＿＿＿和＿＿＿＿合成有关。

四、问答题：

10题，每题5分，共50分。

1．根据氨基酸通式的R基团极性性质，20种常见的氨基酸可分成哪四类？

2．简述蛋白质翻译后的加工过程

3．葡萄糖酵解过程的第一步是葡萄糖磷酸化形成6磷酸葡萄糖，催化这一步反应有两种酶，已糖激酶和葡萄糖激酶。

己糖激酶对葡萄糖的Km值远低于平时细胞内葡萄糖浓度，而葡萄糖激酶的Km值比较接近平时细胞内葡萄糖浓度。

此外，己糖激酶受6磷酸葡萄糖强烈抑制，而葡萄糖激酶不受6磷酸葡萄糖的抑制。

上述描述，请你说明两种酶在调节上的特点是什么？

4．请解释什么是酶的活力和酶的比活力，并说出活力的比活力两个指标在酶的纯化过程中分别可以反映什么？

5．写出葡萄糖酵解生成丙酮酸过程中的步骤（写出九步即可）。

（A卷此题不同，大概是讲为什么会得脂肪肝的原理）

6．写出氧化磷酸化的五个作用部位不同的抑制剂，并写出各处的抑制部位。

7．真核生物mRNA的3'

末端有一段poly（A），5'

末端有一个"

帽子"

，"

的结构特点是什么？

8．5-磷酸核糖-1-焦磷酸（PRPP）是一个重要的代谢中间物，试举出二个反应合例子。

9．试列出tRNA分子上与多肽合成有关的位点。

10。

真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式。

中科院02年研究生入学试题生化B答案

一、

1-2-3-4-5+6-7-生成溶血磷脂8-9+10-1112-有的为RNA->

RNA

13-14+15-

二

1C2B3C4A5C6C7D8C9B10A11D12B13B14A15C16B17C18A19B20A

三、

1、αα、ββ、βαβ2、抗原抗体结合的专一性3、低温干燥4、糖蛋白（阴离子交换蛋白）5、多聚阴离子抗凝血6、snoRNA7、增色效应8、平末端9、光面内质网脂质胆固醇

四

1、不带电荷的极性氨基酸、带正电荷的极性氨基酸、带负电荷的极性氨基酸、非极性氨基酸。

2、

（1）末端端修饰细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸，真核生物的多肽N末端都是甲硫氨酸，通常N末端的甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的N末端氨基酸残基都要被除去。

真核生物的多肽的N末端残基还要进一步的乙醇化。

羧基端的再修饰也时有发生。

（2）切除信号序列。

（3）非末端氨基酸的修饰丝氨酸、苏氨酸残基的磷酸化；

赖氨酸、谷氨酸残基的甲基化；

谷氨酸、天冬氨酸的羧基化。

（4）糖基化工厂糖蛋白的末冬酰氨，丝氨酸、苏氨酸和糖基结合。

（5）附加异戊二烯基团。

许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合。

（6）添加辅基这些辅基和解键共价结合，如血红素，叶绿素、生物素等。

（7）前体修饰。

有些蛋白生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的要通过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子。

（8）形成二硫键

3、同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：

已糖激酶对6-碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物6-磷酸葡萄糖的强烈负反馈抵制；

葡萄糖激酶则对D-葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被6-磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变成糖原储存起来。

4、酶活力也叫酶活性，可以用酶活力单位表示，酶活力是由酶自身催化一定反应的的能力决定的，比活力是指单位质量的酶制剂的酶活力单位数，酶的比活力反应酶的纯度。

5、生化下P67

6、生化下P129

7、真核生物mRNA的5'

端有一个帽子结构。

这一结构的最大特点是7-甲基鸟嘌呤核苷和mRNA的5'

端通过5'

-5'

三磷酸酯键相连，另外靠近这一帽子结构的第一和第二核苷酸的2‘羟基甲基化；

真核mRNA的3‘末端有一个多聚A尾，这些结构都是转录后加上去的。

8、生化下P393P397

9、有4个关键的位点

（1）反密码子

（2）携带氨基酸的3’末端的氨基酸臂

（3）和核糖体上的蛋白质相互作用的二氢鸟嘧啶环和TΨC环

（4）氨酰t-RNA合成酶的结合位点

10、生化下P571

中国科学院2003年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》卷

一.是非题（共25分）

1.多肽链的共价主链形式可以是双链或单链（）

2.分子量相同的两种蛋白质，如分子中酪氨酸和色氨酸残基数亦相同，，其摩尔消光系数可能不同（）

3.胰岛素元的降血糖活性是胰岛素的1/10左右（）

4.苯丙氨酸是人体必需氨基酸（）

5.丝-酪-丝-甲硫-谷-组-苯丙-赖-色-甘十肽经胰蛋白酶部分水解后，溶液中将有两种肽段存在（）

6.核酸在pH3.5的缓冲液中电泳时，是从正极向负极运动的（）

7.核糖体上蛋白质生物合成时，催化肽键合成的是核糖体RNA（）

8.tRNA转录后加工有剪接反应，它是有蛋白质催化的（）

9.核酸降解成单核苷酸时，紫外吸收值下降（）

10.RNA连接酶的底物是RNA,DNA连接酶的底物是DNA（）

11.DNA的复制方法有多种，滚动式复制方式通常以双向方式进行（）

12.色氨酸操纵子（trpoperon）中含有衰减子序列（）

13.对正调控和负调控操纵子而言，诱导物都能促进基因的转录（）

14.RecA蛋白只能与单链DNA结合，并发挥NTP酶活性（）

15.在克隆载体pBSK质粒中，利用完整的lacZ基因作为筛选标记，白色转化菌落表明重组质粒含有插入片断（）

16溶菌酶水解的底物是N-乙酰氨基葡萄糖的聚合物（）

17.激素受体都具有酪氨酸受体结构域（）

18.在底物的浓度达到无限大又没有任何效应剂存在的条件下，酶催化反应为零级反应（）

19.蛋白质可接离的基团都来自其侧链上的基团（）

20.蛋白质的等电点和它所含的酸性氨基酸残基和碱性氨基酸残基的数目比例有关（）

21.心碱脂是一种在中性pH下带正电荷的磷脂（）

22.生物膜上有许多膜固有蛋白，他们的跨膜肽段大多呈α螺旋结构（）

23.生物膜以脂双层结构为骨架，虽然细胞的不同膜由不同的磷脂组成，但脂双层的两个单层的磷脂组成是基本一致的（）

24.NADH氧化时的P/O比值时3（）

25.生物膜是离子与极性分子的通透屏障，但水分子是例外（）

二.选择题（共20分）

1.胰岛素的功能单位是单体；

二体；

四体；

六体

2.1mol/L硫酸钠溶液的离子浓度为2；

3；

6；

3.某蛋白质的pI为8，在pH6的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为

像正极方向泳动；

没有泳动；

向负极方向泳动；

向正负极扩散

4.今有A,B,C,D四种蛋白质，其分子体积由大到小的顺序是A>

D,在凝胶过滤柱层析过程中，最先洗脱出来的蛋白质一般应该是A;

5.噬菌体展示可用来研究：

A蛋白质-蛋白质相互作用；

B蛋白质-核酸相互作用；

C核酸-核酸相互作用；

D噬菌体外壳蛋白性质

6.DNA合成仪合成DNA片断时，用的原料是（）4种dNTP;

4种NTP;

4种dNDP;

4种脱氧核苷的衍生物

7.酒精沉淀核酸时，下列何种长度核苷酸不能被沉淀（）10；

20；

50；

100

8.反密码子IGC可以识别的密码子是（）GCG;

GCA;

ACG;

ICG

9.真核RNA聚合酶2最大亚基C末端重复序列的功能是

磷酸化使RNA聚合酶2与其它转录因子解离，促进转录的起始与延伸；

乙酰化使RNA聚合酶2与组蛋白竞争结合与DNA上，促进转录的起始与延伸；

甲基化使RNA聚合酶2活化，促进转录的起始与延伸；

三者都有

10.GAL4因子能够结合于基因的上游调控序列并激活基因的转录，它的DNA结合结构域属于（）

锌指结构；

亮氨酸拉链结构；

螺旋-环-螺旋结构；

螺旋-转角-螺旋结构

11.NA聚合酶1的功能是（）转录tRNA和5sRNA基因；

转录蛋白质基因和部分snRNA基因；

只转录rRNA基因；

转录多种基因

12.在真核细胞内，着丝粒是指

两个构成染色体DNA分子的连接区域；

一段高度重复的序列与组蛋白结合形成异染色质区；

染色体DNA上的一段特殊序列，能够促进与纺锤体的相互作用；

大约430bp长的一段序列，两端为两段高度保守的序列

13.下列哪种酶的巯基参与催化肽键断裂反应（）羧肽酶Y;

胃蛋白酶；

木瓜蛋白酶；

胰凝乳蛋白酶

14.达到反应平衡时，决定酶催化反应中底物转化为产物比率的参数是

酶的比活力高低；

酶的Vmax大小；

酶的转化数；

酶的Km

15.自然界通过光合作用生成大量的植物干物质，其中含量最高的是

淀粉；

木质素；

纤维素；

半纤维素

16.能催化蛋白质的谷氨酸及天冬氨酸的羧基侧肽键断裂反应的酶是

枯草杆菌蛋白酶；

嗜热菌蛋白酶；

金黄色葡萄糖球菌v8蛋白酶

17.下列化合物中哪一个是线粒体氧化磷酸化的解偶联剂

氯霉素；

抗酶素A;

2,4-二硝基苯酚；

β-羟基丁酸

18.蛋白激酶A催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化，它是

酪氨酸残疾；

组氨酸残基；

丝氨酸残基；

门冬氨酸残基

19.钠钾ATP酶催化一分子ATP水解时，同时

泵出2Na+,泵入2K+;

泵出3Na+，泵入3K+;

泵出2Na+,泵入3K+;

泵出3Na+，泵入2K+;

20.动物细胞质中游离Ca+2的浓度大约是细胞外的

1/1000；

1/200；

1/50；

1/10

三.填空（共25分）

1.肌红蛋白分子中的辅基含有——离子（金属），在正常状态下，该离子的化合价为——

2.在朊病毒致病过程中，其分子中的——结构转变为——结构，从而使其分子产生——

3.Northern杂交是用——鉴定——

4.真核生物主要有三类DNA聚合酶：

DNA聚合酶1，DNA聚合酶2和DNA聚合酶——；

他们分别催化rRNA,mRNA,和——的转录

5.——通过结合反式因子，改变染色质DNA的结构而促进转录

6.λ噬菌体侵入大肠杆菌细胞后通过——重组而进入溶源状态

7.在同源重组过程中，常常形成——中间体

8.大肠杆菌DNA依赖的RNA聚合酶由α2ββ‘σ五个亚基组成，——亚基与转录启动有关

9.天然染色体末端不能与其他染色体断裂片断发生连接，这是因为天然染色体的末端存在——结构

10.真核生物的基因组中有许多来源相同，结构相似，功能相关的基因，这样的一组基因称为——

11.酶活性调节控制包括，酶的别构调节（或正负反馈调节），可逆的化学修饰，酶原活化，激活蛋白或抑制蛋白的调控。

此外，还有——和——调控等

12.多酶复合体具有自身调节的机制，第一步反应一般是限速步骤，可被其他反应产物——。

这种作用被称之为——，催化这步反应的酶往往是——。

13.紧密偶联的线粒体内膜在状态4时的跨膜电位为——伏特

14.磷酸酯酶C水解磷脂酰胆碱，生成——和——

15.蛋白质识别磷酸化酪氨酸残基的结构域是——

16.表皮生长因子受体与胰岛素受体分子的结构域功能的共同特点是受体的胞内区都具有——

四.问答题（10*8）

1.某一单链蛋白质，经过实验测得，在20摄氏度时其解折叠反应（N<

D,其中N为该蛋白质的折叠态，D为非折叠态）的平衡常数是1.0*10^（-8）,试求该种蛋白质在该条件下折叠反应的自由能.（R=1.9872cal/（mol*K）或R=8.3144J/（mol*K））

2.何谓蛋白质组，简述其研究特点。

3.请你尽可能多地列举RNA生物功能的种类

4.说明基因芯片的工作原理及其在生物学研究中的意义

5.简述反转录（还原）病毒HIV的结构特征及其可能的致病机理

6.简述真核生物染色体上组蛋白的种类，组蛋白修饰的种类及其生物学意义

7.如何用实验证明双功能酶所催化的2种化学反应是否发生在同一催化部位

8.为什么说体外蛋白质复性或折叠与细胞内蛋白质折叠的机制是不同的

9.试管内偶联线粒体加琥珀酸与ADP产生状态3呼吸耗氧时，在分光光度计下检测到线粒体内源NAD+还原。

这有那几种可能的机制？

最后证明是何种机制

10.信号转导中第二信使指的是什么？

试举两个第二信使的例子与他们在细胞内的主要作用。

中国科学院2003年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》参考答案（答案为网友所提供非正式答案,仅供参考）

1.dG'

=-2.303RTlnK.

2.蛋白质组，蛋白质组学及研究技术路线（转自37度医学网,谢谢!

）

基因组（genome）包含的遗传信息经转录产生mRNA，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组（transcriptome）。

很显然，不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。

mRNA经翻译产生蛋白质，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质称为蛋白质组（proteome）。

同理，不同细胞在不同生理或病理状态下所表达的蛋白质的种类也不尽相同。

蛋白质是基因功能的实施者，因此对蛋白质结构，定位和蛋白质-蛋白质相互作用的研究将为阐明生命现象的本质提供直接的基础。

生命科学是实验科学，因此生命科学的发展极大地依赖于实验技术的发展。

以DNA序列分析技术为核心的基因组研究技术推动了基因组研究的日新月异，而以基因芯片技术为代表的基因表达研究技术为科学家了解基因表达规律立下汗马功劳。

在蛋白质组研究中，二维电泳和质谱技术的黄金组合又为科学家掌握蛋白质表达规律再铸辉煌。

蛋白质组学（proteomics）就是指研究蛋白质组的技术及这些研究得到的结果。

蛋白质组学的研究试图比较细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同，对相关蛋白质进行分类和鉴定。

更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能。

蛋白质组学的研究内容包括:

1.蛋白质鉴定:

可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术，利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。

2.翻译后修饰:

很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化，糖基化，酶原激活等。

翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式，因此对蛋白质翻译后修饰的研究对阐明

3.蛋白质功能确定:

如分析酶活性和确定酶底物，细胞因子的生物分析/配基-受体结合分析。

可以利用基因敲除和反义技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。

另外对蛋白质表达出来后在细胞内的定位研究也在一定程度上有助于蛋白质功能的了解。

4对人类而言，蛋白质组学的研究最终要服务于人类的健康，主要指促进分子医学的发展。

如寻找药物的靶分子。

很多药物本身就是蛋白质，而很多药物的靶分子也是蛋白质。

药物也可以干预蛋白质-蛋白质相互作用。

在基础医学和疾病机理研究中，了解人不同发育、生长期和不同生理、病理条件下及不同细胞类型的基因表达的特点具有特别重要的意义。

这些研究可能找到直接与特定生理或病理状态相关的分子，进一步为设计作用于特定靶分子的药物奠定基础。

不同发育、生长期和不同生理、病理条件下不同的细胞类型的基因表达是不一致的，因此对蛋白质表达的研究应该精确到细胞甚至亚细胞水平。

可以利用免疫组织化学技术达到这个目的，但该技术的致命缺点是通量低。

LCM技术可以精确地从组织切片中取出研究者感兴趣的细胞类型，因此LCM技术实际上是一种原位技术。

取出的细胞用于蛋白质样品的制备，结合抗体芯片或二维电泳-质谱的技术路线，可以对蛋白质的表达进行原位的高通量的研究。

很多研究采用匀浆组织制备蛋白质样品的技术路线，其研究结论值得怀疑，因为组织匀浆后不同细胞类型的蛋白质混杂在一起，最后得到的研究数据根本无法解释蛋白质

在每类细胞中的表达情况。

虽然培养细胞可以得到单一类型细胞，但体外培养的细胞很难模拟体内细胞的环境，因此这样研究得出的结论也很难用于解释在体实际情况。

因此在研究中首先应该将不同细胞类型分离，分离出来的不同类型细胞可以用于基因表达研究，包括mRNA和蛋白质的表达。

LCM技术获得的细胞可以用于蛋白质样品的制备。

可以根据需要制备总蛋白，或膜蛋白，或核蛋白等，也可以富集糖蛋白，或通过去除白蛋白来减少蛋白质类型的复杂程度。