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常用显色剂

一、通用显色剂

(1)硫酸①浓硫酸与甲醇等体积小心混合,冷却;②15%浓硫酸的正丁醇溶液;③5%浓硫酸的乙酸酐溶液;④5%浓硫酸的乙醇溶液;⑤浓硫酸与乙酸等体积混合。

用以上任一试液喷薄层板后,于110℃烘烤15min,不同类的成分显不同颜色。

(2)碘①%碘的氯仿溶液;②碘蒸气在一密闭的玻璃缸内预先放入少许碘结晶,使缸为碘蒸气饱和。

将薄层板放入缸内数分钟即可显色,碘对很多化合物显黄棕色。

(3)高锰酸钾-硫酸高锰酸钾溶于15ml40%硫酸中。

检测易还原性物质。

(4)铬酸-硫酸重铬酸钾5g溶于100ml40%硫酸中。

易还原性物质显色。

(5)荧光显色液①%的罗丹明B乙醇溶液;②%的荧光素乙醇溶液;③%的桑色素乙醇溶液。

用以上任一试液喷薄层板后,在荧光背景下可能显黑色或其他荧光斑点。

二、专属性显色剂

(一)生物碱及含氮类化合物

(1)改良碘化铋钾(Dragendorff)试剂①碱式硝酸铋溶于10ml冰醋酸与40ml水中;②碘化钾溶于20ml水中。

试液①与试液②等量混合置棕色瓶内保存作贮备液。

用前将1ml贮备液、2ml冰醋酸与10ml水混合。

用于生物碱与某些含氮化合物,显橙红色。

(2)碘-碘化钾(Wagner)碘1g与碘化钾10g溶于50ml水(微温),加2ml乙酸,加水至100ml。

用于生物碱,显棕褐色。

(3)碘铂酸5ml15%氯化铂溶液加45ml10%碘化钾溶液,用水稀释至100ml。

用于生物碱,不同生物碱显不同颜色。

(4)碘铂酸钾10%六氯铂酸溶液3ml与97ml水混合,加100ml6%碘化钾溶液,混匀。

新鲜配制。

用于生物碱与其他有机含氮化合物,不同生物碱显不同颜色。

(5)Ehrlich①10%对二甲氨基苯甲醛盐酸溶液与丙酮按1:

4混合。

②对二甲氨基苯甲醛1g,溶于100ml96%乙醇中。

用于吲哚类,有时喷后要加热。

(6)硫酸高铈铵1%本品的85%磷酸溶液。

用于吲哚类,长春花生物碱显各种颜色。

(7)对二甲氨基苯甲醛-硫酸65ml浓硫酸与35ml水混合,放冷后加对二甲氨基苯甲醛125mg,再加入5%三氯化铁溶液。

本试液可保存一周。

用于麦角生物碱。

(8)肉桂醛-盐酸肉桂醛5ml、乙醇95ml和5ml36%盐酸混合,新鲜配制。

用于吲哚类衍生物。

(9)呫吨氢醇本品溶于90ml乙醇中,加10ml36%的盐酸,用前新鲜配制。

用于色氨酸及其他吲哚类生物碱。

(10)氯化铁-过氯酸L三氯化铁溶液1ml与35%过氯酸溶液50ml混合。

用于吲哚类生物碱。

(11)三氯化铁-碘三氯化铁5g、碘2g溶于50ml丙酮与50ml20%酒石酸的混合液中。

用于黄嘌呤生物碱类,不同生物碱显不同颜色。

(12)硫酸铈-硫酸(改良Sonnenschein试剂)硫酸铈混悬于4ml水中,加1g三氯乙酸,加热煮沸,放冷,逐滴加入浓硫酸直至浑浊消失。

用于生物碱、含碘有机化合物的显色,喷后110℃烤几分钟,不同生物碱显不同颜色。

(13)硫氰酸钴(Ⅱ)试液硫氰酸铵3g、氯化钴1g溶于20ml水中。

用于生物碱,伯、仲、叔胺类。

(14)碘化汞钾(Meyer)试剂氯化汞和5g碘化钾各溶于20ml水中,混合后加水稀释至100ml即可。

(15)硅钨酸(Bertrand)试剂5g硅钨酸溶于100ml水中,加盐酸少量调至pH=2左右。

(16)苦味酸试剂1g苦味酸溶于100ml水中。

(17)鞣酸试剂鞣酸1g加乙醇1ml溶解后再加水至10ml。

(18)4-甲基伞形酮本品溶于35ml乙醇,加水至100ml。

用于含氮杂环化合物。

(19)硫酸铜-联苯胺①硫酸铜溶于100ml水-乙醇(5:

4)的混合液中;②%联苯胺的50%乙醇溶液。

用时先喷试液①,于60℃干燥后再喷试液②。

用于吡啶单羧酸的显色。

(20)氯化铜%氯化铜溶液。

用于肟类。

(21)硝普钠-铁氰化物10%氢氧化钠溶液、10%硝普钠溶液、10%铁氰化钾溶液和水按(1:

1:

1:

3)混合,冰箱内保存(可保存数周),使用前取适量与等体积丙酮混合。

用于氯基氰、胍、肌酸、肌酸酐、脲和硫脲及其衍生物的显色。

(22)硝普钠-过氧化氢5%硝普钠溶液2ml、10%氢氧化钠1ml与5ml3%过氧化氢溶液混合后,加15ml水。

冰箱可保存数日。

用于胍、尿素、硫脲及其衍生物、肌酸和肌酸酐的检测。

(23)三氯化锑试剂25g三氯化锑溶于75g氯仿中成饱和溶液。

用于秋水仙生物碱类。

(二)黄酮类

黄酮类化合物在紫外灯或日光下多显不同颜色,用氨薰、喷三氯化铝或氢氧化钠溶液等皆会使颜色加深或变色。

(1)三氯化铝-乙醇试液三氯化铝1g,加100ml乙醇溶解,即得。

用于含氧杂环化合物。

(2)氢氧化钾(钠)试剂10%氢氧化钾或氢氧化钠水溶液。

(3)氨气。

(4)三氯化锑试液10%三氯化锑的氯仿溶液。

喷后110℃烤5min,用于黄酮类。

(5)碱式(或中性)醋酸铅试剂1%碱式醋酸铅(或饱和中性醋酸铅)水溶液。

用于黄酮类。

(6)硫酸铜-枸椽酸钠硫酸铜(CuSO4?

5H2O)、柠檬酸钠与无水碳酸钠10g溶于水并稀释至100ml。

用于含邻二羟基的黄酮类与香豆精类。

(7)硼氢化钾试剂①1%~2%硼氢化钾异丙醇溶液,必须新鲜配制;②浓盐酸。

先喷①溶液,5min后放入盐酸蒸气缸内。

用于双氢黄酮类化合物,显红、橙红色。

(8)盐酸镁粉试剂浓盐酸和镁粉。

(9)醋酸镁试剂2%醋酸镁甲醇溶液。

(三)糖类

(1)茴香醛-硫酸试剂①茴香醛加入50ml乙酸,混匀后加1ml硫酸,用前新鲜配制。

②改良试液。

茴香醛、9ml乙醇、浓硫酸与乙酸混合后立即使用。

用于糖类、甾族、萜类。

喷后将薄层板置100~105℃烤,不同糖显不同颜色。

(2)α-萘酚-硫酸15%的α-萘酚-乙醇溶液、浓硫酸、乙醇与水4ml的混合液。

喷后100℃烤几分钟,多数糖显蓝色,鼠李糖显橙色。

用于糖类的显色。

(3)苯胺-二苯胺-磷酸4g二苯胺、4ml苯胺与20ml85%磷酸共溶于200ml丙酮中。

喷后85℃烤10min,用于还原糖,不同糖显不同颜色。

(4)对二甲氨基苯甲醛-乙酰丙酮

①%氢氧化钾溶液5ml与20ml乙醇混合;b.乙酰丙酮与正丁醇(1:

100)的混合液。

两种溶液均需新鲜配制,临用前混合。

取a.混合液,加入10mlb.溶液。

②对二甲氨基苯甲醛1g溶于30ml乙醇中,加30ml36%盐酸,需要时用180ml正丁醇稀释。

使用时先喷试液①,于105℃加热5min,再喷试液②,于90℃干燥5min。

用于氨基糖类。

(5)酚-硫酸试剂酚3g、浓硫酸5ml溶于95ml乙醇中。

喷后110℃加热几分钟,糖显棕色。

(6)1,3-二羟基萘酚-磷酸试剂%1,3-二羟基萘酚乙醇溶液100ml与85%磷酸100ml混匀。

喷后120℃加热5~10min,酮糖显红色,醛糖显淡蓝色。

(7)邻氨基联苯-磷酸邻氨基联苯溶于5ml85%磷酸与95ml乙醇,即得。

用于糖类。

(8)苯胺-磷酸2mol/L苯胺的水饱和正丁醇溶液与L磷酸正丁醇溶液,按1:

2(体积)混合。

用于糖类。

(9)咔唑-硫酸咔唑、5ml硫酸溶于95ml乙醇中。

用于糖类。

(10)3,5-二氨基苯甲酸-磷酸试剂3,5-二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于25ml80%磷酸中,加水稀释到60ml。

喷后100℃加热15min,2-去氧糖在日光下显棕色,在紫外光下显黄绿色荧光。

(11)苯胺-邻苯二甲酸试剂苯胺、邻苯二甲酸溶于100ml水饱和的正丁醇溶液中。

喷后105~110℃加热10min,糖显红棕色。

(12)百里酚-硫酸试剂百里酚、硫酸5ml溶于95ml乙醇。

喷后120℃加热15~20min,多数糖在白色背影上显暗红色,继续加热则变成浅紫色。

(13)萘雷锁辛-磷酸%萘雷锁辛乙醇溶液100ml与85%磷酸溶液10ml相混合。

用于糖类。

(14)4-氨基马尿酸%的4-氨基马尿酸乙醇溶液。

用于还原糖。

(15)酞酸苯胺苯胺和酞酸溶于100ml水饱和的正丁醇中。

用于糖类。

(16)硝普钠-偏高碘酸钠①%偏高碘酸钠溶液;②7%硝普钠溶液、水与饱和的哌嗪乙醇溶液按照1:

3:

20比例混合。

使用时先喷试液①,室温干燥10min,再喷试液②。

用于脱氧糖。

(17)偏高碘酸钠-联苯胺-硝酸银①%偏高碘酸钠溶液;②联苯胺溶于80ml乙醇、70ml水、30ml丙酮与1mlo/L盐酸的混合液中;③20ml丙酮加1ml饱和硝酸银溶液,然后逐滴加水直至沉淀的硝酸银刚刚溶解。

使用时先喷试液①,干燥,再喷试液②,放入含25%氢氧化铵溶液的容器内5min后,取出轻轻喷试液③。

用于糖和含1,2二羟基多醇类。

(18)联苯胺-三氯乙酸联苯胺溶于10ml乙酸,加10ml40%三氯乙酸水溶液,用乙醇稀释至100ml。

用于糖类。

(19)蒽酮蒽酮溶于10ml乙酸与20ml乙醇中,加入3ml85%磷酸与1ml水。

置冰箱内保存。

用于酮糖。

(20)氨性硝酸银试剂1g硝酸银,加20ml水溶解,滴加适量的氨水,边加边搅拌,至开始产生的沉淀将近全溶为止,过滤。

用于糖类。

(21)碱性酒石酸铜试剂①结晶硫酸铜,加100ml水;②酒石酸钾钠、氢氧化钠10g,加100ml水。

用时将试液①与试液②等量混合。

用于糖类。

(22)呫吨氢醇冰醋酸(Xanthydrol)试剂10mg呫吨氢醇溶于100ml冰醋酸(含1%的盐酸)中。

用于α-去氧糖。

(四)强心苷

(1)3,5-二硝基苯甲酸(Kedde)试剂2%3,5-二硝基苯甲酸的甲醇液与2mol/L氢氧化钾甲醇溶液或5%氢氧化钠乙醇液,用前等量混合。

强心苷显紫红色,几分钟后褪色。

(2)三氯乙酸①25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液。

②三氯乙酸溶于10ml氯仿,加30%过氧化氢溶液1~2滴。

喷后110℃加热7~10min,紫外灯下观察荧光。

用于甾族、洋地黄苷与藜芦碱。

(3)碱性三硝基苯试剂①间三硝基苯100ml溶于40ml二甲基甲酰胺溶液,加浓盐酸3~4滴,加水至100ml;②5%碳酸钠溶液。

使用时先喷试液①,再喷试液②,于90~100℃加热4~5min。

用于强心苷,在浅橙色背景上显橙红色。

(4)硫酸-次氯酸盐10ml1mol/L硫酸与3ml次氯酸钠溶液(10%活性氯)混合。

用于洋地黄苷。

(5)三氯化锑试剂25%或饱和的三氯化锑氯仿溶液。

喷后100℃加热5min,在紫外灯或日光下观察。

(五)蒽醌类

蒽醌类化合物本身在日光下显黄色或橙黄色,在紫外光下则显黄、红、橙色荧光。

薄层展开后用氨熏或喷氢氧化钾(钠)碱溶液,则颜色变深或变色。

(1)氢氧化钾试剂10%氢氧化钾甲醇溶液。

(2)氨气。

(3)醋酸镁试剂%醋酸镁甲醇溶液,喷后100℃加热5min。

(4)乙酸铝溶液%乙酸铝水溶液,喷后紫外灯下看荧光。

(5)硼酸试剂1%硼酸水溶液。

(6)碱式醋酸铅试剂1%碱式醋酸铅水溶液。

(六)香豆素与酯类

香豆素母体本身无荧光,但羟基香豆素在紫外光下常显亮蓝色荧光。

层析法检识常用以下显色剂。

(1)羟胺-氯化铁①a.盐酸羟胺20g溶于50ml水,用乙醇稀释至200ml,冷凉处保存;b.氢氧化钾50g溶于少许水中,加500ml乙醇。

②氯化铁(FeCl3?

6H2O)10g溶于20ml36%盐酸溶液中,加乙醚200ml摇匀,置密闭容器内保存。

使用时将试液①a.与①b.按1:

2混合,滤去沉淀,滤液放冰箱保存。

先喷此试液,稍干,再喷试液②。

用于内酯类、酯类、酰胺与羧酸酐类。

香豆素类显红色。

(2)三氯化铁试剂5%三氯化铁的水溶液或甲醇溶液。

检识含有酚羟基的香豆素。

(3)重氮化试剂①对硝基苯胺,溶于浓盐酸5ml中,加水至50ml;②亚硝酸钠5g,加水50ml。

取①、②液等量在冰水浴中混合后使用。

香豆素

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