血液细胞分析仪-实验简述_精品文档.pptx

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血细胞分析仪的使用一：

血常规检验的现状：

1.血细胞分析仪应用广泛。

2.医生越来越依靠报告单上的数据。

病人也格外关注自己的合法权利。

3.各种抱怨不断。

“你用手工给我化验吧”4.局限多多：

病态白细胞分类不准确。

红细胞、血红蛋白的影响等。

（冷凝、乳糜）血小板假性减低（抗凝剂诱聚、大血小板）。

（一）、血细胞分析仪基本工作原理与影响因素负压库尔特原理三要素：

小孔、负压、电极小孔电流内电极检测：

细胞大小和数量外电极样品杯血细胞小孔近观悬液小孔小孔管库尔特原理“当一个不良导体颗粒，例如血细胞，通过两个电极之间时，导致电路的电阻抗发生变化。

”-华莱士.库尔特,1947+白细胞白细胞通过小孔检测区域示波镜影响因素细胞大小、小孔情况、电磁干扰、细胞碎片、阈值调节。

2白细胞分群原理与影响因素：

根据脱水后细胞体积大小将白细胞分群（类）。

常分两群或三群。

注意：

由于各种细胞（包括幼稚细胞）体积有交叉，故此法分类有极大的局限性。

切不可盲目依赖它的分类结果而不进行推血片手工分类。

3、红细胞、血小板计数原理与影响因素:

在另一个通道内进行，测定原理也是库尔特原理。

注意：

仪器的最小测出值、小孔的洁净状况、红细胞的聚集、小红细胞、红细胞碎片、电磁波的干扰、血小板的聚集、大血小板严重重影响红细胞和血小板测定。

必须格外注意。

4直方图：

表示细胞群体分布情况的图形，它是计算机收集细胞通过微孔管时产生的脉冲而得到的。

横坐标表示细胞体积大小，以飞升（fl）为单位，纵坐标表示一定体积细胞的相对数量。

（1）白细胞直方图小细胞中间细胞大细胞注意：

传统上体积最大的单核细胞在直方图中位于小、大细胞之间，因为在溶血素的作用下，皱缩后的粒细胞所含的细胞核与胞质中的颗粒总体积最大。

白细胞直方图图形变化不特异。

有核红细胞或巨大血小板，血小板聚集、红细胞碎片等均可使图形在50fl以下区域出现异常峰。

各种符号的汉语意义红细胞直方图：

反映红细胞大小分布的直方图，正常情况下光是光滑的正态分布，其峰值相对应的横坐标为红细胞平均体积（MCV）。

在一定范围内曲线下面积与红细胞数量成正比，在所有直方图中红细胞直方图意义最大，分析时重点观察峰的位置、峰底宽度、有无双峰等。

红细胞常见的几种异常峰形有：

（1）峰顶左移，峰低变宽显示小细胞不均一性。

常见于缺铁性贫血。

若小峰左移底部变窄，呈小细胞均一性贫血，如-珠蛋白生成障碍性贫血。

（2）峰顶右移，底部变宽说明红细胞体积偏大。

呈明显大细胞不均一性，见于大细胞性贫血（叶酸、B12缺乏等）。

（3）若出现双顶且低部变宽说明有两类RBC，见于缺铁贫或巨幼贫治疗有效期。

或混合性营养缺乏贫血。

若底部较窄则常见于铁粒幼细胞性贫血。

血小板直方图：

注意：

小红细胞、红细胞碎片、微生物、灰尘颗粒等也可出现在此范围内。

由于小红细胞干扰而尾部抬高时，血小板值会偏高。

因此在发出血小板报告之前，首先要观察其图形是否正常，如为异常的图形,均应仔细判定，必要时作血涂片检查是否有小红细胞或大血小板增多、血小板聚集等现象，甚至手工计数。

直方图的作用是：

1、反映细胞群体体积分布情况。

2、为临床提供直观的诊断信息或图形依据。

3、用以监测仪器状态及分析结果的可靠性。

4、反映结果误差的潜在原因。

影响直方图变化的其它因素仪器的阈值、孔电压、脉冲增益。

试剂的质量（稀释液的导电性、渗透压、离子强度；溶血剂的种类用量、溶血时间等）都会干扰使直方图发生改变。

工作中要密切观察，分析原因，及时推片复检，有时还须结合临床诊断，确认无误方能发出报告。

但不能向临床报告“大细胞、小细胞、中间细胞百分比和绝对值”。

6.激光型五分类血细胞分析仪原理和影响因素FlowCellduringSampleAnalysis.CellsareHydrodynamicallyFocused.Sheathsurroundssamplebutdoesnotmix.SamplePressureSheathPressureGENS散点图五个细胞亚群.中性粒细胞嗜酸性细胞单核细胞淋巴细胞嗜碱性细胞联合检测型分类原理（VCS）容量、电导、光散射（VCS）白细胞分类法VCS（volume，conductivity，scatter）技术可使血细胞在未经任何处理，与体内形态完全相同的自然状态下得出检测结果。

（BeckmanCoulter公司的仪器采用此法。

）

（二）、血细胞分析仪的管理：

1仪器的选购和基本要求：

2仪器的安装与校准与评价3对开机人员的要求仅能根据画面按键操作绝对不能保证质量。

（1）思想素质开机人员首先必须具有高度的责任心和事业心。

（2）文化素质有一定的外文、电子和计算机知识。

（3）技术素质良好的培训，对说明书、仪器的原理、构造、试剂系统、操作程序和使用注意事项应有充分的了解。

4对仪器正确监控二、现代血常规检验局限性的应对措施分析前质量控制、分析中质量控制、分析后质量控制。

分析前质量控制1标本的采集-临床准备要考虑生理、病理状态、应用各种药物（如升白、杀白药等）。

2.尽量静脉采血还要注意不能溶血，如不能加压往负压管里打血。

（附图）3.标本的运送采集血液12ml后放入特制负压管（含EDTA-K.2HO4.0mg）内尽快送检。

22作好标本的采集和运送工作,交接登记制度,确保标本采集正确，认真进行标本验收，拒收不合格标本。

标本量的多少、出现凝血、溶血、脂血等,都应给予拒收。

4.稀释溶血现象是指血液经高倍率稀释后，随着放置时间的延长，血细胞（特别是形态异常的血细胞）自行溶解的现象。

白细胞的形态也发生改变，所以要求在lmin-5min内分析完血液稀释样品。

分析中质量控制1.注意环境温度不能过热或过冷，低于15或高于302试剂的使用应注意以下原则：

正规批准文号、效期，质控。

最好使用原装仪器的配套试剂，不能混用。

添加溶血剂的液滴大小和添加溶血剂后的摇匀及放置时间应一致。

3.血样制作仪器吸样前血样要充分混匀，并且动作要轻。

如不能及时送检应在室温保存。

样本编号要科学。

4.做好室内质控确保在控时才能发出病人的报告。

5.室内质控的具体做法1质控品的选定供应稳定、及时、有效期长2确定质控物的靶值和SD暂定均值和SD计数20天算出x和SD并更改之3输入质控项目、批号、均值、等参数4在控、失控的判定和处理（检测结果超出3s）检查质控品、试剂、仪器、记录和上报5室内质控的数据管理打印原始数据和图形6.注意观察计数时间、示波器波形、指示灯、听报警声音等。

预防堵孔的主要措施注意观察仪器的各种报警。

如血样不够、试剂缺如、堵孔等，发现问题及时处理。

（1）某些疾病原因不明疾病血中含有冷球蛋白、冷纤维蛋白，可使血液中非晶体物质聚集，导致血细胞计数值增高。

此时稀释标本（用稀释液稀释3倍）放在37水浴，l0min后立即数可消除之。

或新鲜血液立即上机.红细胞冷凝的判断RBC低Hb高，HcT、MCV无计数或MCH及MCHC很高7注意病理因素对血液分析仪使用的影晌

（2）血液中白细胞显著增高影响红细胞计数（计算消除），或有核红也干扰白细胞计数（通过镜下分类消除）。

白细胞过高（超过线性范围）还必须稀释样本。

（3）低色素贫血或红细胞内含有大量HbS或HbCO，某些初生儿、肝病患者红细胞膜质类异常，有抵抗溶血剂作用，导致红细胞不完全溶血。

干扰白细胞计数。

（4）小红细胞或碎片引起PLAT增高（附图），或大血小板引起的PLAT减少，须手工计数消除。

或者更换不同计数原理机器。

（5）多发性骨髓瘤M蛋白增多时，在pH低情况下M蛋白可与溶血剂反应使结果偏高。

（6）各种病因引起的血栓前状态使血小板易于聚集。

8注意病理因素对血液分析仪使用的影晌（7）血小板过少必须要推片、手工计数。

（8）血小板遇抗凝剂聚集的判断：

PLT低，MPV、PCT-，图形异常；处理涂片镜检。

用109mmol/L枸橼酸钠（1：

9）抗凝然后换算，或新鲜血立即上机。

注意与凝固的鉴别。

（9）高脂血症可使Hb假性升高，进而导致MCH和MCHC的测定偏差。

（10）各种白血病白细胞直方图、散点图有明显变化。

必须推制血片显微镜分类。

9.人为因素对血液分析仪使用的影晌

（1）低血量的结果判断某些项目结果异常减低附图

（2）没有完全混均匀的判断RBC、Hb异常高，WBC、PLT下降。

红细胞沉到低，白细胞、血小板上浮。

附图（3）其他操作失误。

如有大凝快。

常见干扰血细胞分析仪参数的因素哪种细胞多了？

淋巴？

粒细胞？

成熟的？

幼稚的？

嗜酸性粒细胞？

嗜碱性粒细胞？

粒细胞有无中毒性改变？

粒细胞有无病态表现？

大颗粒淋巴细胞？

异淋？

FLcells除了白细胞其它有无异常？

有无异常淋巴瘤细胞？

Hairycells红细胞形态有无异常？

有无缗钱样改变？

有无有核红细胞？

红细胞碎片？

有无异常白细胞？

有无血小板聚集有无异常形态的血小板有无白细胞分类的异常有无红细胞碎片X分析后质量控制1回顾性质量控制控制检测工作的精密度，日间、批间检测的一致性，决定当日实验结果是否准确，及时报告。

（1）图质量控制法与一般生化图一致。

用全血质控物随患者样本检测，绘制质控图,每天观察质控数据是否在控,涉及操作、X试剂、校准物、质控品的失效,仪器维护不良等多种因素。

（2）对比分析两台以上血细胞分析仪时，每天进行对比以保持科室内几台仪器结果上的一致性。

（3）浮动均值法浮动均值法是搜集每天检测标本数据20个以上为一批,求出每批的浮动均值,并绘制质控图。

2根据国际上应用的是41条复片规则、直方图及参数变化确定白细胞分类是否需要显微镜检查较大的工作量迫使我们要筛查一些不需镜检和必须镜检的标本细胞结合自己医院实验室的具体情况建立自己的显微镜复检规则3分析实验结果各参数之间的关系RBC、HCT与MCV，Hb、RBC与MCH之间，RDW与涂片的红细胞形态变化，血涂片显微镜检白细胞分类与机器报警。

4.双签字、组长抽检。

5.与临床资料进行相关分析仔细研究实验中出现的异常结果，是否可以从临床角度加以解释，或是否与其他实验参数相关。

检验结果病人情况尤其是出血、疾病、药物等6定期征求临床医护人员对本室结果的评价检验技师医护人员