结核感染T细胞TB-IGRA检测及意义.ppt

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干扰素释放试验（IGRAS）临床应用南京医科大学第二附属医院南京医科大学第二附属医院呼吸科呼吸科沈沈红红contents目录目录1.1.结核病的诊断现状结核病的诊断现状2.TB-IGRA2.TB-IGRA产品介绍产品介绍3.TB-IGRA3.TB-IGRA的临床应用的临床应用4.TB-IGRA4.TB-IGRA检测方法及结果解释检测方法及结果解释3结核病现状结核病现状结核病结核病（tuberculosis）是由结核分枝杆菌（tuberclebacillus）引起的一种慢性肉芽肿性炎。

以肺结核最常见，死亡人数仅次于艾滋病。

也可见于全可见于全身各器官身各器官。

肺外结核肺外结核占整个发病率的10%-20%10%-20%，死亡率，死亡率占结核病全部死亡率的14.1%-17.6%14.1%-17.6%。

全世界约三分之一的人群感染，2014年全球结核病报告显示：

2013年有900万新发病例，150万人死亡。

中国是结核病高发区中国是结核病高发区，发病数居全球第二发病数居全球第二，现有600万活动性肺结核，且患者人数逐年增加，始终位居全国甲乙类传染病的前列。

电镜下的结核杆菌电镜下的结核杆菌WorldHealthOrganization.Globaltuberculosiscontrol:

epidemiology,strategy,financing:

WHOreport2011（WHO/HTM/TB/2011.16）.Geneva:

WHO,20112010年新发880万例结核患者，59%在亚洲，26%在非洲发病人群前五位的国家India（2.0million2.5million）（26%）China（0.9million1.2million）SouthAfrica（0.40million0.59million）Indonesia（0.37million0.54million）Pakistan（0.33million0.48million）.38%结核病现状及危害-传播范围广WorldHealthOrganization.Multidrugandextensivelydrug-resistantTB（M/XDR-TB）:

2010globalreportonsurveillanceandresponse.WHO/HTM/TB/2010.3.逐年增加全球27个MDR-TB流行严重的国家之一，中国尤其严重中国尤其严重HIV感染和艾滋病破坏了机体的免疫系统，加剧了结核的发病，1/3HIV病人死于结核多菌耐药的结核菌感染率增加贫困、移民等细菌学涂片率低，2/3TB病人菌阴性原因结核发病机理结核发病机理LTBI结核分枝杆菌（MTB）暴露感染自愈自愈90%不发展为结核病不发展为结核病Latency2-5%疾病进展疾病进展1%活动性结核病活动性结核病细菌全部被清除细菌全部被清除一直存在活菌一直存在活菌需预防性服药不需要预防性服药Latency潜伏潜伏9%复燃复燃注：

感染后发病与否和机体易感性有关！

注：

感染后发病与否和机体易感性有关！

5-10%HIV10%治愈治愈l活动性结核：

发病状态l潜伏性结核感染（LTBI）：

是宿主感染结核杆菌后尚未发病的一种特殊状态未根治未根治结核病的免疫主要是细胞免疫结核病的免疫主要是细胞免疫DhedaK,etal.Theimmunologyoftuberculoisis:

Frombenchtobeside.Respirogy,2010,15:

433-45011耗时长4-8周检出率低50%涂阴检出低22%-38%肺外结核难结核检测的方法比较结核诊断X射线射线分子诊断分子诊断涂片涂片镜检镜检细菌培养细菌培养特异性差误诊肺炎、肺癌肺外结核难操作复杂技术要求高涂阴检出低34%肺外结核难不能区分NTM检出率低20%肺外结核难假阳/假阴多；（涂阴45%/35%）WHO建议禁用抗体检测抗体检测TST（结核菌素皮试）（结核菌素皮试）不能区分卡介苗接种者不能区分NTM48-72小时复诊取样操作简便检出率高（活动结核和潜伏结核）区分BCG、NTM检测肺外结核IGRA方法方法接触史临床症状病原/病理12TB-IGRATuberculosis（结核TB）Interferon（干扰素）Gamma（）Release（释放）Assay（测定）原理:

感染者体内被结核菌（TB）抗原致敏的效应效应TT细胞细胞，在体外受到相同抗原的刺激（在APC辅助下）后，会分泌大量IFN-（细胞因子）。

通过IFN-的检测，判断结核感染情况。

contents目录目录1.1.结核病的诊断现状结核病的诊断现状2.TB-IGRA2.TB-IGRA介绍介绍3.TB-IGRA3.TB-IGRA的临床应用的临床应用4.TB-IGRA4.TB-IGRA检测方法及结果解释检测方法及结果解释APCTcellTB-IGRATB-IGRA方法介绍方法介绍细胞因子活化/细胞因子细胞因子ELISAELISPOT流式流式细胞胞术细胞因子活化标志物IGRAsIFN-greleaseassayTNFaIFNgCK体外刺激：

体外刺激：

RD1RD1抗原抗原原理原理:

机体内被结核菌抗原致敏的效效应T细胞胞，在体外受到相同抗原的刺激（在APC辅助下）后，会分泌大量IFN-（细胞因子）。

通过IFN-的检测，判断结核感染情况。

两种两种TB-IGRATB-IGRA比较比较高孟秋,刘菲,纪滨英等.两种-干扰素释放分析在结核病临床诊断中的比较研究.中华结核和呼吸杂志，2012，35（10）：

762-765TB-IGRATB-IGRA产品特性产品特性高灵敏度，检出率高灵敏度，检出率85%85%以上以上高特异性高特异性RD1RD1区编码的区编码的ESAT-6ESAT-6和和CFP-10CFP-10两个特异性抗原两个特异性抗原该抗原具该抗原具有较强的有较强的ThlThl细胞免疫原性，且在所有制备卡介细胞免疫原性，且在所有制备卡介苗的菌株及环苗的菌株及环境中绝大多数非结核分枝杆菌中均不存在该抗原，不受卡介苗和非分支境中绝大多数非结核分枝杆菌中均不存在该抗原，不受卡介苗和非分支杆菌影响杆菌影响TNFaIFNgCK国内外相关研究国内外相关研究TB-IGRATB-IGRA快速简便快速简便，是一种值得推广的检测方法：

，是一种值得推广的检测方法：

张华，黄圣文，罗振元.结核分枝杆菌r-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用.中华医学院感染学杂志2009年第19卷第14期国内外相关国内外相关研究研究国内文章国内文章sensitivitysensitivity结核分枝杆菌结核分枝杆菌-干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用干扰素体外释放定量试验诊断结核感染的临床应用90.2490.24%（74/8274/82）TB-IGRATB-IGRA与与TSTTST检测菌培阳性肺结核患者比较检测菌培阳性肺结核患者比较80.380.3%（118/147）118/147）-干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义干扰素释放试验诊断结核分枝杆菌感染的临床意义88.6488.64%（39/4539/45）结核分枝杆菌相关结核分枝杆菌相关-干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值干扰素体外释放试验在结核病诊断中的应用价值90.790.7%（243/268243/268）两种结核分枝杆菌相关两种结核分枝杆菌相关-干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究干扰素定量检测试剂盒检测结核分枝杆菌感染结果比较研究90.990.9%（290/319290/319）体外释放酶联免疫法检测结核杆菌体外释放酶联免疫法检测结核杆菌-干扰素的实验研究干扰素的实验研究89.1189.11%（90/10190/101）干扰素释放酶联免疫法（干扰素释放酶联免疫法（TB-IGRATB-IGRA）用于检测结核分枝杆菌的优越性）用于检测结核分枝杆菌的优越性96.12%（99/103）96.12%（99/103）体外体外-干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较干扰素检测结核分枝杆菌不同方法的应用价值比较90.1%（308/34290.1%（308/342干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值干扰素体外释放酶联免疫法在结核潜伏感染诊断中的价值88.6%（39/44）88.6%（39/44）国外同类试剂国外同类试剂优势优势AThree-WayComparisonofTuberculinSkinTesting,QuantiFERON-TBGoldandT-AThree-WayComparisonofTuberculinSkinTesting,QuantiFERON-TBGoldandT-SPOT.TBinChildrenSPOT.TBinChildrenLatentTBLatentTB检出高检出高PositiveTuberculinSkinTestorInterferon-GammaReleaseAssayinPatientswithPositiveTuberculinSkinTestorInterferon-GammaReleaseAssayinPatientswithRadiographicLesionsSuggestingOldHealedTuberculosisRadiographicLesionsSuggestingOldHealedTuberculosisLatentTBLatentTB检出高检出高EstimatingdiagnosticaccuracyoftestsforlatenttuberculosisinfectionEstimatingdiagnosticaccuracyoftestsforlatenttuberculosisinfectionwithoutagoldstandardamonghealthcareworkerswithoutagoldstandardamonghealthcareworkers特异性特异性93.6%93.6%ClinicalUtilityofInterferonGammaAssayintheDiagnosisofTuberculosisClinicalUtilityofInterferonGammaAssayintheDiagnosisofTuberculosis灵敏度灵敏度90%,90%,特异性特异性97%97%contents目录目录1.1.结核病的诊断现状结核病的诊断现状2.TB-IGRA2.TB-IGRA介绍介绍3.TB-IGRA3.TB-IGRA的临床应用的临床应用4.TB-IGRA4.TB-IGRA检测方法及结果解释检测方法及结果解释临床应用案例临床应用案例肺结核辅助诊断：

肺结核辅助诊断：

某院呼吸科病人，男临床临床症状：

症状：

发热1周，咳嗽检测结果：

检测结果：

TB-IgG（-）TB-IgG（-），TB-IGRATB-IGRA（+）T-NT-N的值是的值是21.5pg/ml21.5pg/ml结果分析：

结果分析：

TB-IgG灵敏度低，易漏检。

临床诊断：

临床诊断：

肺结核肺结核备注：

2011年，WHO建议不再使用结核抗体检测结核感染临床应用案例临床应用案例肺外结核辅助诊断：

肺外结核辅助诊断：

某院感染科，女，75岁临床症状：

临床症状：

发热数日，胸痛，干咳检测结果：

检测结果：

X射线胸腔积液影像，积液涂片（射线胸腔积液影像，积液涂片（-）、积液培养（）、积液培养（-）、）、TB-IGRAT-N350pg/ml，积液积液单核细胞增多，单核细胞增多，血沉血沉快快结果分析：

结果分析：

对于肺外结核的诊断，涂片与培养的阳性率极低，TB-IGRA（+），结合其他非特异辅助指标可明确诊断肺外结核