精浆的生化检验技术三修.ppt

精浆的生化检验技术三修.ppt

《精浆的生化检验技术三修.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《精浆的生化检验技术三修.ppt（79页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。

1精精浆浆生生化化检检验验郑大三附院检验科郑大三附院检验科郑大三附院检验科郑大三附院检验科袁恩武袁恩武袁恩武袁恩武二二二二0000八年七月八年七月八年七月八年七月2一一、精浆的来源及作用、精浆的来源及作用二、二、精浆精浆-葡萄糖苷酶测定葡萄糖苷酶测定三、三、精浆果糖测定精浆果糖测定四、四、精子顶体酶的测定精子顶体酶的测定五、五、其他生化项目测定其他生化项目测定3一一、精浆的来源及作用精浆的来源及作用nn男性生殖系统的结构男性生殖系统的结构外生殖器外生殖器外生殖器外生殖器内生殖器内生殖器内生殖器内生殖器阴囊阴茎阴囊阴茎生殖腺生殖腺（睾丸）、（睾丸）、输送管道输送管道（附睾、（附睾、输精管、射精管和尿道）和输精管、射精管和尿道）和附属腺体附属腺体（精囊、前列腺、尿道球腺）（精囊、前列腺、尿道球腺）4n男性生殖腺分泌功能男性生殖腺分泌功能u睾丸睾丸:

精子精子、雄性激素、转铁蛋白、雄性激素、转铁蛋白、u附睾附睾:

中性中性-葡萄糖苷酶、肉毒碱、甘油磷酸葡萄糖苷酶、肉毒碱、甘油磷酸葡萄糖苷酶、肉毒碱、甘油磷酸葡萄糖苷酶、肉毒碱、甘油磷酸胆碱、唾液酸等，与精子的功能性成熟有关胆碱、唾液酸等，与精子的功能性成熟有关胆碱、唾液酸等，与精子的功能性成熟有关胆碱、唾液酸等，与精子的功能性成熟有关u精囊腺精囊腺:

分泌果糖、前列腺素等，呈碱性分泌果糖、前列腺素等，呈碱性分泌果糖、前列腺素等，呈碱性分泌果糖、前列腺素等，呈碱性u前列腺前列腺:

分泌酸性磷酸酶、柠檬酸、谷氨酸转分泌酸性磷酸酶、柠檬酸、谷氨酸转肽酶、肽酶、PSA、锌、镁等，其分泌物呈酸性、锌、镁等，其分泌物呈酸性5nn精液的组成和来源精液的组成和来源u精液是由精子和精浆组成的混合物精液是由精子和精浆组成的混合物u精子产生于睾丸精子产生于睾丸u精浆产生于附睾、前列腺、精囊腺和尿道球精浆产生于附睾、前列腺、精囊腺和尿道球腺等附属腺体腺等附属腺体u正常精液中精子占正常精液中精子占5%，精浆占，精浆占95%u在精浆中约在精浆中约30%来自前列腺，来自前列腺，60%来自精囊来自精囊腺，腺，5-10%来自于附睾及尿道球腺来自于附睾及尿道球腺67nn正常精浆应具备正常精浆应具备u精浆量精浆量2.0mlu外观和粘稠度都正常外观和粘稠度都正常uPH值值7.2-7.8u精浆各项生化指标正常精浆各项生化指标正常u精液精液WBC1106/mlu细菌培养阴性或细菌计数细菌培养阴性或细菌计数1000/ml8n精浆主要化学成分精浆主要化学成分u水水:

约占约占90%90%以上以上u糖类糖类:

果糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖等果糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖等u蛋白质蛋白质:

白蛋白及非酶蛋白质白蛋白及非酶蛋白质u脂类脂类:

包括胆固醇、睾酮、前列腺素等包括胆固醇、睾酮、前列腺素等u酶蛋白酶蛋白:

酸性磷酸酶、透明质酸酶、糖苷酶、酸性磷酸酶、透明质酸酶、糖苷酶、精素、纤溶酶原激活剂等精素、纤溶酶原激活剂等9u肽类激素：

如肽类激素：

如FSHFSH、LHLH、催乳素等催乳素等u胺类：

如精胺、亚精胺、精胺素等氨基酸：

胺类：

如精胺、亚精胺、精胺素等氨基酸：

如精氨酸、谷氨酸等如精氨酸、谷氨酸等2020多钟多钟u有机酸及有机碱：

如柠檬酸、肉毒碱、甘油有机酸及有机碱：

如柠檬酸、肉毒碱、甘油磷酸胆碱、乳酸等磷酸胆碱、乳酸等u无机离子：

锌、镁、钙、铜、钾、氯、钠等无机离子：

锌、镁、钙、铜、钾、氯、钠等10nn精浆的生理作用精浆的生理作用u作为一种介质把精子输送到女性生殖道内，作为一种介质把精子输送到女性生殖道内，为为精子提供营养物质精子提供营养物质u参与精液的凝固和液化参与精液的凝固和液化u精浆组成一个适当的精浆组成一个适当的pHpH值和渗透压环境，具值和渗透压环境，具有一定的缓冲能力，以适应精子活动的需要有一定的缓冲能力，以适应精子活动的需要u精浆中含有调节输卵管及子宫活动的物质，精浆中含有调节输卵管及子宫活动的物质，同时还含有使宫颈粘液水解的物质。

同时还含有使宫颈粘液水解的物质。

11nn精液的凝固与液化精液的凝固与液化u精液刚射出时为一粘性、略呈灰黄色的液体，精液刚射出时为一粘性、略呈灰黄色的液体，射出后立即呈胶冻样凝块，射出后立即呈胶冻样凝块，5520min20min后又会后又会自动液化，并仍呈一定粘度。

当精液射于阴自动液化，并仍呈一定粘度。

当精液射于阴道内道内5min5min可以完全液化，比体外液化的时间可以完全液化，比体外液化的时间为快为快12u精液液化一旦形成，精子在此液状环境中才精液液化一旦形成，精子在此液状环境中才开始有效的自由活动，且有充分活动力，可由开始有效的自由活动，且有充分活动力，可由阴道进入宫颈、子宫及输卵管，最后与卵子结阴道进入宫颈、子宫及输卵管，最后与卵子结合而致孕。

合而致孕。

u精囊（精囊（凝固酶凝固酶）和前列腺（）和前列腺（液化因子、液化因子、PSA）在精液的凝固和液化过程中起重要作用在精液的凝固和液化过程中起重要作用13n男性不育疾病中男性不育疾病中精浆生化指标精浆生化指标的改变的改变凝固凝固凝固凝固液化液化液化液化PHPH-糖苷糖苷糖苷糖苷酶酶酶酶果糖果糖果糖果糖酸性磷酸性磷酸性磷酸性磷酸酸酸酸酶酶酶酶柠檬酸柠檬酸副副副副睾睾睾睾疾疾疾疾病病病病正常正常正常正常正常正常正常正常急性急性急性急性8888慢性慢性慢性慢性7降低降低降低降低正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常精精精精囊囊囊囊缺缺缺缺如如如如不不不不正常正常正常正常78888正常正常正常正常正常正常正常正常升高升高升高升高降低降低降低降低降低降低降低降低输精管输精管输精管输精管阻阻阻阻塞塞塞塞正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常降低降低降低降低正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常正常14nn精浆生化检验的目的精浆生化检验的目的uu精子功能指标：

评价精子受孕能力精子功能指标：

评价精子受孕能力精子功能指标：

评价精子受孕能力精子功能指标：

评价精子受孕能力uu用于男性生殖道炎症的诊断用于男性生殖道炎症的诊断用于男性生殖道炎症的诊断用于男性生殖道炎症的诊断uu了解副性腺功能了解副性腺功能了解副性腺功能了解副性腺功能uu确定梗阻性无精子症及梗阻部位确定梗阻性无精子症及梗阻部位确定梗阻性无精子症及梗阻部位确定梗阻性无精子症及梗阻部位15nn男科实验室开展的精浆生化项目男科实验室开展的精浆生化项目uu精浆精浆精浆精浆-葡萄糖甘酶测定葡萄糖甘酶测定葡萄糖甘酶测定葡萄糖甘酶测定uu精浆果糖测定精浆果糖测定精浆果糖测定精浆果糖测定uu精浆酸性磷酸酶的测定精浆酸性磷酸酶的测定精浆酸性磷酸酶的测定精浆酸性磷酸酶的测定uu精子顶体酶的测定精子顶体酶的测定精子顶体酶的测定精子顶体酶的测定uu精浆锌的测定精浆锌的测定精浆锌的测定精浆锌的测定uu精浆乳酸脱氢酶精浆乳酸脱氢酶精浆乳酸脱氢酶精浆乳酸脱氢酶XX同工酶的测定同工酶的测定同工酶的测定同工酶的测定uu精浆柠檬酸定量测定精浆柠檬酸定量测定精浆柠檬酸定量测定精浆柠檬酸定量测定16二、精浆中性二、精浆中性-葡萄糖甘酶测定（酶法）葡萄糖甘酶测定（酶法）n检测目的检测目的u主要是附睾分泌功能的指标，较左旋肉毒碱和甘油磷酸胆碱对附睾更敏感、更特异u先天性副睾发育不良明显降低、急慢性副睾炎降低u正常见于单纯输精管阻塞无精症17nn原理原理uuP-P-硝基酚吡喃葡糖苷硝基酚吡喃葡糖苷硝基酚吡喃葡糖苷硝基酚吡喃葡糖苷（底物底物底物底物）对硝基对硝基对硝基对硝基酚（酚（酚（酚（产物产物产物产物）淡黄色物质，在淡黄色物质，在淡黄色物质，在淡黄色物质，在405nm405nm波波波波长有最大吸收峰长有最大吸收峰长有最大吸收峰长有最大吸收峰uu加酸是抑制酸性加酸是抑制酸性加酸是抑制酸性加酸是抑制酸性-葡萄糖甘酶葡萄糖甘酶葡萄糖甘酶葡萄糖甘酶，保护中性，保护中性，保护中性，保护中性-葡萄糖甘酶葡萄糖甘酶葡萄糖甘酶葡萄糖甘酶加加酸酸-葡葡葡葡糖糖糖糖苷酶苷酶苷酶苷酶NaNa22COCO3318nn试剂组成试剂组成uu酸性抑制剂酸性抑制剂酸性抑制剂酸性抑制剂600l1600l1瓶瓶瓶瓶uu糖苷酶抑制剂（冻干粉）糖苷酶抑制剂（冻干粉）糖苷酶抑制剂（冻干粉）糖苷酶抑制剂（冻干粉）11瓶瓶瓶瓶uu底物（冻干粉）底物（冻干粉）底物（冻干粉）底物（冻干粉）22瓶瓶瓶瓶uu终止液终止液终止液终止液50ml150ml1瓶瓶瓶瓶uu标准品（标准品（标准品（标准品（1515）各各各各2.5ml2.5mluu质控液质控液质控液质控液100l1100l1瓶瓶瓶瓶uu底物溶解液底物溶解液底物溶解液底物溶解液5ml15ml1瓶瓶瓶瓶19nn实验设备及用具实验设备及用具uu酶标仪酶标仪酶标仪酶标仪uu低速自动平衡离心机低速自动平衡离心机低速自动平衡离心机低速自动平衡离心机uu微量水平振荡器微量水平振荡器微量水平振荡器微量水平振荡器uu水浴箱水浴箱水浴箱水浴箱（3737）uu精密移液器（加样枪）精密移液器（加样枪）精密移液器（加样枪）精密移液器（加样枪）0.520ul0.520ul、50200ul50200ul、100500ul100500ul、2001000ul2001000uluu石英定时钟石英定时钟石英定时钟石英定时钟20nn实验操作方法实验操作方法uu试剂准备试剂准备试剂准备试剂准备tt糖苷酶抑制剂冻干粉以糖苷酶抑制剂冻干粉以糖苷酶抑制剂冻干粉以糖苷酶抑制剂冻干粉以120l120l蒸馏水溶解，蒸馏水溶解，蒸馏水溶解，蒸馏水溶解，44可使可使可使可使用用用用2020天，分装保存天，分装保存天，分装保存天，分装保存-20-20可长期使用（切勿反复冻可长期使用（切勿反复冻可长期使用（切勿反复冻可长期使用（切勿反复冻融）融）融）融）tt每瓶底物冻干粉以每瓶底物冻干粉以每瓶底物冻干粉以每瓶底物冻干粉以2.2ml2.2ml底物溶解液充分溶解，分底物溶解液充分溶解，分底物溶解液充分溶解，分底物溶解液充分溶解，分装保存装保存装保存装保存tt溶解后的底物液，溶解后的底物液，溶解后的底物液，溶解后的底物液，44保存可用保存可用保存可用保存可用55天，天，天，天，-20-20保存可保存可保存可保存可用数月（切勿反复冻融）用数月（切勿反复冻融）用数月（切勿反复冻融）用数月（切勿反复冻融）21uu标本准备标本准备标本准备标本准备tt记录受检者一次射精的精液总量记录受检者一次射精的精液总量记录受检者一次射精的精液总量记录受检者一次射精的精液总量（ml）（ml）tt精液液化后以精液液化后以精液液化后以精液液化后以3000g3000g离心离心离心离心1010分钟，保留精浆分钟，保留精浆分钟，保留精浆分钟，保留精浆tt若样本不能立即测定，可以若样本不能立即测定，可以若样本不能立即测定，可以若样本不能立即测定，可以EppendorfEppendorf管分管分管分管分装精浆，装精浆，装精浆，装精浆，-20-20保存待检保存待检保存待检保存待检tt根据离心力计算离心速度公式根据离心力计算离心速度公式根据离心力计算离心速度公式根据离心力计算离心速度公式NN：

离心速度离心速度离心速度离心速度RcfRcf：

离心力离心力离心力离心力RR：

离心半径离心半径离心半径离心半径22nn操作方法操作方法质控测定管质控测定管质控测定管质控测定管质控对照管质控对照管质控对照管质控对照管标本测定管标本测定管标本测定管标本测定管标本对照管标本对照管标本对照管标本对照管酸性抑制剂（酸性抑制剂（酸性抑制剂（酸性抑制剂（ulul）10101010蒸馏水（蒸馏水（蒸馏水（蒸馏水（ulul）10101010质控液（质控液（质控液（质控液（ulul）5555样本（样本（样本（样本（ulul）5555糖苷酶抑制剂糖苷酶抑制剂糖苷酶抑制剂糖苷酶抑制剂（ulul）55