抗菌肽生产关键技术及其产业化改Word文件下载.docx
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0.214
5.53
T-1043
0.244
5.50
6916.9
0.226
0.223
5.52
T-1045
5.63
10453.3
0.213
5.62
T-1211
0.219
5.43
8952.8
0.227
0.207
T-1278
0.241
5.48
9926.6
5.55
5.51
T-1298
0.234
7668.2
中等
0.240
T-1344
0.235
5073.6
0.258
0.252
T-1576
0.264
0.239
5.56
0.236
表2高效价抗菌肽菌株的筛选结果之二
T-1588
0.243
5.44
7556.4
较小
0.233
T-1592
0.245
0.246
T-1879
0.238
5.60
T-1966
0.257
0.272
T-2856
0.247
5.66
T-2936
0.266
0.262
5.47
T-3033
0.242
0.255
0.249
2.2T-1045菌株种子及发酵培养基优化
2.2.1T-1045菌株种子培养基配方四因素七水平均匀法设计方案
表3种子培养基配方四因素七水平均匀法设计方案(%)
因子
蔗糖
糖蜜
玉米浆粉
硫酸铵
N1
2.00
4.20
2.20
0.50
N2
2.60
3.80
0.65
N3
1.80
4.00
0.90
0.70
N4
1.40
4.80
1.50
0.60
N5
3.00
1.30
0.55
N6
2.40
4.40
1.10
0.45
N7
1.60
3.40
1.70
0.40
2.2.2T-1045菌株种子培养基配方四因素七水平均匀法实验结果
表4四因素七水平均匀法实验结果之一
项目
16h
20h
24h
0.306
6.28
0.319
7.34
0.290
7.94
0.288
6.22
0.335
6.38
7.91
0.343
6.02
5.81
0.323
7.05
0.254
6.05
7.28
0.292
7.60
0.258
5.99
0.328
6.91
0.356
7.29
0.276
6.12
0.293
6.03
0.351
7.08
0.271
6.11
0.272
7.62
7.53
表5四因素七水平均匀法实验结果之二
配方
配方编号
培养时间
培养基成份
种子配方
N-3
16h
N-16
4.76
2.2
N-2
20h
N-20
N-5
20h和24h
N-24
2.58
0.9
0.51
发酵配方
(一)
25h
3.50
5.30
0.84
0.60
注:
N16、N20、N24分别为16h、20h、24h理论拟合结果
表6四因素七水平均匀法实验结果之三
种子培养时间
OD*50
OD*100
16h种龄
0.286
0.194
6.01
8333
0.204
5.94
0.198
5.87
7.16
0.186
6.13
8576
6.14
0.191
6.11
20h种龄
0.324
7.56
0.212
5.93
8476
0.182
5.90
0.295
7.15
0.210
6.32
9304
6.37
6.44
0.362
6.56
0.176
5.96
11667
0.201
5.89
0.202
5.92
24h种龄
0.32
6.72
0.185
6.33
9106
0.175
6.41
0.171
0.349
6.19
5.97
9367
0.208
0.221
上述结果表明:
种子N-20配方,发酵20h,效价最高达11667µ
2.2.3T-1045菌株种子及发酵培养基综合优化结果
2.2.3.1T-1045菌株种子培养基综合优化结果
表7T-1045菌株种子培养基综合优化结果
PH
生物量
101
6.99
0.283
38.0%
17300
102
5.45
0.115
14.0%
14730
103
6.82
0.217
17.4%
15006
104
7.78
0.248
20.6%
10767
原配方
6.42
0.127
10.0%
11868
2.2.3.2T-1045菌株发酵培养基综合优化结果
表8T-1045菌株发酵培养基优化结果
201
6.70
0.243
16%
24280
202
0.208
11%
25670
203
6.40
0.296
23450
7.15
0.314
14%
11966
2.2.3.3T-1045菌株发酵培养基综合优化结果
表9T-1045菌株发酵培养基综合优化结果
平均效价(µ
301
7.35
0.437
22%
27670
27623
7.40
0.442
27576
302
6.38
0.165
24806
24809
6.34
0.174
24811
303
7.31
0.392
23%
21495
21431
7.28
0.394
27%
21367
304
7.11
0.429
26%
9730
9703
0.389
9675
6.02
0.207
12%
11795
11789
6.06
0.203
11805
0.202
11766
种子培养基以编号101最高,达17300µ
/ml,发酵培养基以编号202最高,达25670µ
/ml,综合优化培养基以编号301最高,达27623µ
/ml,比原配方11789µ
/ml,提高了134.3%,效果极为显著,实现了预定的技术指标。
2.2.4T-1045菌株发酵配方优化及产品载体比较
表10T-1045菌株发酵配方优化及产品载体比较之一
种子培养结果
发酵培养时间
发酵培养结果
OD值
PH值
效价((µ
401
0.187
48h
7.49
20960
402
0.197
6.75
30h
0.194
6.73
18357
403
0.124
6.44
0.215
5.13
21505
表11T-1045菌株发酵配方优化及产品载体比较之二
载体
湿样
干样
水分(%)
/g)
膨化玉米
44.58
8513
13.73
16625
麸皮
49.96
6231
9.25
18944
49.36
6308
13.60
14590
52.40
3335
9.96
41.83
8871
11.95
49.11
6522
7.03
19752
2.2.4.1T-1045菌株发酵配方优化以编号403配方为最佳,发酵效价达21505µ
2.2.4.2抗菌肽产品载体比较了膨化玉米和麸皮,这两者均可作为载体,但麸皮效价稍高。
2.3抗菌肽产品稳定性试验
为了考核抗菌肽产品的稳定性,进行了24个月在室温条件下的效价变化,具体见表25和图1。
表12抗菌肽产品在室温条件下的效价变化
年-月
月平均温度(℃)
2010-10
25.3
22500
2010-11
21.9
22000
2010-12
19.0
21000
2011-01
12.9
20000
2011-02
14.3
19500
2011-03
17.2
19300
2011-04
23.5
19000
2011-05
25.4
18800
2011-06
31.7
18500
2011-07
32.6
18100
2011-08
32.5
17600
2011-09
29.7
17500
2011-10
25.5
17000
2011-11
22.5
16500
2011-12
16.2
16100
2012-01
13.3
15700
2012-02
13.0
15000
2012-03
16.6
14300
2012-04
22.4
14000
2012-05
26.0
12000
2012-06
29.6
11040
2012-07
33.4
10540
2012-08
32.0
10140
2012-09
10040
图1.抗菌肽产品在室温条件下的效价变化
抗菌肽产品在室温条件下,经2年时间起始效价由22500µ
/g下降到10040µ
/g,下降率仅为55.4%。
而1年的下降率仅22.2%,说明该产品具有相当好的稳定性,此项试验仍在继续进行中。
3.0抗菌肽应用效果
3.1抗菌肽对仔猪喂养试验及其效果
3.1.1试验分组:
采用单因子浓度梯度法设计,试验设2组:
对照组、0.3%生物抗菌肽组。
每个组设4个重复,每个重复12头仔猪下表。
试验分组
序号
项目
对照组
试验组
1
生物抗菌肽添加水平
0.3%
2
仔猪头数(头)
48
3.1.2试验材料:
试验选用28日龄断奶、遗传背景相同、体重相近的仔猪随机分组。
3.1.3抗菌肽产品
效价:
8320µ
/g
3.1.4试验日粮:
按试验猪场正常使用日粮,生物抗菌肽按试验分组中的添加水平添加,直接加到配合饲料中制粒或拌料饲喂。
3.1.5试验时间:
2012年1月5日起到2月4日结束,共30天。
3.1.6试验情况:
按猪场正常饲养管理程序进行,试验期间自由采食、饮水,正试期间记录每天的饲料消耗量、腹泻情况,试验开始和试验结束禁饲(自由饮水)24h后空腹称重。
经过30天的饲养试验,仔猪未出现疫情,没有出现死亡现象。
仔猪腹泻方面,对照组偶尔有小猪腹泻,但情况不严重,康复较快,而试验组未腹泻现象极少。
从皮毛质量方面看,试验组明显好于对照组。
试验具体数据如表1:
表13抗菌肽对仔猪养殖试验效果
生物制剂添加水平
3
初始总重(kg)
436
438
4
初始均重(kg/头)
9.10
9.13
5
总耗料量(kg)
986
1102
6
日均采食量(kg/头.天)
0.685
0.765
7
试验末总重(kg)
1045
1183
8
试验末均重(kg/头)
21.77
24.65
9
总增重(kg)
609
745
10
平均日增重(kg/天)
0.423
0.518
11
料肉比
1.62
1.48
3.1.7实验结果分析
由上表试验数据我们可以看出,对照组和试验组仔猪初始重差异不显著,试验组在采食量方面比对照组提高了11.68%,差异显著;
在平均日增重方面,试验组比对照组提高了22.46%,差异显著,生物抗菌肽促生长效果明显;
在料肉比方面,试验组比对照组降低了8.64%,差异显著,提高了养殖经济效益。
日均采食量、平均增重、料肉比试验组与对照组得出的数据如下图所示:
抗菌肽对试验猪日均采食量、平均增重和料肉比试验结果
4.0抗菌肽对大龄猪养殖试验及其效果
4.1试验时间:
2011年11月30日至2012年1月9日。
4.2试验结果:
表14抗菌肽对仔猪饲养试验效果
项目组别
对照一组
试验一组
对照二组
试验二组
开试磅重
639
617
605
589
投料重量
1205
1365
1210
1305
出栏磅重
996
1052
960
987
增重量
357
425
355
398
料肉比率
3.375:
3.211:
3.408:
3.278:
日均增重/头
1.115
1.328
1.109
1.243
4.3试验结果分析:
4.3.1每八头大龄段商品猪为一组,对照组和试验组各两组进行对比试验,第一组肉料比率降低5.1%,头日均增重率提高1.91%;
第二组料肉比率降低3.96%,头日均增重率提高1.21%;
平均肉比率降低4.53%,头日均增重率提高1.56%。
4.3.2按中龄猪每头30公斤开始投食抗菌肽,饲养期120天每头增重量90公斤,可节约饲料4.07公斤,节约饲料成本14.65元,缩短饲养周期三天。
4.3.3由于提高商品猪成活出栏率而提高经济效益尚未计算在内。