抗菌肽生产关键技术及其产业化改Word文件下载.docx

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0.214

5.53

T-1043

0.244

5.50

6916.9

0.226

0.223

5.52

T-1045

5.63

10453.3

0.213

5.62

T-1211

0.219

5.43

8952.8

0.227

0.207

T-1278

0.241

5.48

9926.6

5.55

5.51

T-1298

0.234

7668.2

中等

0.240

T-1344

0.235

5073.6

0.258

0.252

T-1576

0.264

0.239

5.56

0.236

 

表2高效价抗菌肽菌株的筛选结果之二

T-1588

0.243

5.44

7556.4

较小

0.233

T-1592

0.245

0.246

T-1879

0.238

5.60

T-1966

0.257

0.272

T-2856

0.247

5.66

T-2936

0.266

0.262

5.47

T-3033

0.242

0.255

0.249

2.2T-1045菌株种子及发酵培养基优化

2.2.1T-1045菌株种子培养基配方四因素七水平均匀法设计方案

表3种子培养基配方四因素七水平均匀法设计方案(%)

因子

蔗糖

糖蜜

玉米浆粉

硫酸铵

N1

2.00

4.20

2.20

0.50

N2

2.60

3.80

0.65

N3

1.80

4.00

0.90

0.70

N4

1.40

4.80

1.50

0.60

N5

3.00

1.30

0.55

N6

2.40

4.40

1.10

0.45

N7

1.60

3.40

1.70

0.40

2.2.2T-1045菌株种子培养基配方四因素七水平均匀法实验结果

表4四因素七水平均匀法实验结果之一

项目

16h

20h

24h

0.306

6.28

0.319

7.34

0.290

7.94

0.288

6.22

0.335

6.38

7.91

0.343

6.02

5.81

0.323

7.05

0.254

6.05

7.28

0.292

7.60

0.258

5.99

0.328

6.91

0.356

7.29

0.276

6.12

0.293

6.03

0.351

7.08

0.271

6.11

0.272

7.62

7.53

表5四因素七水平均匀法实验结果之二

配方

配方编号

培养时间

培养基成份

种子配方

N-3

16h

N-16

4.76

2.2

N-2

20h

N-20

N-5

20h和24h

N-24

2.58

0.9

0.51

发酵配方

(一)

25h

3.50

5.30

0.84

0.60

注:

N16、N20、N24分别为16h、20h、24h理论拟合结果

表6四因素七水平均匀法实验结果之三

种子培养时间

OD*50

OD*100

16h种龄

0.286

0.194

6.01

8333

0.204

5.94

0.198

5.87

7.16

0.186

6.13

8576

6.14

0.191

6.11

20h种龄

0.324

7.56

0.212

5.93

8476

0.182

5.90

0.295

7.15

0.210

6.32

9304

6.37

6.44

0.362

6.56

0.176

5.96

11667

0.201

5.89

0.202

5.92

24h种龄

0.32

6.72

0.185

6.33

9106

0.175

6.41

0.171

0.349

6.19

5.97

9367

0.208

0.221

上述结果表明:

种子N-20配方,发酵20h,效价最高达11667µ

2.2.3T-1045菌株种子及发酵培养基综合优化结果

2.2.3.1T-1045菌株种子培养基综合优化结果

表7T-1045菌株种子培养基综合优化结果

PH

生物量

101

6.99

0.283

38.0%

17300

102

5.45

0.115

14.0%

14730

103

6.82

0.217

17.4%

15006

104

7.78

0.248

20.6%

10767

原配方

6.42

0.127

10.0%

11868

2.2.3.2T-1045菌株发酵培养基综合优化结果

表8T-1045菌株发酵培养基优化结果

201

6.70

0.243

16%

24280

202

0.208

11%

25670

203

6.40

0.296

23450

7.15

0.314

14%

11966

2.2.3.3T-1045菌株发酵培养基综合优化结果

表9T-1045菌株发酵培养基综合优化结果

平均效价(µ

301

7.35

0.437

22%

27670

27623

7.40

0.442

27576

302

6.38

0.165

24806

24809

6.34

0.174

24811

303

7.31

0.392

23%

21495

21431

7.28

0.394

27%

21367

304

7.11

0.429

26%

9730

9703

0.389

9675

6.02

0.207

12%

11795

11789

6.06

0.203

11805

0.202

11766

种子培养基以编号101最高,达17300µ

/ml,发酵培养基以编号202最高,达25670µ

/ml,综合优化培养基以编号301最高,达27623µ

/ml,比原配方11789µ

/ml,提高了134.3%,效果极为显著,实现了预定的技术指标。

2.2.4T-1045菌株发酵配方优化及产品载体比较

表10T-1045菌株发酵配方优化及产品载体比较之一

种子培养结果

发酵培养时间

发酵培养结果

OD值

PH值

效价((µ

401

0.187

48h

7.49

20960

402

0.197

6.75

30h

0.194

6.73

18357

403

0.124

6.44

0.215

5.13

21505

表11T-1045菌株发酵配方优化及产品载体比较之二

载体

湿样

干样

水分(%)

/g)

膨化玉米

44.58

8513

13.73

16625

麸皮

49.96

6231

9.25

18944

49.36

6308

13.60

14590

52.40

3335

9.96

41.83

8871

11.95

49.11

6522

7.03

19752

2.2.4.1T-1045菌株发酵配方优化以编号403配方为最佳,发酵效价达21505µ

2.2.4.2抗菌肽产品载体比较了膨化玉米和麸皮,这两者均可作为载体,但麸皮效价稍高。

2.3抗菌肽产品稳定性试验

为了考核抗菌肽产品的稳定性,进行了24个月在室温条件下的效价变化,具体见表25和图1。

表12抗菌肽产品在室温条件下的效价变化

年-月

月平均温度(℃)

2010-10

25.3

22500

2010-11

21.9

22000

2010-12

19.0

21000

2011-01

12.9

20000

2011-02

14.3

19500

2011-03

17.2

19300

2011-04

23.5

19000

2011-05

25.4

18800

2011-06

31.7

18500

2011-07

32.6

18100

2011-08

32.5

17600

2011-09

29.7

17500

2011-10

25.5

17000

2011-11

22.5

16500

2011-12

16.2

16100

2012-01

13.3

15700

2012-02

13.0

15000

2012-03

16.6

14300

2012-04

22.4

14000

2012-05

26.0

12000

2012-06

29.6

11040

2012-07

33.4

10540

2012-08

32.0

10140

2012-09

10040

图1.抗菌肽产品在室温条件下的效价变化

抗菌肽产品在室温条件下,经2年时间起始效价由22500µ

/g下降到10040µ

/g,下降率仅为55.4%。

而1年的下降率仅22.2%,说明该产品具有相当好的稳定性,此项试验仍在继续进行中。

3.0抗菌肽应用效果

3.1抗菌肽对仔猪喂养试验及其效果

3.1.1试验分组:

采用单因子浓度梯度法设计,试验设2组:

对照组、0.3%生物抗菌肽组。

每个组设4个重复,每个重复12头仔猪下表。

试验分组

序号

项目

对照组

试验组

1

生物抗菌肽添加水平

0.3%

2

仔猪头数(头)

48

3.1.2试验材料:

试验选用28日龄断奶、遗传背景相同、体重相近的仔猪随机分组。

3.1.3抗菌肽产品

效价:

8320µ

/g

3.1.4试验日粮:

按试验猪场正常使用日粮,生物抗菌肽按试验分组中的添加水平添加,直接加到配合饲料中制粒或拌料饲喂。

3.1.5试验时间:

2012年1月5日起到2月4日结束,共30天。

3.1.6试验情况:

按猪场正常饲养管理程序进行,试验期间自由采食、饮水,正试期间记录每天的饲料消耗量、腹泻情况,试验开始和试验结束禁饲(自由饮水)24h后空腹称重。

经过30天的饲养试验,仔猪未出现疫情,没有出现死亡现象。

仔猪腹泻方面,对照组偶尔有小猪腹泻,但情况不严重,康复较快,而试验组未腹泻现象极少。

从皮毛质量方面看,试验组明显好于对照组。

试验具体数据如表1:

表13抗菌肽对仔猪养殖试验效果

生物制剂添加水平

3

初始总重(kg)

436

438

4

初始均重(kg/头)

9.10

9.13

5

总耗料量(kg)

986

1102

6

日均采食量(kg/头.天)

0.685

0.765

7

试验末总重(kg)

1045

1183

8

试验末均重(kg/头)

21.77

24.65

9

总增重(kg)

609

745

10

平均日增重(kg/天)

0.423

0.518

11

料肉比

1.62

1.48

3.1.7实验结果分析

由上表试验数据我们可以看出,对照组和试验组仔猪初始重差异不显著,试验组在采食量方面比对照组提高了11.68%,差异显著;

在平均日增重方面,试验组比对照组提高了22.46%,差异显著,生物抗菌肽促生长效果明显;

在料肉比方面,试验组比对照组降低了8.64%,差异显著,提高了养殖经济效益。

日均采食量、平均增重、料肉比试验组与对照组得出的数据如下图所示:

抗菌肽对试验猪日均采食量、平均增重和料肉比试验结果

4.0抗菌肽对大龄猪养殖试验及其效果

4.1试验时间:

2011年11月30日至2012年1月9日。

4.2试验结果:

表14抗菌肽对仔猪饲养试验效果

项目组别

对照一组

试验一组

对照二组

试验二组

开试磅重

639

617

605

589

投料重量

1205

1365

1210

1305

出栏磅重

996

1052

960

987

增重量

357

425

355

398

料肉比率

3.375:

3.211:

3.408:

3.278:

日均增重/头

1.115

1.328

1.109

1.243

4.3试验结果分析:

4.3.1每八头大龄段商品猪为一组,对照组和试验组各两组进行对比试验,第一组肉料比率降低5.1%,头日均增重率提高1.91%;

第二组料肉比率降低3.96%,头日均增重率提高1.21%;

平均肉比率降低4.53%,头日均增重率提高1.56%。

4.3.2按中龄猪每头30公斤开始投食抗菌肽,饲养期120天每头增重量90公斤,可节约饲料4.07公斤,节约饲料成本14.65元,缩短饲养周期三天。

4.3.3由于提高商品猪成活出栏率而提高经济效益尚未计算在内。

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