水质测定1Word格式文档下载.docx
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2、50mL酸性滴定管
3、250mL锥形瓶
3）试剂
1、浓硫酸：
化学纯，比重1.84
2、硫酸锰溶液：
称取480g硫酸锰（MnSO4·
4H2O或364gMnSO4·
H2O）溶于蒸馏水中，过滤后稀释至1000mL。
3、碱性碘化钾溶液：
称取500g氢氧化钠溶于500mL蒸馏水中，另称取150g碘化钾（或135克碘化钠）溶于200mL蒸馏水中，待氢氧化钠溶液冷却后，将两溶液合并，混匀，用蒸馏水稀释至1000mL,静置24小时，使碳酸钠下沉，倾出上层清夜，贮于棕色瓶中备用。
4、0.1N硫代硫酸钠溶液：
取分析纯硫代硫酸钠（NaS2O3·
5H2O）22.5g溶于煮沸冷却后的蒸馏水中，加入0.2g无水碳酸钠，稀释至1000mL，贮于棕色瓶中，使用前用重铬酸钾标定浓度。
硫代硫酸钠的标定：
取优级纯重铬酸钾（K2CrO7）在105～110℃烘干2小时冷却后，准确称取0.1～0.2g左右，加蒸馏水50mL使其溶解，加2g碘化钾晶体及5mL浓硫酸混合后稀释至200mL，于暗处静置5min后，自滴定管加入硫代硫酸钠溶液，至变成淡黄色时加入1mL1%淀粉溶液，继续滴定至淡蓝色消失而变为绿色为止。
根据滴定所用硫代硫酸钠毫升数与重铬酸钾量，按下式计算出硫代硫酸钠的浓度。
硫代硫酸钠N＝
g－称取重铬酸钾量（g）
V－滴定时所消耗硫代硫酸钠溶液用量
0.04904－重铬酸钾毫克当量
5、0.01N硫代硫酸钠标准溶液：
用吸管吸取上述经过标定的硫代硫酸钠溶液稀释10倍，配成0.01N标准溶液。
6、1％淀粉溶液：
称取1g可溶性淀粉，用少量水调成糊状，再用刚煮沸的蒸馏水冲稀至100mL，冷却后加入0.1g水杨酸防腐。
4）操作步骤
1、打开已盛满水样的溶解氧瓶塞，用吸管沿瓶壁加入1mL硫酸锰溶液、2mL碱性碘化钾溶液，盖好瓶塞颠倒混合数次，静置。
待沉淀物降至瓶内一半时，再颠倒混合一次，待沉淀物下降至瓶底。
一般在取样现场固定。
2、打开瓶塞用吸管沿瓶壁加入2mL浓硫酸，盖好瓶盖，颠倒混合均匀，至沉淀全部溶解为止，放置暗处5分钟。
3、用移液管吸管吸取100mL（或50mL）此液于250mL锥形瓶中，自滴定管加入0.01N硫代硫酸钠标准溶液至淡黄色时加1mL1％淀粉溶液摇匀，继续滴定至蓝色刚好褪去为止，记录硫代硫酸钠标准液用量。
5）计算
溶解氧（O2mg/L）=
式中：
N－硫代硫酸钠标准溶液当量浓度
V1－硫代硫酸钠标准溶液消耗量（mL）
V－水样体积
6）注意事项
1、如果水样呈强酸性或强碱性，可用氢氧化钠或硫酸溶液调至中性后测定。
2、当水中含有大量有机物，还原性物质或有效氯>
3mg/L，时，水样在测定前先用高锰酸钾预处理，方法如下：
取下溶解氧瓶塞，用吸管沿瓶壁加入数滴浓硫酸（中性水样加1～2滴）使水样呈酸性，沿瓶壁逐滴加入0.2N高锰酸钾溶液，盖紧瓶塞，颠倒摇匀，使水样保持淡红色5分钟不褪，然后用以同样操作方法加入0.2N草酸钠溶液，使高锰酸钾红色刚褪去为止（切勿过量），然后按上述测定步骤进行测定。
3、当水样含亚硝酸盐氮较高时会影响滴定终点，即一到终点蓝色立即重新出现，使结果偏高。
采用叠氮化钠可以排除亚硝酸盐氮干扰。
方法是：
将叠氮化钠（NaN3）配入碱性碘化钾溶液中，每升加入10g（要将NaN3先溶于蒸馏水中），或将5％NaN3溶液在用浓硫酸溶解沉淀之前向溶解氧瓶中加入数滴。
4、如水样中含有较多铁盐，在测定溶解氧前，应先加40％氟化钾溶液1mL，使氟化钾与铁生成络合物，以去除铁的影响。
5、如水样中含有游离氯或其他氧化剂时，应预先于水样中加入硫代硫酸钠去除。
即同一水样放入两个溶解氧瓶内，取其中一瓶加5mL 1＋5硫酸溶液和1g碘化钾，摇匀，此时游离出碘。
以淀粉做指示剂，用硫代硫酸钠滴定至蓝色刚褪，记下用量。
于另一瓶水样中，加入同样量的硫代硫酸钠摇匀后，按溶解氧操作步骤测定。
6、水样中溶解氧随温度而变，亦随水样中微生物分解其中有机物不断被消耗而下降，因此取样后要立即测定溶解氧，如来不及，要立即将水样固定。
在取样过程中要特别小心防止水样充氧。
测定生化需氧量（BOD5）操作方法
稀释接种法
五日生化需氧量的测定采用稀释法，即取原水样或经适当稀释的水样，将上述水样分成二份，一份立即测定当天的溶解氧含量，而将另一份放入20℃恒温培养箱内，培养五天后再测定其溶解氧含量，而者之差，即为五天生化需氧量。
一般水样中溶解氧有限，因此需用含有一定养份和含有饱和溶解氧的水（称稀释水）稀释，使培养后减少的溶解氧占培养前的溶解氧约40%～70%为宜。
除测定溶解氧所需仪器外还需下列仪器：
1、自动调节温度培养箱（20±
1℃）
2、2000mL锥形瓶
3、250mL或500mL容量瓶
1、氯化钙溶液：
称取27.5g化学纯无水氯化钙溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。
2、三氯化铁溶液：
称取0.25g化学纯三氯化铁（FeCl3·
6H2O）溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。
3、硫酸镁溶液：
称取22.5g化学纯硫酸镁（MgSO4·
7H2O）溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。
4、磷酸盐缓冲溶液：
称取8.5g磷酸二氢钾，21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.42g磷酸氢二钠和1.72g氯化铵（NH4Cl）溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。
5、稀释水：
将一定量蒸馏水装入2000mL锥形瓶置于20℃培养箱中放置约24小时，使水中溶解氧含量达8mg/L左右，使用前每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸缓冲溶液各1mL，并混合均匀。
稀释水的pH值应为7.2，其BOD5应小于0.2mg/L。
当水样层pH过高或过低，或含有抑制微生物生长的工业废水时，这时的稀释水应接种。
接种液可采用生活污水或同行业污水处理厂的出水，接种液投加量视接种液本身的BOD5大小而定，据经验：
若接种液BOD5为100～150mg/L，则向稀释水投加0.5～0.3％接种液；
若BOD5为60～70mg/L，则加1％左右。
加入接种液量以接种的稀释水的BOD5在0.6～1.0mg/L为宜。
1、水样预处理：
水样pH若超出6.5～8.5范围时，可用盐酸或氢氧化钠溶液调节pH近于7，但用量不得超过水样体积的0.5％，否则改用混酸或浓碱。
2、决定水样稀释倍数：
水样是否要稀释以及稀释倍数多少视被污染的程度而定。
对于清洁地面水或河水可不用稀释直接检测；
而污水则要稀释，稀释倍数可参考水样的化学需氧量（CODMn或CODCr）来决定，对于纺织印染废水的参考稀释倍数一般采用CODMn×
（0.3～0.5）。
另外也可从估算水样BOD5来决定稀释倍数，据实践：
当水样BOD5为100mg/L，约稀释比为3.5～5％；
BOD5为150mg/L，约为2～4％；
BOD5为200mg/L，约为1.5～2％；
BOD5为250mg/L，约为1.2～1.8％。
3、根据已决定的稀释倍数，正确计算并量取所需的污水数量与稀释水数量沿着容器壁加至刻度，小心摇匀，将此溶液沿壁倾入同一编号的二个溶解氧瓶中，盖好瓶塞。
一个水样应同时做2～3个稀释倍数。
4、将几个稀释倍数的水样（包括空白稀释水）其中一瓶用稀释水灌满瓶口凹处，放入20℃培养箱培养，每天检查培养箱的温度及溶解氧瓶口的水封情况。
另一瓶立即测定溶解氧值，其操作见溶解氧项目。
5、经过五天培养后，取出培养瓶，弃去封口水，测定剩余的溶解氧。
选取经20℃培养五天后溶解氧降低在40～70％范围内的结果。
1、稀释水不需要接种时：
BOD5（mg/L）＝
2、稀释水需要接种时：
f＝
D1－水样在培养前的溶解氧
D2－水样在培养后的溶解氧
B1－稀释水（或接种稀释水）在培养前的溶解氧
B2－稀释水（或接种稀释水）在培养后的溶解氧
f1－稀释水在培养液中所占百分比
f2－水样在培养液中所占百分比
f2－接种液在培养液中所占百分比
x－接种液在稀释水中所占百分比
f－接种液的校正系数
1、接种液应在使用时加入稀释水中，现配现用。
2、稀释水的pH值以7.0为宜，超过或不到此数值范围时，可用盐酸或碳酸氢钠加以调节。
3、要经常检查培养箱内溶解氧瓶口水封是否完好，每天要补充瓶口水封水，以避免水样与空气接触。
4、其余见溶解氧注意事项。
测定化学需氧量（COD）操作方法
酸性高锰酸钾法
使用足量的高锰酸钾在酸性溶液中，将还原性物质氧化，多余的高锰酸钾用过量的草酸钠还原，再用高锰酸钾溶液滴定至终点。
1、电热板或电炉
2、250mL锥形瓶
3、50mL酸性滴定管
4、移液管
1、0.01N草酸钠标准溶液：
称取在105～110℃干燥2小时的优级纯草酸钠（NaC2O4）6.705g溶于蒸馏水中，移入1000mL容量瓶内，加水至刻度，此液浓度为0.1N。
将此液稀释10倍，即为0.01N草酸钠标准溶液。
2、高锰酸钾贮备液：
称取3.5g高锰酸钾溶于1L蒸馏水，煮沸15分钟，放置过夜，用G3砂芯漏斗过滤后，贮于棕色瓶中保存。
3、0.01N高锰酸钾溶液：
吸取50mL上述高锰酸钾溶液，用水稀释至500mL，贮于棕色瓶。
使用当天应进行浓度标定求出校正系数K值
4、1+3硫酸：
将1份浓硫酸加在3份蒸馏水中。
1、称取适量摇匀水样（使测定结果所消耗的0.01N高锰酸钾溶液在3～7mL之间），用蒸馏水补充之100mL，放入250mL锥形瓶内，加入5mL1+3硫酸、10mL0.01N高锰酸钾溶液、玻璃珠数粒。
放在电炉或电热板上加热煮沸十分钟。
2、取下锥形瓶，趁热用移液管加入10mL0.01N草酸钠标准溶液，摇匀，待红色褪尽后，再用0.01N高锰酸钾溶液滴至微红色，记录用量为V1。
同时用蒸馏水作空白试验，记录高锰酸钾溶液用量为V2。
3、高锰酸钾溶液浓度的标定：
将上述已滴定完毕的溶液加热至约70℃准确加入10mL0.01N草酸钠标准溶液。
立即以0.01N高锰酸钾溶液滴定至微红色。
记录用量为V3，按下式求得高锰酸钾溶液的校正系数K值
K＝
化学耗氧量
CODMn（mg/L）=
V1－滴定水样时，高锰酸钾溶液的消耗量（mL）
V2－滴定蒸馏水时，高锰酸钾溶液的消耗量（mL）
C－蒸馏水在水样中的百分比
V－水样体积（mL）
8－氧的克当量
N－草酸钠标准溶液浓度（mol/L）
1、煮沸完毕后，溶液仍应保持淡红色，如全部褪去，说明高锰酸钾的用量不够，则必须减少水样体积。
2、如水样中氯离子高于300mg/L以上，则消耗高锰酸钾溶液量偏高，此时应改用碱性高锰酸钾法测定。
3、在酸性条件下，草酸钠和高锰酸钾的反应温度应保持在60～80℃所以滴定操作必须趁热进行。
重铬酸钾法
在强酸性溶液中，用重铬酸钾氧化水样中的还原性物质。
过量的重铬酸钾以试亚铁灵作为指示剂，用硫酸亚铁铵溶液回滴，由消耗的重铬酸钾量计算出水样中还原性物质被氧化所消耗氧的量。
1、回流装置：
带250mL（或500mL）锥形瓶的全玻璃回流装置
2、电热板或电炉
4、250mL锥形瓶
1、0.25N重铬酸钾标准溶液：
称取预先在120℃烘干2小时的优级纯重铬酸钾12.258g溶于蒸馏水中，移入1000mL容量瓶，稀释至刻度。
2、试亚铁灵指示剂：
称取1.485g化学纯邻菲啰啉（C12H8N2·
H2O）与0.695g化学纯硫酸亚铁（FeSO4·
7H2O）溶于蒸馏水中，稀释至100mL，贮于棕色瓶中。
3、硫酸亚铁铵标准溶液：
称取49.3g分析纯硫酸亚铁铵[Fe（NH4）2（SO4）·
6H2O]溶于蒸馏水中，加20mL浓硫酸，冷却后稀释至1000mL，此溶液浓度约0.125N。
临用前，用重铬酸钾溶液标定。
标定方法：
准确吸取10mL重铬酸钾标准溶液于250mL锥形瓶中，加水稀释至110mL，加30mL浓硫酸，摇匀冷却后，加3滴试亚铁灵指示剂，用硫酸亚铁铵溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录用量V。
硫酸亚铁铵当量浓度=
4、浓硫酸—硫酸银溶液：
于500mL浓硫酸中加5g硫酸银，放置1～2天，不时摇动使其溶解。
5、硫酸汞：
结晶或粉末
1、取20mL混合均匀的水样（或适量水样稀释至20mL）置250mL磨口回流锥形瓶中，准确加入10mL重铬酸钾标准溶液及数粒玻璃珠，缓慢加入30mL硫酸—硫酸银溶液，摇匀，连接磨石回流冷凝管，加热回流2小时（自开始沸腾时计时）。
2、冷却后，用90mL蒸馏水冲洗冷凝管壁，取下锥形瓶。
溶液总体积不得少于140mL，否则因酸度太大，滴定终点不明显。
3、溶液再度冷却后，加3滴试亚铁灵指示剂，用硫酸亚铁铵标准溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录用量。
4、测定水样的同时，取20mL蒸馏水，按同样操作步骤作空白试验，记录消耗的硫酸亚铁铵溶液用量。
5）计算：
化学耗氧量（CODCrmg/L）=
N－硫酸亚铁铵的当量浓度
V0－滴定空白时硫酸亚铁铵标准溶液用量（mL）
V1－滴定水样时硫酸亚铁铵标准溶液用量（mL）
V－水样的体积（mL）
1、氯离子在酸性条件下，能被重铬酸钾所氧化生成氯气，消耗一定量重铬酸钾，影响结果偏高。
若水样中氯离子含量超过30mg/L时，应先加入0.4g硫酸汞与于流锥形瓶中，再加入20mL水样，摇匀，其余操作同上。
2、对于CODCr高的水样，可先取上述操作所需体积1/10的水样和试剂于15×
150mm酸质玻璃试管中，摇匀，加热后观察是否变成绿色。
如溶液显绿色，再适当减少水样取样量，直至溶液不变色为止。
3、每次测定时，应对硫酸亚铁铵标准溶液进行标定。
测定氨氮（NH3-N）操作方法
氨氮是指以游离的氨或铵离子形式存在的氮，测定氨氮常用的纳氏比色法和蒸馏滴定法（容量法）。
前者用于检测清洁的饮用水、河水、天然水；
后者用于检测色度高、浊度大而氨氮浓度又比较高的水样。
蒸馏－滴定法
氨在磷酸盐缓冲液作用下，经蒸馏稀释的氨用硼酸溶液吸收，以甲基红、亚甲蓝混合溶液作指示剂，用标准硫酸溶液滴定，其终点由绿色变成暗紫色为终点。
1、500mL凯氏烧瓶
2、直管冷凝管
4、氮球
5、酸性滴定管
6、电炉
水样稀释及试剂配制均用无氨水
1、无氨水配制
①蒸馏法：
每升蒸馏水中加0.1mL浓硫酸进行重蒸馏，弃去50mL初馏液，接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存
②离子交换法：
使蒸馏水通过强酸性阳离子交换树脂柱。
2、磷酸盐缓冲溶液：
称取7.15g分析纯无水磷酸二氢钾及45.08g分析纯磷酸氢二钾溶于少量蒸馏水中，稀释至500mL。
3、标准硫酸溶液（0.02N）：
吸取5.6mL分析纯浓硫酸，用无氨水稀释定容至1000mL，再用此溶液稀释10倍，并用无水碳酸钠标定。
称取经180℃干燥2小时的优质纯无水碳酸钠约0.2g（称准至0.0001g）于锥形瓶中加100mL煮沸过的蒸馏水，待碳酸钠溶解后加2滴甲基橙指示剂，用硫酸溶液滴定至溶液转为橙红色止，记录用量，按下式计算硫酸溶液浓度
硫酸溶液当量浓度（N）＝
4、2％硼酸溶液：
称取20g分析纯硼酸，溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。
5、甲基橙指示剂：
称取0.1g甲基橙溶于100mL蒸馏水。
6、混合指示剂：
称取0.1g甲基红溶于50mL95％乙醇中，另外称取0.05g亚甲蓝溶于25mL95％乙醇中，取前者二份，后者一份混合即成（需每月配制1次）
1、取适量（50～100mL）水样放入500mL凯氏烧瓶中，加无氨水至250mL，再加10mL磷酸盐缓冲溶液，接好蒸馏装置，加热蒸馏，用50mL2％硼酸溶液吸收馏出液，蒸馏速度控制在每分钟6～10mL，导管尖端浸没在硼酸吸收液下，蒸馏至馏出液检不出氨为止。
2、在收集的馏出液中，加入2滴混合指示剂，溶液显示绿色，然后用标准硫酸溶液滴定，直至溶液由绿色转变为暗紫色时为止。
记录消耗标准硫酸溶液的体积。
3、同时作空白的试验测定，并记录消耗标准硫酸溶液的体积
氨氮（mg/L）＝
式中：
V0－空白试验消耗标准硫酸体积（mL）
V1－水样试验消耗标准硫酸体积（mL）
N－标准硫酸溶液当量浓度
V－水样体积（mL）
14－氮克当量
1、馏出液应保持绿色，如变为灰紫色表示取水样过多，要重做！
2、检查蒸馏装置是否漏气，导管是否插入吸收液内。
测定总氮操作方法
总氮包括有机氮、氨氮、亚硝酸氮、硝酸氮。
水中含氮物质来自含氮工业废水及蛋白质的分解。
水样中含氮化合物在硫酸铜的催化作用下，加浓硫酸消解，使其转变成硫酸氢铵，然后加氢氧化钠蒸馏释放出氨，并吸收于硼酸溶液中，最后用标准硫酸溶液滴定。
1、电炉
2、500mL凯氏烧瓶
3、直管冷凝管
4、锥形瓶500mL
5、氮球
6、酸性滴定管
1、浓硫酸
2、锌粉
3、无水硫酸钠
4、10％硫酸铜溶液
5、50％氢氧化钠溶液
6、2％硼酸溶液
7、标准硫酸溶液：
配方见氨氮测定
8、混合指示剂：
1、吸取适量水样（见下表）于凯氏烧瓶内，先后加入0.5g锌粉、1g无水硫酸钠、5mL10%硫酸铜溶液及10mL浓硫酸，瓶口加盖一个小漏斗，然后置于电炉上加热消解，直至凯氏烧瓶内溶液呈透明的黄绿色为止。
水样中总氮含量（mg/L）
10
10～20
20～50
50～100
取水样体积（mL）
250
100
50
25
2、待完全冷却后，慢慢加入250mL无氨蒸馏水，并沿瓶口加入40mL50%氢氧化钠溶液。
3、立即把凯氏烧瓶与氮球、冷凝管接好（注意防止漏气），并将冷凝管的导管插入500mL锥形瓶中，瓶内预先盛有50mL2%硼酸溶液及2滴混合指示剂。
4、摇动凯氏烧瓶，此时瓶内应生成绿蓝色或灰色沉淀（Cu（OH）2）（如不生成沉淀表示氢氧化钠加的不够，应适量增加），检查凯氏烧瓶与氮球、冷凝管接妥后，才加热蒸馏，约蒸出200mL蒸馏液，降低锥形瓶使导管离开液面，继续蒸馏以冲洗导管，至馏出液检不出氨为止。
5、取出锥形瓶，用标准硫酸溶液滴定，当溶液颜色由绿色转变成暗紫色时，表示滴定终点已到，记录消耗标准硫酸溶液体积。
6、同时做空白试验，并记录消耗标准硫酸溶液体积。
总氮（mg/L）＝
1、消解过程应在通风橱进行。
2、加氢氧化钠后氨易蒸发，必须立即将凯氏烧瓶与冷凝管、锥形瓶连接好进行蒸馏，以免影响结果准确性。
3、为防止消解及蒸馏过程中出现崩爆现象，应加4～5粒玻璃珠。
测定磷操作方法
在天然水和废水中，磷几乎都以各种磷酸盐的形式存在，它们分为正磷酸盐、缩合磷酸盐和有机结合的磷酸盐。
水中总磷的测定，包括所有的正磷酸盐和缩合磷酸盐，既包括溶解的和颗粒的，也包括有机的和无机的。
氯化亚锡法
水样经消解后将各种形式的磷酸盐转化为正磷酸盐。
在酸性条件下，正磷酸盐与钼酸铵反应，生成磷钼杂多酸。
当加入还原剂氯化亚锡后，则转变成蓝色络合物。
1、分光光度计
2、125mL凯氏烧瓶
3、50mL具塞比色管
4、电炉
5、50mL容量瓶
6、20mm比色皿
2、浓硝酸及1＋3硝酸溶液
3、1N氢氧化钠溶液
4、1％酚酞指示剂
5、钼酸铵溶液：
称取8.25g钼酸铵溶于约75mL蒸馏水中，另取100mL浓硫酸徐徐注入300mL蒸馏水中，冷却后，将钼酸铵溶液在搅拌下注入硫酸溶液中，加蒸馏水至500mL，贮于聚乙烯瓶中。
6、氯化亚锡溶液：
溶解2.5g氯化亚锡于100mL的甘油中，放在水域中加热并用玻璃棒搅拌促溶。
这种试剂很稳定，无需用特殊方法保存。
7、磷酸盐标准贮备液：
称取于110℃干燥2小时的优级纯磷酸二氢钾0.1432g，溶于蒸馏水中，稀释至100mL，此溶液1mL相当于0.1mg磷酸盐。
8、磷酸盐标准溶液：
临用时，吸取上述贮备液5mL置于50mL容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，混匀。
此溶液1mL相当于0.01mg磷酸盐。
1、标准曲线的绘制：
取数支50mL具塞比色管，分别加入磷酸盐标准液0、0.5、1.0、3.0、5.0、10.0、15.0mL，加蒸馏水至标线。
向比色管中加入4mL钼酸铵溶液，混匀。
加入0.25mL（10滴）氯化亚锡溶液，充分混匀。
在室温（20℃）放置10分钟后，用20mm比色皿于700纳米处，以零浓度溶液为参比测量吸光度。
根据磷的含量及其相应吸光度绘制校准曲线。
2、取适量水样（约50mL）于125mL凯氏烧瓶，加入1mL浓硫酸和5mL浓硝酸，放入3～4粒玻璃珠，在电炉上加热消解至冒白烟，如液体尚未清澈透明，放冷后，加5mL浓硝酸，再加热至冒白烟。
3、取下烧瓶冷却后，大约加入20mL蒸馏水，加一滴酚酞指示剂，加1N氢氧化钠溶液中和至烧瓶内溶液变为淡粉色，然后加1mol/L硫酸溶液至红色刚好褪去。
将烧瓶中溶液转入50mL容量瓶中，最后用蒸馏水稀释至刻度。
4、吸取5～10mL上述溶液（视磷酸盐含量多少而定）于50mL比色管中，用蒸馏水稀释至标线。
以下按绘制校准曲线的步骤进行显色、测量吸光度。
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