全程CRP临床应用.ppt

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全程C-反应蛋白的检测及临床应用乌鲁木齐温泉康复医院乌鲁木齐温泉康复医院郝万鹏郝万鹏一、特点一、特点二、定义二、定义三、三、CRP的发现及结构的发现及结构四、四、CRP的生理作用的生理作用五、常规五、常规CRP、hsCRP、全程、全程CRP的区别的区别六、检测方法六、检测方法七、健康人七、健康人CRP浓度正常参考范围浓度正常参考范围八、八、CRP检测的临床意义检测的临床意义九、全程九、全程CRP的应用建议的应用建议十、全程十、全程CRP的应用小结的应用小结全程全程CRPCRP（hsCRP+常规常规CRP）一、特点一、特点全程全程CRP检测项目，包括：

超检测项目，包括：

超敏敏CRP和常规和常规CRP检测，检测线检测，检测线性范围：

性范围：

0.5-200mg/L,一次检测同一次检测同时出具超敏时出具超敏CRP和常规和常规CRP两个两个检测结果，增加了检测结果，增加了CRP的临床运用的临床运用价值。

价值。

二二、定义、定义CRP是一种急性相蛋白，健康人血清中浓度是一种急性相蛋白，健康人血清中浓度很低，当人体受了微生物等多种因子侵袭后，人很低，当人体受了微生物等多种因子侵袭后，人体的血清在几小时后很快产生一种急性期反应蛋体的血清在几小时后很快产生一种急性期反应蛋白，这种蛋白以与肺炎球菌白，这种蛋白以与肺炎球菌C多糖体超反应。

多糖体超反应。

CRP由肝细胞合成，在人的血清、脑脊液、胸腹由肝细胞合成，在人的血清、脑脊液、胸腹水等多种体液中均可测出。

水等多种体液中均可测出。

三、三、C-反应蛋白反应蛋白（CRP）的发现与结构）的发现与结构19301930年由年由TilletTillet和和FrancisFrancis发现发现一种能在一种能在CaCa2+2+存在时存在时与肺炎链球菌与肺炎链球菌的荚膜的荚膜CC多糖结合多糖结合的蛋白质的蛋白质19411941年，年，AveryAvery等先后证实这是一等先后证实这是一种急性感染时出现的蛋白质（病情种急性感染时出现的蛋白质（病情恢复后恢复后/健康人血清中没有这种物健康人血清中没有这种物质）质）结构对称的盘状五聚体结构对称的盘状五聚体，归于五聚，归于五聚素家族素家族l由由55个完全相同的非糖基化单体以个完全相同的非糖基化单体以非共价键联接形成非共价键联接形成l每个单体每个单体每个含每个含206206个氨基酸残基个氨基酸残基（相对分子质量相对分子质量23017）C反应蛋白（c-reactiveprotein，CRP）C-反应蛋白反应蛋白（CRP）的生成）的生成由肝细胞在由肝细胞在IL6、IL2、TNF刺激下刺激下合成，炎症局部巨噬细胞也可少量合成，炎症局部巨噬细胞也可少量产生。

产生。

正常合成率正常合成率1-10mg/d，急性炎症时，急性炎症时每天合成每天合成1g。

半衰期半衰期19h，不耐热，不耐热，6530min破坏，沉淀系数破坏，沉淀系数615715S，等电，等电点点4182。

不能通过胎盘，在体内分布甚广，不能通过胎盘，在体内分布甚广，除血液外，胸水、腹水、心包液、除血液外，胸水、腹水、心包液、关节液中均可测出。

关节液中均可测出。

四、四、C-反应蛋白反应蛋白（CRP）的生理作用）的生理作用引发对侵入细胞的免疫调节和吞噬作用，引发对侵入细胞的免疫调节和吞噬作用，与配体结合，激活补体，调理吞噬功能，与配体结合，激活补体，调理吞噬功能，促使内源性或外源性配体物质（载有配体促使内源性或外源性配体物质（载有配体的病理物质或病原体）的清除，的病理物质或病原体）的清除，表现为炎表现为炎症反应症反应在在Ca2+存在下与磷酸胆碱、存在下与磷酸胆碱、DNA、组蛋白等结合、组蛋白等结合与凋亡坏死细胞膜脂质双层结构破坏时暴露的磷脂或外部侵入的细菌、真菌、与凋亡坏死细胞膜脂质双层结构破坏时暴露的磷脂或外部侵入的细菌、真菌、寄生虫的细胞壁磷酸胆碱结合寄生虫的细胞壁磷酸胆碱结合CRP细菌细菌巨噬细胞巨噬细胞C-反应蛋白反应蛋白（CRP）是急性时相反应蛋白）是急性时相反应蛋白CRP升高见于急性和慢性炎症（如伴有升高见于急性和慢性炎症（如伴有细菌感染）、组织损伤（心梗、手术创细菌感染）、组织损伤（心梗、手术创伤、烧伤、放射线损伤等伤、烧伤、放射线损伤等）、恶性肿）、恶性肿瘤、风湿性疾病等瘤、风湿性疾病等疾病后疾病后68h开始升高，开始升高，2448h达到达到高峰高峰比正常值高比正常值高1001000倍，升高幅度与倍，升高幅度与感染的程度呈正相关感染的程度呈正相关病变好转时其含量急速下降，病变好转时其含量急速下降，1周内可周内可恢复正常（恢复正常（T1/2约约19h），此反应不受放，此反应不受放疗、化疗、皮质激素治疗影响疗、化疗、皮质激素治疗影响时相性时相性+灵敏性灵敏性NEnglJMed1999;340:

448-454.血清淀粉样蛋白A结合珠蛋白纤维蛋白原转铁蛋白白蛋白白蛋白五、常规五、常规CRP、hsCRP、全程、全程CRP的区别的区别8160mg/L常规CRP（低水平区灵敏度较差）0.58mg/LhsCRP（准确的检测低水平的CRP和微小变化，更敏感）0.5200mg/L全程CRP=hsCRP+常规CRP（增强了临床高CRP标本的检测能力，同时也提高了低值的灵敏性，更利于动态监测）三者检测血中相同的物质（物质的唯一性，仅是检测方法和范围的差异）六、检测方法六、检测方法方法方法灵敏度灵敏度参考献参考献试管内沉淀试验试管内沉淀试验-JExpMed1930;52561JExpMed1930;52561毛细管内沉淀试验毛细管内沉淀试验10102020mg/Lmg/LAmJMed1950;8445AmJMed1950;8445改良平板双扩散法改良平板双扩散法10102020mg/Lmg/LIntArchAllergy1962IntArchAllergy1962改良琼脂柱扩散法改良琼脂柱扩散法3.03.0mg/Lmg/LProcSocExpBiol1955ProcSocExpBiol1955改良单扩散法改良单扩散法1.01.0mg/Lmg/LActaPatholMicrobiolScandActaPatholMicrobiolScand琼脂糖凝胶电泳法琼脂糖凝胶电泳法1.01.0mg/Lmg/LClinChimActa1969ClinChimActa1969放射电免疫扩散法放射电免疫扩散法1010g/Lg/LJClinLabInvest1973JClinLabInvest1973补体结合试验补体结合试验0.60.6mg/Lmg/LProcSocExpBiol1954ProcSocExpBiol1954胶乳凝集试验胶乳凝集试验1.01.0mg/Lmg/LNature（London）1961Nature（London）1961高敏乳胶增强浊度高敏乳胶增强浊度0.35mg/mlDadeGermany2000荧光抗体法荧光抗体法Nature（London）1961Nature（London）1961放射免疫测定法放射免疫测定法33gg/LJLabClinMed1976/LJLabClinMed1976CRP定量检测定量检测C方法学线性分析方法学线性分析序号序号检测方法检测方法线性范围线性范围mg/L线性线性范围有效倍数范围有效倍数检测项目检测项目1免疫荧光免疫荧光0.5-200400倍倍全程全程CRP2免疫比浊免疫比浊8-16020倍倍常规常规CRP3金标金标8-250或或5-15032倍倍常规常规CRP4紫外分光光度紫外分光光度0.5-5或或5-5010倍倍常规常规CRP或超敏或超敏CRP5动态散射比浊动态散射比浊0.08-3.4或或5-23046倍倍常规常规CRP或超敏或超敏CRPi-CHROMATM全程全程CRP检测原理检测原理i-CHROMATM全程全程CRP检测使用的是免疫荧光，检测使用的是免疫荧光，双抗体夹心法，将血液样本和检测缓冲液充分混双抗体夹心法，将血液样本和检测缓冲液充分混匀，缓冲液中荧光标记的抗匀，缓冲液中荧光标记的抗CRP抗体和血液中的抗体和血液中的CRP抗原结合形成抗原抗体复合物。

当混合样本抗原结合形成抗原抗体复合物。

当混合样本加入到检测板的加样孔后，该复合物被固相在检加入到检测板的加样孔后，该复合物被固相在检测板上的抗测板上的抗CRP抗体所捕获。

荧光信号强度反映抗体所捕获。

荧光信号强度反映了被捕获的了被捕获的CRP数量。

数量。

i-CHROMATM全程全程CRP默默认是以认是以mg/L为单位为单位全程全程CRP检测步骤检测步骤检查并插入检查并插入ID芯片确定检测板和芯片确定检测板和ID芯片相匹芯片相匹配配从冰箱中取出检测缓冲液，放置从冰箱中取出检测缓冲液，放置10分钟使其分钟使其平衡至室温平衡至室温吸取吸取15ul全血（全血（10ul血清，血浆或质控品，血清，血浆或质控品，EDTA抗凝）放入到有检测缓冲液的管子中，抗凝）放入到有检测缓冲液的管子中，充分混匀。

充分混匀。

取取75ul样本混合液加入检测板的加样孔中，样本混合液加入检测板的加样孔中，在室温下反应在室温下反应3分钟分钟将检测板放在将检测板放在i-CHROMATM免疫荧光分析仪免疫荧光分析仪的检测板承载器中的检测板承载器中确保检测板方向正确并将确保检测板方向正确并将其完全推入，按其完全推入，按“选择选择”键，仪器开始自动键，仪器开始自动扫描。

扫描。

13秒内屏幕上即可读取结果或直接打印结果秒内屏幕上即可读取结果或直接打印结果或通过或通过LIS系统输出数据。

系统输出数据。

七、七、健康人健康人CRP浓度浓度正常参考范围正常参考范围（A）FrequencydistributionofCRPconcentrationsinserafrom100healthyadults.（B）SerumCRPconcentrationinmonthlysamplesover10monthsin10healthysubjects.Wilkins,J.etal.ClinicalChemistry.1998;44:

1358-1361.正常情况下正常情况下，CRPCRP浓度很低浓度很低l儿童和成人儿童和成人10mg/L10mg/Ll新生儿新生儿（16月）月）2mg/L2mg/Ll成人成人3mg/L3mg/L即表示存在潜在心血管即表示存在潜在心血管炎症炎症CRP一定要使用高敏感的检测方法一定要使用高敏感的检测方法（hsCRP）l常规常规CRP：

88160mg160mgLLlhsCRP：

0.50.58mg8mgl全程全程CRP：

0.50.5200mg200mg=hsCRP+常规常规CRP三者检测血中相同的物质三者检测血中相同的物质全程全程CRPCRP浓度浓度的解释的解释儿童儿童成人成人检测结果检测结果临床应用建议临床应用建议检测结果检测结果临床应用建议临床应用建议25.0细菌感染细菌感染100.0提示细菌感染，可排除病毒感染提示细菌感染，可排除病毒感染50.0100.0常为细菌感染，病毒感染不常见常为细菌感染，病毒感染不常见25.050.0提示细菌或者病毒感染提示细菌或者病毒感染10.025.0提示病毒感染提示病毒感染抗生素治疗时抗生素治疗时hsCRP应降至此水平以下应降至此水平以下如病程尚短，不能排除细菌感染，应数小如病程尚短，不能排除细菌感染，应数小时后复查时后复查10.025.0提示病毒感染提示病毒感染抗生素治疗时抗生素治疗时hsCRP应降至此水平以下应降至此水平以下如病程尚短，不能排除细菌感染，应数小时后复如病程尚短，不能排除细菌感染，应数小时后复查查10.0病程大于病程大于6-12小时，可基本排除细菌感染小时，可基本排除细菌感染或细菌已被清除或细菌已被清除3.010.0心血管疾病：

高危险性，建议给予抗炎与抗栓同时心血管疾病：

高危险性，建议给予抗炎与抗栓同时治疗治疗新生儿新生儿