生物化工分离复习题Word格式.docx
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31.生物分离技术：
是指从动植物与微生物的有机体或器官、生物工程产物（发酵液、培养液）及其生物化学产品中提取、分离、纯化有用物质的技术过程。
35．盐析：
是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。
39．功能基团：
离子交换树脂中与载体以共价键联结的不能移动的活性基团，又称功能基团
43．洗脱：
利用适当的溶剂，将树脂吸附的物质释放出来，重新转入溶液的过程。
44．树脂的再生：
就是让使用过的树脂重新获得使用性能的处理过程，树脂的再生反应是交换吸附的逆反应。
46．流动相：
在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一个方向移动的液体、气体或租临界体等，都称为流动相。
47．正相色谱：
是指固定相的极性高于流动相的极性，因此，在这种层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度快，先从柱中流出来。
48．反相色谱：
是指固定相的极性低于流动相的极性，在这种层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度快而先从柱中流出。
49．吸附层析：
是以吸附剂为固定相，根据待分离物与吸附剂之间吸附力不同而达到分离目的的一种层析技术。
50．分配层析：
是根据在一个有两相同时存在的溶剂系统中，不同物质的分配系数不同而达到分离目的的一种层析技术。
51．凝胶过滤：
层析是以具有网状结构的凝胶颗粒作为固定相，根据物质的分子大小进行分离的一种层析技术。
52．离子交换层析：
是以离子交换剂为固定相，根据物质的带电性质不同而进行分离的一种层析技术。
53．高效液相色谱：
是指选用颗粒极细的高效耐压新型固定相，借助高压泵来输送流动相，并配有实时在线检测器，实现色谱分离过程全部自动化的液相色谱法。
54．亲和层析：
是利用生物活性物质之间的专一亲和吸附作用而进行的层析方法。
是近年来发展的纯化酶和其他高分子的一种特殊的层析技术。
55．疏水层析：
是利用表面偶联弱疏水性基团（疏水性配基）的疏水性吸附剂为固定相，根据蛋白质与疏水性吸附剂之间的弱疏水性相互作用的差别进行分离纯化的层析技术。
58．等电点：
是两性物质在其质点的净电荷为零时介质的pH值,溶质净电荷为零，分子间排斥电位降低，吸引力增大，能相互聚集起来，沉淀析出，此时溶质的溶解度最低。
二、选择
2．针对配基的生物学特异性的蛋白质分离方法是（C）。
A.凝胶过滤B.离子交换层析
C.亲和层析D.纸层析
4．从组织中提取酶时，最理想的结果是（C）
A.蛋白产量最高
B.酶活力单位数值很大
C.比活力最高（代表酶的纯度）
D.Km最小
6．下列哪项酶的特性对利用酶作为亲和层析固定相的分析工具是必需的？
（B）
A.该酶的活力高
B..对底物有高度特异亲合性
C.酶能被抑制剂抑制
D.最适温度高
E.酶具有多个亚基
45．适合小量细胞破碎的方法是（B）
A、高压匀浆法B.超声破碎法C.高速珠磨法D.高压挤压法
8．盐析法沉淀蛋白质的原理是（B）
A.降低蛋白质溶液的介电常数
B.中和电荷，破坏水膜
C.与蛋白质结合成不溶性蛋白
D.调节蛋白质溶液pH到等电点
10．基因工程药物分离纯化过程中，细胞收集常采用的方法（C）
A．盐析B.超声波C.膜过滤D.层析
11．氨基酸的结晶纯化是根据氨基酸的（A）性质。
A.溶解度和等电点B.分子量C.酸碱性D.生产方式
13．人血清清蛋白的等电点为4.64，在PH为7的溶液中将血清蛋白质溶液通电，清蛋白质分子向（A）
A：
正极移动；
B：
负极移动；
C：
不移动；
D：
不确定。
14．蛋白质具有两性性质主要原因是（B）
A：
蛋白质分子有一个羧基和一个氨基；
蛋白质分子有多个羧基和氨基；
蛋白质分子有苯环和羟基；
以上都对
15．使蛋白质盐析可加入试剂（D）
氯化钠；
硫酸；
硝酸汞；
硫酸铵
16．凝胶色谱分离的依据是（B）。
A、固定相对各物质的吸附力不同B、各物质分子大小不同
C、各物质在流动相和固定相中的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同
17．非对称膜的支撑层（C）。
A、与分离层材料不同B、影响膜的分离性能
C、只起支撑作用D、与分离层孔径相同
20．乳化液膜的制备中强烈搅拌（C）。
A、是为了让浓缩分离充分B、应用在被萃取相与W/O的混合中
C、使内相的尺寸变小D、应用在膜相与萃取相的乳化中
23．在蛋白质初步提取的过程中，不能使用的方法（C）。
A、双水相萃取B、超临界流体萃取C、有机溶剂萃取D、反胶团萃取
24．在液膜分离的操作过程中，（B）主要起到稳定液膜的作用。
A、载体B、表面活性剂C、增强剂D、膜溶剂
25．离子交换法是应用离子交换剂作为吸附剂，通过（A）将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上。
A、静电作用B、疏水作用C、氢键作用D、范德华力
27．丝状（团状）真菌适合采用（A）破碎。
A、珠磨法B、高压匀浆法C、A与B联合D、A与B均不行
28．用来提取产物的溶剂称（C）。
A、料液B、萃取液C、萃取剂D、萃余液。
29．阴离子交换剂（C）。
A、可交换的为阴、阳离子B、可交换的为蛋白质
C、可交换的为阴离子D、可交换的为阳离子
30．分配层析中的载体（C）。
A、对分离有影响B、是固定相
C、能吸附溶剂构成固定相D、是流动相
32．洗脱体积是（C）。
A、凝胶颗粒之间空隙的总体积B、溶质进入凝胶内部的体积
C、与该溶质保留时间相对应的流动相体积D、溶质从柱中流出时所用的流动相体积
34．吸附色谱分离的依据是（A）。
C、各物质在流动相和固定相的分配系数不同D、各物质与专一分子的亲和力不同
37．下面哪一种是根据酶分子专一性结合的纯化方法（A）。
A.亲和层析B.凝胶层析C.离子交换层析D.盐析
38．纯化酶时，酶纯度的主要指标是：
（D）
A.蛋白质浓度
B.酶量C.酶的总活力
D.酶的比活力
39．盐析法纯化酶类是根据（B）进行纯化。
A.根据酶分子电荷性质的纯化方法B.调节酶溶解度的方法
C.根据酶分子大小、形状不同的纯化方法D.根据酶分子专一性结合的纯化方法
43．颗粒与流体的密度差越小，颗粒的沉降速度（A）
A.越小B.越大C.不变D.无法确定
45．下列物质属于絮凝剂的有（A）。
A、明矾B、石灰C、聚丙烯类D、硫酸亚铁
51．发酵液的预处理方法不包括（C）
A.加热B絮凝C.离心D.调pH
52．其他条件均相同时，优先选用那种固液分离手段（B）
A.离心分离B过滤C.沉降D.超滤
53．那种细胞破碎方法适用工业生产（A）
A.高压匀浆B超声波破碎C.渗透压冲击法D.酶解法
55．关于萃取下列说法正确的是（C）
A.酸性物质在酸性条件下萃取B碱性物质在碱性条件下萃取
C.两性电解质在等电点时进行提取D.两性电解质偏离等电点时进行提取
56．液一液萃取时常发生乳化作用，如何避免（D）
A.剧烈搅拌B低温C.静止
58．当两种高聚物水溶液相互混合时，二者之间的相互作用不可能产生（D）
A.互不相溶，形成两个水相B两种高聚物都分配于一相，另一相几乎全部为溶剂水
C.完全互溶，形成均相的高聚物水溶液D.形成沉淀
61．盐析操作中，硫酸铵在什么样的情况下不能使用（B）
A.酸性条件B碱性条件C.中性条件D.和溶液酸碱度无关
63．有机溶剂为什么能够沉淀蛋白质（B）
A.介电常数大B介电常数小C.中和电荷D.与蛋白质相互反应
65．若两性物质结合了较多阳离子，则等电点pH会（A）
A.升高B降低C.不变D.以上均有可能
66．若两性物质结合了较多阴离子，则等电点pH会（B）
68．那一种膜孔径最小（C）
A.微滤B超滤（用于活性染料的盐与浓缩）C.反渗透（主要用于海水的淡化）D.纳米过滤
69．超滤技术常被用作（C）
A.小分子物质的脱盐和浓缩B小分子物质的分级分离
C.小分子物质的纯化D.固液分离
70．微孔膜过滤不能用来（D）
A.酶活力测定BmRNA的测定及纯化C.蛋白质含量测定D.分离离子与小分子
71．吸附剂和吸附质之间作用力是通过（A）产生的吸附称为物理吸附。
A.范德华力B库伦力C.静电引力D.相互结合
76．离子交换树脂适用（B）进行溶胀
A.水B乙醇C.氢氧化钠D.盐酸
79．下列关于正相色谱与反相色谱说法正确的是（C）
A.正相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性
B正相色谱层析过程中非极性分子或极性小的分子比极性大的分子移动的速度慢
C.反相色谱是指固定相的极性低于流动相的极性
D.反相色谱层析过程中，极性大的分子比极性小的分子移动的速度慢
80．一般来说，可使用正相色谱分离（B）
A.酚B带电离子C.醇D.有机酸
81．分子筛层析指的是（C）
A.吸附层析B分配层析C.凝胶过滤D.亲和层析
94．气相色谱的载气不能用（C）
A.氢气B氦气C.氧气D.氮气
95．关于电泳分离中迁移率描述正确的是（A）
A.带电分子所带净电荷成正比B分子的大小成正比
C.缓冲液的黏度成正比D.以上都不对
99．为加快过滤效果通常使用（C）
A.电解质B高分子聚合物C.惰性助滤剂D.活性助滤剂
102．下列哪个不属于高度纯化：
A.层析B.吸附法C.亲和层析D.凝胶层析
103．酶提取液中，除所需酶外，还含有大量的杂蛋白、多糖、脂类和核酸等，为了进一步纯化，可用（E）方法除去杂质。
A、调pH值和加热沉淀法B、蛋白质表面变性法
C、降解或沉淀核酸法D、利用结合底物保护法除去杂蛋白E、以上都可以
104．物理萃取即溶质根据（B）的原理进行分离的
A.吸附B.相似相溶C分子筛D亲和
105．纳米过滤的滤膜孔径（D）
A0.02～10µ
mB0.001～0.02µ
mC<
2nmD<
1nm
108．单宁沉析法制备菠萝蛋白酶实验中，加入1%的单宁于鲜菠萝汁中产生沉淀，属于（D）沉析原理。
（单宁是一种有机酸）
A盐析B有机溶剂沉析C等电点沉析D有机酸沉析
115．下列哪项不属于发酵液的预处理：
（D）
A.加热
B.调pHC.絮凝和凝聚D.层析
116．下列哪个不属于初步纯化：
（C）
A.沉淀法B.吸附法C.离子交换层析D.萃取法
119．高效液相色谱仪的种类很多，但是无论何种高效液相色谱仪，基本上由（D）组成。
A高压输液系统、进样系统、分离系统、过滤系统、记录系统或色谱工作站等五大部分
B进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站四大部分
C高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统四大部分
D高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统、记录系统或色谱工作站等五大部分
121．超滤膜通常不以其孔径大小作为指标，而以截留分子量作为指标。
所谓“分子量截留值”是指阻留率达（B）的最小被截留物质的分子量。
A80%以上B90%以上C70%以上D95%以上
123．“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质（B）
A．极性溶剂B．非极性溶剂C．水D．溶剂
124．能够除去发酵液中钙、镁、铁离子的方法是（C）
A．过滤B．萃取C．离子交换D．蒸馏
126．当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时，蛋白质溶解度（C）
A、增大B、减小C、先增大，后减小D、先减小，后增大
129．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中减去配基的洗脱方法称作（D）
A、阴性洗脱B、剧烈洗脱C、正洗脱D、负洗脱
130．下列细胞破碎的方法中，哪个方法属于非机械破碎法（A）
A.化学法B.高压匀浆C.超声波破碎D.高速珠磨
131．下列哪一项不是常用的滤布材料（C）
A.法兰绒B.帆布C.滤纸D.斜纹布
132．超滤膜截留的颗粒直径为（B）
140．微滤膜所截留的颗粒直径为（A）
143．气相色谱柱主要有（C）。
A填充柱B毛细管柱CA或BDA或B及其他
148．分离纯化早期，由于提取液中成分复杂，目的物浓度稀，因而易采用（A）
A、分离量大分辨率低的方法B、分离量小分辨率低的方法
C、分离量小分辨率高的方法D、各种方法都试验一下，根据试验结果确定
154．反渗透膜的孔径小于（C）
mC<
155．亲和层析的洗脱过程中，在流动相中加入配基的洗脱方法称作（C）
A、阴性洗脱B、剧烈洗脱C、竞争洗脱D、非竞争洗脱
156．凝胶层析中，有时溶质的Kd>
1，其原因是（B）
A、凝胶排斥B、凝胶吸附C、柱床过长D、流速过低
158．将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物，该复合物可选择性地与蛋白质结合，在一定条件下沉淀出来，此方法称为（A）
A、亲和沉淀B、聚合物沉淀C、金属离子沉淀D、盐析沉淀
159．在一定的pH和温度下改变离子强度（盐浓度）进行盐析，称作（A）
A、KS盐析法B、β盐析法C、重复盐析法D、分部盐析法
160．在超滤过程中，主要的推动力是（C）
A、浓度差B、电势差C、压力D、重力
161．下面关于亲和层析载体的说法错误的是（B）
A、载体必须能充分功能化。
B、载体必须有较好的理化稳定性和生物亲和性，尽量减少非专一性吸附。
C、载体必须具有高度的水不溶性和亲水性。
D、理想的亲和层析载体外观上应为大小均匀的刚性小球。
162．在选用凝胶层析柱时，为了提高分辨率，宜选用的层析柱是（A）
A、粗且长的B、粗且短的C、细且长的D、细且短的
163．如果用大肠杆菌作为宿主细胞，蛋白表达部位为周质，下面哪种细胞破碎的方
法最佳？
（C）
A.匀浆法B.超声波法C.渗透压休克法D.冻融法
164．盐析法与有机溶剂沉淀法比较，其优点是（B）
A．分辨率高B．变性作用小C．杂质易除D．沉淀易分离
165．在萃取液用量相同的条件下，下列哪种萃取方式的理论收率最高（C）
A.单级萃取B.三级错流萃取C.三级逆流萃取D.二级逆流萃取
三、判断题
1．助滤剂是一种可压缩的多孔微粒。
（×
）
2．通过加入某些反应剂是发酵液进行预处理的方法之一。
（√）
5．极性溶剂与非极性溶剂互溶。
）
6．溶剂萃取中的乳化现象一定存在。
9．液膜能把两个互溶但组成不同的溶液隔开。
10．流动相为气体则称为气相色谱。
11．用冷溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸煮。
）
12．用热溶剂溶出固体材料中的物质的方法又称浸渍。
14．要增加目的物的溶解度，往往要在目的物等电点附近进行提取。
15．应用有机溶剂提取生化成分时，一般在较高温度下进行。
17．生物物质中最常用的干燥方法是减压干燥。
18．冷冻干燥适用于高度热敏的生物物质。
20．蛋白质变性，一级、二级、三级结构都被破坏。
21．蛋白质类的生物大分子在盐析过程中，最好在高温下进行，因为温度高会增加其溶解度。
25．离子交换剂是一种不溶于酸、碱及有机溶剂的固态学分子化合物。
（√）
26．蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。
28．当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为7.0。
（√）
29．采用氧化铝为吸附剂时，用洗脱剂应从高极性开始，逐渐减低，洗脱剂的极性。
33．超声波破碎法的有效能量利用率极低，操作过程产生大量的热，因此操作需在冰水或有外部冷却的容器中进行。
35．有机溶剂被细胞壁吸收后，会使细胞壁膨胀或溶解，导致破裂，把细胞内产物释放到水相中去。
36．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹥pI蛋白质带正电。
37．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹥pI蛋白质带负电。
38．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹤pI蛋白质带负电。
39．蛋白质为两性电解质，改变pH可改变其荷电性质，pH﹤pI蛋白质带正电。
。
40．离心是基于固体颗粒和周围液体密度存在差异而实现分离的。
43．超临界流体温度不变条件下，溶解度随密度（或压力）的增加而增加，而在压力不变时，温度增加情况下，溶解度有可能增加或下降。
44．盐析是利用不同物质在高浓度的盐溶液中溶解度的差异，向溶液中加入一定量的中性盐，使原溶解的物质沉淀析出的分离技术。
46．在低盐浓度时，盐离子能增加生物分子表面电荷，使生物分子水合作用增强，具有促进溶解的作用。
47．向含有生化物质的水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂，能使生化物质沉淀析出。
49．有机溶剂与水混合要在低温下进行。
56．离子交换速率总是取决于内部扩散速率。
63．只有树脂对被交换离子比原结合在树脂上的离子具有更高的选择性时，静态离子交换操作才有可能获得较好的效果。
64．层析分离是一种化学的分离方法。
65．分离纯化极性大的分子（带电离子等）采用反相色谱（或正相柱），（×
66．而分离纯化极性小的有机分子（有机酸、醇、酚等）多采用正相色谱（或反相柱）。
67．吸附力较弱的组分，有较低的Rf值。
69．任何情况都优先选择较小孔隙的交换剂。
70．凝胶柱层析可进行生物大分子分子量的测定。
71．在高浓度盐溶液中疏水性相互作用减小。
72．色谱分离技术中固定相都是固体。
73．色谱分离技术中被检测物质的峰越宽越好。
74．制备型HPLC对仪器的要求不像分析型HPLC那样苛刻。
75．在聚丙烯酰胺凝胶中加入阴离子去污剂十二烷基硫酸钠（SDS），影响凝胶的形成。
76．等电聚焦电泳会形成的一个由阳极到阴极逐步递减的pH梯度。
77．在恒速干燥阶段，过程速度由水分从物料内部移动到表面的速度即内扩散所控制。
78．在降速干燥阶段，干燥速度由水的表面汽化速度即外扩散所控制法。
79．渗透压冲击是各种细胞破碎法中最为温和的一种，适用于易于破碎的细胞，如动物细胞和革兰氏阳性菌。
80．等密度梯度离心中，梯度液的密度要包含所有被分离物质的密度。
81．可以用纸色谱的方法来选择、设计液-液萃取分离物质的最佳方案。
83．酸性、中性、碱性氨基酸在强碱性阴离子交换树脂柱上的吸附顺序是碱性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸（×
84．等密度梯度离心适于分离大小相同密度不同的物质。
85．当气体的温度超过其临界温度，压力超过临界压力之后，物质的聚集状态就介于气态和液态之间，成为超临界流体。
86．盐析反应完全需要一定时间，一般硫酸铵全部加完后，应放置30min以上才可进行固-液分离。
88．疏水柱层析可直接分离盐析后或高盐洗脱下来的蛋白质、酶等生物大分子溶液（√）
89．某结晶物质经硅胶薄层色谱，用一种展开剂展开，显示单一斑点，所以该晶体为一单体。
（×
90．水提醇沉法时根据物质溶解度差别进行分离的方法。
91．采用溶剂提取法提取中草药有效成分时，选择溶剂的原则是“相似相溶原则”。
（√）
92．凝聚与絮凝作用的原理是相同的，只是沉淀的状态不同。
93．冻结-融化法冻结的作用是破坏细胞膜的疏水键结构，增加其亲水性和通透性来破坏细胞的。
94．发生乳化现象对萃取是有利的。
96．由于pH值可能对蛋白的稳定性有较大的影响，故一般通常采用改变离子强度的梯度洗脱（√）
97．盐析作用也能减少有机溶剂在水中的溶解度，使提取液中的水分含量减少。
可以促使生化物质转入有机相从而提高萃取率。
98
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