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B.镊子等器械需酒精灭菌

C.操作前手需酒精消毒

D.培养基需高压蒸汽灭菌

【解析】 植物组织培养需严格的无菌操作,包括:

培养基需用高压蒸汽锅灭菌;

操作前手需酒精消毒;

外植体应浸泡在酒精中杀菌;

整个操作过程在酒精灯火焰旁进行,同时对镊子等器械灼烧灭菌。

4.下列关于植物组织培养的叙述,错误的是(  )

A.外植体可以来自于植物的任何细胞

B.培养应在无菌条件下进行

C.以花粉作为外植体可得到单倍体植株

D.不同阶段的培养基中细胞分裂素和生长素的比例不同

【解析】 植物组织培养的原理是细胞的全能性,所以作为植物组织培养的细胞必须有完整的细胞核。

【答案】 A

5.菊花的组织培养需要进行严格的无菌操作,下列说法不正确的是(  )

A.培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌

B.幼苗要先移植到消过毒的蛭石或者珍珠岩等环境下生活一段时间

C.用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长,一旦污染杂菌则前功尽弃

D.接种时用镊子夹取菊花茎段插入培养基中即可

【解析】 菊花的组织培养中为防止杂菌污染,需要进行严格的无菌操作,外植体要消毒,培养基及其他器械要消毒。

接种时要注意茎段的形态学上下端,不应倒插;

幼苗要先移植到消过毒的环境中生活一段时间,然后再栽培到土壤中。

6.科学工作者把胡萝卜的韧皮部细胞分离出来,将单个细胞放入培养基中培养,获得了许多完整植株,这些植株的特点是(  )

A.彼此性状相似B.单倍体

C.变异频率高D.都是纯合子

【解析】 植物组织培养形成的新植物体的繁殖方式是无性生殖,所以彼此性状相似。

7.下列关于影响植物组织培养的因素的叙述,不正确的是(  )

A.幼嫩组织较成熟组织易培养成功

B.给外植体消毒用70%的酒精

C.菊花茎段进行组织培养时,始终进行光照

D.生长素与细胞分裂素含量之比较高时,有利于芽的分化

【解析】 生长素与细胞分裂素含量之比较高时,有利于根的分化,较低时,有利于芽的分化,二者相当时,促进愈伤组织的生长。

8.关于愈伤组织形成过程的正确叙述是(  )

A.愈伤组织形成是离体的植物细胞分化的结果

B.愈伤组织形成是离体的植物细胞脱分化和分裂的结果

C.愈伤组织形成是离体的动物细胞分化的结果

D.愈伤组织形成是离体的动物细胞脱分化和分裂的结果

【解析】 愈伤组织形成是离体的植物细胞脱分化和分裂的结果,动物细胞培养没有愈伤组织出现。

9.植物组织培养中的“脱分化”过程是指(  )

A.已休眠的种子经过处理使种子尽快萌发的过程

B.植物根尖、茎尖等处分生组织细胞有丝分裂产生新细胞后分化为各种组织

C.愈伤组织细胞分化为根与芽的过程

D.离体的植物组织、细胞培育产生愈伤组织的过程

【解析】 脱分化指让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。

A、B、C都是细胞分裂、分化的过程。

10.用于组织培养的培养液和无土栽培时所用的营养液相比,前者(  )

A.必须含植物必需的矿质元素

B.必须含有机物

C.不一定含有植物激素

D.浓度必须小于细胞液浓度

【解析】 植物组织培养的初期,培养物的代谢类型为异养需氧型,它还不能进行光合作用,因此与无土栽培相比,最大的不同在于进行植物组织培养时,培养基中含有机物。

11.在植物组织培养过程中,植物激素的作用是(  )

A.启动并促进细胞的分裂、脱分化和再分化

B.供应植物组织生长所需营养物质

C.促进植物幼苗合成叶绿素

D.诱导细胞染色体数目加倍

【解析】 植物激素有细胞分裂素和生长素等,可以启动并促进细胞的分裂、脱分化和再分化,但不提供营养,也不能诱导细胞染色体数目加倍。

12.某同学在进行组织培养过程中,发现只分裂而不分化出芽和根,可能原因是(  )

D.细胞分裂素和生长素配比不对

【解析】 愈伤组织产生根或芽,取决于生长素和细胞分裂素的浓度比值,当细胞分裂素/生长素的比值低时,诱导根的分化;

两者比值大致相等时,愈伤组织只生长不分化;

两者比值高时,诱导芽的生成。

13.植物组织培养依据的原理、培养过程的顺序及诱导的植物激素分别是(  )

①细胞的全能性 ②离体植物器官、组织或细胞

③根、芽 ④生长素和细胞分裂素 ⑤生长素和乙烯 ⑥愈伤组织 ⑦再分化 ⑧脱分化 ⑨植物体

A.①、②⑦⑥⑧③⑨、④

B.①、②⑧⑥⑦③⑨、④

C.①、⑥②⑨⑧③⑦、⑤

D.①、②⑨⑧⑥⑦③、⑤

【解析】 植物组织培养依据的原理为植物体细胞的全能性;

培养过程的顺序是离体植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织,再分化形成根、芽等进而形成新的植物体。

14.植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性物质,在植物组织培养过程中,如何使用这两种激素更有利于愈伤组织的形成(  )

A.生长素的用量与细胞分裂素用量的比值高时

B.生长素的用量与细胞分裂素用量的比值低时

C.生长素的用量与细胞分裂素用量的比值大致相等时

D.只使用细胞分裂素不使用生长素时

【解析】 生长素和细胞分裂素比值高时有利于根的分化,低时有利于芽的分化,大致相等时则促进愈伤组织的生长。

【答案】 C

15.下列有关植物组织培养的叙述,正确的是(  )

A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞

B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株

C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子

D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得

【解析】 在普通培养基中添加适量的NaCl,制成选择培养基,可用来筛选植物耐盐突变体,故选项D正确。

愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞;

二倍体植株的花粉经离体培养后得到单倍体植株,该单倍体高度不育,不能稳定遗传;

用人工薄膜将胚状体等进行包装可制成人工种子,愈伤组织不能作为制作人工种子的材料,故选项A、B、C错误。

16.试管苗的移栽,下列说法正确的是(  )

A.丛状苗在生根培养基中生根后,可直接转移至土壤中定植

B.外植体培养2~3周后,可将生长健壮的丛状苗直接定植于土中

C.将已生根的试管苗移至草炭土或蛭石中,应保持自然湿度予以继续培养

D.待生根后,应将试管苗移至草炭土或蛭石中培养锻炼,然后再转移至土中定植

【解析】 进行植物组织培养时,丛状苗诱导生根后,应将苗移至草炭土或蛭石中用玻璃罩或塑料布保持80%以上的湿度,2~3天后打开玻璃罩逐渐降低湿度进行锻炼,直到将罩全部打开处于自然湿度下为止,然后方可移至土中培养(定植)直至长成植株并开花。

故A、B、C所述均不正确,D选项所述正确。

17.某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染,为查找污染原因设计了4个实验,实验条件除图示外其他均相同。

下列各图表示实验结果,据图可得出的初步结论是(  )

A.污染主要是培养基灭菌时间短造成的

B.污染主要来源于组织培养所用的离体组织

C.调节培养基pH能解决污染问题

D.调节培养温度能解决污染问题

【解析】 本题考查组织培养的相关知识。

据图分析可知:

培养基灭菌时间的长短、培养温度的高低、培养基pH的变化对污染率的影响不大,基本上是在一定的范围内波动;

而离体组织灭菌时间的长短对污染率的影响是很明显的。

二、非选择题(共49分)

18.(10分)斯图尔德将胡萝卜根部细胞分离出来,进行单独培养形成植株,实验过程如下:

从根的切片分离出单个细胞

细胞团―→芽、根―→植株

(1)A过程称为________,诱导这一过程的物质是________。

(2)植物组织培养过程中多次强调一系列的消毒、灭菌及无菌操作,原因是______________________________________________________________

____________________________________________________________。

(3)愈伤组织的培养是很重要的一步,一般从接种到出现愈伤组织需要14天,那时可以看到外植体长出白色或黄色的________状的愈伤组织。

(4)培养时注意恒温箱要关闭光源,因为在________条件下愈伤组织长得更快,两周以后,由于培养基中的营养几乎耗尽,必须______________进行继续培养。

(5)试管苗的培养可分为________培养和________培养,必须先进行________培养,二者的区别在于__________________________________

【解析】 本题主要考查植物组织培养过程、原理以及对实验结果的分析能力。

植物组织培养的过程为离体的细胞

愈伤组织

发芽生根―→植株,可以根据此线索解决其中的问题。

(1)A过程表示由离体的细胞发育成细胞团,所以为脱分化过程,诱导脱分化过程需要有植物激素,主要为生长素和细胞分裂素。

(2)同植物体相比较,离体的植物组织抗性差,所以在组织培养整个过程中都要执行严格的消毒程序。

(3)愈伤组织为外植体经脱分化形成的乳白色或黄色的瘤状物。

(4)进行组织培养过程,脱分化阶段不需要光照,但在再分化阶段,由于叶片中叶绿素的形成需要光照,所以需要光照,当营养耗尽时,需更换有丰富营养成分的培养基。

(5)试管苗的培养分为生根和生芽培养,但是先生芽,才有利于生根,生根培养基与生芽培养基的区别就在于生长素和细胞分裂素的比例不同。

【答案】 

(1)脱分化 植物激素(或生长素与细胞分裂素)

(2)外植体材料体积小,抗性差,如果不小心引起污染,将可能造成培养工作的前功尽弃

(3)瘤

(4)无光 更换培养基

(5)生芽 生根 生芽 培养基中的生长素和细胞分裂素的比例不同

19.(10分)植物组织培养的培养基中加有激素。

下表是培养基中两种植物激素在不同比例时的实验结果。

请分析回答:

(其中6-BA是一种细胞分裂素,IAA是一种生长素)

实验组别

1

2

3

激素种类及激素含量关系

6-BA>IAA

6-BA=IAA

6-BA<IAA

结果

组织块分化出芽

愈伤组织不断生长

愈伤组织有生根趋势

(1)愈伤组织生长的条件是___________________________________

(2)芽的分化条件是_________________________________,根的分化条件是____________________________________________________________。

(3)在植物组织培养中,脱分化可用的激素组合是实验________中的激素含量关系,再分化时可用的激素组合是实验________和实验________中的激素含量关系。

整个实验表明,植物的生根、发芽等生命活动是多种激素共同作用的结果。

(4)植物组织培养的培养基中,除激素外,还必须含有营养物质,它的成分至少应该含有________、________等。

【解析】 本题考查植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用的有关知识,培养学生利用生物知识分析、解决问题的能力。

从表中数据可以看出,只有靠细胞分裂素和生长素的共同作用及适当的比例,才能使组织培养过程顺利进行。

培养基中必须具备植物激素、无机物(矿质元素)、有机物等营养物质。

【答案】 

(1)细胞分裂素和生长素含量相等

(2)细胞分裂素的含量大于生长素 生长素的含量大于细胞分裂素

(3)2 1 3

(4)无机物(矿质元素) 有机物

20.(9分)如图表示菊花的嫩枝的离体培养过程,请回答:

菊花的组织培养

(1)对菊花来说,要选取生长旺盛的嫩枝来进行组织培养,其原因是______

_________________________。

(2)在植物组织培养中常用的培养基名称为____________,从物理性质上来看属于________培养基。

培养基中都要加入一定的植物激素,在培养过程中,使用激素的顺序和比例都影响细胞的发育,细胞分裂素/生长素的比值________(填“高”“低”或“相当”)有利于根的分化。

(3)两种植物组织培养都需要接种,接种前为确定培养基是否灭菌彻底,检测的方法是_____________________________________________________

______________________________________________________________,

植物组织培养无菌操作应注意_____________________________(两点)。

(4)图中的B过程都需要________,因为愈伤组织形成幼小植物后,植物需要叶绿素进行光合作用。

【答案】 

(1)生长旺盛的嫩枝生理状况好或容易诱导脱分化和再分化

(2)MS培养基 固体 低

(3)将未接种的培养基放在37℃的恒温箱中培养24小时(或放在适宜温度下培养一段时间)后观察是否有菌落出现 外植体消毒、在酒精灯旁进行操作、操作者双手消毒等等(答到两点即可)

(4)光照

21.(10分)通过植物组织培养技术可以快速繁殖、生产药物及培育无病毒的植物等。

据图甲、表乙回答问题:

离体的植物器官

胚状体

植物体组织或细胞

图甲 植物组织培养过程

表乙:

植物的花芽分别在含有不同比例的吲哚乙酸和细胞分裂素的培养基中的生长状况

A组

B组

C组

D组

E组

吲哚乙酸

3ppm

0.03ppm

细胞分裂素

0.002ppm

1.0ppm

0.2ppm

花芽生长状况

仍是组织切块

形成愈伤组织

愈伤组织分化出根

愈伤组织分化出嫩芽

稍生长

(1)离体的植物器官、组织或细胞能够被培养成新的植物体的原因是__________________________________。

(2)用植物组织培养方法诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状体结构,若包上人造种皮,制成人工种子,可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。

胚状体来源于离体的植物体细胞,其形成过程中要经过的生理变化大体上是图甲中[ ]________和[ ]________过程,在此过程中被培养的细胞始终受__________的调节([ ]内填序号)。

(3)应用植物组织培养技术培养茎尖或根尖组织可获得无病毒植株,其原因是______________________________________________________________

(4)从表乙的实验结果可看出:

吲哚乙酸和细胞分裂素是实验中的两种重要物质。

其中,新芽形成必需的条件是______________________________;

而在培养形成完整新个体的过程中,对它们的调控关键是______________________________________________________________

______________________________________________________________

_____________________________________________________。

【解析】 植物组织培养利用细胞全能性的原理,在离体状态下经脱分化和再分化形成胚状体,进一步发育成新植株或被包以人造种皮,制成人工种子。

在此过程中细胞分裂素和吲哚乙酸起着调节作用。

细胞分裂素高时,诱导丛芽的产生,吲哚乙酸浓度高时,诱导根的产生。

对它们的调控关键是适当控制好不同培养期的培养基中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度及二者的比例。

【答案】 

(1)植物细胞具有全能性

(2)① 脱分化 ② 再分化 植物激素

(3)植物的茎尖或根尖很少被病毒感染,甚至无病毒

(4)细胞分裂素的浓度大于吲哚乙酸的浓度 适当调控好不同培养期的培养基中细胞分裂素与吲哚乙酸的浓度和它们的比例

22.(10分)设计实验,探究生长素和细胞分裂素用量的比例对植物组织培养的影响。

材料用具:

略。

实验步骤:

(1)取4个已灭菌的装有MS培养基的锥形瓶,编号为1、2、3、4。

(2)设置对照:

①1号瓶不添加任何植物激素。

②____________________________________________________________。

③3号瓶中生长素:

细胞分裂素>1。

④____________________________________________________________。

(3)外植体消毒:

(4)接种。

(5)培养。

预期结果及分析:

①若1号瓶中外植体生根发芽正常,说明______________________

②若2号瓶中愈伤组织不断生长,说明_________________________

③若3号瓶中只生根不生芽,说明_____________________________

④若4号瓶中只生芽不生根,说明_____________________________

【解析】 本题考查了植物组织培养中生长素和细胞分裂素使用的有关知识,培养学生利用生物知识分析、解决问题的能力。

只有靠细胞分裂素和生长素的共同作用及适当的比例,才能使组织培养过程顺利进行。

而愈伤组织的特点是细胞排列疏松而无规则,呈无定形状态。

设计实验探究生长素和细胞分裂素用量的比例对植物组织培养的影响时,应遵循对照原则及单一变量原则等。

【答案】 

(2)②2号瓶中生长素:

细胞分裂素=1

④4号瓶中生长素:

细胞分裂素<1

(5)预期结果及分析:

①植物激素对其无影响

②生长素和细胞分裂素用量的比值等于1时,促进愈伤组织的生长

③生长素和细胞分裂素用量的比值大于1时,有利于根的分化,抑制芽的形成

④生长素和细胞分裂素用量的比值小于1时,有利于芽的分化,抑制根的形成

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