验证性试验Word文档下载推荐.docx
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25%乌拉坦溶液
家兔
【操作】
1．取健康家兔2只，称重，编号。
观察其正常活动、肌张力、翻正反射、呼吸（次/分）等情况。
2．甲兔耳静脉缓慢注射25%乌拉坦溶液4ml/kg，乙兔由大腿外侧肌肉分次注入25%乌拉坦溶液4ml/kg，分别记录给药时间。
3．密切观察给药后两兔的翻正反射消失时间及呼吸抑制程度有何不同。
并将实验结果填入表中。
兔号
体重
药物及剂量
给药途径
翻正反射消失时间
呼吸抑制程度
耳静脉
肌注
【注意事项】
在家兔安静状态下记录呼吸次数。
1．给药途径对药物作用产生何影响？
2．临床用药时，同一药物在不同的给药途径时，为什么应用的剂量也不同？
实验三药物半数致死量的测定
了解药物半数致死量测定的意义、原理、方法和计算过程；
学习动物的随机分组方法。
【材料】
鼠笼、1ml注射器、5号针头、天平、计算器
2%盐酸普鲁卡因注射液
【实验对象】小白鼠，体重18g～22g,雌雄各半，实验前禁食12小时，不禁水
寇氏法要求剂量按等比级数排列，每组鼠数一般10只，剂量范围在0-100%死亡率之间。
1．探索剂量范围找出100%及0%死亡的剂量（即上、下限剂量Dm、Dn）。
方法是取鼠9-10只，每组3只，按估计量（根据经验或文献资料定出）给药。
若3只鼠全死则降低剂量，若全不死则增加剂量，由此找出上、下限剂量。
2．计算各组剂量要求各组剂量按等比数列排列，先求出公比r：
r=lg-1（lgDm—lgDn）/G—1
G为分组数，本实验分为5组。
求出公比r后再计算出各组剂量D1、D2、D3、D4、D5。
其中D1=Dn（最小剂量），D2=D1×
r，D3=D2×
r，D4=D3×
r，D5=D4×
r。
3．分组并给药称鼠体重，将体重相同者放一笼，并标记。
再分为5组，每组10只，使各组平均体重及体重分布尽可能一致。
然后给各组小白鼠腹腔注射计算量的2%盐酸普鲁卡因注射液。
给药顺序采用间隔跳组法，即先按2、4组顺序给药，在逆行按5、3、1组顺序给药。
4．观察记录给药后观察小鼠中毒表现，记录死亡数，计算每组死亡率。
将结果记入下表。
组别
剂量D
（mg/kg）
对数剂量X
（lgD）
动物数n
（只）
死亡数F
死亡率P
（F/n）
P2
1
2
3
4
5
注：
P用小数值表示。
1．计算LD50
LD50＝lg-1[Xm—i（∑P—0.5）]
式中Xm：
最大剂量的对数值
i:
相邻两组比值的对数（lgr）（r=D2/D1）
∑P：
各组死亡率的总和
2．计算LD50的95%平均可信限：
L95＝LD50±
4.5×
LD50×
i×
[（∑P—∑P2）/（n—1）]1/2
式中n：
各组动物数
∑P2：
各组死亡率平方的总和
1.本实验为定量药物的毒性测定，要求较高的准确性，故要求动物分组要随机，给药剂量要准确无误。
2.动物种类、体重范围、给药途径、实验观察时间等因素对LD50的测定结果都有影响，在报告结果时都应加以说明。
测定LD50的意义是什么？
实验四传出神经药对离体肠肌的作用
观察硫酸阿托品、甲基新斯的明等药物对离体平滑肌的作用；
分析它们的作用机制，联系临床应用。
BL-420生物机能实验系统、张力传感器、万能支台、AS-HJ-II型恒温平滑肌槽、手术剪、木锤、敷料碗小烧杯、1ml注射器。
1%硫酸阿托品注射液、1%甲基新斯的明注射液、1%氯化钡、1%毛果芸香碱、台氏液。
【实验对象】家兔
1．取家兔一只，用木锤击后脑致死。
剖开腹部，分离近十二指肠的一段空肠，剪取2～3cm小肠数段，置于盛有任氏液的烧杯中备用。
将水温控制在37~38oC（±
0.5oC）后，取小肠一段，一端固定在恒温平滑肌槽浴管（盛有台氏液）中的L形钩上，一端固定在张力传感器的连线上，通可数的气泡供养。
2．启动BL-420生物机能实验系统。
待肠肌收缩后，输出描记曲线。
3．描记一段药前肠肌活动曲线后，向浴管中滴加1%新斯的明3滴。
待肠肌收缩明显加强时，再滴加1%阿托品0.2ml，观察曲线变化。
药前曲线
新斯的明曲线
阿托品曲线
1．此实验用饥饿的兔为好，但不能缺水。
2．制备肠肌标本时不要过分牵拉，以防肠肌功能受损。
3．水温、肠肌的拉力程度均会影响肠肌的活动，影响实验结果，应注意调节。
用受体理论分析讨论阿托品、新斯的明对肠肌的作用，并联系其临床应用。
实验五去甲肾上腺素的缩血管作用
【目标】
1．观察去甲肾上腺素的缩血管作用，分析其作用机制，联系其临床用途。
2．练习蛙的捉拿及破坏其脑、脊髓的方法。
【材料】
器材：
脊髓破坏针、图钉、蛙板、手术剪、手术镊子、滴管、放大镜。
药品：
0.01%重酒石酸去甲肾上腺素溶液
【实验对象】 蛙
【操作】
1．取蛙一只，破坏大脑和脊髓后背位固定于蛙板上，剖开腹腔一侧，找出肠细膜，平铺于有孔的蛙板上，用放大镜观察肠系膜血管的粗细和色泽。
2．向肠系膜血管处滴0.01%重酒石酸去甲肾上腺素溶液1～2滴。
3分钟后再观察肠系膜血管粗细、色泽，比较给药前后有何不同。
【结果】
标本
给药前
给药后
血管粗细
色泽
蛙肠系膜
mm
1.去甲肾上腺素为何能收缩血管？
其临床用途有哪些？
2.应用去甲肾上腺素时应注意什么问题?
实验六普鲁卡因的传导麻醉作用
观察普鲁卡因的传导麻醉作用，联系其临床应用。
铁支台、双凹夹、蛙板、手术剪、手术镊、玻璃分针、脊髓探针、大止血钳、秒表、小烧杯、敷料碗、脱脂棉、弯盘、滴管
0.5%盐酸溶液、2%普鲁卡因溶液。
【实验对象】
蟾蜍或蛙
1．取蛙一只，用脊髓探针破坏大脑后，俯卧位将两前肢固定在蛙板上。
2．剪开股部皮肤，在股三头肌与半月肌之间用玻璃分针小心分离坐骨神经干（注意不要伤及血管）。
在神经干下垫一棉签，将神经干与周围血管，肌肉隔开，然后用止血钳夹住下颌，将其悬吊在铁支台上。
3．当两下肢静止不动时，分别将两趾蹼浸入0.5%盐酸溶液中，同时打开秒表，测试记录缩腿反射的时间，然后立即用清水洗去趾蹼部的盐酸液，并揩干。
两肢交替如上测试三次，记录平均值。
4．在暴露的神经干上滴加三滴普鲁卡因溶液，并平放五分钟，在用与前相同的方法测试、记录两后肢缩腿反射时间各三次，取均值。
以30秒没有缩腿反射为传导阻滞的指标。
下肢
药前缩腿反射时间（秒）
药物
药后缩腿反射时间（秒）
一二三平均值
左
盐酸普鲁卡因
右
空白对照
1．缩腿反射时间是指从趾蹼浸入盐酸溶液到开始缩腿所用时间。
2．滴药后必须平放五分钟，以防止药液流失而影响实验结果。
普鲁卡因局麻机制、临床用途？
应用时要注意哪些问题？
实验七普鲁卡因与丁卡因毒性比较
1.比较普鲁卡因与丁卡因的毒性大小，并联系临床应用。
2.练习小白鼠捉拿及腹腔注射方法。
托盘天平、大号方盘、钟罩、大镊子、1ml注射器、弯盘
1%盐酸普鲁卡因溶液、1%盐酸丁卡因溶液
动物：
取大小相近的小白鼠2只称重，观察正常活动情况后，甲鼠腹腔注射1%盐酸普鲁卡因溶液0.1ml/10g。
大约十五分钟左右，乙鼠腹腔注射1%盐酸丁卡因溶液0.1ml/10g。
观察两鼠用药后反应有何差异。
鼠号
药液及其用量
用药后反应及时间
1%盐酸普鲁卡因溶液____ml
1%盐酸丁卡因溶液_____ml
【讨论】
1.为什么丁卡因在临床上不能作浸润麻醉？
2.比较丁卡因和普鲁卡因的特点及用途。
实验八药物的抗惊厥作用
1．观察苯巴比妥钠、地西泮的抗惊厥作用。
2．联系小白鼠的捉拿和腹腔注射法。
调剂天平、大方盘、钟罩、1ml注射器
药品:
0.5%苯巴比妥钠溶液、2.5%尼可刹米溶液、生理盐水
1．取小白鼠2只，称重，编号，观察正常活动情况。
2．甲鼠腹腔注射0.5%苯巴比妥钠溶液0.1ml/10g，乙鼠同法同量注射生理盐水作对照；
3．20分钟后两鼠均腹腔注射2.5%尼可刹米溶液0.2ml/只；
观察两鼠有无惊厥发生，惊厥出现的速度、程度和结果有何不同（后肢强直为惊厥指标）。
（—）
药物剂量
尼可刹米
惊厥出现时间
惊厥程度
结果
苯巴比妥钠ml
生理盐水ml
ml
ml
4．给以出现惊厥的小白鼠腹腔注射1%地西泮液0.1ml/10g，观察小鼠的变化。
（二）
鼠
救治前状态
药物剂量
救治后情况
1%地西泮ml
地西泮救治应及时，以防小鼠死亡，最好采用小鼠尾静脉注射，作用快。
1．地西泮的抗惊厥机制、作用及临床用途？
2．制作惊厥模型除药物致惊法外，还有什么方法？
实验九氯丙嗪的镇静和降温作用
观察氯丙嗪的镇静和降温作用，掌握其降温特点。
磅秤、肛温表、大方盘、冰袋、弯盘、注射器、脱脂棉等
2.5%氯丙嗪注射液、生理盐水、液体石蜡
家兔
1．取健康家兔3只，一人固定家兔头部及兔身，使下肢及尾部暴露。
2．另一人左手提起兔尾，右手将涂有液体石蜡的肛温表插入肛门内深约4～5cm，3分钟后取出读数。
3．以后每隔2分钟测一次共测三次，取平均值，作为正常体温。
选择体温在38.5～39.5oC的家兔，否则弃掉另换。
4．称重，编号，观察全身正常活动情况后，甲兔耳静脉注射2.5%盐酸氯丙嗪溶液0.3ml/kg,腹部下放冰袋；
乙兔耳静脉注射同量氯丙嗪溶液，不放冰袋；
丙兔耳静脉注射等量的生理盐水，腹部放冰袋。
5．每20分钟测量体温一次取均值。
观察各兔体温变化及活动情况有何不同
【结果】室温0C。
兔
号
体
重
药物及用量
（ml）
条件
药前
体温
给药后体温
温差0C
20min40min60min
25%氯丙嗪
冰袋
室温
生理盐水
1．前药后体温计插入的深度必须一致。
2．实验中要保持实验室温度。
1．根据实验结果分析氯丙嗪的降温特点，有何临床意义？
2．氯丙嗪用于人工冬眠的理论依据是什么？
实验十镇痛药的镇痛作用
方法一热板法
【目标】
1．观察镇痛药的镇痛作用，并联系其临床应用；
2．学习镇痛药的筛选方法。
恒温水浴槽、镇痛盒、秒表、钟罩、注射器等
0.2%吗啡溶液、生理盐水
【实验对象】雌性小白鼠
1．将恒温水浴槽内加水至镇痛盒1/3高度，调试温度并控制在55oC±
0.5oC。
2．取雌性小鼠2只，放入镇痛盒中，同时启动秒表，密切观察并记录小鼠舔后足的时间，如舔足时间大于30秒者应弃去更换。
两鼠各测2次取均值，并把该值作为小鼠的药前痛阈值。
3．编号后，甲鼠腹腔注射0.2%盐酸吗啡溶液0.6ml/只，乙鼠腹腔注射等量的生理盐水作对照。
注射后15分、30分、60分钟各测小白鼠的痛阈值2次，取均值。
如60秒无舔足反应，立即取出，痛阈值以60秒计算。
4．实验完毕，汇总全班各组的实验结果按下列公式计算：
用药后平均反应时间－用药前平均反应时间
痛阈提高百分率=-----------------------------------------×
100%
用药前平均反应时间
药前痛阈值
（秒）
药后痛阈值及提高百分率
15´
（%）30´
（%）60´
（%）
1．因雄性小鼠过热时睾丸下垂，阴囊触及热板导致反应敏感，故选雌性小鼠为宜。
2．此实验室温在150C左右为宜，过低小鼠反应迟钝，多高则过于敏感，产生跳跃，影响实验结果。
讨论吗啡的镇痛机制及临床应用。
方法二扭体法（化学刺激法）
1．观察比较杜冷丁、颅痛定等正统要的镇痛效应。
托盘天平、大方盘、钟罩、秒表、注射器、弯盘等
0.2%哌替啶溶液、0.2%罗痛定溶液、生理盐水
【实验对象】
1．取小白鼠9只，称重，分为三组，每组三只。
2．甲组腹腔注射0.2%哌替啶溶液0.1ml/10g；
乙组腹腔注射0.2%罗痛定溶液0.1ml/10g；
丙组腹腔注射生理盐水0.1ml/10g作对照。
3．给药30分钟后，各鼠腹腔注射0.8%醋酸溶液0.2ml/只，随即观察10分钟内出现扭体反应的动物数。
扭体反映表现为腹部内凹、后肢伸张、躯体扭体、臀部抬高。
4．实验完毕，综合全班各组实验结果计算药物镇痛百分率。
实验组无扭体鼠数-对照组无扭体鼠数
药物镇痛百分率=-----------------------------------×
100%
对照组无扭体鼠数
鼠数
扭体反应鼠数
无扭体反应鼠数
镇痛%
哌替啶ml
罗痛定ml
醋酸液要新鲜配置。
也可用0.05%酒石酸锑钾0.4ml/只致痛，但室内温度要求10～150C，因酒石酸锑钾的药量随室温的变化而相应的改变。
1．讨论热板法和扭体法的区别。
2．试述哌替啶的药理作用及临床用途。
实验十一尼可刹米对呼吸抑制的解救
1．观察尼可刹米对吗啡所致呼吸抑制的解救作用，并联系其临床意义。
2．练习家兔的捉拿、固定方法及耳静脉注射法。
BL-420生物机能实验系统、张力传感器、磅秤、兔台、铁支台、双凹夹、注射器等。
1%盐酸吗啡溶液、5%尼可刹米溶液。
家兔
1．取家兔一只，称重后背位固定在兔台上，将张力传感器联与家兔胸腹之间。
2．启动BL-420生物机能实验系统，选择药理实验项目中的有关实验项目（可选择“离体平滑肌”）。
设置给药项目及实验参数。
3．描记一段正常呼吸曲线后，由耳静脉注射1%盐酸吗啡0.7ml/kg，观察呼吸频率及幅度的变化。
4．当家兔呼吸频率极度减慢、幅度明显降低时，立即由耳静脉缓慢注射5%尼可刹米溶液0.5ml/kg，观察呼吸变化。
如欲观察尼可刹米的毒性可快速注射。
动物
正常呼吸曲线
吗啡曲线
尼可刹米曲线
1．注射吗啡的速度一般宜先快后慢，做出的呼吸抑制模型较好。
2．尼可刹米的注射速度不宜过快，否则容易引起惊厥。
1．为什么尼可刹米适用于吗啡急性中毒的解救？
应用时应注意什么？
2．吗啡急性中毒的主要症状有哪些？
实验十二强心苷的强心作用
观察强心苷对蟾蜍心脏的直接作用及其与Ca++的关系，分析其作用机制，联系其临床应用。
BL-420生物机能实验系统、张力传感器、蛙心夹、铁支台、蛙板、眼科剪、眼科镊、手术剪、动脉插管、止血钳、辅料镊、脊髓探针、手术线等。
任氏液、缺Ca++任氏液、强心苷注射液、1%氯化钙溶液、0.25%肝素溶液。
蟾蜍或青蛙
1．取蛙一只，破坏大脑及脊髓，背位固定在蛙板上。
2．在腹部正中偏左0.5cm行纵行切口，分离腹壁浅静脉备注射之用。
3．自胸骨下端剪开胸廓，剪成一小窗，用眼用剪、眼用镊将心包膜打开，暴露心脏，结扎右主动脉及左主动脉远心端，并在左主动脉下置一手术线打一活结，剪一小口插入注有肝素液的动脉套管后结扎。
4．用蛙心夹夹住心尖部，启动BL-420生物机能实验系统，选择药理实验的“蛙心实验”项目，并设置给药项目及实验参数。
5．描记一段正常心跳曲线后，从腹壁浅静脉缓慢注缺钙任氏液直至心收缩明显减弱时，再注入强心苷注射液0.2ml，待心肌收缩加强时，再注入1%氯化钙溶液1ml（或注至心跳出现明显变化为止）。
【结果】
描绘或剪贴各段心跳曲线。
正常曲线
缺Ca++任氏液曲线
强心苷曲线
1%氯化钙曲线
1．如果腹壁浅静脉注射失败，可直接由动脉给药，但要注意减速减量给药。
2．灌注缺Ca++任氏液必须保持恒速。
根据实验结果讨论强心苷的作用机制、主要药理作用及临床意义。
实验十三普萘洛尔和奎尼丁
对氯化钡诱发心律失常的预防作用
观察普萘洛尔和奎尼丁对氯化钡诱发心律失常的预防作用，了解氯化钡诱发心律失常的机制。
心电记录器材一套,鼠台,手术器械一套,纱布,棉球。
100g/L（10%）水合氯醛,3g/L（0.3%）氯化钡,1g/L（0.1%）普萘洛尔,5g/L（0.5%）奎尼丁,生理盐水等.
【实验对象】大鼠
1.大白鼠3只,称重,编号。
2.腹腔注射10%水合氯醛（3～4ml/kg）进行麻醉,背位固定于大白鼠手术台上,作股静脉插管备给药用。
3.记录II导联心电图。
4.两只大白鼠分别静脉注射0.1%普萘洛尔（2ml/kg）和0.5%奎尼丁（2ml/kg）,另一只静脉注射等容积的生理盐水作对照。
然后分别记录给药后1min,3min和5min的心电图。
5.5min后静脉注射0.3%氯化钡（1ml/kg）,立即记录心点图,随后记录给药后15秒,30秒及1min、3min、5min、10min、15min、20min和30min的心电图。
1.氯化钡需要新鲜配置,并且快速静注。
普萘洛尔和奎尼丁要缓慢静脉注射。
2.快速注射氯化钡后,大多数动物在给药过程中或给药后30秒出现心律失常。
3.水合氯醛有时可诱发心律失常。
1.氯化钡诱发心律失常的机制是什么?
2.普萘洛尔和奎尼丁抗心律失常的机制是什么?
实验十四普萘洛尔提高心肌缺氧耐受力作用
观察普萘洛尔提高心肌缺氧耐受力作用；
学习抗心绞痛药物的筛选方法。
广口瓶（250ml）、秒表、注射器、天平、钟罩
钠石灰、凡士林、0.1%盐酸普萘洛尔溶液、生理盐水
小白鼠（18～22g）
1．取小白鼠2只，称重，编号。
2．甲鼠腹腔注射0.1%盐酸普萘洛尔溶液0.2ml/10g，乙鼠腹腔注射同量生理盐水作对照。
3．给药15min后，将小鼠分别放入事先装有15g钠石灰的广口瓶中，瓶口涂抹适量凡士林加盖密闭，立即记录时间。
观察记录各鼠活动变化及呼吸停止时间。
4．综合各实验小组结果，计算每种药物的小鼠平均存活时间，并与对照组相比较，求得存活时间延长百分率。
存活时间延长百分率（%）=
给药组平均存活时间（min）-对照组平均存活时间（min）×
对照组平均存活时间（min）
小鼠平均存活时间（min）
存活时间延长百分率（%）
普萘洛尔ml
1．各组广口瓶需容量一致，绝对密封不漏气。
2．钠石灰吸水和二氧化碳后变色，应即更换。
3．为提高对心肌的特异性，可给小白鼠异丙肾上腺素0.2mg/10g皮下注射后15min在进行耐缺氧实验。
1．普萘洛尔抗缺氧的作用机制是什么？
2．普萘洛尔与硝酸甘油合用的临床意义？
实验十五可待因的镇咳作用
1．观察可待因的镇咳作用，并联系临床应用；
2．练习小白鼠的腹腔注射方法。
托盘天平、大方盘、钟罩、秒表、注射器胶塞等
0.5%磷酸可待因溶液、生理盐水、浓氨水
取小白鼠2只，称重，置于钟罩内，观察正常活动情况。
编号后甲鼠腹腔注射0.5%磷酸可待因溶液0.1ml/10g,
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