为菌种来源Word格式.docx
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PartB：
繪製瓊脂斜面上細菌之分布及生長
菌種：
S.aureus
顏色：
1、2
Exp.3Culturalcharacteristicsofmicroorganisms
Nutrientagarplates
Micrococcusluteus
Mycobacteriumsmegmatis
Bacilluscereus
Escherichiacoli
Klebsiellapneumoniae
Elevation
Margin
Pigmentation
Exp.8Preparationofbacterialsmears
Exp.9Simplestaining
1.畫出代表視野中之微生物形態。
2.描述各菌之形狀（桿菌、球菌、螺旋體）及其排列（鏈狀、成簇、成對）。
Methyleneblue
Crystalviolet
Carbolfuchsin
Drawingofarepresentativefield
Organism
Cellmorphology
Shape
Arrangement
Cellcolor
Exp.10Negativestaining
繪製一鏡檢視野
菌名：
形狀：
排列：
Exp.11Gramstain
1.繪製一代表視野。
2.描述各菌形態、排列及呈色，並根據顏色將菌分為革蘭氏陽性菌或陰性菌。
E.coli
B.cereus
Mixture
Gramreaction
2、3、4
Exp.12Acid-faststaining
2.描述各菌形態、排列及呈色，並根據顏色將菌分為抗酸性菌或非抗酸性菌。
Mycobacteriumsp.
Acid-fastreaction
＊回答課本問題：
Exp.13Differentialstainingforvisualizationofbacterialcellstructures
PartA:
Sporestainingprocedure
1.畫出各菌之代表視野。
2.描繪內胞子於生長型細胞中之位置，如中央、近終端或終端等。
3.表明內胞子及生長型細胞之顏色。
B.subtilis
Colorofspores
Colorofvegetativecell
Locationofendospore
PartB:
Capsulestainingprocedure
1.畫出菌之代表視野。
2.指出莢膜及菌體之顏色。
Colorofcapsule
Colorofcell
＊回答課本問題：
1、2、3、4、5
Exp.15Useofdifferentialandselectivemedia
1.檢視所有平板觀察下列各項目並記錄於表格中：
a.接種線之生長量：
以（-）表示未生長，（1+）表示少量生長，（2+）表示中等至大量生長。
b.生長之外觀：
記錄菌落之顏色、透明度。
c.生長周圍培養基之改變：
培養基顏色變化及溶血性。
Medium
Bacterialspecies
Amountofgrowth
Appearanceofgrowth
Appearanceofmedium
TSA
（Trypticsoyagar）
E.aerogenes
S.typhimurium
S.epidermidis
S.pyogenes
E.faecalis
MSA
（Mannitolsaltsagar）
BA
（Bloodagar）
MCA
（MacConkeyagar）
EMB
（Eosin-methyleneblueagar）
PEA
（Phenylethylalcoholagar）
2.指出下列培養基具有的選擇性和鑑別性功能：
a.Mannitolsaltagar
b.Bloodagar
c.MacConkeyagar
d.Eosin-methyleneblueagar（Levine）
e.Phenylethylalcoholagar
1
Exp.44Chemicalagentsofcontrols：
Chemotherapeuticagents
Kirby-Bauerantimicrobialsusceptibilitytestprocedure
1.觀察所有平板上各抗生素濾片周圍是否出現抑制環。
2.以尺量取各抑制環之直徑，以mm為單位，並將結果記錄於表格中。
3.將結果與表43.2比較，判斷各受試菌對化學治療劑之感受性，以抗性（R）居間（I）或感受性（S）表示，並將結果記錄於下表中。
Chemotherapeuticagent
Gram-negative
Gram-positive
Zonesize
Susceptibility
Penicillin
Streptomycin
Tetracycline
Chloramphenicol
Gentamicin
Vancomycin
4.指出化學治療劑之有效作用微生物為革蘭氏陽性菌或革蘭氏陰性菌。
Type（s）ofmicroorganisms
Synergisticeffect
1.檢視所有平板，決定所表現之抑制環形式。
抑制環明顯分離者表示加成作用（additiveeffect），抑制環融合者表示協同作用（synergism）。
將觀察結果記錄於表中。
Cultures
Appearanceofzoneofinhibition
Synergisticoradditiveeffect
E.coli：
trimethoprimandsulfisoxazole
trimethoprimandtetracycline
S.aureus：
Exp.16PhysicalFactors：
Temperature
1.檢視所有培養基，觀察細菌生長狀態。
以（1＋）表示少量生長，以（2＋）表示中度生長，以（3＋）表示大量生長，以（－）表示沒有生長。
2.觀察S.marcescens是否有橘色至深紅色色素產生，有色素生成紀錄為（＋），沒有色素形成紀錄為（－）。
3.依觀察所見決定各菌之溫度分類。
S.marcescens
P.aeruginosa
Pigment
Growth
4℃（refrig.）
20℃（roomtemp.）
37℃（bodytemp.）
60℃
Classification
Exp.17PhysicalFactors：
pHoftheextracellularenvironment
1.觀察各菌在不同pH值之生長量（混濁度），以（1+）表示少量生長，（2+）表示中度生長，（3+）表示大量生長，（－）表示沒有生長。
2.判斷各菌生長之pH值範圍及生長最適pH值。
Species
pH3
pH5
pH7
pH9
pHrange
OptimumpH
Exp.18PhysicalFactors：
Atmosphericoxygenrequirements
1.觀察各菌於試管中之生長分布情形。
2.依觀察所見判斷各菌之需氧狀況。
DistributionofGrowth
（可繪圖輔助）
ClassificationaccordingtoOxygenRequirement
1、2、3、4
Exp.20Serialdilution-agarplateproceduretoquantitateviablecells
1.觀察並計算所有平板上之菌落數，若平板上菌落數超過300視為過多無法計算，記錄為toonumeroustocount（TNTC），若菌落數少於30視為過少，記錄為toofewtocount（TFTC），僅計算30至300之間的菌落數，凡表面或表面下之菌落均需計算在內。
2.原培養液中每毫升之細菌數為菌落數乘以稀釋倍數（numberofcellsperml=numberofcolonies×
dilutionfactor）。
例如：
a.平板上菌落數=50
稀釋倍數=1：
1×
106
加入平板之菌液=1mL
50×
106=5×
107CFUs/mL（CFU：
colony-formingunits）
b.平板上菌落數=50
105
加入平板之菌液=0.1mL
（50×
105）cells/0.1mL=5×
107CFUs/mL
3.將觀察所見及檢體中每毫升計算所得菌數記錄於表格中。
4.因各稀釋度之平板計數均同時進行三組，故檢體中每毫升之菌數應取平均值。
Tubedilution
mlofdilutionplated
Finaldilutiononplate
Numberofcolonies
Bacterialcountpermlofsample（CFU/ml）
10-5
0.1
10-6
107
10-7
108
Averagecountpermlofsample（CFU/ml）=
1、2、3、4、5、6、7
Exp.51Standardqualitativeanalysisofwater
Presumptivetest
1.於培養24及48小時後，檢視所有試管，並依下列說明將結果記錄於表中。
a.Positive：
24小時內試管出現10﹪或以上之氣體。
b.Doubful：
48小時後試管出現氣體。
c.Negative：
48小時後試管中無氣體出現。
2.依表50.1決定並計算MPN值（註1）。
斜坡旁水溝
Gas
Reading
MPN
Range95﹪
probability
稀釋倍數
10-3
10-4
試管
2
3
4
5
結果
註1：
大腸桿菌群最大可能數（MPN/100ml）＝查表所得之MPN/最具意義之三種稀釋度之中間水樣稀釋度。
依上表結果得Reading值為5-3-1，經查表MPN為110，則大腸桿菌群最大可能數（MPN/100ml）＝110/10-4＝1.1×
106（cells/100ml）。
大腸桿菌群最大可能數（MPN/100ml）＝
Confirmedtest
1.檢視EMB平板，觀察是否有大腸桿菌菌落存在，並將結果記錄於表中。
2.依所得結果決定水檢體是否可飲用並記錄之。
如有大腸桿菌存在，表陽性肯定試驗，該水不可飲用，如無大腸桿菌存在，則為陰性試驗，表該水未受糞便污染可飲用。
水樣
Coliforms（EMBplate）
PotableorNonpotable
PartC：
Completedtest
1.檢視乳糖醱酵培養是否有氣體產生。
2.取金屬綠光澤菌落進行革蘭氏染色，鏡檢觀察有無革蘭氏陰性短桿菌存在，此乃表示大腸桿菌，故水不可飲用。
將革蘭氏反應及細菌形態記錄於表中。
Lactosebroth
A/G（+）or（-）
Gramstain
Potablility
Reaction/Morphology
Potable
Nonpotable
Exp.52Quantitativeanalysisofwater：
Membranefiltermethod
1.計數濾膜片上之菌落數，並將結果記錄於下表中。
水樣來源
總菌數
（CFUs/10ml）
（CFUs/100ml）
大腸桿菌群菌數（CFUs/100ml）
Exp.39Cultivationandenumerationofbacteriophages
1.觀察所有平板上菌苔中之溶菌斑形成單位（PFU：
plaque-formingunits）。
2.計數PFUs數目介於30-300的平板。
3.根據PFU計數結果，計算原來的噬菌體保存液中每毫升含有之噬菌體數目。
4.將結果記錄於表格中。
Phagedilution
NumberofPFUs
calculation：
PFUs×
dilutionfactor
PFUs/mlofstockphageculture
Averagecountpermlofstockphageculture（PFUs/mL）＝
1、2、3、4、5、6
Exp.48Microbiologicalanalysisoffoodproducts：
Bacterialcount
1.計數各平板上之菌落數目，計數時選擇菌落數介於30-300之平板，如菌落數少於30，列為太少不計（TFTC：
toofewtoocount），如大於300，列為太多不計（TNTC：
toonumeroustocount）。
2.將菌落數乘以稀釋倍數，計算食物檢體中每毫升之菌數。
3.將平板上之菌落數及食物檢體中每毫升之含菌數記錄於下表中。
食物檢體
名稱
dilution
Dilutionfactor
Numberofcoloniesperplates
Numberoforganismsperml
10-1
102
10-2
103
104
4.檢視eosin-methyleneblueagar（EMB）平板培養，觀察表面是否有金屬綠光澤之菌落，此乃大腸桿菌（E.coli），以（＋）或（－）表示有無大腸桿菌存在食物檢體中及此食物是否受糞便污染。
食物檢體名稱
E.coli（＋）or（－）
Fecalcontamination（＋）or（－）
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