美国伯乐电转化仪使用说明之欧阳治创编Word格式.docx
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【介绍】
电穿孔是功能强大的将核酸、蛋白及其它分子导入多种细胞的高效技术。
通过高强度的电场作用,瞬时提高细胞膜的通透性,从而吸收周围介质中的外源分子。
这种技术可以将核苷酸、DNA与RNA、蛋白、糖类、染料及病毒颗粒等导入原核和真核细胞内。
电转化相对其它物理和化学转化方法,是一种有价值和有效的替代方法。
GenePulserXcell系统的设计,基于Bio-Rad15年来在电转化技术上经验积累,它提供指数波和方波波型选择、系统配置选择及友好的用户界面。
主要特点指数波和方波波型确保所有细胞类型(原核及真核)均可获得最佳的电转化效果Bio-Rad专利的*PulseTrac电路和电弧保护设计,确保可重复性并保护样品模块化设计可根据研究需要选择系统用户友好的数字化界面,具有直观的编程以控制所有参数,包括附属模块的参数包括人工操作、预设规程、用户规程、一个优化规程及其它先进功能等程序选择
指数波或方波脉冲选择
GenePulserXcell系统可产生指数波和方波波型,使你选择最适合你细胞的波型与规程。
指数波和方波均能有效地用于电转化及电融合。
电穿孔波型对不同类型细胞的转化效率有很重要的影响。
左,指数衰变脉冲。
当一个充电至电压为V0的电容器放电到细胞,加在细胞上的电压随时间以指数方式下降。
从起始电压下降到V0/e所需的时间称为为时间常数τ,一种方便的脉冲时间表达方式。
右,方波脉冲。
放电到样品后截断电容器脉冲可产生方波脉冲。
脉冲时间为细胞被放电的时间。
所有方波设备都会产生细微的电压下降。
这种电压下降称为脉冲下垂,并以起始电压的百分比计量。
PulseTrac电路和电弧保护提供可靠的、可重复的和安全的性能Bio-Rad独创的专利微处理器控制电路能为任何规程提供可重复的结果,无论使用何种介质,它所产生的电压值可在全世界范围内测试。
PulseTrac电路和电弧保护:
●确保电压准确地传送到电击杯
●把CE模块中的低压电容器精确度从20%提升到10%
●便于电容器再校正,以保持精确的脉冲指标,修正电容器随着时间而发生的偏移
●提供脉冲前样品电阻测量
●当脉冲或电路中断时,可安全地自动放电降
●低电弧危险,保护设备及样品
用户友好界面,便于编程和控制
主单元上的图形界面可控制包括任何连接的附属模块在内的所有功能。
界面由一个通过功能键和字母数字键盘
操作的屏幕组成。
根据屏幕提示进行简便而直观的编程。
屏幕用于编程和显示储存与设定的程序、运行参数以及波型。
规程包括:
●人工编程以输入或编辑方波或指数衰变脉冲的所有参数
●辅助编程需要的时间常数
●预设有适合常用细菌、真菌和哺乳动物细胞株的优化程序
●优化规程
●根据不同的波型选择,显示时间常数、实际电压、脉冲间隔和脉冲时间等参数
●储存和调用前100个实验的脉冲参数
预优化规程,可快速选择程序这项功能为每个细胞株提供一组专用的预优化参数。
提供以下细胞株的预设程序
选择你所需要的系统
GenePulserXcell是由一个主单元、2个附属模块(CE与PC模块)及ShockPod
电击槽组成的模块式电穿孔系统。
CE模块与GenePulserXcell主单元配合使用可电转化多数真核细胞(包括哺乳动物细胞和植物原生质体)。
PC模块建议用于细菌和真菌的电转化,或其它需要在小体积和高电阻样品上施加高电压脉冲的应用。
【技术指标】
GenePulserXcell完全系统
包括主单元、CE模块、PC模块
输出波型:
指数衰变或方波
电压:
10–3,000V
电容10–500V,25–3,275µ
F,25µ
F增量500–3,000V,10,25,50µ
F
电阻(并联)50–1,000Ω,50Ω增量,加无穷大
样品电阻10–2,500V内,最小20Ω2,500–3,000V内,最小600Ω
方波时间10–500V:
持续时间0.05–10ms,0.05ms增量;
持续时间10–100ms,1ms增量,1–10个脉冲,间隔0.1–10s500–3,000V:
持续时间0.05-5ms,0.05ms增量,1-2个脉冲,最小间隔5s
GenePulserXcell真核系统
包括主单元、CE模块;
输出和其他规格除了无并联电阻外,输出等与完全系统相同
GenePulserXcell微生物系统
包括主元件、PC模块
200–3,000V
电容10,25,50µ
电阻(并联)50–1,000Ω增量50Ω,加无穷大
样品电阻200–2,500V内,最小20Ω
2,500–3,000V内,最小600Ω
方波时间持续时间0.05–5ms,0.05ms增量,1-2个脉冲,最小间隔5s
GenePulserXcell主单元
放电电容10,25,50µ
常规
输入电压100–120VAC或220–240VAC,50/60Hz
电源最大240W(在短放电过程中)
工作环境温度0–35°
C,湿度0–95%(无冷凝水)
安全认证EN61010,EMCEN61326A级安全认证
大小(WxDxH)主单元:
31x30x14cm
CE模块:
31x28x9cm
PC模块:
31x28x5cm
重量主单元:
6.6公斤
3.1公斤
1.9公斤
使用说明
人工操作:
1.从最初的显示屏开始
按Enter键选择实验指数式衰减
按2键,之后按Enter键选择指数式衰减并且要指定一个时间常量
按3键,之后按Enter键来选择方波
2.使用上、下键来选择屏幕上各量的参数值。
当一个参数值是加亮的,使用键盘输入一个数值,然后按Enter键来接受这个数值
3.当必要的参数输入完毕时,机器上的脉冲键就是可激活的了
4.按下脉冲键来开始电击样品
5.按返回键返回详细设定显示界面,并且进行另一次的脉冲。
使用仪器设置好的程序
1.在最初的显示界面,按4键,然后按Enter键来浏览已经设置好的程序
2.按1-3键来选择样品是细菌、真菌或是哺乳动物细胞;
按Enter键来选择组织类型和显示组织列表。
对于细菌和哺乳动物细胞预先设置好的程序,使用左、右方向键来在两个屏之间触发
3.按数字键来设置参数来使之呈现高亮状态。
然后按Enter键来选择和显示程序详细的界面
4.按脉冲键来电击样品
5.按返回键来返回程序详细界面并且来进行下一次的脉冲
使用一个用户设置好的程序
1.在最初显示界面,按5键,之后按Enter键来打开用户程序菜单并且显示第一个用户界面。
用左、右方向键来在两个界面间切换
2.按1-12键来使目标用户名高亮,按Enter键来选择名字并且显示第一个用户参数界面,使用左、右方向键来在两个界面间切换
3.按1-12键来使目标程序名高亮,按Enter键来选择名字并且显示程序详细信息界面。
仪器上的脉冲键现在是可被激活的
BIO-RAD
GenepulserxcellTMElectroporationsystem
quickguide
2009-4-5