培养基的质量控制资料Word格式.docx

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4.3.2验收合格的培养基应建立“商品化干粉培养基目录清单”，使用前对容器密闭性进行复查。

4.3.3开封的脱水培养基，每次使用前应对其质量进行检查，通过粉末的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化等判断培养基的质量变化。

若发现培养基受潮或物理性状发生明显改变则不应再使用。

4.3.4制备好的成品培养基应建立“成品培养基目录清单”，每次使用前应检查：

颜色是否发生变化?

/是否蒸发/脱水?

/是否有微生物生长?

等。

如果发生上述异常情况，则不应再使用。

5．制备好的成品培养基的质量控制

新购的不同批次的商品化培养基在使用前应进行培养基性能测试，符合要求后使用。

成品培养培养基的质量控制应包括物理指标和微生物指标的测试，根据测试结果及时填写“实验室制备培养基测试结果记录单”。

5.1物理指标控制

5.1.1测试20℃～25℃的pH值

5.1.2琼脂层厚度；

色泽；

透明度和（或）是否存在肉眼可见杂质；

凝胶稳定性、粘稠度和湿度。

5.2微生物学指标控制

可根据要求选用定量方法、半定量方法或定性方法（详见表1-表）对培养基性能进行测试，具体操作方法详见作业指导书“培养基性能测试指南”。

5.2.1微生物污染的控制

从每批制备好的培养基中选取至少一个（或1%）平板或试管，置于37℃或按特定标准中规定的温度培养18h。

5.2.2生长特性

5.2.2.1生长率

第2页共6页

将适量测试菌株的工作培养物接种至固体、半固体和液体培养基中，每种培养基上菌株的生长率应达规定的最低限值。

5.2.2.1.1定量方法

生长率PR的计算：

PR=NS/NO

NS：

从一个或多个待测培养基平板上得到的菌落总数。

N0：

从一个或多个规定的参考培养基平板上获得的菌落总数（该菌落总数应≥100cfu）。

要求：

非选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0.7，该类培养基应易于目标菌生长；

选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0.1；

每平板（或每试管）的接种水平为10CFU～100CFU。

5.2.2.1.2半定量方法

半定量方法采用生态测量技术在平板上划线，平板板连续划线区域得分的总和即为生长指数G，G值不应超过标准规定的允许范围。

5.2.2.1.3定性方法

定性方法采用划线法观察。

5.2.2.2选择性

将浓度为104CFU/mL～106CFU/mL的非目标菌工作菌株悬浮液接种至选择培养基和参考培养基中，培养基的选择性应达到规定值。

5.2.2.2.1定量方法

选择因子SF：

SF=DO-DS

DO：

能在参考培养基上生长至少10个菌落的最高稀释度

DS：

能在测试培养基上显示生长的最高稀释度

非目标菌在选择性培养基上的SF至少为2；

半定量和定量法中，非目标菌应部分或全部被抑制。

5.2.3生理生化特性（选择性和特异性）

规定培养基的基本特性，使用一套适当的测试菌株对培养基上的目标菌的生理生化特性（菌落形态、大小等）和非目标菌的被抑制程度进行测试。

5.3性能评价和结果解释

按照规定得到的所有测试菌株的性能均符合规定，则该批培养基品质优良；

若只有物理指标和微生物指标符合规定，则该批培养基可被接收。

表1计数用选择性培养基

培养基

用途

培养条件

测试菌株

参考培

养基

控制方法

判定标准

特征反应

Baird-

Parker

[S]

生长率

37℃24-48h

金黄色葡萄球菌ATCC6538/25923

TSA

定量

PR≥0.5

黑色/灰色菌落，周围为一混浊带，其外有透明带

选择性

37℃48h

大肠杆菌ATCC25922/8739

——

定性

全部抑制

特异性

表皮葡萄球菌ATCC12228

黑色/灰色菌落，周围为一混浊带，其外无透明带

MYP

30℃24-48h

腊样芽胞杆菌ATCC11778

PR≥0.7

具沉淀带的粉色菌落

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大肠杆菌ATCC25922

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购买行为有较强的感情色彩，比起男生热衷于的网络游戏，极限运动，手工艺制品更得女生的喜欢。

、DIY手工艺市场现状分析定性

（五）DIY手工艺品的“价格弹性化”——

枯草芽胞杆菌ATCC6633

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不具沉淀带的粉色菌落

5、你认为一件DIY手工艺制品在什么价位可以接受？

（3）优惠多惠山疾控

是□否□作业指导书

第3页共6页

表1计数用选择性培养基（续）

VRBG（结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂）

37℃24h

带有或不带沉淀带的粉红色或红色菌落

鼠伤寒沙门菌ATCC14028

37℃20h

粪链球菌ATCC29212/19433

VRBL（紫红胆汁乳糖）

30℃20h

带有或不带沉淀带的淡紫色菌落

铜绿假单胞菌ATCC27853

--

无色至浅棕色菌落

CT-SMAC（改良山梨醇麦康凯琼脂）

大肠杆菌O157：

H7

ATCC43894/43895

透明菌落，表面淡黄棕色，菌落直径约1mm

大肠杆菌ATCC11775/25922

粉色菌落

BGBLB（煌绿乳糖胆盐肉汤）

[L]

半定量

浊度2+，导管1/3产气

产气并浑浊

弗氏柠檬酸杆菌

ATCC25922/8739

不生长

EC

44℃24～48h

浊度2+，导气管1/3产气

铜绿假单胞菌ATCC27853b

EC-MUG/

LS-MUG

产气并浑浊，产生荧光

乳糖胆盐发酵培养

导气管1/3产气

产气并变黄色

不产气、仍为紫色

LST（月桂酸肉汤）

福氏志贺氏菌CMCC51572

表2计数用非选择性培养基

PCA（平板计数琼脂）

30℃72h

金黄色葡萄球菌ATCC6538

枯草芽孢杆菌ATCC6633

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表3选择性增菌培养基

EE

VRBG上＞10CFU

粉红至红色菌落，有或没有沉淀带

粪肠球菌ATCC29212

RVS

41.5℃24h

XLD或其他选择性培养基上＞10CFU

肠炎沙门氏菌ATCC13076

TSA上全抑制

粪链球菌

ATCC29212

TSA上＜10CFU

SC（亚硒酸盐胱氨酸）

不同培养基上菌落特征不同（见标准）

+大肠杆菌ATCC25922

+铜绿假单胞菌ATCC27853b

TTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）

伤寒沙门菌CMCC50071

碱性蛋白胨水

霍乱弧菌CMCC16109

TCBS或其他选择性培养基上＞10CFU

副溶血性弧菌CMCC20001

7.5%氯化钠肉汤[L]

B-P平板或其他培养基上＞10CFU

表4非选择性增菌培养基

BHI

浊度1～2

蛋白胨盐

稀释

20～25℃45min

+/-50%菌落数/至（+/-50%原始菌落数

金黄色葡萄球菌ATCC25923

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表4非选择性增菌培养基（续）

乳糖蛋白胨肉汤

SCDLP液体培养基

液体沙氏培养基[L]

26℃5天

白色念珠菌CMCC98001

真菌培养基[L]

表5选择性分离培养基

亚硫酸酸铋琼脂（BS）

良好生长

（2）

菌落呈黑色，有金属光泽

菌落呈棕色

全部或部分抑制（0～1）

无典型菌落

全部抑制（0）

XLD

菌落呈黑色

福氏志贺氏菌CMCC51573

菌落呈无色

血琼脂平板

37℃24～48h

良好生长

β溶血，透明溶血环

粪链球菌ATCC29212

α溶血,草绿色溶血环

TCBS

菌落较大，呈黄色

菌落较大，呈绿色

4号琼脂

菌落较大、扁平透明、湿润、中心带有黑色

非O1群霍乱弧菌CMCC17045

第6页共6页

表5选择性分离培养基（续）

伊红美兰琼脂

菌落紫黑色带金属光泽

菌落灰白色半透明

TSI（三糖铁琼脂）

斜面及底层均变黄，产气，硫化氢阳性

普通变形杆菌

CMCC49001

底层变黄，斜面变红，不产气，硫化氢阴性

底层变黄，斜面变红，产气，硫化氢阳性

表6非选择性分离培养基

营养琼脂

鼠伤寒沙门菌ATCC14028c

小肠耶尔森氏菌ATCC23715

5．记录

培养基验收检查记录单HSCDC/ZJ-19-29A

商品化培养基目录清单HSCDC/ZJ-19-30A

成品培养基目录清单HSCDC/ZJ-19-31A

实验室制备培养基测试结果记录单HSCDC/ZJ-19-33A

6．参考文献

6.1GB/T27405-2008.实验室质量控制规范食品微生物检测[S].

6.2SN/T1538.1-2005.培养基制备指南第1部分：

实验室培养基制备质量保证通则[S].

6.3SN/T1538.2-2007.培养基制备指南第2部分：

培养基性能测实用指南[S].

6.4纪绍梅.微生物培养基质控与图解[M].北京:

北京科学技术出版社,2006.

更改

编制

审核

批准

日期

培养基验收检查记录单

HSCDC/ZJ-19-29A共页第页

序号

名称

编号

生产厂家

批号

数量

接收日期

有效期限

验收记录

储存条件

备注

MR08001

20瓶

20091014

包装完好，标识清晰

验收者：

复核者：

商品化培养基目录清单

HSCDC/ZJ-19-30A共页第页

首次开封日期

容器密封性复查

内容物感官检查

密封

不密封

正常

受潮

变色

制单者：

成品培养基目录清单

HSCDC/ZJ-19-31A共页第页

配制日期

首次使用日期

末次使用日期

培养基质量检查

脱水

长菌