临床分子生物学检验复习题Word文档格式.docx

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在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝.

9、载体:

能在连接酶的作用下和外源DN**段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA分子.

10、转化:

指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程.

11、感染:

以噬菌体,粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增.

12、转导:

指以噬菌体为载体,在细菌之间转移DNA的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程.

13、转染:

指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程.

14、DNA变性:

在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响.

15、DNA复性:

当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成

16、癌基因:

是细胞内控制细胞生长的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性.当癌基因

17、核酶:

是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA组成的酶,可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂.

18、DNA变性:

19、反义RNA:

碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA.可以作为一种调控特定基因表达的手段

20、DNA复性:

当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构.

21、退火:

指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交链.

22、定量PCR:

基因表达涉及的转录水平的研究常需要对mRNA进行定量测定,对此采用的PCR技术就叫定量PCR.

23、基因表达:

24、基因治疗:

一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞,以最终达到预防或改变特殊疾病状态为目的治疗方法.

25、管家基因:

在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因.

26、SD序列:

转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16SrRNA3,末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点.

27、核酸探针:

探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用,并在相互作用之后可以检测出来的生物大分子.核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段DNA或RNA分子.

28、周期蛋白:

是一类呈细胞周期特异性或时相性表达,累积与分解的蛋白质,它与周期素依赖性激酶共同影响细胞周期的运行.

二,问答题

1、影响DNA稳定性的因素有哪些

氢键，磷酸酯键，碱基堆积力，疏水作用力

2、受体的特点有哪些？

1,高度专一性;

2,高度亲和性;

3,可逆性;

4,可饱和性;

5,特定的作用模式

3、什么是基因组？

细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和.

4、基因工程的定义是什么？

有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程.

5、请问哪些条件可促使DNA复性（退火）

降低温度.pH值和增加盐浓度可以促进DNA复性（退火）

6、原核基因组的特点有哪些？

①为一条环状双链DNA;

②只有一个复制起点;

③具有操纵子结构;

④绝大部分为单拷贝;

⑤基因一般是连续的,无内含子;

⑥重复序列很少.

7、病毒基因组的特点有哪些

①种类单一;

②单倍体基因组:

每个基因组在病毒中只出现一次;

③形式多样;

④大小不一;

⑤基因重叠;

⑥动物/细菌病毒与真核/原核基因相似:

内含子;

⑦具有不规则的结构基因;

⑧基因编码区无间隔:

通过宿主及病毒本身酶切;

⑨无帽状结构;

⑩结构基因没有翻译起始序列.

8、真核基因组的特点有哪些

①真核生物基因组远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数庞大,具有多个复制起点;

②基因组DNA与蛋白质结合成染色体,储存于细胞核内;

③真核基因为单顺反子,而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子;

④基因组中非编码区多于编码区;

⑤真核基因多为不连续的断裂基因,由外显子和内含子镶嵌而成;

⑥存在大量的重复序列;

⑦功能相关的基因构成各种基因家族;

⑧存在可移动的遗传因素;

⑨体细胞为双倍体,而精子和卵子为单倍体.

9、乳糖操纵子的组成有哪些？

大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶,透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I.

10、什么是转基因动物？

是指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内,并能稳定传代的一类动物

11、什么是限制性核酸内切酶

是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶.

12、基因突变的类型有哪些？

①点突变:

DNA大分子上一个碱基的变异.分为转换和颠换.

②缺失:

一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失.

③插入:

一个原来没有的碱基或一段原来没有的核苷酸链插入到DNA大分子中间.

④倒位:

DNA链内重组,使其中一段方向倒置.

12、简述转基因动物的主要应用有哪些

（1）建立用于研究外源基因表达调控体系;

（2）建立医学中常用的疾病模型;

（3）培育动物新品种;

13、什么是细胞癌基因？

存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长,增殖,分化和发育等生理功能.在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因,当其受到某些条件激活时,结构和表达发生异常,能使细胞发生恶性转化.

14、什么是病毒癌基因？

存在于病毒（大多是逆转录病毒）基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因.它不编码病毒结构成分,对病毒无复制作用,但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用.

15、RFLP的定义是什么?

RFLP即限制性片段长度多态性,个体之间DNA的核苷酸序列存在差异,称为DNA多态性.若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化,称为RFLP.

三、综合题

1、实时PCR中两种荧光检测方法各有什么优缺点？

（1）染料技术

优点：

成本较低，无须对引物或探针进行特殊的荧光标记，操作亦比较简单。

缺点：

特异性不够，染料分子会结合到非特异性扩增产生的双链分子和引物二聚体中，使反应体系中的荧光本底较高。

（2）探针技术

高度特异性；

重复性好；

灵敏度高；

可进行多重定量

只适合一个特定的目标；

委托公司标记，价格较高；

不易找到本底低的探针。

2、简述真核生物转录后水平的调控机制

答1）,5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化的调控意义:

5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化是保持mRNA

稳定的一个重要因素,它至少保证mRNA在转录过程中不被降解.

（2）,mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用

（3）,mRNA运输的控制

3、简述良好载体具有的条件

1,必须有自身的复制子;

2,载体分子上必须有多克隆位点,以供外源DNA插入;

3,载体应具有可供选择的遗传标志,以区别阳性重组子和阴性重组子;

4,载体分子必须有足够的容量;

5,可通过特定的方法导入细胞;

6,对于表达载体还应具备与宿主细胞相适应的启动子等DNA调控元件.

4、简述核酸分子杂交的原理

答:

具有互补序列的两条单链核酸分子在一定的条件下（适宜的温度及离子强度等）碱基互补配对结合,重新形成双链;

在这一过程中,核酸分子经历了变性和复性的变化,以及在复性过程中个分子间键的形成和断裂.杂交的双方是待测核酸和已知序列.

5、简述探针的种类和优缺点

1）cDNA探针:

通过逆转录获得cDNA后,将其克隆于适当的克隆载体,通过扩增重组质粒而使cDNA得到大量的扩增.提取质粒后分离纯化作为探针使用.它是目前应用最为广泛的一种探针.

2）基因组探针:

从基因组文库里筛选得到一个特定的基因或基因片段的克隆后,大量扩增,纯化,切取插入片段,分离纯化为探针.

3）寡核苷酸探针:

根据已知的核酸顺序,采用DNA合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段作为探针.

4）RNA探针:

采用基因克隆和体外转录的方法可以得到RNA或反义RNA作为探针.

6、简述PCR反应的原理及步骤

PCR反应,是体外合成特定DNA片段的分子生物学技术。

反应分为三步：

1.变性：

在高温条件下，DNA双链解离形成单链

2.退火：

温度突然降低，引物与其互补的模板在局部形成杂交链

3.延伸：

聚合酶催化以引物为起始点的DNA链延伸反应。

7、简述转基因动物的概念,原理

概念:

是指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内,并能稳定传代的一类动物.它的特点是"

分子及细胞水平操作,组织及动物整体水平表达"

.

基本原理:

将目的基因或基因组片段用显微注射等方法注入实验动物的受精卵或着床前的胚胎细胞中,使目的基因整合到基因组中,然后将此受精卵或着床前的胚胎细胞再植入受体动物的输卵管或子宫中,使其发育成携带有外源基因的转基因动物,人们可以通过分析转基因和动物表型的关系,揭示外源基因的功能;

也可以通过转入外源基因培育优良的动物品种.

8、简述突变的遗传效应

①遗传密码的改变:

错义突变,无义突变,同义突变,移码突变

②对mRNA剪接的影响:

一是使原来的剪接位点消失;

二是产生新的剪接位点.

③蛋白质肽链中的片段缺失:

9、简述三种RNA在蛋白质合成过程中的作用

RNA有三种mRNA、tRNA、rRNA

mRNA是DNA转录产物，含有DNA遗传信息，是蛋白合成的模板；

tRNA携带运输活化了的氨基酸，参与蛋白质的生物合成，转运氨基酸到正确位置。

rRNA不单独存在，与其他蛋白质构成蛋白体，核蛋白体是蛋白质合成的场所。

10、以mRNA为例，说明RNA转录的基本过程

（1）剪接：

去除内含子，拼接外显子

（2）加帽：

5’端加帽子，7-甲基鸟嘌呤核苷三磷酸

（3）加尾：

3’端加多聚腺苷酸尾。

（4）碱基修饰：

甲基化

教育之通病是教用脑的人不用手，不教用手的人用脑，所以一无所能。

教育革命的对策是手脑联盟，结果是手与脑的力量都可以大到不可思议。