传递窗验证方案版Word格式.docx

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是一种洁净室的辅助设备，主要用于洁净区与洁净区之间，洁净区与非洁净区之间小件物品的传递，以减少洁净室的开门次数，使洁净室的污染降低到最低程度。

传递窗内安装有紫外灯，物品经紫外线照射消毒后进入洁净区。

紫外线是一种电磁辐射，波长190～350nm，其中以的杀菌力最强，可使DNA链上相邻嘧啶碱基之间形成二聚体，抑制DNA的复制，导致突变或死亡。

紫外线的杀菌力与紫外线强度、照射时间、温度和湿度等因素有关。

本方案包括该设备的安装确认、运行确认和性能确认等内容。

在确认过程中出现任何偏差，必须及时解决偏差之后再进行下一步的确认。

实施内容

时间安排

安装确认

运行确认

性能确认

2实施计划3验证小组成员

部门

姓名

职责

QA

负责验证方案、验证报告的批准

负责验证方案、验证报告的审核

QC

负责验证方案、验证报告的审核，指导和监督方案的实施

负责验证方案、验证报告的起草，参加方案的实施

负责验证方案、验证报告的审核，协助方案的实施

4仪器及用具

名称

型号或规格

校验单位

校验编号

有效期

细菌培养箱

GNP-9270型

广州市计量所

霉菌培养箱

SHP-150型

数显式温湿度计

DWS508D

紫外线强度测定仪

TN-2254

净化工作台

HS-1300-V型

——

电动混匀器

G560E

移液器

～10ul

100～1000ul

5菌株和培养基

批号

生产厂家

营养琼脂培养基

改良马丁琼脂培养基

营养肉汤培养基

改良马丁培养基

金黄色葡萄球

[CMCC（B）26003]

枯草芽孢杆菌

[CMCC（B）63501]

大肠杆菌

[CMCC（B）44102]

白色念珠菌

[CMCC（F）98001]

6安装确认

由供应商技术人员作为主要安装人员，工程部人员协助安装。

安装过程中对装置及其工作状态进行检查。

若确认过程中发现因为紫外灯管不符合要求而造成偏差，工程部人员负责紫外灯管的申购与更换。

将安装确认结果记录于附件1和附件2。

确认项目

描叙

工作环境确认

传递窗应安装在非洁净区（培养室）与洁净区（洁净走廊）之间。

非洁净区温度应为18℃～27℃；

相对湿度应为40%～80%。

电源确认

设备的电源应正确连接，工作电源：

AC（220±

22）V。

装置确认

确认紫外灯管功率。

紫外灯管应正常，无损坏，匹配，紧密连接。

传递窗侧门垫圈应配套、密合、完好。

传递窗内部与紫外灯管表面应清洁，表面无尘土。

传递窗内表面材质应为不锈钢，平整光洁耐磨。

备件

确认是否有相同型号规格的紫外灯管备用。

7运行确认

运行确认在安装确认之后进行，若安装确认出现偏差，须在解决偏差之后进行。

通过对传递窗进行试运行，以证明设备各项技术参数和功能能达到本公司设定要求。

将运行确认结果记录于附件3和附件4。

SOP确认：

确认是否有传递窗使用的SOP，作为传递窗使用操作的技术支持与指导。

验证全过程必须严格按照此SOP对传递窗进行操作。

设备操作功能确认：

逐项确认各项操作功能，结果均应符合要求。

互锁确认:

两侧门设有互锁装置，确保两侧门不能同时处于开启状态。

辐照强度测定：

开启紫外灯5min后，用中心波长为的紫外线强度测定仪

在灯管下方垂直中心操作面处测量其辐照度值（uW/cm2）。

普通型或低臭氧型直管紫外灯，新灯管的辐照度值应为：

功率10W，≥65uW/cm2；

功率15W，≥145uW/cm2。

使用中的灯管其辐照度值：

功率10W，≥45uW/cm2；

功率15W，≥100uW/cm2，低于此值者应予以更换。

7.5紫外强度分布：

开启紫外灯5min后，在传递窗底部测量中央及四角5个位置的紫

外线强度（uW/cm2），确定紫外线强度最弱位置。

以紫外线强度最弱位置达到所需照射剂量的时间作为消毒合格时间。

洁净区

非洁净区

8性能确认

确认紫外灯对细菌及其芽孢和真菌的杀灭效果。

性能确认在运行确认之后进行，若运行确认出现偏差，须在偏差解决之后进行。

培养基的制备

8.1.1营养琼脂培养基

配方：

营养琼脂培养基粉

纯化水1000ml

配制：

称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至±

，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×

15分钟。

8.1.2改良马丁琼脂培养基

改良马丁琼脂培养基粉

称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至±

，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115℃×

20分钟。

8.1.3营养肉汤培养基

营养肉汤培养基20g

称取营养肉汤培养基20克，加1000ml纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121℃×

8.1.4改良马丁培养基

改良马丁培养基粉

称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至±

菌悬液的制备

8.2.1接种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中,30～35℃培养18～24小时；

接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中,23～28℃培

养18～24小时。

8.1.1细菌芽孢悬液的制备：

8.1.1.1取枯草芽孢杆菌增菌液适量至营养琼脂培养基斜面，使菌液布满营养琼脂培养基

斜面，30～35℃培养5～7天。

用接种环取菌样少许涂于玻片上，固定后以改良芽孢染色法染色，并在显微镜（油镜）下进行镜检。

当芽孢形成率达95％以上时，即可进行以下处理。

否则，应在室温下放置一定时间，直至达到上述芽孢形成率后再进行以下处理。

8.1.1.2取适量无菌水于营养琼脂培养基斜面，以L棒轻轻推刮下菌苔。

吸出第一批洗下

的菌悬液，再取适量无菌水于营养琼脂培养基斜面，重复洗菌一遍。

将第一和第二批洗下的菌悬液集中于一含玻璃珠的无菌三角烧瓶内，振摇5min，打碎菌块，使成均匀的芽孢悬液。

8.1.1.3将芽孢液放于80℃水浴中10min（或60℃，30min），以杀灭残余的细菌繁殖体。

待冷至室温后，保存于4℃冰箱中备用。

有效使用期为半年。

8.2稀释液

1％蛋白胨—PBS溶液：

取磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、蛋白胨，加水1000ml，微温溶解，分装，置高压灭菌器121℃×

30分钟灭菌。

8.3菌片的制备

8.3.1试验中使用的菌片是以菌液滴加于载体上制成（×

的不锈钢片）。

所

用载体染菌前应进行脱脂处理。

脱脂方法如下：

①将载体放在含肥皂的水中煮沸30min；

②纯化水洗净；

③纯化水煮沸10min；

④用纯化水漂洗至pH呈中性；

⑤晾干备用。

8.3.2载体经灭菌后使用滴染法染菌。

将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注

10ul菌悬液，用10ul移液器接灭菌塑料吸头，滴染菌液，并用接种环涂匀整个载体表面。

滴染菌液后，染菌载体可置超净台上晾干后使用。

8.3.3每个菌片的染菌量即回收菌量应为1×

105～5×

106cfu/片。

8.4载体定量消毒试验

8.4.1取4种菌染菌载片各4个。

开启紫外灯5min后，将16个染菌载片平放于无菌平

皿内，水平放于紫外线强度最弱的位置处照射，于4个不同间隔时间（15min、30min、45min、60min）各取出1个染菌玻片，分别投入4个盛有10ml稀释液的试管中，用电动混匀器震荡20s或振打80次，洗脱载片上的菌体。

8.4.2取洗脱液或其稀释液1ml，作平板倾注。

细菌放30～35℃培养48小时做活菌计

数，真菌放23～28℃培养72小时做活菌计数。

8.4.3阳性对照，除不做照射处理外，操作同上。

8.4.4杀灭对数值计算

杀灭对数值（KL）＝对照组活菌浓度对数值-试验组活菌浓度对数值

8.4.5消毒合格时间

在照射强度最弱处，对细菌及其芽孢和真菌的杀灭对数值≥3所需的时间即为消毒合格时间。

其它传递窗，确定最弱照射强度后，根据所需照射剂量确定消毒合格时间。

照射剂量（uW·

s/cm2）＝紫外线照射强度（uW/cm2）×

时间（s）

将性能确认结果记录于附件5。

9再验证

9.1传递窗构造或紫外灯管安装位置发生改变时，需进行再验证。

9.2若无任何改变或偏差时，每6个月对该系统进行紫外灯强度确认。

10修改事项

在实施过程中，如果方案需要修改，必须提交书面报告，阐述修改的原因、修

改的内容，并经过相关部门及QA的认可。

修改后的方案同先前执行的方案一起归档。

11相关SOP

编号

文件名称

微生物实验室管理

物品进出微生物检验室

微生物检验区的清洁消毒

培养基的配制

细菌的接种、传代和保存

高压灭菌

微生物数量的测定

12附件

附件名称

附件1

安装确认记录1（微生物室）

附件2

安装确认记录2（无菌室）

附件3

运行确认记录1（微生物室）

附件4

运行确认记录2（无菌室）

附件5

性能确认记录

方案结束（转载请注明来源：

）