《微生物肥料学》11页Word文档下载推荐.docx

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企业数量扩张快，县、公社（乡）、大队生产模式；

设备落后，产品质量难控制；

持续时间短，无行业管理，无标准。

第三阶段——20世纪60~70年代：

企业数量继续扩张，少有正规发酵设备的企业；

产品种类不少，质量不高；

根瘤菌接种剂、放线菌、固氮蓝绿藻肥和VA菌根研究为主；

无标准，无行业管理；

持续时间不长，逐步有一些应用基础研究。

第四阶段——20世纪80年代至今：

无序发展、有序发展和创新发展三个阶段。

20.生物肥力的概念是什么？

生物肥力是如何形成的？

土壤生物肥力是指生活在土壤中的微生物、动物、植物根系等有机体为植物生长发育所需要营养的贡献。

同时，生物过程对土壤的物理特性、化学特性起到良好的促进和维持作用。

生物肥力的形成：

（1）分解有机物和动植物残渣；

（2）转换复合物的化学形态，影响这些物质的有效性；

（3）分解杀虫剂和除草剂等复合物；

（4）产生抗生素以利抵抗土传病害；

（5）产生黏合物质利于土壤胶体和团粒结构形成；

（6）通过共生作用，为植物提供营养。

21.常见的促进作物生长活性物质有哪些？

生长素、细胞分裂素（cytokinin，CTK）、吲哚-3-乙酸（indole-3-aceticacid，IAA）、赤霉素（Gibberellin，GA）等活性物质。

第二章微生物肥料产品种类及特点

40.固氮菌有哪些类型？

各自的固氮机理有何差别？

（1）共生固氮菌：

主要通过与宿主植物形成共生固氮体系，进行生物固氮。

（2）自生固氮菌：

是指由人工培育的、能直接固定空气中的氮素并能产生促进作物生长物质的一类菌剂。

主要分布于细菌和蓝细菌的不同科、属及生理群中，如红螺菌、红硫细菌、绿硫细菌和梭状芽孢杆菌等都是自生固氮菌，利用光能或化能固氮。

（3）联合固氮菌：

主要是聚集在根表或通过植物根部伤口定植到根内，不形成根瘤状特异化结构的一种特殊共生固氮体系，其中联合固氮微生物以根际分泌物为碳源和能源，而植物则得到固氮菌固定的氮及分泌的生物活性物质。

41.简述PGPR的促生机理。

（1）促生机理：

产生调节植物生长的信号物质（吲哚乙酸、赤霉素、细胞分裂素和乙烯）、共生固氮、溶解磷矿物及其它养分、产嗜铁素、抗生素和氰化物抵抗病原菌等。

（2）PGPR的促生机理可分为直接作用途径和间接作用途径，直接作用体现在固氮、溶磷和解钾作用和产生植物生长调节物质两方面；

间接作用体现为通过与病原菌竞争有限的生活空间和营养来间接促进植物生长。

42.溶磷微生物和解磷微生物各有哪些？

目前报道的具有磷营养转化作用的微生物有芽孢杆菌、假单胞杆菌、欧文氏菌、土壤杆菌、沙雷氏菌、黄杆菌、肠细菌、微球菌、固氮菌、根瘤菌、沙门氏菌、色杆菌、产碱菌、节细菌、硫杆菌、埃希氏菌等。

43.解钾微生物有哪些类型？

如何培养？

（1）解钾微生物（硅酸盐细菌）：

芽孢杆菌属，邻单胞菌属

（2）解钾微生物筛选培养基：

蔗糖5g，硝酸氮3g，NaH2PO41g，氯化亚铁0.1g，硫酸镁1g，钾长石5g，水1000mL。

（3）筛选方法：

初筛溶解圈较大的菌株分别接入解钾液体培养基中用四苯硼钠法进行复筛。

30.菌种选育的方法有哪些？

（1）自然选育；

（2）诱变育种；

（3）原生质融合技术；

（4）杂交技术；

（5）基因工程技术。

31.引起菌种衰退的原因有哪些？

（1）营养不足或保藏条件不当；

（2）多次传代；

（3）培养条件不合适；

（4）杂菌侵染；

（5）其它原因。

32.如何防止菌种的衰退？

（1）控制传代次数：

不超过7代，易变异的不过5代；

（2）砂土管、冻干管保藏的原种，开启不能超过3次，以防污染；

（3）选择良好保藏方法：

保证菌不死、不衰、保存活性及原有典型性状；

（4）良好的培养条件：

注意斜面菌株的培养条件（保藏、活化培养基）；

（5）采用不同类型的细胞进行接种。

33.如何进行菌种的复壮？

（1）纯种分离；

（2）淘汰已衰退的个体；

（3）通过寄主体进行复壮。

34.厌氧微生物细分为哪几类？

厌氧微生物根据对氧不同程度的利用特性可分为专性厌氧菌（obligateanaerobes）、严格厌氧菌（strictanaerobes）、耐氧厌氧菌（aerotolerantanaerobes）、兼性厌氧菌（facultativeanaerobes）、微好氧菌（microaerobes）。

35.厌氧微生物如何取样、分离？

取样要点：

（1）取样时要避免接触空气，尽可能快带回实验室，不要冷冻处理；

（2）尽快置于合适的培养基，在相应厌氧条件下培养；

（3）不要使用富集培养物或转移培养基，可用稀释液或直接从样品划线培养。

厌氧微生物的分离：

在滚管法中，附着在试管壁的膜状培养基上会形成菌落，在无氧气体保护下，用120°

弯头毛细管将单菌落吸入新液体无菌厌氧培养基中，使菌落混入厌氧管或厌氧瓶中，培养后，镜检或测定代谢产物，得到较纯培养物，重复上述操作直至获得纯培养物。

36.厌氧微生物的计数有哪些方法？

各自适合的菌型有何特点？

（1）平板法——兼性厌氧菌；

（2）滚管法——专性厌氧菌；

（3）MPN（mostprobablenumber）法——此法对于用通常平板培养法不能计数，而通过特异性代谢或菌体特性可检查有无生长的厌氧微生物适用，如光合细菌、硫酸盐还原菌、梭菌属微生物。

（4）直接计数法——此方法要求对厌氧菌显而易见的特性比较清楚，能够在显微镜下识别该菌。

第四章微生物肥料的生产工艺

28.根据目前微生物肥料产品中菌种的使用统计，列出不少于6种微肥常用菌种。

枯草芽孢杆菌（873）、胶冻样类芽孢杆菌（281）、巨大芽孢杆菌（208）、地衣芽孢杆菌（162）、酿酒酵母（106）、侧孢短芽孢杆菌（96）、细黄链霉菌（72）、解淀粉芽孢杆菌（68）、植物乳杆菌（60）、黑曲霉（38）、米曲霉（34）等。

29.简述菌种扩大培养的工艺流程。

冷冻干燥管→斜面活化→摇瓶或茄子瓶或固体三角瓶培养→车间一级种子→车间二级种子→发酵。

30.简述液体微生物肥料的生产工艺流程。

保藏原种→菌种纯度及重要特性检查→菌种活化→种子扩大培养（摇瓶→一级种子罐培养→二级种子罐培养）→扩大发酵→分装包装。

31.简述固体微生物肥料的生产工艺。

保藏原种→菌种纯度及重要特性检查→菌种活化→种子扩大培养【固态三角瓶孢子制备→固态培养制备大批量孢子（曲房或帘子曲）】→扩大堆积发酵→添加灭菌辅料→干燥→分装包装。

32.微生物肥料成品检验的主要指标有哪些？

根据《NYT2321-2013微生物肥料产品检验规程》标准，微生物肥料成品检验的主要指标有：

有效（活）菌数、杂菌率、有机质、总养分含量、细度、pH、粪大肠菌群数、蛔虫卵死亡率、重金属含量、保质期和微生物肥料效应等。

28.半数致死量（LD50）：

是经口给予受试物后，预期能够引起动物死亡率为50%的单一受试物剂量，该剂量为经过统计得出的估计值。

其单位是每千克体重所摄入受试物质的毫克数、克数或毫升数，即mg/kg体重、g/kg体重或mL/kg体重。

30.请列出微生物肥料临时登记所需资料的种类。

（1）微生物肥料登记申请表；

（2）初审意见表；

（3）企业质量保证和质量控制条件考核表；

（4）工商注册证明；

（5）商标注册证明；

（6）生产企业基本情况；

（7）产品及生产工艺概述；

（8）无知识产权争议声明；

（9）产品执行标准；

（10）产品标签样式（11）肥效试验资料；

（12）菌种分类地位和菌种安全鉴定报告；

（13）毒性报告；

（14）样品。

31.请列出微生物肥料正式登记所需资料的种类。

（1）微生物肥料正式登记申请表；

（2）微生物肥料示范、试验资料；

（3）肥料样品；

（4）生产者基本情况；

（5）产品执行标准；

（6）产品标签样式；

（7）产品毒性报告。

第六章微生物肥料施用技术

30.配方施肥量的估算方法有哪些？

（1）地力分区（分级）法：

按土壤肥力高低划分为3级或5级，对各级别做一个配方施肥方案，结合当地群众经验，计算对应级别区域适宜肥料种类及使用量。

针对性强，易接受，但有局限，精确度较差。

（2）养分平衡法：

根据作物产量的构成，由土壤和肥料两个方面供给养分的原理来计算施肥量。

此法应用广泛。

（3）肥料效应函数法：

以田间试验为基础，采用先进的回归设计，得出经不同处理的产量与施肥量之间的数量关系，即肥料效应函数或称肥料效应方程式。

此法反馈性好，优先配方法。

31.选择施肥时期的一般原则是什么？

及时满足作物需要，提高肥料利用率，尽量减少施肥次数而节省劳力。

32.微生物肥料的一般施用方法有哪些？

（1）基肥：

在作物播种或移栽前施用的肥料。

（2）种肥：

与作物种子播种或幼苗定植时一起施用的肥料。

（3）追肥：

作物生长中加施的肥料。

33.菌根菌如何分类？

根据菌根形态结构可分为外生菌根、外内生菌根和内生菌根；

内生菌根又分为有隔菌丝的内生菌根和无隔菌丝的内生菌根。

34.微生物肥料施肥时的原则及注意事项有哪些？

原则：

（1）要保证微生物肥料有足够数量的有效微生物。

（2）创造适合有益微生物生长的环境和营养条件。

施用使用注意事项：

（1）微生物肥料要求避免阳光直射；

（2）拌种时加水要适量，使种子完全吸附；

（3）拌种后要及时播种，以免种皮上微生物大量死亡；

（4）微生物肥料不可与有害的农药、化肥混合使用；

（5）有适宜的土壤环境：

pH、水分、通气性、温度等；

（6）适宜的营养条件：

能源及各种养分。

GB20287-2006农用微生物菌剂适用于农用微生物菌剂类产品。

包括根瘤菌菌剂、固氮菌菌剂、解磷类微生物菌剂、硅酸盐微生物菌剂、光合细菌菌剂、有机物料腐熟剂、促生菌剂、菌根菌剂、生物修复菌剂等。

复合菌剂，每一种有效菌的数量不得少于0.01亿/g（mL）；

以单一的胶质芽胞杆菌（Bacillus

mucilaginosus）制成的粉剂产品中有效活菌数不少于1.2亿/g。

BM菌剂-生产工艺

☞发酵方式

目前是单株菌发酵，先液体后固体，再复配。

☞工艺流程

试管→三角瓶培养→种子罐培养→固体培养→干燥→组配→成品

计数规则

菌落计数的时限（细菌定温培养1～2天；

真菌5～7天计数）

稀释度范围（至少3个，视试样含菌量而定）

菌落计数的数量标准

每稀释度2～4个重复，丝状真菌10～150，其它微生物20～300之间。

稀释度的选定原则

选用一个平均菌落数在数量标准之内的稀释度（例1-3）；

若2稀释度平均数在数量标准内时，比值＜2倍，取平均值（例4）；

比值＞2倍，取值小者（例5）；

稀释度的平均菌落数超出数量标准范围时，应重新用更高或更低的

稀释度进行计数。

数据处理（2位有效数字报告，后续数字均可四舍五入）

⑴蜡样芽孢杆菌：

致人腹泻；

⑵不动杆菌：

产生乙酸致鱼类感染而大面积死亡。

①铜绿假单胞菌：

产酸，溶磷；

致人畜伤口化脓，不易愈合；

②肺炎克雷伯氏菌：

固氮；

但致老幼肺炎病；

专性厌氧菌（obligateanaerobes）：

只能在无氧条件下生长的微生物（如梭状芽孢杆菌属、产甲烷杆菌属、脱硫弧菌属等）。

严格厌氧菌（strictanaerobes）：

只能在没有游离氧存在环境中生存的微生物。

耐氧厌氧菌（aerotolerantanaerobes）：

在有氧条件下可存活，但不生长（即一种耐氧的专性厌氧菌）或在有氧条件下以亚最适速率生长的微生物。

兼性厌氧菌（facultativeanaerobes）：

在有氧与无氧条件下，均能以不同的氧化方式获得能量来维持其生长的微生物（如土壤中的反硝化细菌）。

微好氧菌（microaerobes）：

仅能在氧浓度较低（氧分压在0.01~0.03Pa）的环境中才能正常生长的微生物。

微生物肥料是指一类含有活微生物的特定制品，应用于农业生产中，能够获得特定的肥料效应，在这种效应的产生中，制品中活微生物起关键作用，符合上述定义的制品均应归入微生物肥料。

——陈华癸院士

希望以上资料对你有所帮助，附励志名言3条：

1、有志者自有千计万计，无志者只感千难万难。

2、实现自己既定的目标，必须能耐得住寂寞单干。

3、世界会向那些有目标和远见的人让路。