薄层色谱中展开剂的选择Word格式.docx
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如果没有分开的迹象（黑点较“拖”），最好是换溶剂.对于在硅胶中这类酸性物资上易分解的物资，在睁开剂里常常加一点点三乙胺，氨水，吡啶等碱性物资来中和硅胶的酸性.（选择所添加的碱性物资，还必须考虑容易从产品中除去，氨水无疑是较好的选择.）分离后果的好坏和所用硅胶和溶剂的质量很有关系：
分歧厂家生产的硅胶可能含水量和颗粒的粗细程度，酸性强弱分歧，从而导致产品在某个厂家的硅胶平分离后果很好，但在另一个厂家的就不成.溶剂的含水量和杂质含量对分离后果都有明显的影响.温度，湿度对分离后果影响也很明显，在实验中我们发现有时同一睁开条件，上下战书的Rf截然分歧.
睁开剂的选择次要根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等身分来考虑，在进行薄层层析时，首先应当晓得未知化学成分的类型，其极性的大致归属，从提取液或从色谱柱的流动相极性可知，另外某样品里含多种化学成分先按极性分歧大致分，然后细分，对于分离未知的化学物资，睁开剂的选择也是一个摸索的过程，不该该仅仅从睁开剂考虑，多身分综合衡量！
溶剂：
层析过程中溶剂的选择，对组分分离关系极大.在柱层析时所用的溶剂（单一剂或混合溶剂）习气上称洗脱剂，用于薄层或纸层析时常称睁开剂.洗脱剂的选择，须根据被分离物资与所选用的吸附剂性质这两者结合起来加以考虑在用极性吸附剂进行层析时，当被分离物资为弱极性物资，普通选用弱极性溶剂为洗脱剂；
被分离物资为强极性成分，则须选用极性溶剂为洗脱剂.如果对某一极性物资用吸附性较弱的吸附剂（如以硅藻土或滑石粉代替硅胶），则洗脱剂的极性亦须响应降低.在柱层操纵时，被分离样品在加样时可采取于法，亦可选一适宜的溶剂将样品溶解后加入.溶解样品的溶剂应选择极性较小的，以便被分离的成分可以被吸附.然后渐增大溶剂的极性.这类极性的增大是一个十分缓慢的过程，称为“梯度洗脱”，使吸附在层析柱上的各个成分逐一被洗脱.如果极性增大过诀（梯度太大），就不克不及获得满意的分离.溶剂的洗脱能力，有时可以用溶剂的介电常数（ε）来暗示.介电常数高，洗脱能力就大.以上的洗脱顺序仅适用于极性吸附剂，如硅胶、氧化铝.对非极性吸附剂，如活性炭，则正好与上述顺序相反，在水或亲水住溶剂中所构成的吸附感化，较在脂溶性溶剂中为强.
被分离物资的性质
被分离的物资与吸附剂，洗脱剂共同构成吸附层析中的三个要素，彼此紧密相连.在指定的吸附剂与洗脱剂的条件下，各个成分的分离情况，直接与被分离物资的结构与性质有关.对极性吸附剂而言，成分的极性大，吸附住强.当然，中草药成分的全体分子观是次要的，例如极性基团的数目愈多，被吸附的住能就会更大些，在同系物中碳原子数目少些，被吸附也会强些.总之，只需两个成分在结构上存在不同，就有可能分离，关键在于条件的选择.要根据被分离物资的性质，吸附剂的吸附强度，与溶剂的性质这三者的彼此关系来考虑.首先要考虑被分离物资的极性.如被分离物资极性很小为不含氧的萜烯，或虽含氧但非极性基团，则需选用吸附性较强的吸附剂，并用弱极性溶剂如石油醚或苯进行洗脱.但多数中药成分的极性较大，则须要选择吸附功能较弱的吸附剂（普通Ⅲ～Ⅳ级）.采取的洗脱剂极性应由小到大按某一梯度递增，或可利用薄层层析以判断被分离物在某种溶剂零碎中的分离情况.此外，能否获得满意的分离，还与选择的溶剂梯度有很大关系.现以实例说明吸附层析中吸附剂、洗脱剂与样品极性之间的关系.如有多组分的混合物，象植物油脂系由烷烃、烯烃、舀醇酯类、甘油三酸醋和脂肪酸等组份.如对于C-27甾体皂甙元类成分，能因其分字中羟基数目的多少而获得分离：
将混合皂甙元溶于含有5％氯仿的苯中，加于氧化铝的吸附柱上，采取以下的溶剂进行梯度洗脱.如改用吸附性较弱的硅酸镁以替代氧化铝，因为硅酸镁的吸附性较弱，洗脱剂的极牲需响应降低，亦即采取苯或含5％氯仿的苯，即可将一元羟基皂甙元从吸附剂上洗脱上去.这一例子说明，同样的中草药成分在分歧的吸附剂中层析时，需用分歧的溶剂才干达到不异的分离后果，从而说明吸附剂、溶剂和欲分离成分三者的彼此关系.
（二）簿层层析：
薄层层析是一种简便、快速、微量的层析方法.普通将柱层析用的吸附剂撒布到平面如玻璃片上，构成一薄层进行层析时一即称薄层层析.其道理与柱层析基底细似.
1．薄层层析的特点：
薄层层析在利用与操纵方面的特点与柱层析的比较.
2．吸附剂的选择：
薄层层析用的吸附剂与其选择准绳和柱层析不异.次要区别在于薄层层析请求吸附剂（撑持剂）的粒度更细，普通应小于250目，并请求粒度均匀.用于薄层层析的吸附剂或预制薄层普通活度不宜过高，以Ⅱ～Ⅲ级为好.而睁开距离则随薄层的粒度粗细而定，薄层粒度越细，睁开距离响应缩短，普通不超出10厘米，否则可惹起色谱扩散影响分离后果.
3．睁开剂的选择：
薄层层析，当吸附剂活度为必定值时（如Ⅱ或Ⅲ级），对多组分的样品能否获得满意的分离，决定于睁开剂的选择.中草药化学成分在脂溶性成分中，大致可按其极性分歧而分为无极性、弱极性、中极性与强极性.但在实际工作中，经常须要利用溶剂的极性大小，对睁开剂的极性予以调整.
实例谈薄层色谱睁开剂选择
2007/12/0812:
18P.M.
实例谈薄层色谱睁开剂选择
根据本人的几年薄层层析经验，参考药典等国家药品尺度和有关文献，将2000版药典一部里部分有代表性的对照品的薄层层实例按睁开剂极性排序，并对其规律做一些分析.以下的分析和介绍是整体描述性的，目的是快速、简便地选择睁开剂.如果想了解睁开剂选择的各种理论，请参考其他专著.#TfaMVME
选择睁开剂，要根据溶剂极性和他们的混溶性，溶剂对被分析物的溶解性，和被分析物的结构.这里只讨论药典里通常使用的以硅胶为固定相主体的正相薄层，也不考虑板的活性.
列出溶剂极性参数表，方便以下比较睁开剂.环已烷:
-0.2、石油醚（Ⅰ类，30~60℃）、石油醚（Ⅱ类，60~90℃）、正已烷:
0.0、甲苯:
2.4、二甲苯:
2.5、苯:
2.7、二氯甲烷:
3.1、异丙醇:
3.9、正丁醇:
3.9、四氢呋喃:
4.0、氯仿:
4.1、乙醇:
4.3、乙酸乙酯:
4.4、甲醇:
5.1、丙酮:
5.1、乙腈:
5.8、乙酸:
6.0、水:
10.2[1].
关于溶剂混溶性，普通根据类似相溶准绳，须要留意，极性相差大的不混溶，比方正己烷与甲醇.多元睁开剂，主体的两种溶剂不克不及混溶，就须要通过第三种溶剂来调和.比方：
石油醚、正庚烷、正已烷、戊烷、环已烷和甲醇、水之类的.
普通正相色谱，固定相为极性，被分析物资的极性越大，须要极性更大的睁开剂.
了解被分析物的极性可以通过分析其结构获得，很难获得它的极性指数.物资分子化学结构中，通常由较极性部分和非极性部分两部分.例如上面以苯丙烷为极性小部分，随着极性基团部分的添加，整体的极性就添加，睁开剂极性也添加了.
，顺次为肉桂酸、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸.
响应睁开剂分别为：
正己烷—乙醚—冰醋酸（5:
5:
0.1）、苯－冰醋酸－甲醇（30:
1:
3）、氯仿－甲醇－甲酸（9:
0.5）、石油醚－乙酸乙酯－甲酸（3:
6:
1）、醋酸丁酯－甲酸－水（7:
2.5:
2.5）.（因为薄层板、比移值分歧的缘由，睁开剂极性比较是绝对的，并不是绝对的后者大于前者）.
此刻最次要的成绩是，分歧化合物，如何定它的极性，又用什么尺度来定它对应的睁开剂呢？
以下分开讨论分歧化合物极脾气况及其对应的睁开剂.
首先是极性较小的挥发性物资.比方：
龙脑：
石油醚（30～60℃）—醋酸乙酯（17:
3）、厚朴酚：
苯－醋酸乙酯（9:
1.5）、α-喷鼻附酮：
苯－醋酯乙酯－冰醋酸（92:
5）、丹皮酚：
环己烷－醋酸乙酯（3:
1），这类化合物，以石油醚、正构烷和苯为体积百分数比较大的溶剂，通常起溶解和分离化合物的感化，而用醋酸乙酯为调节Rf（比移值）的溶剂.为了减少拖尾之类其他类似相溶准绳之外的影响，适当加入添加剂，如无机酸或者无机碱.
极性较小的不挥发性物资.比方：
β-谷甾醇：
环己烷－醋酸乙酯－甲醇（6:
1）或者环己烷－丙酮（5:
2）、熊果酸：
甲苯－醋酸乙酯－冰醋酸（12:
4:
0.5）、齐墩果酸：
氯仿－甲醇（40:
1）、猪去氧胆酸：
氯仿－乙醚－冰醋酸（2:
2:
1）、大黄素：
苯—醋酸乙酯—甲醇（15:
0.2）或者苯—乙醇（8:
1）、丹参酮ⅡA：
苯-醋酸乙酯-甲酸（40:
25:
4）、穿心莲内酯：
氯仿-无水乙醇（9:
1）、靛玉红、靛蓝氯仿－乙醇（9:
1）或者苯－氯仿－丙酮（5:
1）.这类物资睁开剂极性比极性较小的挥发性物资洗脱力强一些，因为这类物资极性小的母核大，而极性大的基团通常可以构成氢键，比方羧酸、羟基.以上物资，母核分子量减小、母核结构中不饱和健的添加（特别是出现苯环），极性基团的添加，都使极性添加，睁开剂极性也增大.这个范围内的物资很多，普通睁开剂大百分数的溶剂可以从环己烷—〉甲苯—〉二甲苯—〉苯—〉氯仿的顺序，按照极性请求选择.这里留意，异丙醇、正丁醇极性指数也比较小，在这范围的化合物很少用，因为粘性大、睁开慢，形成黑点扩散；
另外，羟基的氢键感化力也有晦气.调节Rf值的溶剂，从醋酸乙酯—〉甲醇—〉丙酮—〉乙醇.挥发性物资也有很多带羰基、羟基的，但从它的挥发性就可以明白，分子间感化力不强，另外，母核与石油醚、正构烷和苯的结构差别小，估计更容易离开硅胶吸附，更快进入溶剂中，而不须要通过提高睁开剂的极性.
皂苷类.人参皂苷：
氯仿－甲醇－水（65:
35:
10）10℃以下放置的基层溶液或正丁醇－醋酸乙酯－水（4:
5）的上层溶液或氯仿－醋酸乙酯－甲醇－水（15:
40:
22:
10）10℃以下放置的基层溶液、芍药苷：
氯仿－醋酸乙酯－甲醇－甲酸（40:
10:
0.2）、黄芩苷：
醋酸乙酯－丁酮－醋酸－水（10:
7:
3）、橙皮苷：
苯—醋酸乙酯—甲酸—水（1:
12:
3）的上层溶液、葛根素：
氯仿－甲醇－水（14:
0.5）、芦丁：
醋酸乙酯－甲酸－水（8:
1）.这类物资，因为存在糖的多羟基结构，苷元的结构影响变小.睁开剂中使用极性大的无机溶剂（氯仿、醋酸乙酯、甲醇、正丁醇）和水.乙酸和甲酸的使用，一方面增大睁开剂极性，另外也能够按捺硅胶羟基的感化，减少拖尾.因为混溶性和硅胶耐酸能力的限制，水和酸的使用是无限制的.
极性大的小分子无机酸.没食子酸：
氯仿－醋酸乙酯－甲酸（5:
1）、阿魏酸、咖啡酸、菊苣酸、绿原酸、异绿原酸.这类物资多数是苯乙烯母核的，这个结构的极性本人比较大，另外有酚羟基和羧酸基团，个别有多羟基配基.皂苷的睁开剂差不多，极性大.留意甲酸通常指的是浓度85%摆布的，含有水.
含氮无机物.盐酸小檗碱：
苯－醋酸乙酯－甲醇－异丙醇－浓氨试液（12：
6：
3：
0.6）（氨蒸气饱和）或正丁醇－冰醋酸-水（7:
2）、麻黄碱：
氯仿－甲醇－浓氨试液（20:
0.5）或正丁醇－冰醋酸－水（8:
1）、甘草酸铵：
醋酸乙酯－甲酸－冰醋酸－水（15:
2）.因为NH2硅醇基的感化很强，在强极性睁开剂加无机酸、无机碱扫尾.对于极性化合物，使用正丁醇对黑点扩散影响较小，因为化合物和硅胶的感化强.DB^}#kvL:
进行薄层分析基本可以根据母核、基团，选择类似的化合物对号入座.当然，具体的条件优化则须要根据实际情况了.碰到较困难的分离，须要使用到设计优化方法的，曾经不属于本文讨论范围了.
关于睁开剂：
分离的样品酸性比较大，普通在睁开剂中加酸
加甲酸是因为该样品是酸性的，加酸的量和该物资的酸性成反比关系，加水可能是因为你的样品是苷类的用酸水做一下缓冲，目的就是让黑点油滑，不脱尾，展距良好.
饱和也非常次要，边沿效应很严重的不妨用下端浸在睁开剂中的滤纸贴在睁开缸的内壁，如许饱和后果会好一些
1）在层析缸口涂适量凡士林，添加密封性；
2）以睁开剂边沿效应的大小，确定睁开剂平衡时间的是非，普通平衡时间在30分钟即可.
无机溶剂的极性，甲醇>
氯仿，是以在氯仿：
甲醇：
氨水（10:
0.6）这个睁开剂中，如果极性略大，可适当降低甲醇比例；
如极性太小，可适当增大甲醇比例.
氯仿：
氨水10:
0.6和20：
2：
1.2极性肯定是不异的，这有成绩吗？
另外还有一个成绩，这个睁开剂中，甲醇用量较小，而甲醇又易挥发，容易发生边沿效应，要特别留意睁开剂的平衡和层析缸的密封.
分歧的睁开零碎意思是其中至多应当有一种溶剂分歧（最好是分歧分类组的溶剂），而不是比例分歧.或者使用分歧的固定相.
关于睁开：
TLC中样品拖尾景象是什么缘由?
该如何解决?
2.TLC中样品跑成几乎为一条线,黑点没有清晰的分离,想请教一下这是什么缘由形成的?
普通情况下该如何解决?
形成成绩1的缘由基底细同：
a、对于一些具有酸碱性的化学成分，在溶液中部分电离，事实上睁开时存在分子、离子两种形态，以中性的无机试剂睁开必定会出现两种层析行为，形成脱尾甚至是一条线.
b、睁开剂选择不当
c、点样量过大，样品超载
解决法子：
a、在睁开剂中加几滴甲酸或冰醋酸；
b、睁开时以氨水饱和
c、减少点样量
d、参考文献，调整睁开剂品种、比例
我想问问，关于TLC二次睁开，是在第一次睁开显色后再在继续第二次睁开，还是在第一次睁开后，换另一种睁开剂接着睁开啊？
？
请哪位大侠指导一下关于TLC的二次睁开.二次睁开是根据样品定的，但肯定要在第一次睁开后，将板晾干或吹干，再放入另一种睁开剂中睁开，有的样品二次睁开还要换睁开方向，和原方向垂直.所以要以实际分离样品须要而定.普通是因为样品成分多，极性不同有的大，有的
关于显色：
在工作中研讨过用硫酸乙醇显色作定量分析的品种，但凡加了CMC的板都易烘糊，特别是温度高于100度时，后改用不加CMC辅的水板来作，就不会有烘糊景象，故也可推论CMC易于与硫酸起糊化反应.感觉辅水板关键是硅胶G与水的比例要达1：
3.5摆布，而且研磨后要尽快涂布，不克不及易于凝固而难于涂布，我是百思不得其解，难道CMC还有类似波动剂的感化
2.“0.5%的板加热时间长了就会黑”，是在层析完，显色后吧，我也碰到过同样的情况，这只要严酷控制加热显色的时间.
这个成绩应当是如许回答：
但凡加了CMC的板都易烘糊，特别是温度高于100度时，若改用不加CMC辅的水板来作，就不会有烘糊景象，但不加CMC辅的板又太软，点样时容易点出洞，有个好法子是将CMC的浓度调至0.1%，如许就不容易烘黑的.不信你试试，我们这边药检所都如许做的
3.关于薄层板加热变黑的成绩，其实很容易解决：
当喷完显色剂后不必在放烘箱里烘了，可以用电吹风在板子反面吹吹就能显色了．我们实验室里普通都采取此法，简便、快洁．如果一非想使用烘箱烘的话，必定要用带玻璃窗的，当看到显色了就取出，否则欠好控制显色时间，时间过长，ＣＭＣ容易碳化变黑
4．各位楼主真是经验丰富，我铺的0.5%的板加热时间长了就会黑，有什么好着吗？
根据我的经验，薄层版变黑与CMC－Na的浓度过大有关，如果你留意的话，你会发现，当显色剂中有浓硫酸时，加热时间稍长就会变黑（其他显色剂是没事的），我老师说这是因为浓硫酸把CMC－Na炭化了，其实[color=blue=这类情况你只需适当降低CMC-Na的浓度[/color]就可以了，当然如果不加CMC-Na的话容易把板弄破.普通我都是显色后用电吹风吹的，要均匀吹，电吹风离板的距离要远些，防止部分会黑.
另还要留意显色剂，如果显色剂中含有硫酸，加热时间必定要把握好，不成太长.
5．CP2000中277页苏氨酸的TLC的其它氨基酸检查似乎有成绩:
...以"
正丁醇\丁酮\浓氨溶液\水"
为睁开剂,睁开后,晾干,喷以茚三酮的丙酮溶液（1-50）,...茚三酮与浓氨溶液起显色反应,弄得整块板都有色,茚三酮氧化苏氨酸后再与释放出的氨气起反应生成的点在整块板中尚能看到,其它氨基酸就别想看了.
氨基酸类的薄层鉴别过程中，显色前先将展完的板子在烘箱内烘一段时间，从而确保睁开剂挥干净，后果不错
关于裂板：
板子会裂口，一则可能是因为硅胶的比例太大，二则可能是，板子要在常温下晾干后，再在烘箱中活化.如果铺完不久就在较高温度下，裂口的几率就比较高的.
“晾干的板子放在烘箱里如何全炸裂了，有什么方法可以防止板子炸裂.”你的板没有完整干透，概况看是干了，但是最两头的没有干，所以你直接放入105度的烘箱烘，当然会炸裂了，所以应当先用低温大约40度摆布烘30分钟摆布，再用105度活化，就可以解决这个成绩了.
关于活化出现裂板、爆板的成绩.我从没有赶上过.活化我是如许处理不要等到温度达到100度，而是设好温度后就将板子放在干燥箱，然后再通电加热，达到最高温度后停留5分钟摆布即可.如许水分是慢慢由内而外散发，而不是由内向内散发，防止了概况成膜，里面还在散发水气，岂有不裂、不爆的道理！
.
关于点样：
1.点样我本人没有什么技巧，导师教了我一招挺好用，写出来大家分享，就是在点样时食指放在点样管的上端，当点样管的下端与硅胶板接触的瞬间轻轻松动上端的食指，溶液天然从点样管出来，敏捷提起点样管，就如许反复操纵点出的黑点既小又均匀.但要提出样品溶液不克不及太浓，浓度太大，点下的样品不克不及被硅胶很好的接收，晦气于分离.
2.关于点样，我上学的时候，老师用比较廉价的进样器（大约10几块钱吧，10μl即可），将针尖打磨油滑，老师好像是用锉一点一点锉的，如许点样的时候样品溶液不容易沿针尖上行（甲醇溶液都如许），而且针尖不会刺破曾经铺好的薄层板.此刻，我和师兄都是实行的这个法子，还是比较实用的，点样量可以精确到0.5µ
l.当然，点样的时候手不克不及抖动，动作要轻，这些方法在于领悟，逐步锻炼，信任你会体会到其中的快感.
3.要磨平微量进样器的针尖，简单的方法就是，在展缸的盖子上轻磨（当然是靠近两头部分），就很快能解决成绩，且很平滑.
薄层色谱小常识
1、如何提高点样效力?
点样是形成TLC定量误差的次要来源.实验证实：
定量毛细管更适合较小体积的点样；
微量打针器更适合较大体积的点样.这主如果因为微量打针器受吝啬泡、溶液回爬景象的影响较大.为防止分歧定量毛细管间的点样误差、建议一块薄层板上最好用同一只定量毛细管.但应留意更换样品时，应将毛细管用超声波或分歧极性溶剂清洗干净.在制备样品时，溶样溶剂黏度不克不及过高，以便于点样；
溶剂沸点过低则进样体积易变，过高则会改变睁开剂构成；
对样品溶解度过高会使样点发生空心景象；
经常使用的溶剂为甲醇、乙醇、丙酮.经典TLC样点原点普通为直径3mm点间距1--2cm底边距；
HPLC样点原点普通为直径1mm点间距5mm底边距1cm.
2、睁开剂的选择
TLC与HPLC比拟，一个突出的长处就是流动相的选择具有更大的灵活性.流动相的选择的目的是使绝大部分样品的RF值位于0.1--0.7之间并达到较好的分离，与此对应的是流动相要有适当的强度和构成.流动相强度越大，溶质RF值越大，但很可能降低分离能力；
另外单一溶剂很难分离较复杂的混合物，根据类似相溶道理，要使用多元溶剂体系.普通睁开剂体系选择如下：
根据分离样品性质、薄层色谱板性质选择一个二元溶剂体系，通过调节溶剂比例以追求适合RF值，适合的RF值找到后，再追求极性参数不异的二元溶剂体系两个，以这三个构成为三点构成一个三角形，则可看到：
三角形顶点是二元体系，边是三元体系，三角形内是四元体系，而且极性分歧，可根据几何道理得出任一点构成.这类方法较为直观，也较简单.
3、TLC的通用显色方法
理想的显色但愿灵敏度高、黑点色彩波动、黑点与布景间的对比度好、黑点的大小及色彩的深度与物资的量成反比.在样品构成其实不完整已知的情况下，通用显色方法显得成尤其次要.通用显色法次要有：
（1）、紫外照耀法：
方便，不破坏样品；
（2）、碘蒸气法：
通用性强，与紫外法结合灵敏度高于该两法单独使用；
（3）、荧光试剂：
制作荧光布景，使本来紫外下无荧光物资被鉴别，有荧光物资更明显；
（4）、硫酸溶液：
对绝大多数无机物无效，但有破坏性.
∙睁开剂
PE（60-90）
EtAc/PE=1:
2
EtAc/PE/AcOH=15:
1
EtAc/AcOH/n-Butanol/H2O=2:
8年来我用这四种体系,没有出现过什么成绩.
我不断在用的是乙酸乙酯：
环已烷，不竭调节比例，直到有满意的Rf值，有拖尾时可能要加酸或碱，我普通乙酸和三乙胺.我用了好几年了，都还好.不妨一试！
极性小的用+/零碎极性较大的用甲醇：
氯仿零碎极性大的用甲醇：
水：
正丁醇：
醋酸零碎拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
氯仿对于胺类比较好氯仿：
甲醇9：
1是比较经常使用的方法
我经常使用的睁开剂有：
氯仿/甲醇；
环已烷/丙酮；
醋酸乙酯/石油醚；
甲醇/吡啶/水
酸用BTOH：
HAc：
H2O=2：
1：
1很好用的.
二氯甲烷：
甲醇，调节分歧的配比基本解决大多数成绩
根据化合物的极性选择合适的睁开剂，极性大的可滴加少量水，酸碱化合物会拖尾，酸性化合物可在睁开剂中加少量乙酸，碱性的加少量三乙胺，会减少拖尾.
前面的一些帖子中提到在分离碱性化合物时可以在睁开剂中加入少量三乙胺，如许确实会达到分离后果，但在柱层析时须要留意，当你的洗脱剂含有二氯甲烷或氯仿时经常会分到三乙胺的盐酸盐，因为普通的二氯甲烷或氯仿中都含有少量的盐酸，三乙胺的盐酸盐为无色针状结晶，很漂亮，经常会误觉得是分到的单体.切忌！
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