BV培训讲义Word格式文档下载.docx

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阴道异常分泌物明显增多，稀糊状，灰白色、灰黄色或乳黄色，带有特殊鱼腥臭味，阴道分泌物pH值升高。

白细胞、吞噬细胞等代谢物增多、正常菌群代谢产物降低。

2、BV造成的影响

1）妇科方面

①是导致霉菌性阴道炎的主要原因

②与滴虫感染密切相关，80%的滴虫患者同时伴有BV感染

③是造成输卵管炎、盆腔炎、泌尿系统感染、术后感染的危险因素

④与不孕症、宫外孕相关

⑤与妇科肿瘤有关；

BV患者发生CIN（CIN：

宫颈上皮内瘤病变，是宫颈癌前病变）危险是正常妇女的2倍。

2）产科方面

①是造成早产、胎膜早破、低体重儿的主要原因。

BV阳性妊娠妇女中40-50%易在37周前早产或分娩出生低体重儿，比正常妇女高3-4倍，她们的孩子也可能受到直接感染，患新生儿肺炎、脑膜炎等，并带来各种后遗症；

②是导致绒毛膜炎、剖腹产术后子宫炎的危险因素。

BV患者产后或剖宫产后发生产褥期子宫内膜炎是正常人群的10倍；

③是导致某些妊娠不良和妊娠并发症的危险因素。

3、重点检测对象

①阴道瘙痒、红肿、分泌物异常及愈后定检

②妇科、人流或其他宫腔内操作术前、术后检查

③妇科、产科常规检查，阴道炎复查

三、BV的流行情况

1、90年南京区BV的分布

国内最早关于此病的调查为1990年，全国性病防治研究中心在南京地区发现其患病率在成年健康妇女中为18.92％，在性罪错妇女中为36.73％，在妇科门诊有阴道异常分泌物的患者中为43.33％。

人群

健康妇女

性犯罪

分泌物异常

百分比

18.92

36.73

43.33

BV在一般如女中大约有15-30%的感染率，患病人数远高于阴道滴虫、霉菌等的感染人数，而且常易复发。

约50%左右的患者因无明显的临床症状而被贻误诊断和治疗。

2、包头市的妇科阴道炎症分布

包头市中心医院检验科:

BV调查统计2004年4月~2005年3月310例门诊患者中BV占19.0％，2005年4月~2006年3月420例门诊患者中BV占24.3％。

远远超过滴虫，霉菌等妇科常见病。

BV的发病率很高，在阴道感染疾病中，细菌性阴道病约占50%-60%，念珠菌性阴道炎占20%-30%，滴虫性阴道炎占5%-10%。

因此，细菌感染远远超过滴虫，霉菌感染，细菌性阴道病是妇科最常见的阴道感染性疾病这足以证明BV在全国的流行情况是严峻的，这也就说明了BV的试剂盒是拥有广阔的市场的。

四、BV的诊断方法

1、Amsel法（金标准）

A.阴道分泌物变稀如奶状；

B.阴道分泌物PH>

4.5；

C.胺试验阳性；

D.镜检可见线索细胞

诊断标准：

凡见第四项以及前三项中任意两项即可诊断为BV感染。

1）阴道分泌物呈灰白色，很粘稠，甚至象面糊状，均匀一致，但不是脓性分泌物，量多少不定。

2）分泌物中胺含量特别高，故呈鱼腥味，性交时或活动后往往因促进胺释放而使气味加重，分泌物中加入10%氢氧化钾后也可释出胺味。

3）阴道分泌物中的PH值增高，PH范围4.5-5.5，健康人的pH为3.8-4.5

4）阴道分泌物的湿涂片中可检出经线索细胞。

上述四项标准中，具备三项以上者即可确诊，有强调第四项为必需诊断标准。

2、其他方法：

1）生化法：

胺试验法；

2）加德纳菌诊断法：

培养法、PCR、荧光染色法

3）生物酶快速检测法：

利用生物体独具的酶催化机理结合发色底物的快速检测技术。

常用的检测目的酶为阴道分泌物中的唾液酸苷酶NAcase。

实验室检查对本病的诊断是十分必要的。

单有白带增多而没有实验室检查是不能诊断本病的。

实验室检查包括涂片、胺试验、培养法、生化法、荧光抗体法等。

涂片法和胺试验是简单易于操作的实验室方法，对诊断很有帮助。

有条件的可以作培养或荧光抗体法试验。

①涂片镜检　取分泌物作涂片可找到线索细胞（Cluecell）。

线索细胞是表面附着有大量的加特纳细菌的上皮细胞，特点是上皮细胞表面毛糙或有细小的颗粒，好像撒上了一层面粉。

细菌为革兰氏染色阴性的球状杆菌。

②胺试验　取一滴10%氢氧化钾溶液加入阴道分泌物中，可闻到有“鱼腥”样氨释出，这是因为分泌物中胺量较高，遇碱后可放出氨味来。

③培养法　应先分离后再作培养，可见到直径为0.5mm圆形、不透明、表面光滑的菌落。

④生化法　取阴道分泌液作生化测定，正常妇女乳酸盐量高，琥珀酸盐量低，而本病妇女测定值正相反。

⑤荧光抗体法　涂片后用荧光抗体染色镜检。

五、我司BV试剂盒

细菌性阴道病联合检测试剂盒（酶化学法）BacterialVaginosisMulti-TestKit

1、四项检测指标

pH值、过氧化氢浓度、白细胞酯酶、唾液酸苷酶

PH值/过氧化氢/白细胞酶/唾液酸苷酶联合测定技术

1）pH－阴道生态平衡指标

了解阴道生态平衡

2）过氧化氢浓度—生态优势菌指标

了解阴道的生态优势菌活力。

3）唾液酸苷酶SNA活性—致病菌指标

了解有无引发BV的病原体进居和繁殖。

4）白细胞酯酶LE活性—宿主反应指标

了解阴道分泌物清洁度、阴道粘膜损伤的程度和辅助诊断宫颈炎。

2、四项检测指标的意义

1）酸碱度（阴道生态平衡指标，了解阴道生态平衡）

是阴道生态平衡最直接指标，了解阴道生态恢复情况；

正常的阴道内部的pH为3.8-4.4，BV患者PH值升高为4.5-5.5；

阴道内低的pH是维持阴道内各种有益群权比例的重要保证，以此来达到阴道的菌群的平衡。

PH>

4.5提示乳酸杆菌减少，可能存在菌群更替；

是阴道生态平衡最直接指标，正常的阴道pH值维持在3.8~4.4，有益于维持阴道的生态平衡，抑制阴道条件致病菌如加德纳杆菌等的生长繁殖，维持阴道菌群平衡。

2）过氧化氢（阴道生态优势菌乳酸杆菌的指标）

是异常病原体存在的强烈提示信号，阴道生态正常与否的良好指标，了解阴道生态优势菌的活力；

正常的阴道内90%以上为产H2O2的乳酸菌，当阴道的H2O2浓度低于2μmol/L时，意味着阴道生态菌群遭到了破坏，已经引起了厌氧菌的生长，导致了阴道菌群的失衡；

阳性结果表示阴道处于病态或亚健康状态；

H2O2的浓度过低，意味着乳酸杆菌菌群的失衡，使外源或条件致病菌入侵或大量繁殖，是女性下生殖道感染难以治愈易复发的重要原因之一。

3）白细胞酯酶（宿主反应指标）

是评价阴道分泌物清洁度、阴道粘膜损伤的程度和辅助诊断宫颈炎的一个重要指标；

专用于检测多形核白细胞释放的酯酶，在正常情况下难以检测当人体发生炎症反应时，多形核白细胞的趋化性在炎症病灶聚集而大量释放酯酶，只有在这种炎症情况下（白细胞104/ml），炎性白细胞酯酶才有可能检测；

阳性结果提示炎症；

三中最常见的阴道炎（细菌性阴道病、念珠菌阴道炎、滴虫性阴道炎）均有多形核白细胞浸润，当多形核白细胞凋亡时，大量释放白细胞酯酶。

白细胞酯酶活性可辅助诊断阴道炎症状况。

白细胞对细菌的吞噬过程

4）唾液酸苷酶（致病菌指标）

是细菌的毒力因子，细菌性阴道病致病菌指标，了解引发BV的病原体的进居和繁殖状态。

BV的主要致病菌加德纳菌、普雷沃菌、拟杆菌等均可产生唾液酸苷酶会改变粘膜通透性，而利于细菌对粘膜组织的附着、侵入和损伤，导致早产以及低体重儿的发生；

阳性结果表明有细菌性阴道病；

研究证明唾液酸苷酶是BV重要的致病因子，是BV致病菌产生的特异性酶，唾液酸苷酶的活性与致病菌的浓度成正比。

3、技术原理简介

1）过氧化氢浓度测定：

试剂垫上1，5-二甲基-2-苯基-4-氨基-3-吡唑酮在H2O2作用下与DHBS反应生成红色物质，红色深浅与H2O2作浓度成正比。

2）唾液酸苷酶活性测定：

唾液酸苷酶水解试剂垫上底物5-溴-4-氯-3-吲哚乙酰神经氨酸，释放出溴吲哚基，后者遇显色剂（重氮盐）起反应呈现红色或紫色，呈色深度与唾液酸苷酶活性成正比。

3）白细胞酯酶测定：

白细胞酯酶水解试剂垫上底物5-溴-4-氯-3-吲哚乙酸盐，释放出溴吲哚基，后者在氧存在的条件下呈蓝色，呈色深度与白细胞酯酶活性成正比。

4）酸碱度：

阴道分泌物滴加到PH显色纸上通过显色确定PH值范围。

六、我司试剂盒的操作方法

1、取样

1）阴道后穹窿处旋转10-20秒，尽可能多地采集患者阴道分泌物，以清晰见到棉签上有分泌物附着为准。

2）非经期取样，且取样前24小时应禁止性交、盆浴、阴道灌洗及局部上药等。

雌性激素使用者，孕期、经期样品会对结果判读有影响，不宜做该项检测。

雌性激素使用者及激素滥用者会对检测结果产生影响，也不适宜做该项检测。

3）取样后的标本应及时测定，否则应保存在2-8℃，当天内完成测定。

2、试剂盒操作

1）取出试剂盒平衡至室温。

2）撕开铝箔包装，取出反应卡并轻轻揭掉铝箔封条。

3）取样后棉签在PH孔中点印一下，立即观察结果。

4）将棉签置于试管中，加300ul稀释液。

并用棉签反复挤压管壁使目的物充分释放。

5）滴管在其余3孔中各滴加1滴处理过的样品，在“唾液酸苷酶”孔中滴加一滴“显色液”。

6）装置卡放置于37℃环境中，15min后判读“过氧化氢”、“白细胞酯酶”、“唾液酸苷酶”结果。

3、结果判读

１）过氧化氢反应孔：

呈红色、紫色为阴性

２）唾液酸苷酶反应孔：

不变色为阴性；

显红色、红紫色为阳性，表示可能　感染细菌性阴道病。

３）白细胞酯酶反应孔：

蓝绿色为“+”、蓝色为“++”、深蓝色为“+++”

４）pH值反应孔：

当样品pH≤4.5时，pH值反应孔显黄绿色或黄色，为阴性；

　　　　　　当样品pH>

4.7时，pH值反应孔显深绿、蓝绿色或蓝色，为阳性。

５）唾液酸苷酶反应孔试验后呈棕黄色，应判为唾液酸苷酶阴性。

因为脓性样品、血性样品、浓稠分泌物会出现棕黄色反应，此现象非唾液酸苷酶的呈色反应。

4、结果意义

1）PH

PH<

4.7提示乳酸杆菌数量正常，阴道微环境正常：

4.7提示乳酸杆菌减少，可能存在菌群更替。

2）过氧化氢孔

阳性“+”提示阴道菌群失调，阴道环境病态或出于亚健康状态。

弱阳性“±

”提示阴道内可能存在乳酸菌，需结合临床再判。

恶化趋势或处于恢复期。

阴性“-”提示有大量乳酸菌群存在，阴道菌群正常。

3）白细胞酯酶

阳性“+”“++”“+++”表示不同程度的炎症病变。

”提示阴道内可能存在炎症反应，需结合临床再判

阴性“-”阴道无炎症反应。

4）唾液酸苷酶

阳性“+”提示阴道感染细菌性阴道病。

”提示阴道内可能感染细菌性阴道病，需结合临床再判。

阴性“-”阴道可能未感染细菌性阴道病。

5、注意事项

1）本品仅用于体外辅助诊断，检测结果应结合临床症状进行综合判断。

2）请认真阅读本说明书，操作者应经过培训，对显色结果的判读，应参照比色卡。

3）请认准反应上四个测试孔上的标识，显色液只用于“唾液酸苷酶”反应孔。

4）请在有效期内使用。

5）本产品为一次性医疗器具，请依据《医疗废弃物管理条例》和各医疗机构针对一次性医疗器具管理规定进行处理。

6）请及时正确填写受试者姓名或编号。

7）不同批号试剂盒中各组份不能互换。

七、阴道感染复发率高的主要原因

1、治疗方案----单一消炎杀菌很少考虑生态治疗

2、疗效评价标准----临床治愈,很少考虑实验室指标是否恢复正常

3、生态治疗

例1.首诊：

pH/过氧化氢不正常→生态治疗（1-2疗程）→复查：

pH/过氧化氢正常→停药

例2.首诊：

pH/过氧化氢不正常+白细胞酯酶阳性→抗菌治疗→白细胞酯酶阴性→复查：

生态治疗（1-2疗程）→pH/过氧化氢正常→停药

例3.首诊：

pH/过氧化氢不正常+唾液酸苷酶阳性→抗菌治疗→唾液酸苷酶阴性→复查：

例4.首诊：

pH/过氧化氢不正常+白细胞酯酶阳性+唾液酸苷酶阳性→抗菌治疗→白细胞酯酶阴性+唾液酸苷酶阴性→复查：

八、BV检测结果临床参考判定

九、BV四联卡PK其他检测方法

十、判读分析：

1、唾液酸酶的阳性率低

1）城市的发病率比较低

2）同类产品的对比，目前，主要的竞争厂家中生、安图的，唾液酸酶的符合率较高。

2、pH变色不明显，阳性率不高

1）处于感染初期，感染是一个发展的过程，病症比较轻微时，变色自然不明显。

2）标本的特异性，

3、过氧化氢阳性率高

1）是否是稀释液滴加过量引起？

300微升，大约6滴稀释液。

稀释液少滴加一些。

2）标本的特异性，当感染病菌，乳酸杆菌开始减少，代谢产生的过氧化氢减少了，过氧化氢是一个强氧化物质，其在常温下就容易分解，放置时间稍久一点，或者阳光的直射，更容易引起过氧化氢的分解。

4、过氧化氢阳性，pH阴性

1）理论上两者应该是一致的。

2）过氧化氢的强氧化性，自生分解降解了。

3）处于感染初期，乳酸杆菌开始减少，对过氧化氢的影响比较优先。

5、过氧化氢阴性，pH阳性

2）因每个人身体素质的不一致，pH本就存在差异性。

3）阴道是一个比较复杂的菌群，感染初期，生态菌群开始紊乱，优先影响了pH。

6、白细胞酯酶阳性（镜下白细胞少）

1）白细胞酯酶这个孔是特异的酶化学反应，不可能会有假阳性的情况发生。

2）细胞的生长是都有其生理期，阴道感染病菌后，白细胞等中性粒细胞会聚集在病灶处，吞噬细菌。

在裂解酶的作用下，细菌和白细胞同时裂解，这一裂解的同时，白细胞释放白细胞酯酶。

可能多数的白细胞已经裂解，所以镜下很少的白细胞，LE是阳性。

7、白细胞酯酶阴性（镜下白细胞多）

1）理论上确实，镜下很多白细胞时，白细胞酯酶应该是阳性的。

2）阴道感染病菌后，白细胞等中性粒细胞会聚集在病灶处，吞噬细菌。

可能出于大量白细胞吞噬细菌的这一过程，白细胞还未裂解，白细胞酯酶未释放，照成LE的阴性。

3）标本适当放置一小段时间，会提高白细胞酯酶的阳性率。