实用文档之常用缓冲溶液配制方法Word格式文档下载.docx
《实用文档之常用缓冲溶液配制方法Word格式文档下载.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实用文档之常用缓冲溶液配制方法Word格式文档下载.docx（18页珍藏版）》请在冰豆网上搜索。
9.35
9.86
10.30
10.60
18.76
17.82
16.83
15.89
15.06
14.30
13.56
12.90
12.29
11.72
11.18
10.65
10.14
9.70
5.2
5.4
5.6
5.8
6.0
6.2
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
10.72
11.15
11.60
12.09
12.63
13.22
13.85
14.55
15.45
16.47
17.39
18.17
18.73
19.15
19.45
9.28
8.85
8.40
7.91
7.37
6.78
6.15
5.45
4.55
3.53
2.61
1.83
1.27
0.85
0.55
Na2HPO4分子量=14.98，0.2mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·
2H2O分子量=178.05，0.2mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·
H2O分子量=210.14，0.1mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液
钠离子浓度
（mol/L）
柠檬酸（克）
C6H8O7·
H2O
氢氧化钠（克）
NaOH97%
盐酸（毫升）
HCl（浓）
最终体积（升）①
3.1
3.3
4.3
5.3
6.5
0.20
0.35
0.45
0.38
210
245
285
266
84
83
144
186
156
160
116
106
45
68
105
126
10
①
使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%
氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1mol/L）
0.1
mol/L
柠檬酸钠
18.6
17.2
16.0
14.9
14.0
13.1
12.3
10.3
9.2
1.4
5.1
6.9
7.7
8.6
9.7
10.8
7.3
5.5
4.7
11.8
12.7
13.6
14.5
15.3
16.2
18.0
柠檬酸C6H8O7·
H2O：
分子量210.14，0.1mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3C6H5O7·
2H2O：
分子量294.12，0.1mol/L溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.2mol/L）
pH（18℃）
0.2
NaAc
0.3
HAc
NaAc
HAc
0.75
1.20
1.80
2.65
3.70
4.90
9.25
8.80
8.20
7.35
6.30
5.10
5.90
7.00
7.90
8.60
9.10
9.40
4.10
3.00
2.10
1.40
0.90
0.60
Na2Ac·
3H2O分子量=136.09，0.2mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液
（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2）
Na2HPO4
NaH2PO4
mol/L
Na2HPO4
5.9
6.1
6.3
6.7
10.0
15.0
18.5
22.5
26.5
31.5
37.5
43.5
49.5
55.0
92.0
90.0
87.7
85.0
81.5
77.5
73.5
68.5
62.5
56.5
51.0
45.0
7.1
7.5
7.9
61.0
67.0
72.0
77.0
81.0
84.0
87.0
89.5
91.5
93.0
94.7
39.0
33.0
28.0
23.0
19.0
13.0
10.5
8.5
2H2O分子量=178.05，0.2mol/L溶液为85.61克/升。
12H2O分子量=358.14，0.2mol/L溶液为71.628克/升。
NaH2PO4·
2H2O分子量=156.01，0.2mol/L溶液为31.202克/升。
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa值，所以用它们配制的缓冲液，pH范围最宽：
NaH2PO4：
pKa1＝2.12，pKa2＝7.21；
Na2HPO4：
pKa1＝7.21，pKa2＝12.32
配酸性缓冲液：
用NaH2PO4，pH＝1～4，
配中性缓冲液：
用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，
配碱性缓冲液：
用Na2HPO4，pH＝10～12。
用钾盐比钠盐好，因为低温时钠盐难溶，钾盐易溶，但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时，只能用磷酸钠而不能用磷酸钾，因为SDS（十二烷基硫酸钠）会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为：
①容易配制成各种浓度的缓冲液；
②适用的pH范围宽；
③pH受温度的影响小；
④缓冲液稀释后pH变化小，如稀释10倍后pH的变化小于0.1。
其缺点为：
①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀；
②会抑制某些生物化学过程，如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用。
（2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15mol/L）
mol/L/15Na2HPO4
mol/L//15KH2PO4
mol/L//15Na2HPO4
4.92
5.29
5.91
6.24
6.47
6.64
6.81
6.98
0.10
0.50
1.00
2.00
4.00
5.00
6.00
9.90
9.50
9.00
8.00
7.17
7.38
7.73
8.04
8.34
8.67
8.18
9.75
10.00
0.25
2H2O分子量=178.05，1/15M溶液为11.876克/升。
KH2PO4分子量=136.09，1/15M溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2MK2PO4+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至29毫升
pH（20℃）
X（毫升）
Y（毫升）
0.372
0.570
0.860
1.260
1.780
2.365
2.963
3.500
3.950
4.280
4.520
4.680
9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃）
0.04M巴比妥钠溶液
0.2V盐酸
0.04M巴比妥钠溶液（毫升）
0.2N盐酸（毫升）
100
18.4
17.8
16.7
13.4
11.47
9.39
7.21
8.4
8.8
9.0
9.4
9.6
5.21
3.82
2.52
1.65
1.13
0.70
巴比妥钠盐分子量=206.18;
0.04M溶液为8.25克/升
10．Tris–盐酸缓冲液（0.05M，25℃）
50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后，加水稀释至100毫升。
X（毫升）
7.20
7.30
7.40
7.50
7.60
7.70
7.80
45.7
44.7
43.4
42.0
40.3
38.5
36.6
34.5
32.0
29.2
8.10
8.30
8.50
8.70
8.90
26.2
22.9
19.9
14.7
12.4
三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2CH2OH
C
HOCH2NH2
分子量=121.14;
0.1M溶液为12.114克/升。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根）
0.05M硼砂（毫升）
0.2M硼酸（毫升）
1.0
1.5
8.7
3.5
4.5
硼砂Na2B4O7·
10H2O,分子量=381.37;
0.05M溶液（=0.2M硼酸根）含19.07克/升。
硼酸H3BO3,分子量=61.83,0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）
X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀释至200毫升
12.0
9.8
10.4
10.6
22.4
27.2
38.6
45.5
甘氨酸分子量=75.07;
0.2M溶液含15.01克/升。
13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）
X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀释至200毫升
9.3
11.0
10.1
34.0
43.0
46.0
10H2O,分子量=381.43;
0.05M溶液为19.07克/升。
14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）
Ca2+、Mg2+存在时不得使用
0.1MNa2CO3（毫升）
0.1MN2HCO3（毫升）
20℃
37℃
9.16
9.51
9.78
10.28
10.53
10.83
8.77
9.12
9.72
10.08
10.57
1
2
3
4
6
7
8
9
Na2CO2·
10H2O分子量=286.2;
0.1M溶液为28.62克/升。
N2HCO3分子量=84.0;
0.1M溶液为8.40克/升。
15．“PBS”缓冲液
NaCl
NaH2PO4
1000
0.1
0.2
0.3
100ml
8.5g
2.2g
0.4g
pH标准缓冲溶液
StandardpHBufferSolutions
名称（Name）
配
制
（Compoundingway）
不同温度时的pH值（pHindifferenttemperatures）
0℃
5℃
10℃
15℃
20℃
25℃
30℃
35℃
40℃
草酸盐标准缓冲溶液
c[KH3（C2O4）2·
2H2O]为0.05mol/L。
称取12.71g四草酸钾[KH3（C2O4）2·
2H2O]溶于无二氧化碳的水中，稀释至1000ml
1.67
1.68
1.69
45℃
50℃
55℃
60℃
70℃
80℃
90℃
95℃
-
1.70
1.71
1.72
1.74
1.77
1.79
1.81
酒石酸盐标准缓冲溶液
在25℃时，用无二氧化碳的水溶解外消旋的酒石酸氢钾（KHC4H4O6），并剧烈振摇至成饱和溶液
3.56
3.55
3.58
3.61
3.65
3.67
苯二甲酸氢盐标准缓冲溶液
c（C6H4CO2HCO2K）为0.05mol/L，称取于（115.0±
5.0）℃干燥2～3h的邻苯二甲酸氢钾（KHC8H4O4）10.21g，溶于无CO2的蒸馏水，并稀释至1000ml
（注：
可用于酸度计校准）
4.00
4.01
4.02
4.04
4.05
4.06
4.08
4.09
4.13
4.16
4.21
4.23
磷酸盐标准缓冲溶液
分别称取在（115.0±
5.0）℃干燥2～3h的磷酸氢二钠（Na2HPO4）（3．53±
0．01）g和磷酸二氢钾（KH2PO4）（3．39±
0．01）g，溶于预先煮沸过15～30min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml（注：
6.98
6.95
6.92
6.90
6.88
6.86
6.85
6.84
6.83
6.89
硼酸盐标准缓冲溶液
c（Na2B4O7·
10H2O）称取硼砂（Na2B4O7·
10H2O）（3．80±
0．01）g（注意：
不能烘！
），溶于预先煮沸过15～30min并迅速冷却的蒸馏水中，并稀释至1000ml。
置聚乙烯塑料瓶中密闭保存。
存放时要防止空气中的CO2的进入（注：
9.46
9.40
9.33
9.27
9.22
9.18
9.14
9.10
9.06
9.04
9.01
8.99
8.96
8.92
8.89
8.85
8.83
氢氧化钙标准缓冲溶液
在25℃，用无二氧化碳的蒸馏水制备氢氧化钙的饱和溶液。
氢氧化钙溶液的浓度c[1/2Ca（OH）2]应在（0.0400～0.0412）mol/L。
氢氧化钙溶液的浓度可以酚红为指示剂，用盐酸标准溶液[c（HCl）=0.1mol/L]滴定测出。
存放时要防止空气中的二氧化碳的进入。
出现混浊应弃去重新配制
13.42
13.21
13.00
12.81
12.63
12.45
12.30
12.14
11.98
11.84
11.71
11.57
11.45
注：
为保证pH值的准确度，上述标准缓冲溶液必须使用pH基准试剂配制。
常用pH缓冲溶液的配制和pH值
PreparationandpHValuesofCommonpHBufferSolutions
序号（No.）
溶液名称
（Solutionname）
配制方法
（Preparation）
pH值
（pHvalue）
1
氯化钾-盐酸
13.0ml0.2mol/LHCl与25.0ml0.2mol/L
KCl混合均匀后，加水稀释至100ml
1.7
2
氨基乙酸-盐酸
在500ml水中溶解氨基乙酸150g，加480ml浓盐酸，再加水稀释至1L
2.3
3
一氯乙酸-氢氧化钠
在200ml水中溶解2g一氯乙酸后，加40g
NaOH，溶解完全后再加水稀释至1L
2.8
4
邻苯二甲酸
升级会员 