41LC15C高效液相色谱仪确认方案Word格式.docx

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为确定LC-15C高效液相色谱仪能够达到仪器性能指标，符合检验产品的需求，特制订本方案，对其进行安装确认、运行确认、性能确认，保证该仪器在验证周期内符合检测要求。

2．仪器介绍：

本仪器为日本岛津公司生产，由LC-15CA泵、LC-15CB泵、SPD-15C紫外-可见检测器、CTO-15C色谱柱温箱，N2000双通道色谱工作站组成。

工作原理：

高压输液泵将规定的流动相泵入色谱柱，手动进样器注入供试品，由流动相带入色谱柱温箱内，各组分在色谱柱内被分离，并依次进入检测器，由色谱工作站软件记录和处理色谱信号，从而达到分析目的。

主要用于各种中药原料及成品的含量测定。

3．确认范围及方法：

因该设备为非定制分析仪器，且已初装使用多年，故本次只进行安装确认、运行确认及性能确认三大块的测试。

具体各项确认方法详见确认内容。

4.相关文件：

《分析化学实验》

《岛津LC-15C高效液相色谱仪使用说明书》

《中国药典》2010年版二部

《药品检验仪器操作规程》2010年版

《岛津LC-15C高效液相色谱仪使用标准操作规程》（编号：

SOP-XCZ-YQ-151-01）

《岛津LC-15C高效液相色谱仪维护标准操作规程》（编号：

SOP-XCZ-YQ-152-01）

《岛津LC-15C高效液相色谱仪清洁标准操作规程》（编号：

SOP-XCZ-YQ-153-01）

5．确认小组职责：

组长：

根据计划安排、培训确认小组成员；

组织确认小组人员起草确认方案并进行审核；

监督确认过程按批准的方案实施；

组织汇总及评价、审核确认结果，对确认报告进行批准。

质量部：

化验室起草确认方案，对有关数据、结果进行记录，化验室主任应对确认的检验结果进行审核；

质量保证室汇总及评价确认结果，起草确认报告。

工程设备部：

协助起草确认方案，提供与仪器安装确认有关的技术指导；

参与确认方案的审核。

验证前准备：

参加验证的人员经过系统化培训，具备相关操作的能力；

与仪器有关的操作规程已建立并批准；

确认过程中所用衡器、玻璃量具等已经过校准。

具体见附表1：

名称

规格或型号

校正结果

校验是

否完成

校正有效期

容量瓶

25ml

□合格

□不合格

□是

□否

3年

电子天平

十万分之一

1年

二、验证内容：

1.安装确认：

对已安装的液相色谱仪的安装条件和安装后进行确认，证实设备所应备有的技术资料齐全，并确认安装条件（或场所）符合要求。

1.1.技术资料确认：

检查仪器的采购合同、验收记录、出厂合格证书、仪器使用说明书及各项操规程等。

确认各所需的资料。

操作规程文件编号在备注中标明，检查情况见下表：

确认项目

有

无

存放地点

备注说明

采购合同

验收记录

仪器合格证书

仪器工作站说明书

标准操作规程

维护保养规程

清洁规程

结论：

检查人：

复核人：

1.2.安装条件确认：

确认外部安装条件是否满足要求，查情况见下表：

合格要求

确认结果

备注

温湿度

室温15℃-30℃，相对湿度45%-70%；

装有空调，能控制温湿度。

电源

电源：

AC220V±

10%，50Hz；

接地装置良好，电源线长度适中，无过度弯曲或拉伸状况。

电脑配置

能适应N2000双通道色谱工作站的运行，工作途中无卡机、死机现象。

打印机

配备打印机，能打印彩色图片。

线路安装

各组件相连的线路、管道安装正确，接触良好。

安装场所

周围无震动、无腐蚀性介质、无明火或其他火源；

房间内或周边配有灭火器；

仪器安装在平稳牢固操作台上，避免空调直吹风，避免直射阳光；

操作间彻底通风；

。

2.运行确认与性能确认：

证明液相色谱仪的软硬件功能运行正常，并且达到检测要求，应用标准品或对照品、或检测的样品进行性能确认，以确认仪器符合使用要求。

确认项目及可接受标准见下表：

测试项目

认可质量标准

溶液输送泵

流量设定值（ml/min）

0.5

1.0

2.0

3.0

5.0

泵流量设定值误差（%）

±

2%

流速稳定性误差（%）

柱温箱温度准确度和温度稳定

准确度：

柱温箱示值误差不超过±

2℃

该实验柱温使用范围25℃至40℃,测试点设定为25℃和40℃

温度稳定性：

在40℃测试，不得超过1.0℃

可见波长准确度

波长准确度（nm）≤±

2nm

基线噪音和基线漂移

基线漂移：

≤5×

10-3AU/h

基线噪音：

10-4AU

进样精密度和残留

精密度（峰面积）限度：

1.0%

精密度（峰高）限度：

2.0%

残留（峰面积）限度：

0.2%

残留（峰高）限度：

0.4%

线性

相关系数R2＞0.999

重现性测试

定性测量重现性（RSD）

≤1.0%

定量测量重现性（RSD）

2.1.泵流速确认：

2.1.1.测试方法：

根据仪器显示及实验室需求，流量范围在0.5-5.0ml/min以水为流动相，将流速分别设定为0.5ml/min、1.0ml/min、2.0ml/min、3.0ml/min、5.0ml/min待流速稳定后，用一校正过的10ml容量瓶接收流动相并开始计时，当流动相接收至容量瓶刻度时停止计时并计算流速。

每种流速做三次，按以下公式计算流速的设定值误差，流速的稳定性误差。

2.1.2.测试记录及确认结果判定：

设定流速ml/min

收集时间

（min）

计算流速ml/min

平均流速ml/min

设定值误差%

稳定性误差％

结果判定

测试结果

标准规定

≤2%

测试人：

日期

2.2.柱温箱温度准确度和温度稳定的确认：

2.2.1.测试方法：

温度设定为40℃，将一根经过校正的温度计放入柱温箱，每隔30min读取温度计显示温度及柱温箱显示温度一次。

共读取6次。

2.2.2.测试记录及确认结果判定：

接受标准:

与温度计差值≤±

2℃。

确认参数:

项目

30min

60min

90min

120min

150min

180min

温度计读数℃

柱温箱显示温度℃

差值

2.3.紫外可见波长检测度准确度的确认：

2.3.1.确认方法：

波长准确度用波长示值误差表示。

波长示值误差是设定检测器的波长与实际波长之间的差值。

开启检测器，预热。

配置一份100ug/mL（穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯各一半）的穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯溶液，当穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯溶液从柱子洗脱并流入紫外可见检测器时，停止流速，用190nm到400nm的波长对穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯溶液进行波长扫描，并输出各波长所对应的吸光度，以波长为X轴，吸光度为Y轴建立一条二次曲线，二次曲线的拐点对应的X轴即为波长测得值。

所测得的波长与穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯溶液特定吸收波长（225nm,254nm）的差值即为波长示值误差。

2.3.2.测试记录及确认结果判定：

波长设定值（nm）

225

254

扫描波长（nm）

吸光度（mAU）

二次曲线方程

（Y=ax2+bx+c）

波长测得值（nm）

示值误差（nm）

可接受标准

≤±

附件号

2.4.基线噪音和基线漂移的确认：

2.4.1.确认方法：

检查条件：

选用C18柱，以100%甲醇为流动相，流速为1.0ml/min,紫外检测器的波长选在254nm。

开机预热，待仪器稳定后记录基线60min,测得1min内基线波动幅度作为基线噪音，用检测器自身的物理量（mAU）作单位表示，基线漂移用60min内基线偏离原点的值（mAU/60min）作单位表示。

检查方法：

监视界面，根据PC计算机、记录仪60分钟图谱计算结果。

2.4.2.测试记录及确认结果判定：

项目

实测结果

基线漂移

<

5mAU/60min

基线噪声

0.05mAU

2.5.进样精密度和残留确认：

确认进样精密度及样品残留是否符合要求。

2.5.1.测试方法：

选用4.6mm×

250mm的C18柱，流动相：

甲醇-水（60：

40），检测波长225nm，流速1.0ml/min,进样量10ul，使用下列商业标准品进样。

标准溶液（a）:

穿心莲内酯溶液100ug/ml

标准溶液（b）:

穿心莲内酯溶液10ug/ml

进以下序列样：

——标准溶液（a）:

穿心莲内酯溶液100ug/ml，1针

——空白溶液:

水，1针

——标准溶液（b）:

穿心莲内酯10ug/ml，1针

记录色谱图并对穿心莲内酯峰进行积分。

分别测定三次，记录结果。

2.5.2.测试记录：

第一次

第二次

第三次

三次的平均值

峰面积

峰高

标准溶液（a）

空白溶液

标准溶液（b）

2.5.3.计算结果及确认结果判定：

进样残留

空白溶液中相应的峰面积与标准溶液（a）中穿心莲内酯峰面积的百分比不超过0.2%

空白溶液中相应的峰高与标准溶液（a）中穿心莲内酯峰高的百分比不超过0.4%

进样精密度

标准溶液（b）中穿心莲内酯的峰面积是标准溶液（a）中穿心莲内酯峰面积的9.5%-10.5%

标准溶液（b）中穿心莲内酯的峰高是标准溶液（a）中穿心莲内酯峰高的9%-11%

空白溶液中相应的峰面积与标准溶液（a）中穿心莲内酯峰面积的百分比为%

空白溶液中相应的峰高与标准溶液（a）中穿心莲内酯峰高的百分比为%

标准溶液（b）中穿心莲内酯的峰面积是标准溶液（a）中穿心莲内酯峰面积的%

标准溶液（b）中穿心莲内酯的峰高是标准溶液（a）中穿心莲内酯峰高的%

峰高、峰面积

2.6.线性的确认：

2.6.1.测试方法：

选用一根C18柱，4.6mm×

250mm，5µ

m，流动相:

甲醇-水（60:

40）；

流速1.0ml/min；

检测波长225nm。

开启检测系统，将工作波长设置为225nm，开机等待色谱柱充分平衡且检测器基线稳定,噪声和基线符合规定的要求后,穿心莲内酯标准品溶液进样量分别为1ul，2ul、20ul、4ul、5ul、6ul、7ul,各进样1次。

可接受标准：

相关系数R2＞0.999。

2.6.2.测试记录：

标准品名称（浓度）/批号：

_______________

进样量（ul）

标准品峰面积（mAu*S）

1

10

20

30

50

70

100

标准曲线:

相关系数R2:

附件号:

结果判定：

日期:

2.7.重现性确认:

2.7.1.方法：

m。

流动相:

流速:

1.0ml/min；

进样量:

10ul；

检测波长:

225nm。

开启检测器电源，将工作波长设置为225nm，预热，开启泵的电源开关,流量设置为1.0ml/min，等待色谱柱充分平衡且检测器基线稳定,噪声和基线应符合规定的要求,穿心莲内酯准品溶液100ug/ml10ul，进样六次。

可接受标准：

RSD≤1.0%。

2.7.2.测试记录及结果判定：

__________________标准品批号：

_______

2

3

4

5

6

平均值

相对标准偏差（RSD）

可接受标准（RSD）

保留时间（定性）

（定量）

检测人：

3.偏差情况及评估：

如确认结果无法满足任一可接受评判标准，或组件无法满足任一组件检查评判标准，请执行下列操作。

检查是否有易损部件已达到其使用寿命：

无法满足检查评判标准的原因可能是由于易损部件已不能继续使用。

检查易损部件，如果需要则进行更换。

进行故障排除，并查找类似问题，采取相应措施解决发现的所有问题。

详细信息参见适用的说明书。

如果无法确定故障原因，请与岛津办事处联系。

③凡有更换易损部件或进行故障排除后，应重新开展新一轮的确认试验。

确认过程出现的偏差情况和处理方式应在确认报告中详细说明。

4．确认结果评定与结论

QC负责收集各项确认、确认结果记录。

质量保证室起草确认报告，报确认小组。

确认小组负责对确认结果进行综合评审，做出结论，交质量受权人批准。

5.再确认周期：

高效液相色谱仪属精密仪器，也是我公司最常用的检测仪器之一，仪器性能直接关系日常检验数据的准确性，经综合评估，将该仪器再确认周期定为1年/次，如仪器因出现严重故障而更换主要零部件，则需要立即进行再确认。