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申请书
项目类别(在相应序号上划O1.人文社会科学研究项目②•自然
科学研究项目
自然科学
淮南麻鸭ppar和angptl4基因编码区序列突变检测研究
张晓婷
生物科学
生命科学
2009-10-10
信阳师范学院制
论证报告
一、本课题的研究现状及意义
淮南麻鸭是我国优良的地方家禽品种。
主产于河南省信阳市光山、商城、罗山、平桥、固始、新县等县区,1980年经河南省地方优良畜禽品种编委会正式命名为淮南麻鸭。
淮南麻鸭体型中等,具有蛋肉兼用,喜水耐旱,适应性、抗逆性强,耐粗饲,易养,生长快,觅食力强,产蛋较多,肉质肉味好等特点,已被列入《河南省地方优良畜禽品种志》,是河南省重点保护的优良地方品种之一。
虽然淮南麻鸭有许多优良特点,但其生长速度、育肥性能与大型蛋肉兼用鸭如北京鸭还有相当差距[1],专门化肉用性能不能突出。
而且由于多年来缺乏系统的选育,加上主产区引入多个肉鸭品种,造成淮南麻鸭品种混杂、退化,其体型、外貌不一致,群体整齐度差,生产性能下降,品种内个体间的生产性能差异显著,严重制约了该品种的饲养和推广[2-3],
作为一个地方品种,已经不能满足人们对肉类的高质量的需求,如不进行品种改良,将会在激烈的市场竞争中被淘汰出局。
为加快淮南麻鸭的产业化开发进程、提高产肉性能,就必须对其进行遗传改良。
分子育种技术从一诞生就受到科学家的极大关注,现已在畜牧业发展过程中收到了良好的效果[4]。
目前淮南麻鸭的育种方法主要是常规的杂交育种,世代周期长,效率较低,而分子育种可明显弥补这一不足,有效加速育种进程。
利用现代生物技术手段,从分子水平对麻鸭品种资源进行检测和遗传多样性研究、促进遗传资源保护已成为麻鸭育种的必然趋势。
目前,国内用分子手段研究淮南麻鸭的很少,李慧芳、杨宁、张汤杰等用分子标记技术研究了国内包括淮南麻鸭在内多个地方鸭种的遗传多样性[5-8],但对淮南麻鸭的系统研究很少,且不够深入全面,对淮南麻鸭进行功能基因检测的研究未见报道,因此对淮南麻鸭的遗传改良进行更深入的研究是十分必要的。
近年来,随着人们消费水平的提高,改善肉质成为当前畜禽行业面临的主要问题之一。
沉积在肌肉内的脂肪是影响肉质和风味的一项重要经济性状。
对于家禽而言,研究脂肪性状是家禽育种工作的一个重要方面,从dna水平上研究肉质已经成为一个研究热点[9]。
综上所述,本研究以ppar和angptl4基因为侯选基因,以淮南麻鸭为材料,运用pcr-sscp、pcr-rflp和dna测序技术对所选基因的编码区进行突变检测,旨在为淮南麻鸭的合理开发利用和肉用性能改良提供参考依据。
参考文献
[1]张斌,胡建新,林琳,赵倩.淮南麻鸭品种资源调查与思考[j].中国畜禽种业,2007,7:
46-48.[2]赵云焕,赵聘.淮南麻鸭本品种选育方案[j].水禽世界,2007,4:
46-47.
⑶赵云焕,刘纪成,赵聘,程丰.淮南麻鸭产业化开发研究[j].信阳农业高等专科学校学报,2006,16(3):
111-113.
[4]林金杏,曹学亮.家禽分子育种现状及其发展趋势[j].中国家
禽.2008,30(5):
4-8.
⑸李慧芳冲国地方家鸭品种的分子遗传多样性研究[d].扬州大学博
士研究生学位论文:
扬州,2008.57-85.
⑹张汤杰.江淮流域家鸭遗传多样性及高邮鸭产蛋性状的研究[d].
扬州大学博士研究生学位论文:
扬州,2007.39-98.
[7]李慧芳,杨宁,马月辉,等.中国蛋鸭品种资源的遗传变异[j].山东农业大学学报,2006,37
(4):
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[8]李慧芳,李碧春,杨宁,等.华中地区家鸭种质资源的遗传结构研究[j].
畜牧兽医学报,2008,39(3):
291-295.
[9]张红,龚道清,张军•家禽脂肪性状相关基因研究进展[j].中国畜牧兽医.2007,34⑷:
52-57.[10]孟和,王桂华,王启贵,赵建国,顾志良,王宇祥,李辉.鸡ppar基因单核苷酸多态与脂肪性状
相关的研究[j].遗传学报,2002,29⑵:
119〜123,
[11]孟和,李辉,王宇祥.鸡ppars基因组织表达特性的研究[j].遗传
学报,2004,31(7):
682〜687.[12]李春雨,李辉.低脂肪肉鸡遗传选择方法及效果研究进展[j].中国家
禽,2004,26(14):
35-38.
[13]马云.牛三个基因的分离、定位及其与牛经济性状的关联研究[d]
西北农林科技大学博
陕西杨凌,2006.
[14]马云,李芬,王启钊,等.南阳牛血液基因组dna提取与angptl4基因的pcr扩增[j].新乡学院学报.2009,26
(2):
48-51.
[15]崔宏,赵国强.angptl4的研究进展[j].中国实用神经疾病杂
志.2008,11(11):
56-58.
二、本课题的研究内容、特色和创新之处,预计突破哪些难题
1.本课题的研究内容
2.本课题的研究特色和创新点
首次利用淮南麻鸭对影响肉质性状的重要功能候选基因ppar、
angptl4的编码区序列进行突变检测,首次利用同源序列克隆法克隆鸭的angptl4基因。
研究结果对于我国地方鸭种资源的肉用性能改良具有较重要的参考价值。
3.本课题拟解决的关键问题
sscp分型、酶切位点的准确导入、以及测序图的准确解读是本实验的难点,也是本实验
拟解决的关键问题。
三、本课题的研究方法、步骤、可行性论证,研究工作总体安排及
进度和预期成果
1.本课题的研究方法
采集血样,提取基因组dna,设计合成引物,pcr扩增并检测产物,琼脂糖凝胶电泳检测,确定为阳性后在变性的聚丙烯酰胺凝胶上电泳,sscp分析,最后进行统计分析。
2.本课题的研究步骤
(1)血样采集与保存翅静脉采集血样,edta抗凝,低温贮存带回
实验室,-2oC保存。
(2)全血基因组dna的提取与检测参照李慧芳[10]的方法并作适当改动。
(3)引物设计以genbank公布的ppar和angptl4基因序列为参照序列,设计引物,
利用同源序列克隆法克隆鸭的相应基因并设计检测突变的pcr扩增
引物。
(4)pcr扩增及产物检测常规pcr扩增,琼脂糖凝胶电泳抽检扩增产物。
(5)pcr产物sscp分析聚丙烯酰胺凝胶电泳分离扩增产物,银染法检测电泳结果。
(6)pcr产物的序列测定与比对分析本研究
的技术路线图如下所示:
【篇二:
科创申请书写作技巧】
2.课题申报书写作特点
课题申报书写作最大的特点是目的性非常明确一课题申报成功立
项。
围绕这个目标具体阐述为以下几点:
2.1全面性:
全面占有资料是课题申报写作的基础。
较大的攻关、招标课题(尤其是国家级别的课题)都要求研究生就申报课题的国内外同行研究的现状进行阐述和评价,中小型或地域性较强的课题至少也要了解国内或省内外的研究现状。
2.2创新性:
无论什么科研课题必须要有创新性,这是申报书最突出的特点。
申报课题的创新都是要求在前人没有研究过的或是在已有的研究基础上的再创造。
研究的结果应该是前人所不曾获得的方法和结论,它可以是结合课题研究实践提出的新观点、新发现、新设想、新见解,也可以是通过研究建立的新理论、新技术、新方法或开拓的新领域,还可以是某个学科领域、制度、政策等方面的突破。
2.3科学性:
申报的课题要符合客观规律,要有一定的理论根据和实践依据(即立项依据),同时要有科学的探索精神和科学的论证。
2.4前瞻性:
课题内容应充分地预测到它的创新之处、经济价值和社会效应。
2.5选择性:
除了招标课题外,各类课题指南都只是一个大概的范围,研究生可根据自身的条件找准合适的科研项目。
选题可基本反映出申报者对某一学科基本理论与专业技能的掌握程度,实验技术与操作能力的熟练程度,科学思维和分析能力的强弱程度,知识结构和知识范围的深度和广度,因此,研究生必须实事求是地根据自己的能力和工作环境条件,由浅入深,由易到难,寻找到适合自己的科研课题。
2.6针对性:
为了避免重复,所选的课题不宜过泛、过大,应集中在解决某一领域的某一问题上,命题必须确切。
2.7可行性:
从课题拟研究的内容到方法都应具有可行性,要考虑本课题承担单位所具备的各项条件和因素,根据实际情况选择切实可行、力所能及的课题。
3.课题申报书写作方法
申报书从格式到内容的写作都是有一定的方法、技巧和要求的,掌握好的方法有助于研究生课题申报成功。
即:
3.1写作的定位:
课题拟研究的内容和范围不是写得越多、越大就越好,一定要善于抓住重点并把握拟研究内容的深度以及与自身的条件和能力的关系等。
课题的形成和选择是科研工作中比较艰苦的一个阶段,选择课题就是将自己的主攻方向正确定位,定位正确是课题申报成功的一半。
3.2写作前要调研:
动笔前的调研工作很重要,可以避免低水平的重复。
因此,一是要与科技主管部门密切联系,要及时了解国家和地方科研基金的情况和本单位科研的服务方向;
二是必须加强申报前的文献资料查阅和调研工作,及时了解国内外该研究领域的技术现状、动态趋势及存在的问题,并认真加以分析,根据自己的优势确定主攻方向和目标;
三是申报者要了解各种渠道的科研课题的性质特点、资助方式、资助强度及对象,从而选择合适本人特点的对口课题。
3.3在新”字上下功夫:
课题申报突出自己拟研究内容的新颖性,通过检索了解有关的科研项目是否已经有人做过,研究的程度如何,有没有和该课题密切相关的文献报道等。
如果有密切相关的文献报道,就要努力查找原始文献,弄清其科研思路、课题设计、科研方法、技术手段、实验材料等方面与本人的科研项目的不同点,以及本人的科研方法、技术手段等是否更合理、更有科学价值,社会效益和经济效益是否更大等,这些都是需要考虑的因素。
同时在课题目标、研究的思路、内容设计、科研方法、技术路线或技术手段、技术成果等方面中的某一方面,是他人没有做过的或获得的。
这是打动专家评委的关键所在。
3.4依据要充分:
在查阅大量国内外文献资料,广泛调研的基础上,尽可能地把申报课题的意义、特点、重点、难点和创新点充分表达出来。
要清楚、客观、全面地说明国内外同行的研究状况,如己研究的程度、所用的方法和手段以及发展趋势,要特别指出目前需要解决的
问题及其没有解决的原因,提出对此问题的解决办法及要达到的目的等。
3.5设计要周密:
课题研究方法的设计,牵涉的主要问题是申请的经费和时间能否做到较合理的使用,它是课题研究条件的基本保证,是课题研究非常重要的组成部分,对拟申报课题的完成和经费审批落实起着至关重要的作用。
因此须用最科学、最简便、最清晰的思路设计科研步骤,以最佳的组合、最少的成本、最短的时间,得到最理想的科研效果。
3.6注重过程化:
阶段性成果是完成最终成果不可缺少的重要过程。
拟研究过程中所需解决的具体科学技术问题,包括拟研究的范围、内容和具体指标等,写作时应力求内容具体、完整、切题,目标集中、明确突出阶段性成果。
3.7专家指导好:
国家为了鼓励青年人才脱颖而出,各类课题都有青年项目,这特别适合初次搞研究的人。
但初次搞研究的人在申报课题时,由于经验不足、知识面不宽、资历浅等原因,往往需要有关专家的指导,才有可能使课题申报成功立项。
要取得专家的有效指导,一是根据课题的目标、内容和性质选准专家。
二是根据研究的需要来选择导师指导的方式。
专家的指导一般可以分为个别咨