菊花组织培养PPT格式课件下载.ppt

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离体培养的上皮细胞，始终保持为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。

为上皮细胞，而不会变成其他类型的细胞。

22、稳定性、稳定性33、不可逆性、不可逆性细胞分化发生在整个生命进程中。

细胞分化发生在整个生命进程中。

11、持久性、持久性22、细胞分化的特点、细胞分化的特点造血干细胞造血干细胞原红细胞原红细胞早幼红细早幼红细胞胞中幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞晚幼红细胞成成熟红细胞熟红细胞死亡死亡44、普遍性、普遍性细胞分化是细胞分化是否意味着细胞否意味着细胞中遗传物质的中遗传物质的改变？

改变？

遗传物质遗传物质没有改变没有改变，不同组织的细胞共同不同组织的细胞共同来源于受精卵，经有来源于受精卵，经有丝分裂产生。

丝分裂产生。

3、细胞分化的实质、细胞分化的实质AABBDDCCEEEDCABEDCABEDCABEDCAB基因基因在个体发育过程中，不同细胞中在个体发育过程中，不同细胞中遗传信息的执行情况不同即基因遗传信息的执行情况不同即基因的选择性表达的过程的选择性表达的过程红细胞红细胞合成血红蛋白合成血红蛋白（不合成肌动蛋白不合成肌动蛋白）肌细胞肌细胞肌动蛋白基因开启肌动蛋白基因开启合成肌动蛋白合成肌动蛋白（不合成血红蛋白不合成血红蛋白）肌动蛋白基因关闭肌动蛋白基因关闭血红蛋白基因关闭血红蛋白基因关闭血红蛋白基因开启血红蛋白基因开启4、细胞分化的结果、细胞分化的结果细胞产生了不同种类的蛋白质细胞产生了不同种类的蛋白质即出现了不同的结构和功能即出现了不同的结构和功能愈伤组织愈伤组织胚状体胚状体19581958，美国，斯图，美国，斯图尔德尔德植物组织培养植物组织培养离体二、基础知识二、基础知识

（一）植物组织培养概念关键词：

关键词：

外植体、脱分化、再分化、愈伤组织外植体、脱分化、再分化、愈伤组织在在无菌无菌和和人工控制人工控制条件下，将条件下，将离体的植物（离体的植物（）培养在人工配置的培养基上，给培养在人工配置的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其脱分予适宜的培养条件，诱导其脱分化产生愈伤组织再分化形成丛芽，化产生愈伤组织再分化形成丛芽，最终形成最终形成。

又称：

植物离体培养植物离体培养器官、组织、细胞器官、组织、细胞完整的植株完整的植株由高度分化的植物组织或细胞产生由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程。

愈伤组织的过程。

：

脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，：

脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。

又可以重新分化成根或芽等器官的过程。

用于离体培养的植物器官或组织片段用于离体培养的植物器官或组织片段。

细胞排列疏松、无规则、高度液：

细胞排列疏松、无规则、高度液泡化的无定形的薄壁细胞。

泡化的无定形的薄壁细胞。

外植体外植体脱分化（或去分化）脱分化（或去分化）：

再分化再分化愈伤组织愈伤组织切取切取形成层形成层无菌无菌接种接种诱导愈伤组织诱导愈伤组织的形成的形成试管苗的形成试管苗的形成培养室培养室移栽移栽脱分化脱分化再分化再分化

（二）植物组织培养的基本过程

（二）植物组织培养的基本过程（三）植物组织培养的理论基础-细胞全能性n概念概念：

高度分化的植物细胞，仍然具有发育：

高度分化的植物细胞，仍然具有发育成完整个体的潜能。

成完整个体的潜能。

n基础基础：

生物体的每一个细胞都包含有该物种：

生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。

所特有的全套遗传物质。

n表达条件表达条件：

离体条件：

离体条件无菌操作无菌操作适宜物质的诱导和调节（植物激素）适宜物质的诱导和调节（植物激素）适宜的营养物质适宜的营养物质温度、酸碱度、光照等条件的控制温度、酸碱度、光照等条件的控制思考思考这个试验说明了已经分化的细胞核这个试验说明了已经分化的细胞核具有什么特性？

具有什么特性？

高度分化的动物体细胞的细胞高度分化的动物体细胞的细胞核有发育成完整个体的潜能核有发育成完整个体的潜能对比：

对比：

多利羊的诞生多利羊的诞生动物细胞有没动物细胞有没有这种能力？

有这种能力？

已经分化的细胞（核），仍然具有已经分化的细胞（核），仍然具有发育成完整个体的潜能。

发育成完整个体的潜能。

细胞全能性细胞全能性思考思考为什么已经分化的细胞具有全能性呢？

为什么已经分化的细胞具有全能性呢？

高度分化的细胞含有保持物种发育高度分化的细胞含有保持物种发育所需要的所需要的全套基因全套基因植物组织培养技术植物组织培养技术动物的克隆技术动物的克隆技术11、培育无病毒植株、培育无病毒植株22、大规模培养愈伤组织（提取紫草素，治疗、大规模培养愈伤组织（提取紫草素，治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）44、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法（受体细胞为植物细胞）（受体细胞为植物细胞）（四（四）植物组织培养的应用：

植物组织培养的应用：

33、人工种子（解决有些作物品种繁殖能力差，、人工种子（解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题）结子困难或发芽率低等问题）人工种子人工种子三、影响植物组织培养的因素n1、材料的种类、年龄及保存时间长短等、材料的种类、年龄及保存时间长短等n2、营养、营养n3、植物激素、植物激素n4、PH、温度、光照等条件、温度、光照等条件11、植物材料的选择植物材料的选择-直接关系实验的成败直接关系实验的成败不同植物的组织培养难度不同不同植物的组织培养难度不同egeg：

烟草和胡萝卜的组织培养较为容易烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难枸杞愈伤组织的芽诱导比较难菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝上部新萌生的侧枝同一种植物同一种植物材料，材料，材料的年龄、保存时材料的年龄、保存时间的长短间的长短等也会影响实验结果。

等也会影响实验结果。

22、营养营养-MS-MS培养基培养基AA、大量元素、大量元素（）BB、微量元素（、微量元素（）CC、有机物：

、有机物：

（）（）DD、植物激素：

、植物激素：

（）（）赤霉素赤霉素赤霉素赤霉素等等、主要影响蛋白质、核酸的合成；

、主要影响蛋白质、核酸的合成；

KKKK、CaCaCaCa、MgMgMgMg、SSSS主要影响酶的活性。

主要影响酶的活性。

无无机机盐盐蔗糖蔗糖蔗糖蔗糖既是碳源也是调节渗透压的物质；

既是碳源也是调节渗透压的物质；

维生素维生素维生素维生素能能能能促进细胞分裂和诱导器官分化；

促进细胞分裂和诱导器官分化；

甘氨酸甘氨酸甘氨酸甘氨酸是蛋白质是蛋白质是蛋白质是蛋白质的组成成分，也是有机氮源。

的组成成分，也是有机氮源。

N、P、K、Ca、Mg、SBB、MnMn、CuCu、ZnZn、FeFe、MoMo、II、CoCo甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖蔗糖蔗糖蔗糖生长素、细胞分裂素、生长素、细胞分裂素、生长素、细胞分裂素、生长素、细胞分裂素、萧县郝集中学MSMS固体培养基成分及比例固体培养基成分及比例讨论：

你能说出各种营养物质的作用吗？

同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？

答：

微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的的无机盐无机盐；

蔗糖提供；

蔗糖提供碳源碳源，同时能够维持细胞的，同时能够维持细胞的渗渗透压透压；

甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体；

甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求特殊营养需求。

微生物培养基以微生物培养基以有机营养有机营养为主。

与微生物的培养为主。

与微生物的培养不同，不同，MSMS培养基则需提供大量培养基则需提供大量无机营养无机营养，无机盐混，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。

类。

n常用植物激素：

常用植物激素：

生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素和和赤霉赤霉素素n生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素化和再分化的关键性激素n在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈呈加强加强的趋势的趋势n激素的激素的使用顺序使用顺序、使用的量及比例使用的量及比例影响植物影响植物细胞的发育方向细胞的发育方向3、植物激素的影响生长素类：

生长素类：

2222，4444二氯苯氧乙酸（二氯苯氧乙酸（二氯苯氧乙酸（二氯苯氧乙酸（2222，4444DDDD）、吲哚）、吲哚）、吲哚）、吲哚乙酸（乙酸（乙酸（乙酸（IAAIAAIAAIAA）、萘乙酸（）、萘乙酸（）、萘乙酸（）、萘乙酸（NAANAANAANAA）、吲哚丁）、吲哚丁）、吲哚丁）、吲哚丁酸（酸（酸（酸（IBAIBAIBAIBA）等。

）等。

细胞分裂素类：

激动素（激动素（激动素（激动素（KTKTKTKT）、）、）、）、6666苄基嘌呤（苄基嘌呤（苄基嘌呤（苄基嘌呤（6666BABABABA）、玉米素（）、玉米素（）、玉米素（）、玉米素（ZTZTZTZT）等。

赤霉素类：

赤霉酸（赤霉酸（赤霉酸（赤霉酸（GAGAGAGA3333）等）等）等）等作用：

2，4D有利于愈伤组织的生长；

IAA、NAA、IBA有利于器官分化。

作用：

促进细胞的分裂与分化，其中KT能明显促进芽的分化而抑制根的形成。

促进不定芽和幼株伸长。

使用顺序使用顺序使用顺序使用顺序实验结果实验结果实验结果实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素先使用生长素，后使用细胞分裂素先使用生长素，后使用细胞分裂素先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但不利分化有利于细胞分裂，但不利分化有利于细胞分裂，但不利分化有利于细胞分裂，但不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素先使用细胞分裂素后使用生长素先使用细胞分裂素后使用生长素先使用细胞分裂素后使用生长素细胞既分裂、也分化细胞既分裂、也分化细胞既分裂、也分化细胞既分裂、也分化同时使用同时使用同时使用同时使用分化频率高分化频率高分化频率高分化频率高使用比例使用比例使用比例使用比例实验结果实验结果实验结果实验结果生长素生长素生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素生长素生长素生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素细胞分裂素生长素生长素生长素生长素细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素生长素生长素生长素生长素再分化再分化再分化再分化植物细胞培养植物细胞培养植物细胞培养植物细胞培养不需要光不需要光不需要光不需要光需要光需要光需要光需要光需光否需光否abABC补充下图（注：

补充下图（注：

a、b过程，过程，A、B、C为激素使