食品质量安全检验人员微生物培训班-基础_精品文档PPT资料.ppt

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各级实验室的生物防护水平依次为：

一级最低，四级最高。

生物安全防护水平（生物安全防护水平（BSLBSL）一级生物安全防护水平（一级生物安全防护水平（BSLBSL11）二级生物安全防护水平（二级生物安全防护水平（BSLBSL22）三级生物安全防护水平（三级生物安全防护水平（BSLBSL33）四级生物安全防护水平（四级生物安全防护水平（BSLBSL44）实验室的分类、分级及适用范围实验室的分类、分级及适用范围实验室各级定义及适用范围实验室各级定义及适用范围一级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。

一级生物安全防护实验室一级生物安全防护实验室BSL1：

不需要特殊的防护屏障、除需要洗手池外，依靠标准的微生物操作即可获得基本的防护水平。

一级生物安全防护实验室实验室的分类、分级及适用范围实验室的分类、分级及适用范围实验室各级定义及适用范围实验室各级定义及适用范围二级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。

如临床检验实验室等。

普通微生物实验室加上使用生物安全柜。

BSL2：

安全设备（一级屏障）在BSL-1设施基础上增加:

l生物安全柜（BSC，二级）：

在涉及下例情况，从事感染性生物因子工作时应该使用气溶胶和飞溅大容量培养高浓度BSL2：

安全设备（一级屏障）在BSL-1设施的基础上，增加:

高压灭菌锅高压灭菌锅眼睛清洗站眼睛清洗站二级生物安全防护实验室典型的二级生物安全水平实典型的二级生物安全水平实验室验室（图片由CUH2A，Princeton，NJ，USA提供）。

在生物安全柜中进行可能发生气溶胶的操作程序。

门保持关闭并贴上适当的危险标志。

潜在被污染的废弃物同普通废弃物隔开。

二级生物安全防护实验室基本生物安全设备基本生物安全设备1、移液辅助器避免用口吸的方式移液。

有不同设计的多种产品可供使用。

2、生物安全柜，在以下情况使用：

处理感染性物质；

如果使用密封的安全离心杯，并在生物安全柜内装样、取样，则这类材料可在开放实验室离心空气传播感染的危险增大时进行极有可能产生气溶胶的操作时（包括离心、研磨、混匀、剧烈摇动、超声破碎、打开内部压力和周围环境压力不同的盛放有感染性物质的容器、动物鼻腔接种以及从动物或卵胚采集感染性组织）。

3、一次性塑料接种环，也可在生物安全柜内使用电加热接种环，以减少生成气溶胶。

4、螺口盖试管及瓶子。

5、用于清除感染性材料污染的高压灭菌器或其他适当工具。

6、一次性塑料移液管，尽量避免使用玻璃制品。

7、在投入使用前，像高压灭菌器和生物安全柜等设备必须用正确方法进行验收。

应参照生产商的说明书定期检测。

实验室的分类、分级及适用范围实验室的分类、分级及适用范围实验室各级定义及适用范围实验室各级定义及适用范围三级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。

BSL3：

安全设备（一级屏障）在BSL-1and2安全设备的基础上，加:

感染性材料的感染性材料的操作在II级或III级生物安全柜呼吸道保护呼吸道保护在二级生物安全防护水平上增加特殊防护服、进入制度、定向气流三级生物安全防护实验室l典型的三级生物安全水平实验室。

l实验室与公共通道分开并通过缓冲间（双门入实验室与公共通道分开并通过缓冲间（双门入口或二级生物安全水平的基础实验室）或气锁口或二级生物安全水平的基础实验室）或气锁室进入。

处理废弃物前，在实验室内先进行高室进入。

处理废弃物前，在实验室内先进行高压灭菌以清除污染。

应有非手控的水槽。

形成压灭菌以清除污染。

形成向内气流而且涉及感染性材料的全部工作应在向内气流而且涉及感染性材料的全部工作应在生物安全柜中进行。

生物安全柜中进行。

在二级生物安全防护水平上增加特殊防护服、进入制度、定向气流实验室的分类、分级及适用范围实验室的分类、分级及适用范围实验室各级定义及适用范围实验室各级定义及适用范围四级生物安全防护实验室实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。

与上述情况类似的不明微生物，也必须在四级生物安全防护实验室中进行。

待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在四级还是在较低级别的实验室中处理。

最高防护实验室四级生物安全防护实验室实验室操作：

实验室操作：

在三级生物安全防护水平上增加气锁入口、出口淋浴、污染物安全设施安全设施：

级BSC或级BSC并穿着正压服、双开门高压灭菌器（穿过墙体）、经过滤的空气3.2人员3.2.1检验人员应具有相应的教育、微生物专业培训经历，具备相应的资质，能够理解并正确实施检验。

3.2.2检验人员应掌握实验室生物检验安全操作知识检验人员应掌握实验室生物检验安全操作知识和消毒知识。

和消毒知识。

3.2.3检验人员应在检验过程中保持个人整洁与卫生个人整洁与卫生，防止人为污染样品。

3.2.4检验人员应在检验过程中遵守相关预防措施的规定，保证自身安全。

保证自身安全。

3.2.5有颜色视觉障碍的人员不能执行涉及到辨色的实验。

一、食品微生物实验室的基本要求一、食品微生物实验室的基本要求3.3设备3.3.1实验设备应满足检验工作的需要。

实验设备应满足检验工作的需要。

3.3.2实验设备应放置于适宜的环境条件下，便于维护、清洁、消毒与校准，并保持整洁与良好的工作状态。

3.3.3实验设备应定期进行检查、检定（加贴标识）、维护和保养，以确保工作性能和操作安全。

3.3.4实验设备应有日常性监控记录和使用记录实验设备应有日常性监控记录和使用记录。

一、食品微生物实验室的基本要求一、食品微生物实验室的基本要求微生物检测设施、设备一览超净工作台或生物洁净室超净工作台或生物洁净室微生物培养箱（微生物培养箱（361等等）天平：

（天平：

（感量感量0.1g，0.01g）电热干燥箱（电热干燥箱（干热灭菌干热灭菌）高压灭菌锅（高压灭菌锅（湿热灭菌湿热灭菌）生物安全柜生物安全柜（最重要的安全设备，形成最主最重要的安全设备，形成最主要的防护屏障）要的防护屏障）显微镜显微镜水浴锅、冰箱、冰柜水浴锅、冰箱、冰柜3.4检验用品3.4.1常规检验用品主要有接种环（针）、酒精灯、镊子、剪刀、接种环（针）、酒精灯、镊子、剪刀、药匙、消毒棉球、硅胶（棉）塞、微量移液器、吸管、吸球、试药匙、消毒棉球、硅胶（棉）塞、微量移液器、吸管、吸球、试管、平皿、微孔板、广口瓶、量筒、玻棒及管、平皿、微孔板、广口瓶、量筒、玻棒及L形玻棒等。

形玻棒等。

3.4.2检验用品在使用前应保持清洁和检验用品在使用前应保持清洁和/或无菌或无菌。

常用的灭菌方法包括湿热法、干热法、化学法等。

3.4.3需要灭菌的检验用品应放置在特定容器内或用合适的材料（如专用包装纸、铝箔纸等）包裹或加塞，应保证灭菌效果。

3.4.4可选择适用于微生物检验的一次性用品来替代反复使用的物品与材料（如培养皿、吸管、吸头、试管、接种环等）。

3.4.5检验用品的储存环境应保持干燥和清洁检验用品的储存环境应保持干燥和清洁,已灭菌与未灭菌的已灭菌与未灭菌的用品应分开存放并明确标识。

用品应分开存放并明确标识。

3.4.6灭菌检验用品应记录灭菌/消毒的温度与持续时间。

3.5培养基和试剂3.5.1培养基培养基的制备和质量控制按照GB/T4789.28的规定执行。

3.5.2试剂检验试剂的质量及配制应适用于相关检验。

对检验结果有重要影对检验结果有重要影响的关键试剂应进行适用性验证。

响的关键试剂应进行适用性验证。

3.6菌株3.6.1应使用微生物菌种保藏专门机构或同行认可机构保存的、可溯源的标准或参考菌株。

3.6.2应对从食品、环境或人体分离、纯化、鉴定的，未在微生物菌种保藏专门机构登记注册的原始分离菌株（野生菌株）进行系统、完整的菌株信息记录完整的菌株信息记录，包括分离时间、来源，表型及分子鉴定的主要特征等。

3.6.3实验室应保存能满足实验需要的标准或参考菌株实验室应保存能满足实验需要的标准或参考菌株，在购入和传代保藏过程中，应进行验证试验，并进行文件化管理。

应进行验证试验，并进行文件化管理。

微生物检验人员的工作规范微生物检验人员的工作规范无菌操作无菌操作生物安全生物安全无菌操作无菌操作（彻底灭菌、防止污染）（彻底灭菌、防止污染）无菌及无菌操作的概念：

无菌是指在环境中一切有生命活动的微生物的营养细胞及其芽孢或孢子都不存在的状态。

无菌操作是指在无菌环境下进行的细胞传代培养、植物组织培养、细菌接种等操作,目的是防止微生物进入人体组织或其他无菌范围。

泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。

无菌环境（无菌室、超净工作台）无菌材料（培养基和试剂、器皿、用具的灭菌）防止污染，保持无菌状态无菌室、无菌室应完全封无菌室应完全封闭，进出无菌室至少要闭，进出无菌室至少要经两道门，中间隔有经两道门，中间隔有缓缓冲间冲间，无菌室与外间设，无菌室与外间设置一个置一个可开闭的窗口可开闭的窗口，用于传递器具。

用于传递器具。

、无菌室必须保持整洁。

无菌室必须保持整洁。

工作人员进入无菌室应换工作人员进入无菌室应换专用鞋、专用衣专用鞋、专用衣。

无菌室使用前须用紫外线消毒无菌室使用前须用紫外线消毒30min30min，操作结，操作结束后清洁台面，再用紫外线消毒束后清洁台面，再用紫外线消毒30min30min。

定期用定期用乳酸或甲醛熏蒸乳酸或甲醛熏蒸，彻底消毒。

，彻底消毒。

、无菌室仅用于培养基分装等无菌操作，无菌室仅用于培养基分装等无菌操作，不能进不能进行有菌标本的操作行有菌标本的操作。

操作人员操作时应严格关门，并戴好专用的操作人员操作时应严格关门，并戴好专用的手套、手套、口罩、帽子、防护服口罩、帽子、防护服等个人防护装备等个人防护装备、无菌室内应有无菌室内应有空气过滤装置空气过滤装置，并安装，并安装空调空调。

微生物检验人员的工作规范微生物检验人员的工作规范无菌操作要求无菌操作要求食品微生物实验室工作人员，必