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,18,测定唾液中血型物质可辅助血型鉴定中和ABO血型中天然抗体,有助于鉴定抗体性质制备混合血浆,可忽视血型问题利用红细胞凝集抑制实验,可检查各种组织、陈旧血液、精斑、毛发、皮肤等血型物质,做血型鉴定。

利用动物脏器提取物的血型物质免疫动物,获得高效价抗A抗B血清。

19,在胚胎早期A和B抗原就开始产生,到出生时,他们比成人的抗原数目要少,大约是成人2550%与抗A和抗B试剂血清反应比成人弱,18个月后才能充分表现出抗原性。

56岁时具有较高效价老年人抗A抗B水平一般低于年轻人,20,存在于缺少相应抗原的人血清中新生儿ABO抗体很少;

无抗体成人罕见自然产生抗体:

IgM(主要是A和B型)、IgG类(主要是O型)。

IgM可被唾液中血型物质中和O型-抗A,B:

识别A和B抗原表位共同的结构部分具有交叉反应性,21,输血时,血型的鉴定和配型诊断和预防由于母婴血型不合而引起的新生儿溶血病组织和器官移植时,需血型鉴定和配型。

与某些疾病的相关性应用于亲子关系的鉴别,22,ABO亚型也称变异型,红细胞同属于一种血型抗原,但在结构上有一定差异,性能也不完全相同,由于抗原弱,在用已知抗体检测抗原和用已知抗原检测被检血清时不符合ABO血型特点。

例A亚型:

A抗原减少,与抗A凝集强度减弱,H抗原活性明显增强。

23,1911年,发现ABO血型系有许多复合系统。

随之发现不论在血清学上还是从遗传上都可将A型分为A1和A2二种亚型,A型人中,A1型约占80%,A2型约占20%(欧洲人)。

ABO亚型很多,A亚型主要是A1、A2、A3、Ax、Am等;

B亚型一般比A亚型更少。

24,A亚型主要有A1,A2两种亚型;

A1比A2多4倍,A1型的红细胞有A及A1两种抗原,A2型的红细胞只有A抗原A1与A2型两种抗原有量和质的区别。

量的区别:

A1型红细胞上的A抗原位点比A2型红细胞多2/3至3/4,而H活性则较A2型弱。

A2型红细胞能从B型血清中吸收抗A,遗留抗A1质的区别:

A2型能对A1抗原刺激产生抗A1,证明A2型红细胞上缺乏A1型红细胞的抗原决定族;

A1型与A2型抗原分别受ABO基因座上的A1与A2基因控制A1与A2基因是ABO基因座上的稀有基因,按孟德尔定律遗传,25,

(1)A1和A2:

抗A1凝集A1红细胞,不凝集A2红细胞A1红细胞与抗A、抗A1发生凝集,A2红细胞只与抗A凝集,不与抗A1凝集。

A1:

具有A型共同抗原决定簇和A1特有抗原决定簇A2:

A1抗原决定簇丢失,仅有A共同抗原决定簇,天然抗体1、抗A与抗B抗体其产生可能是某些细菌表面具有与人类红细胞上ABH抗原性相似的糖基团,在生命早期,机体针对这些抗原刺激而产生的抗体,能与A、B、H抗原发生交叉反应天然抗A与抗B抗体主要是IgMO型与B型血清中的抗A有两类,即抗A与抗A1;

抗A可以与A1及A2型红细胞发生反应,而抗A1只与A1型红细胞反应,27,2、抗A,B抗体O型血清中除了含有抗A和抗B外,还含有一种既能与A细胞反应,也能与B细胞反应的抗体,称为抗A,B,又称为交叉反应抗体O型血清中的抗A,B比单独的抗A或抗B活性强,常用来检查A与B的弱亚型抗A,B大多属于IgG,28,3、抗H抗体分为两类:

一类产生于Oh型,另一类以冷凝集素的方式存在于A1型或A1B型的血清中Oh型红细胞上缺乏H抗原由于O、A、B或AB型红细胞均含有H成分,故血清中很少有抗H的存在,29,二、免疫抗体抗A及抗B可以是免疫抗体,多为IgG其产生可以是:

1.输ABO血型不相容的血液2.母婴ABO血型不相容,尤其是O型母亲怀A或B型胎儿3.注射纯化了的A或B物质,30,三、自身抗体很少见,可以引起自身免疫溶血性贫血、致命溶血及肾衰四、器官移植产生的抗体是移植供者的器官的同时也移植了其淋巴网状组织,将供者的抗体带入了受者体内,31,孟买血型,1952年在印度孟买发现一种特殊的血型这种红细胞既无A抗原和B抗原,也无H抗原。

他们的基因型为hh,不能产生H物质,即使有IA和(或)IB基因,也不能形成A抗原或(和)B抗原但IAIB基因可向后代遗传,这种特殊的型,称为孟买型,33,红细胞上H抗原完全缺失,非分泌型孟买型。

用Oh表示典型的孟买型红细胞无A,B,H抗原,血清中含有抗A,抗B及抗H机制:

FUT1基因错义突变及FUT2基因缺失,34,红细胞部分H抗原缺乏副孟买型红细胞H抗原部分缺失是FUT1基因座突变基因纯合子的产物,这种基因只产生活性弱的H转移酶,全部转为A或B抗原红细胞无或有少量H抗原分泌型机制复杂:

可能涉及第三基因座,35,1937年-1939年Landsteiner和Wiener用恒河猴(rhesus)红细胞免疫家兔和豚鼠得到的抗血清将人红细胞分为Rh阴性和Rh阳性。

1939年Levine和Stetsen在一患死胎的孕妇血清中检测到一种抗体,此为人类发现的第一例Rh抗体。

37,1940年Landsteiner和Wiener发表了动物抗血清对人类红细胞的分型结果,被认为是第一篇有关Rh血型系统的报道。

1941年Levine等在患新生儿溶血病患儿血清中发现抗D、抗C、抗CD三种特异性抗体,并指出:

胎儿RBC增多症(HDN)与母婴间血型不合有关。

38,1941-1945年确定了人体红细胞上含有Rh系统的六种抗原,即D、d;

E、e;

C、c。

D和d;

E和e;

C和c表现为对偶关系,但d抗原只是推测。

1942年Fisk等发现某些用人Rh抗体鉴定的阴性红细胞与动物Rh抗体呈阳性反应。

39,40,至今已发现Rh血型系统的抗原48个,但涉及临床问题的主要有5个抗原,即D、C、c、E、e及其相应的特异性抗体。

只存在于红细胞膜中,不存在于其他组织细胞膜上或体液中。

41,Rh抗原的发育Rh抗原是胎儿早期就充分发育并维持整个一生,脐带血或新生儿的红细胞Rh血型与成人一样强。

Rh血型抗原的免疫原性Rh血型抗原的抗原性强度可能仅次于A和B抗原Rh血型抗原中的免疫原性强弱顺序为DEcCe。

Rh抗原都显示剂量效应。

42,D-正常D抗原。

弱D(weakD)-抗原表位质量正常数量少。

不完全D(partialD)-抗原数目基本正常,缺少部分D抗原表位。

不完全弱D(partialweakD)-抗原数量少,缺少抗原决定簇。

增强性D-抗原数量增加,抗原性增强。

43,定义:

与D抗原基本无区别,只是比CcDee的红细胞膜上的D抗原数更少,大约在4901,870个位点之间分类:

低效级、高效级和Del(占黄种人20%左右)特性:

与各抗-D试剂的反应基本一致,该个体的血清中不产生抗-D。

44,定义:

D抗原由多个独立的抗原决定簇组成,缺乏部分D决定簇的红细胞。

分类:

超过30种D表位(4thISBT,2001)单克隆抗-D可区分8种。

特性:

与各抗-D试剂的反应不一样,经免疫后可产生抗-D。

45,46,47,根据红细胞上D抗原的有无可将人类红细胞分为Rh阳性和Rh阴性,即红细胞上缺乏D抗原的人是Rh阴性;

红细胞有D抗原的人是Rh阳性。

Rh阴性分布频率:

白种人1520%中国汉族0.34%,48,RhD基因缺失:

无D抗原RhD基因改变:

D蛋白失活RhD-CE-D融合基因:

杂交重组无D抗原产生,49,50,非洲人:

RhD基因RhD基因缺失RhD-CE-D融合基因白种人:

RhD基因缺失黄种人:

RhD基因缺失;

RhD-CE-D融合基因;

RhD基因完整,D抗原不表达,机理不明。

51,Rh抗体的免疫球蛋白性质大部分Rh抗体是IgG,与盐水悬浮的Rh阳性红细胞(-D-红细胞例外)不起反应,少数抗D血清含有IgM抗体,但一般总伴有IgG抗体。

能凝集盐水悬浮的Rh阳性红细胞。

IgA性质的抗D十分罕见,并且只是混含在IgG抗体的血清中。

52,非免疫的Rh抗体极为罕见,Rh抗体主要通过输血或妊娠免疫而产生。

一般在初次免疫后26个月内出现,经再次免疫后,3周内抗体浓度可达到高峰。

大约1/3的Rh阴性的人,经Rh阳性抗原免疫后,不产生抗D。

Rh阴性血输给阳性者不产生抗体。

53,受血者血浆中如有Rh抗体,输入含有相应抗原的血液后,将引起严重的溶血性输血反应严重者可导致孕妇血浆中如有Rh抗体,妊娠Rh血型不配合胎儿时,其中IgG类的Rh抗体可以通过胎盘进入胎儿体内,破坏胎儿有相应抗原的红细胞,引起新生儿溶血病。

Rh抗体具有十分重要的临床意义,54,常规情况下,红细胞只做Rh(D)定型,对供血者需鉴定D变异型,只有特殊情况下才检查其它抗原。

例如:

家系调查、父权鉴定、产前检查、确定纯合子或杂合子以及配血试验中发现有不规则抗体存在等情况下才需做Rh血型全部表现型的定型。

55,对受血者作抗体筛选的目的是检出有临床意义的抗体,并可在配血前有足够的时间来选择缺乏相应抗原的相配合的血液,避免盲目配血。

方法是用受检者血清与试剂红细胞起反应,以发现在37有临床意义的抗体。

抗体筛选试验用的筛选细胞通常以23个单人份的O型红细胞组成一套筛选细胞试剂。

抗体筛选用试剂红细胞必须含有18种抗原,所表达的抗原以纯合子基因所表达的抗原为佳,随机获得的O型红细胞易造成抗体漏检。

做好抗体筛选,56,57,抗体筛选试验的方法很多,国外以间接抗球蛋白法为金标准,国内中小医院多采用凝聚胺法,大医院多采用微柱凝胶技术。

微柱凝胶法是简单、有效检测不规则抗体的方法,但无法排除无临床意义抗体的干扰。

抗体筛选用的红细胞一定要保存在4环境中,以防红细胞上抗原丢失。

抗体筛选试验并非能检出所有有临床意义的抗体。

原因有二:

1、低频抗原的抗体可能被忽略;

2、以往所产生的抗体已降至难以检出的水平。

以往的抗体鉴定记录有重

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