10骨髓活体组织检查PPT文档格式.ppt
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采用髂后上棘检查时,病人取侧卧位。
髂后上棘检查时,病人取侧卧位。
3.麻醉麻醉常规消毒局部皮肤,操作者戴无菌手套,常规消毒局部皮肤,操作者戴无菌手套,铺无菌洞巾,然后行皮肤、皮下和骨膜麻醉铺无菌洞巾,然后行皮肤、皮下和骨膜麻醉4.穿刺穿刺将骨髓活组织检查穿刺针的针管套在手柄上。
将骨髓活组织检查穿刺针的针管套在手柄上。
操作者左手拇指和示指将穿刺部位皮肤压紧操作者左手拇指和示指将穿刺部位皮肤压紧固定,右手持穿刺针手柄以顺时针方向进针固定,右手持穿刺针手柄以顺时针方向进针至骨质一定的深度后,拔出针芯,在针座后至骨质一定的深度后,拔出针芯,在针座后端连接上接柱(接柱可为端连接上接柱(接柱可为1.5cm或或2.0cm),),再插入针芯,继续按顺时针方向进针,其深再插入针芯,继续按顺时针方向进针,其深度达度达1.0cm左右,再转动针管左右,再转动针管360,针管前,针管前端的沟槽即可将骨髓组织离断。
端的沟槽即可将骨髓组织离断。
5取材取材按顺时针方向退出穿刺针,取出骨髓组织,按顺时针方向退出穿刺针,取出骨髓组织,立即置于立即置于95乙醇或乙醇或10甲醛中固定,并甲醛中固定,并及时送检。
及时送检。
6加压固定加压固定以以2碘酊棉球涂布轻压穿刺部位后,再用碘酊棉球涂布轻压穿刺部位后,再用干棉球压迫创口,敷以消毒纱布并固定干棉球压迫创口,敷以消毒纱布并固定注意事项注意事项1开始进针不要太深,否则不易取得骨髓开始进针不要太深,否则不易取得骨髓组织。
组织。
2由于骨髓活组织检查穿刺针的内径较大,由于骨髓活组织检查穿刺针的内径较大,抽取骨髓液的量不易控制。
因此,一般不用抽取骨髓液的量不易控制。
因此,一般不用于吸取骨髓液做涂片检查。
于吸取骨髓液做涂片检查。
3穿刺前应检查出血时间和凝血时间。
有穿刺前应检查出血时间和凝血时间。
有出血倾向者穿刺时应特别注意,血友病病人出血倾向者穿刺时应特别注意,血友病病人禁止骨髓活组织检查。
禁止骨髓活组织检查。
适应症适应症1.骨髓穿刺多次失败(怀疑骨髓纤维化、骨骨髓穿刺多次失败(怀疑骨髓纤维化、骨髓转移癌、多发性骨髓瘤、多毛细胞白血病髓转移癌、多发性骨髓瘤、多毛细胞白血病等)。
等)。
2.血象显示全血细胞减少,反复骨髓穿刺均血象显示全血细胞减少,反复骨髓穿刺均为为“血稀血稀”或骨髓增生低下,病态造血、怀疑或骨髓增生低下,病态造血、怀疑再生障碍性贫血、骨髓异常增生综合征及增再生障碍性贫血、骨髓异常增生综合征及增生性白血病患者。
生性白血病患者。
3.某些贫血、原因不明的发热、脾或淋巴结某些贫血、原因不明的发热、脾或淋巴结肿大,骨髓涂片不能确诊。
肿大,骨髓涂片不能确诊。
4.白血病疗效观察:
有时骨髓涂片已达到完白血病疗效观察:
有时骨髓涂片已达到完全缓解,但骨髓活检切片内仍可检出白血病全缓解,但骨髓活检切片内仍可检出白血病性原始细胞簇。
性原始细胞簇。
骨髓穿刺与骨髓活检的比较骨髓穿刺与骨髓活检的比较骨髓穿刺骨髓穿刺骨髓活检骨髓活检取材方式取材方式骨髓液涂片染色骨髓液涂片染色一条骨髓组织,固定包埋一条骨髓组织,固定包埋染色染色优点优点操作简单操作简单细胞形态容易辨认,可观细胞形态容易辨认,可观察细微结构察细微结构易于识别巨形变等易于识别巨形变等染色效果好,结果可量化染色效果好,结果可量化保持造血组织天然结构,保持造血组织天然结构,便于判断红骨髓与脂肪比便于判断红骨髓与脂肪比全面了解骨髓增生程度全面了解骨髓增生程度避免血窦稀释避免血窦稀释避免避免“干抽干抽”缺点缺点天然结构破坏天然结构破坏可造成血窦稀释可造成血窦稀释“干抽干抽”无法分析无法分析细胞聚集,不易区分难以细胞聚集,不易区分难以观察细胞细微结构观察细胞细微结构细胞化学染色无法量化细胞化学染色无法量化1.全面了解骨髓增生程度,造血组织、脂肪全面了解骨髓增生程度,造血组织、脂肪细胞和纤维组织所占的容积比例:
了解粒细胞和纤维组织所占的容积比例:
了解粒/红比值及骨髓内铁存储情况,对于某些疾红比值及骨髓内铁存储情况,对于某些疾病(如再生障碍性贫血、缺铁性贫血及骨病(如再生障碍性贫血、缺铁性贫血及骨髓增生异常综合征)及化疗后骨髓抑制程髓增生异常综合征)及化疗后骨髓抑制程度有明确的诊断价值。
度有明确的诊断价值。
临床意义临床意义2.可以发现骨髓穿刺涂片检查不易发现的病可以发现骨髓穿刺涂片检查不易发现的病理变化,当骨髓理变化,当骨髓增生极增生极度活跃或极度减低,度活跃或极度减低,纤维组织增多及骨质增生而发生干抽或骨髓纤维组织增多及骨质增生而发生干抽或骨髓稀释是活检格外重要。
如低增生白血病、多稀释是活检格外重要。
如低增生白血病、多毛细胞白血病、骨髓纤维化、骨髓坏死、恶毛细胞白血病、骨髓纤维化、骨髓坏死、恶性肿瘤累及骨髓等。
对相关疾病的诊断、骨性肿瘤累及骨髓等。
对相关疾病的诊断、骨髓造血微环境及骨髓抑制的研究有重要意义。
髓造血微环境及骨髓抑制的研究有重要意义。
3.活检比涂片能较早地预测疾病的预后。
因活检比涂片能较早地预测疾病的预后。
因活检比涂片能更早、更全面地发现早期的病活检比涂片能更早、更全面地发现早期的病理改变,对各种急慢性白血病和骨髓纤维化理改变,对各种急慢性白血病和骨髓纤维化异常增生综合征有确诊和判定预后的意义,异常增生综合征有确诊和判定预后的意义,对骨髓转移癌、恶性组织细胞病、戈谢病和对骨髓转移癌、恶性组织细胞病、戈谢病和尼曼匹克病等诊断阳性率比骨髓涂片高。
尼曼匹克病等诊断阳性率比骨髓涂片高。
4.活检可协助诊断慢性骨髓增生性疾病,如活检可协助诊断慢性骨髓增生性疾病,如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化等。
骨髓纤维化等。
骨髓活检在血液肿瘤细胞中起辅助作用,结骨髓活检在血液肿瘤细胞中起辅助作用,结合骨髓涂片结果才有诊断价值合骨髓涂片结果才有诊断价值。
尤其是骨髓尤其是骨髓“干抽干抽”患者,干抽的材料处理特患者,干抽的材料处理特别重要,最好不经过脱钙,塑料包埋亦需低别重要,最好不经过脱钙,塑料包埋亦需低温。
可以做多种免疫标记,还可以进行原位温。
可以做多种免疫标记,还可以进行原位杂交,聚合酶链反应。
经抽提后还可以进行杂交,聚合酶链反应。
经抽提后还可以进行比较基因组杂交、基因重组、芯片技术等分比较基因组杂交、基因重组、芯片技术等分子水平诊断。
子水平诊断。
脱钙去除骨质中的无机盐,不容易做免疫组脱钙去除骨质中的无机盐,不容易做免疫组化。
化。
造血细胞培养检验造血细胞培养检验体外造血祖细胞培养或造血细胞克隆形体外造血祖细胞培养或造血细胞克隆形成实验(成实验(colony-stimulatingassays,CSA)主要就是体外模拟体内的生理环境,)主要就是体外模拟体内的生理环境,培养从机体取出的造血祖细胞培养从机体取出的造血祖细胞,使之生,使之生存、存、增殖和分化。
增殖和分化。
作用与意义:
1.研究造血过程造血细胞分化、成熟及调研究造血过程造血细胞分化、成熟及调节机制;
节机制;
2.各种细胞因子对造血调节的作用机制各种细胞因子对造血调节的作用机制3.造血细胞与非造血细胞之间相互作用及造血细胞与非造血细胞之间相互作用及调控的分子机制调控的分子机制4.药物对骨髓造血的影响药物对骨髓造血的影响5.造血系统疾病的发生机制、诊断和治疗造血系统疾病的发生机制、诊断和治疗效果效果红系祖细胞培养红系祖细胞培养实验原理:
实验原理:
在培养体系中选择甲基纤维素作为支持在培养体系中选择甲基纤维素作为支持物,加入适量物,加入适量EPO等细胞因子,使骨髓中等细胞因子,使骨髓中红细胞系造血细胞形成红细胞系造血细胞形成BFU-E和和CFU-E集集落落.每个集落可视为每个集落可视为由由一个红系祖细胞增殖一个红系祖细胞增殖分化而来。
集落数的多少可反映培养物中红分化而来。
集落数的多少可反映培养物中红系祖细胞的量。
系祖细胞的量。
参考范围参考范围CFU-E集落为集落为8-50个细胞组成的细胞团。
个细胞组成的细胞团。
BFU-E集落为集落为50个以上细胞组成的细胞团。
个以上细胞组成的细胞团。
骨髓:
BFU-E:
(:
(25.37.6)个)个/2105有核细胞有核细胞(MNC)CFU-E:
(141.668.4)个)个/2105MNC外周血:
外周血:
(264)个)个/2105MNC脐血:
脐血:
(767)个)个/2105MNC临床意义临床意义1.BFU-E、CFU-E减少:
见于再生障碍性贫减少:
见于再生障碍性贫血、单纯红细胞再障、急性白血病、慢粒等血、单纯红细胞再障、急性白血病、慢粒等2.BFU-E、CFU-E增加:
见于真性红细胞增增加:
见于真性红细胞增多症、原发性骨髓纤维化及部分慢粒患者多症、原发性骨髓纤维化及部分慢粒患者粒粒-单系造血细胞培养单系造血细胞培养原理:
受检者血液、骨髓或脐血经过分原理:
受检者血液、骨髓或脐血经过分离获得的单个核细胞在离获得的单个核细胞在HGFs的作用下,在的作用下,在体外半固体琼脂上形成不同阶段的粒细胞和体外半固体琼脂上形成不同阶段的粒细胞和单核细胞集落。
单核细胞集落。
刺激刺激CFU-GM生长的造血因子主要有:
生长的造血因子主要有:
GM-CSF、IL-3、G-CSF、M-CSF及及SCF培养培养7d后,培养皿倒置显微镜观察。
后,培养皿倒置显微镜观察。
40个细胞团成为集落,个细胞团成为集落,40个细胞的团成个细胞的团成为簇,为簇,3-15个细胞为小簇,个细胞为小簇,16-40个细胞为个细胞为大簇。
大簇。
参考范围参考范围骨髓:
集落数为(骨髓:
集落数为(150.0658.4)个)个/2105MNC细胞簇与集落之比为细胞簇与集落之比为5-20:
1外周血:
集落数为外周血:
集落数为BM的的1/10脐血:
集落数为(脐血:
集落数为(486)个)个/2105MNC临床意义临床意义1.CFU-GM减少:
再障、减少:
再障、PNH、急性白血病、急性白血病、慢粒急变期、红白血病等慢粒急变期、红白血病等2.CFU-GM增加:
慢性粒细胞白血病、真性