培养基的质量控制Word文档下载推荐.docx

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1生产企业提供的材料

培养基生产厂家随产品应提供下列文件：

培养基、独立成分、添加成分名称；

批号；

使用前的pH；

储藏信息和有效期;

性能评价和所用测试菌株；

技术数据清单；

质控证书/必要的安全、危害数据。

4.2验收

实验室收到培养基后，应填写“培养基验收检查记录单”，检查包装及完整性,标识是否清晰等，验收合格后按照“培养基编码系统使用规程”对培养基进行编号。

4.3贮存及使用前质量确认

3.1商品化培养基应严格按供应商提供的贮存条件、有效期进行贮存.

4.3.2验收合格的培养基应建立“商品化干粉培养基目录清单"

使用前对容器密闭性进行复查。

3.3开封的脱水培养基,每次使用前应对其质量进行检查，通过粉末的流动性、均匀性、结块情况和色泽变化等判断培养基的质量变化.若发现培养基受潮或物理性状发生明显改变则不应再使用。

4.3.4制备好的成品培养基应建立“成品培养基目录清单”，每次使用前应检查：

颜色是否发生变化？

/是否蒸发/脱水？

/是否有微生物生长？

等。

如果发生上述异常情况，则不应再使用。

5．制备好的成品培养基的质量控制

新购的不同批次的商品化培养基在使用前应进行培养基性能测试，符合要求后使用。

成品培养培养基的质量控制应包括物理指标和微生物指标的测试，根据测试结果及时填写“实验室制备培养基测试结果记录单”。

5.1物理指标控制

5。

1.1测试20℃~25℃的pH值

5.1。

2琼脂层厚度；

色泽；

透明度和（或）是否存在肉眼可见杂质;

凝胶稳定性、粘稠度和湿度。

5.2微生物学指标控制

可根据要求选用定量方法、半定量方法或定性方法（详见表1—表）对培养基性能进行测试，具体操作方法详见作业指导书“培养基性能测试指南"

。

5.2.1微生物污染的控制

从每批制备好的培养基中选取至少一个（或1％）平板或试管，置于37℃或按特定标准中规定的温度培养18h。

5.2。

2生长特性

2。

1生长率

第2页共6页

将适量测试菌株的工作培养物接种至固体、半固体和液体培养基中，每种培养基上菌株的生长率应达规定的最低限值.

5.2.2.1.1定量方法

生长率PR的计算：

PR=NS/NO

NS：

从一个或多个待测培养基平板上得到的菌落总数.

N0:

从一个或多个规定的参考培养基平板上获得的菌落总数（该菌落总数应≥100cfu）。

要求：

非选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0。

7，该类培养基应易于目标菌生长;

选择性培养基上目标菌的生长率最低应为0。

1；

每平板（或每试管）的接种水平为10CFU～100CFU.

5.2.2。

1.2半定量方法

半定量方法采用生态测量技术在平板上划线，平板板连续划线区域得分的总和即为生长指数G,G值不应超过标准规定的允许范围。

3定性方法

定性方法采用划线法观察.

2选择性

将浓度为104CFU/mL～106CFU/mL的非目标菌工作菌株悬浮液接种至选择培养基和参考培养基中，培养基的选择性应达到规定值。

2.2。

1定量方法

选择因子SF:

SF=DO—DS

DO：

能在参考培养基上生长至少10个菌落的最高稀释度

DS：

能在测试培养基上显示生长的最高稀释度

要求:

非目标菌在选择性培养基上的SF至少为2；

半定量和定量法中,非目标菌应部分或全部被抑制.

3生理生化特性（选择性和特异性）

规定培养基的基本特性，使用一套适当的测试菌株对培养基上的目标菌的生理生化特性（菌落形态、大小等）和非目标菌的被抑制程度进行测试。

3性能评价和结果解释

按照规定得到的所有测试菌株的性能均符合规定,则该批培养基品质优良；

若只有物理指标和微生物指标符合规定，则该批培养基可被接收。

表1计数用选择性培养基

培养基

用途

培养条件

测试菌株

参考培

养基

控制方法

判定标准

特征反应

Baird-

Parker

［S]

生长率

37℃24—48h

金黄色葡萄球菌ATCC6538/25923

TSA

定量

PR≥0。

5

黑色/灰色菌落,周围为一混浊带，其外有透明带

选择性

37℃48h

大肠杆菌ATCC25922/8739

——

定性

全部抑制

-—

特异性

表皮葡萄球菌ATCC12228

黑色/灰色菌落,周围为一混浊带，其外无透明带

MYP

30℃24-48h

腊样芽胞杆菌ATCC11778

PR≥0.7

具沉淀带的粉色菌落

大肠杆菌ATCC25922

--

—-

枯草芽胞杆菌ATCC6633

不具沉淀带的粉色菌落

HSCDC/GC-76-2009

第3页共6页

表1计数用选择性培养基（续）

VRBG（结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂）

[S］

37℃24h

PR≥0.5

带有或不带沉淀带的粉红色或红色菌落

鼠伤寒沙门菌ATCC14028

37℃20h

粪链球菌ATCC29212/19433

VRBL（紫红胆汁乳糖）

[S]

30℃20h

带有或不带沉淀带的淡紫色菌落

铜绿假单胞菌ATCC27853

无色至浅棕色菌落

CT—SMAC（改良山梨醇麦康凯琼脂）

大肠杆菌O157:

H7

ATCC43894/43895

透明菌落,表面淡黄棕色,菌落直径约1mm

大肠杆菌ATCC11775/25922

粉色菌落

BGBLB（煌绿乳糖胆盐肉汤）

［L]

30℃24—48h

半定量

浊度2+，导管1/3产气

产气并浑浊

弗氏柠檬酸杆菌

ATCC25922/8739

不生长

EC

[L]

44℃24～48h

浊度2+，导气管1/3产气

铜绿假单胞菌ATCC27853b

EC-MUG/

LS-MUG

[L］

产气并浑浊，产生荧光

乳糖胆盐发酵培养

导气管1/3产气

产气并变黄色

不产气、仍为紫色

LST（月桂酸肉汤）

福氏志贺氏菌CMCC51572

表2计数用非选择性培养基

PCA（平板计数琼脂）

30℃72h

金黄色葡萄球菌ATCC6538

枯草芽孢杆菌ATCC6633

编号：

第4页共6页

表3选择性增菌培养基

EE

VRBG上＞10CFU

粉红至红色菌落，有或没有沉淀带

粪肠球菌ATCC29212

RVS

41.5℃24h

XLD或其他选择性培养基上＞10CFU

肠炎沙门氏菌ATCC13076

TSA上全抑制

粪链球菌

ATCC29212

TSA上＜10CFU

SC（亚硒酸盐胱氨酸）

不同培养基上菌落特征不同（见标准）

+大肠杆菌ATCC25922

+铜绿假单胞菌ATCC27853b

TTB（四硫磺酸钠煌绿增菌液）

伤寒沙门菌CMCC50071

碱性蛋白胨水

霍乱弧菌CMCC16109

TCBS或其他选择性培养基上＞10CFU

副溶血性弧菌CMCC20001

7.5％氯化钠肉汤[L]

B-P平板或其他培养基上＞10CFU