药敏试验方法及细菌耐药性药剂科_精品文档PPT文档格式.ppt

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接种平板：

MH平板，菌悬液在平板，菌悬液在15分钟内划平板，用分钟内划平板，用无菌棉签，无菌棉签，3个个60度，度，1圈，圈，15分钟内贴纸片。

分钟内贴纸片。

纸片扩散法纸片扩散法贴纸片：

手工，纸片分配器贴纸片：

手工，纸片分配器孵育：

孵育：

（352），空气或，空气或CO2纸片扩散法纸片扩散法结果结果纸片扩散法的特点纸片扩散法的特点简便，便宜，不同层简便，便宜，不同层次实验室均可正规操次实验室均可正规操作，是目前推荐的临作，是目前推荐的临床试验室使用方法。

床试验室使用方法。

检测的是抑菌环直检测的是抑菌环直径（径（mm）2.肉汤稀释法肉汤稀释法药液的准备：

256g/ml12864320.250.1250.0613个梯度菌液的准备：

0.5麦氏浊度=108CFU/ml稀释100倍成106，取10l=104CFU接种:

特点：

工作量大，适用于菌量少，药物种类少的情况结果结果MIC：

最小抑菌浓度，抑制细菌生长的最小浓度单位：

单位：

g/ml0.060.1250.250.5124816320.060.1250.250.5124816326412825664128256宏量肉汤稀释法（每宏量肉汤稀释法（每管含药肉汤含量为管含药肉汤含量为25ml）微量肉汤稀释法（每微量肉汤稀释法（每孔含药肉汤含量为孔含药肉汤含量为0.1ml）3.琼脂稀释法药物在琼脂中，做成平板。

菌量：

每点接种10l=104CFU特点：

菌株多时做MIC较方便结果：

平板上是否出现肉眼可见的菌落8g/ml8g/ml4g/ml2g/ml4g/ml2g/mlMIC法的总体特点较繁琐，但更准确，主要用于科研，测量的是MIC（g/ml）旧:

纸片扩散法新:

微量肉汤稀释法（商品化）4.E-TEST以纸片扩散法的操作方法获得MIC值的一种药敏试验。

操作上有纸片扩散法的优点，结果准确性可与稀释法媲美。

缺点：

昂贵结果五、药敏结果的判读五、药敏结果的判读MICMIC值或抑菌环直径值或抑菌环直径药物的临界浓度药物的临界浓度（CLSI、EUCAST、FDA）临界浓度临界浓度:

又叫又叫折点（折点（breakpointbreakpoint）。

即根据抗菌药物。

即根据抗菌药物抑制细菌生长所需要的抑制细菌生长所需要的MICMIC结合常用剂量时在人体内结合常用剂量时在人体内所能达到的所能达到的血药浓度血药浓度划分细菌对各种抗菌药物敏感和划分细菌对各种抗菌药物敏感和耐药的界限。

耐药的界限。

比较比较药敏判定折点（BREAKPOINT）纸片法获得的纸片法获得的抑菌圈直径抑菌圈直径23MM稀释法或稀释法或E-test法法获得的获得的MIC值为值为4mg/LCLSI上查得头孢哌酮对大上查得头孢哌酮对大肠杆菌的折点为：

肠杆菌的折点为：

R=21mmSCLSI上查得头孢哌酮对上查得头孢哌酮对大肠杆菌的折点为：

大肠杆菌的折点为：

R=64mg/L,S=16mg/LSeg.eg.（头孢哌酮（头孢哌酮vsvs大肠杆菌）大肠杆菌）结果解释l敏感（敏感（susceptiblesusceptible）：

）：

表示测试菌能被测定药物常规剂常规剂量量给药后在感染部位感染部位达到的药物浓度药物浓度所抑制或杀灭，感染被治愈。

l中介中介（intermediate）:

（intermediate）:

指药物在体内生理浓集的部位体内生理浓集的部位或允许加大药物剂量允许加大药物剂量治疗时有效；

该范围还作为一缓冲区缓冲区，避免由于微小技术误差导致的结果错误解释。

l耐药（耐药（resistantresistant）：

表示测试菌不能被在体内感染部位所能达到的抗菌药物浓度所抑制，治疗无效治疗无效。

盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据盛京医院盛京医院2015年统计数据年统计数据