甘松治疗癫痫动物实验和脑电图监测PPT文档格式.ppt

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甘松又称甘松香，属植物,主要分布在喜马拉雅山区及我国西部山地。

甘松均以根及根茎入药,药用历史非常悠久,是古印度阿育吠陀（Ayurveda）和尤那尼（Unani）医学体系中驱风理气、镇静安神的常用芳香药物。

甘松含有甘松香醇,甘松酮,马兜铃酮,缬草酮等很多成分。

国内专家万新等总结甘松的药理作用，认为其有镇静、抗癫痫、促神经生长、改善认知能力、抗抑郁、保护心肌细胞、降血压、抑菌与抗疟等多种作用缬草制剂已是美国和欧洲市场前10位的畅销天然药物，但国内至今尚无缬草制剂类抗癫痫药。

二、研究目的通过大鼠腹腔注射青霉素制作建立急性癫痫模型和腹腔注射戊四氮制作建立慢性癫痫模型来观察甘松及甘松合并丙戊酸钠治疗癫痫的疗效以丙戊酸钠缓释片为阳性对照组,观察甘松合并丙戊酸钠缓释片治疗临床癫痫患者的疗效和安全性三、动物实验材料与方法1、材料实验动物：

Wistar大鼠（南通大学动物实验室提供）100只,雌雄各半,体重200-250g,随机分组。

试剂：

甘松、丙戊酸钠、青霉素、戊四氮实验仪器:

脑立体定位仪（江湾二型，上海二军大）、RM6240BD多道生理信号采集处理系统2、实验设计青霉素诱导大鼠急性癫痫模型：

正常对照组（组）模型组（组）甘松治疗组（组）丙戊酸钠治疗组（组）甘松合并丙戊酸钠治疗组（组）戊四氮点燃慢性癫痫模型：

正常对照组（组）模型组（组）甘松治疗组（组）丙戊酸钠治疗组（组）甘松合并丙戊酸钠治疗组（组）3、大鼠大脑皮层电极的埋置实验前将各组动物腹腔注射水合氯醛400mg/kg进行麻醉,切开头皮,暴露颅骨,在立体定位仪下于冠状缝、矢状缝交界处旁开3mm处用牙科电钻左右各钻一小孔，植入不锈钢电极,牙托粉固定电极后缝合头皮。

在大鼠鼻根部插入一电极作参考。

手术后抗感染,1周后开始实验。

采用RM6240BD多道生理信号采集处理系统进行皮层脑电记录,连续描记脑电图120min。

4、给药方法青霉素诱导大鼠急性癫痫模型甘松煎剂中甘松含量为10g/ml。

甘松治疗组灌服甘松62.5g/kg.d，丙戊酸钠治疗组灌服丙戊酸钠0.64g/kg.d，甘松合并丙戊酸钠治疗组灌胃剂量为甘松62.5g/kg.d加丙戊酸钠0.32g/kg.d，正常对照组和模型组灌服等体积的生理盐水。

每组大鼠每天灌胃一次。

连续灌胃第14天各组动物除正常对照组外均在给药或生理盐水1h后,腹腔注射青霉素500万U/kg戊四氮点燃慢性癫痫模型每天腹腔注射PTZ（戊四氮）30mg/kg（PTZ用蒸馏水配成15mg/ml溶液,用前1小时新鲜配置）,各组注射连续28天,每次注射均在早上8:

00-9:

00进行。

停药一周后,再用相同剂量的PTZ测试。

造模开始即甘松治疗组灌服甘松62.5g/kg.d，丙戊酸钠治疗组灌服丙戊酸钠0.64g/kg.d，甘松合并丙戊酸钠治疗组灌胃剂量为甘松62.5g/kg.d加丙戊酸钠0.32g/kg.d，正常对照组和模型组灌服等体积的生理盐水，每组大鼠每天灌胃一次。

各组大鼠除正常对照组外于连续灌胃第35日灌胃2小时后用PTZ30mg/kg腹腔注射5、大鼠行为参照Racine评级标准0级:

行为正常级:

节律性嘴或面部抽动级:

点头或甩尾级:

单肢抽动级:

多肢抽动或强直级:

全面性僵直-阵挛发作。

6、统计学方法各组所得定量数据均以均数标准差（）表示,采用t检验。

发作级别结果采用X2检验。

四、动物实验结果1、甘松治疗对青霉素诱导大鼠惊厥潜伏期的影响2、甘松治疗对青霉素诱导大鼠痫性发作级别的影响3、甘松治疗对戊四氮点燃各组癫痫发作级别比较4、甘松治疗对戊四氮点燃各组癫痫发作持续时间和次数比较5、甘松治疗对青霉素诱导大鼠脑电图的影响6、甘松治疗对戊四氮点燃大鼠脑电图的影响五、临床研究资料与方法1、临床资料与分组40例患者（男22例,女18例,年龄860岁）临床诊断符合抗癫痫联盟2001年癫痫发作的国际分类及2000年癫痫及癫痫综合征国际分类的定义，在近三个月内均使用丙戊酸钠缓释片0.5，bid。

简单部分性发作（SPS）8例,复杂部分性发作（CPS）22例,继发性全身性发作（SGS）10例。

治疗组对照组2、研究方法治疗组：

丙戊酸钠缓释片0.25bidpo加甘松煎剂10gbidpo对照组:

丙戊酸钠缓释片0.5bidpo3、观察指标两组治疗前后各种类型癫痫平均发作频率治疗6个月后治疗组对照组临床疗效脑电图变化血常规、肾功能及肝功能六、临床研究结果1、治疗组甘松煎剂治疗前后各种类型癫痫平均发作频率比较发作类型例数治疗前发作频率治疗后发作频率治疗前后比较P值SPS44.01.60.50.60.05CPS113.81.50.60.70.01SGS53.61.10.60.70.05合计203.81.40.60.50.012、对照组实验前后各种类型癫痫平均发作频率比较发作类型例数实验前发作频率实验后发作频率实验前后比较P值SPS44.01.42.20.50.05CPS113.61.72.91.90.05SGS53.80.82.61.70.05合计203.71.42.91.80.05注:

发作频率指人均月均发作次数3、治疗6个月后治疗组对照组临床疗效比较4、治疗组对照组脑电图变化比较4、不良反应治疗组有1例谷丙转氨酶轻度升高对照组有3例谷丙转氨酶轻度升高两组经用降转氨酶药物及保肝药后15天后复查结果正常七、讨论1、化学点燃动物模型青霉素急性点燃癫痫动物模型机制青霉素实验剂量的选择戊四氮点燃癫痫动物模型机制2、甘松化学成分：

甘松香醇,甘松酮,马兜铃酮,缬草酮等作用：

镇静、抗癫痫、促神经生长、改善认知能力、抗抑郁、保护心肌细胞、降血压、抑菌与抗疟等国内外专家对其抗癫痫作用的研究制药难度结合本研究结果讨论甘松的抗癫痫作用八、结论用青霉素腹腔给药建立的癫痫模型能够有效而可靠的模拟全身性癫痫发作建立急性癫痫大鼠模型。

戊四氮点燃慢性癫痫模型有效、稳定、可靠。

甘松对青霉素和戊四氮致痫大鼠具有一定的抗癫痫作用，与丙戊酸钠联用有协同作用。

甘松合并丙戊酸钠缓释片治疗癫痫患者疗效确切,安全性较高。

九、本课题创新点既往中草药治疗癫痫的研究仅停留在复合制剂，少见中草药单药治疗癫痫的动物实验和临床研究的报告。

本课题研究甘松单一中药对青霉素和戊四氮致痫大鼠的抗癫痫作用，临床上研究与丙戊酸钠缓释片合并治疗癫痫的作用。

本研究具有坚实的中西医理论基础，能承上启下为中西医结合治疗癫痫寻求新办法。

十、可进一步探讨的问题甘松与其他抗癫痫药物的相互作用甘松对癫痫患者情感、认知功能障碍、炎症反应等多项指标的影响