生物安全实验室操作规范PPT课件下载推荐.ppt
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实验室中样品的安全操作实验室中样品的安全操作打开包装接收和打开样品的人员应当了解样品对身体健康的潜在危害,并接受过如何采用常规预防措施的培训,尤其是处理破碎或泄漏的容器时更应如此。
样品要在生物安全柜内打开,并准备好消毒剂。
移液管和移液辅助器的使用移液管和移液辅助器的使用应使用移液辅助器。
所有移液管应带有棉塞以减少移液器具的污染。
不能向含有感染性物质的溶液中吹人气体。
感染性物质不能够用移液管反复吹吸混合。
不能将液体从移液管内用力吹出。
刻度对应移液管不需要吹出最后一滴液体,因此最好使用这种移液管。
移液管和移液辅助器的使用移液管和移液辅助器的使用污染的移液管应该完全浸泡在盛有适当消毒液的防碎容器中。
移液管应当在消毒剂中浸泡18-24小时后再进行处理。
盛放废弃移液管的容器应当放在生物安全柜内,而不能放在外面。
移液管和移液辅助器的使用移液管和移液辅助器的使用固定有皮下注射针头的注射器不能够用于移液。
应当用钝头导管替代针头。
可以用工具打开瓶塞后再用移液管取样,从而避免使用注射器和针头。
为了避免感染性物质从移液管中意外滴出而扩散,在工作台面应当放置一块浸有消毒液的布或吸有消毒液的纸,使用后将其高压灭菌或按感染性废物处理。
避免感染性物质的扩散避免感染性物质的扩散为了避免转移物质洒落,微生物接种环的直径应为23mm并完全封闭,手柄的长度应小于6cm以减小振动。
或者采用一次性灭菌棉签。
使用封闭式微型电加热器消毒接种环能够避免在本生灯的明火上加热所引起的感染性物质爆溅。
最好使用不需要再进行消毒的一次性接种环。
避免感染性物质的扩散避免感染性物质的扩散为了避免产生气泡和气溶胶的扩散,不要在玻片上进行触酶试验,而应当采用试管、毛细管或盖玻片法。
准备高压灭菌和或处理的废弃样品和培养物应当放置在防漏的容器内,如实验室废物袋。
在每一阶段工作结束后,必须采用适当的消毒剂清除工作区的污染。
生物安全柜的使用生物安全柜的使用应参考国家标准和相关文献,理解生物安全柜的使用方法和局限性。
并发给工作人员书面的操作步骤、安全或操作手册。
应明确注明当出现溢出、破损或不良操作时,安全柜就不再能保护操作者。
生物安全柜必须运行正常时才能使用。
生物安全柜在使用中不能打开玻璃观察挡板。
生物安全柜的使用生物安全柜的使用安安全全柜柜内内应应尽尽量量少少放放置置器器材材或或样样品品,不不能能阻阻碍碍后后部部的的气气流流循循环环。
样样品品在在放放人人安安全全柜柜内内的的工工作作区区前前需需要要清除表面污染。
清除表面污染。
安安全全柜柜内内使使用用酒酒精精灯灯,应应考考虑虑燃燃烧烧产产生生的的热热量量会会干干扰扰气气流流并并可可能能损损坏坏过过滤滤器器。
允允许许使使用用微微型型电电加加热热器器,但最好使用一次性无菌接种环。
但最好使用一次性无菌接种环。
所所有有工工作作必必须须在在工工作作台台面面的的中中后后部部进进行行,并并能能够够通通过观察挡板看到。
过观察挡板看到。
尽量减少操作者身后的人员流动。
生物安全柜的使用生物安全柜的使用操作者不应反复移出和伸进手臂以免干扰气流。
实验记录、移液管以及其他物品不能够阻碍前面的空气格栅,因为这将干扰气体流动,引起物品的潜在污染和操作者的暴露。
工作完成后以及每天下班前,应使用适当的消毒剂对生物安全柜的表面进行擦拭。
工作开始前和结束后,安全柜的风机应至少运行5分钟。
血清的分离血清的分离只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。
只有经过严格培训的人员才能进行这项工作。
操作时应戴手套以及眼睛和黏膜的保护装置。
规规范范的的实实验验操操作作技技术术可可以以避避免免或或尽尽量量减减少少喷喷溅溅和和气气溶溶胶胶的的产产生生。
血血液液和和血血清清应应当当小小心心吸吸取取,而而不不能能倾倾倒。
倒。
移移液液管管使使用用后后应应完完全全浸浸入入次次氯氯酸酸盐盐或或其其他他适适当当的的消消毒毒液液中中。
移移液液管管应应在在消消毒毒液液中中浸浸泡泡至至少少1818小小时时,然然后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。
后再丢弃或灭菌清洗后重复使用。
带带有有血血凝凝块块等等的的废废弃弃样样品品管管,在在加加盖盖后后应应当当放放在在适适当的防漏容器内高压灭菌和或焚烧。
当的防漏容器内高压灭菌和或焚烧。
离心机的使用离心机的使用在使用实验室离心机时,仪器良好的机械性能是保障微生物安全的前提条件。
应按照操作手册来操作离心机。
离心机放置的高度应当使低于平均身高的工作人员也能够看到离心机腔体内部,以正确放置十字轴和离心管套。
离心管和盛放离心样品的容器应当由厚壁玻璃制成,或最好为塑料制品,并且在使用前应检查是否破损。
离心机的使用离心机的使用用于离心的试管和样品容器应当始终牢固盖紧(最好使用螺旋盖)。
离心管套的装载、平衡、密封和打开必须在生物安全柜内进行。
离心管套和十字轴应按重量配对,并在装载离心管后正确平衡。
离心机的使用离心机的使用对于危险度三级和四级的微生物,必须使用可封口的离心离心管套(安全杯)。
当使用固定角离心转子时,必须小心不能将离心管装得过满,否则会导致漏液。
应当每天检查离心机内转子部位的腔壁是否被沾染或弄脏。
如污染明显,应重新评估离心操作规程。
离心机的使用离心机的使用应应当当每每天天检检查查离离心心转转子子和和离离心心管管套套是是否否有有腐腐蚀蚀或或细细微裂痕。
微裂痕。
每每次次使使用用后后,要要清清除除离离心心管管套套、转转子子和和离离心心机机腔腔的的污染。
污染。
使用后离心管套应当倒置存放使平衡液流干。
当当使使用用离离心心机机时时,可可能能喷喷射射出出可可在在空空气气中中传传播播的的感感染染性性颗颗粒粒。
如如果果将将离离心心机机放放置置在在传传统统的的前前开开式式的的II级级或或级级生生物物安安全全柜柜内内,这这些些粒粒子子由由于于运运动动过过快快而而不不能能被被安安全全柜柜内内的的气气流流截截留留。
而而在在级级生生物物安安全全柜柜内内封封闭闭离离心心时时,可可以以防防止止生生成成的的气气溶溶胶胶广广泛泛扩扩散散。
但但是是,良良好好的的离离心心操操作作技技术术和和牢牢固固加加盖盖的的离离心心管管可可以以提提供供足足够够的的保保护护,以以防防止止感感染染性性气气溶溶胶胶和和可可扩扩散散粒粒子的产生。
子的产生。
匀浆器摇床搅拌器和超声匀浆器摇床搅拌器和超声处理器的使用处理器的使用实验室不能使用家用(厨房)匀浆器,因为它们可能泄漏或释放气溶胶。
使用实验室专用搅拌器和消化器更为安全。
盖子、杯子或瓶子应当保持正常状态,没有裂缝或变形。
盖子应能封盖严密,衬垫也应处于正常状态。
在使用匀浆器、摇床和超声处理器时,容器内会产生压力,含有感染性物质的气溶胶就可能从盖子和容器间隙逸出。
由于玻璃可能破碎而释放感染性物质并伤害操作者,建议使用塑料容器,尤其是聚四氟乙烯容器。
匀浆器摇床搅拌器和超声匀浆器摇床搅拌器和超声处理器的使用处理器的使用使用匀浆器、摇床和超声处理器时,应该用一个结实透明的塑料箱覆盖设备,并在用完后消毒。
可能的话,这些仪器可在生物安全柜内覆盖塑料罩进行操作。
操作结束后,应在生物安全柜内打开容器。
应对使用超声处理器的人员提供听力保护。
自动化仪器自动化仪器(超声处理器、涡旋混合器超声处理器、涡旋混合器)为了避免液滴和气溶胶的扩散,这些仪器应采用封闭型的。
排出物应当收集在封闭的容器内进一步高压灭菌和或废弃。
在每一步完成后应根据操作指南对仪器进行消毒。
组织研磨器的使用组织研磨器的使用使用玻璃研磨器时应戴手套,并用一块具有吸收性的软物包住研磨器。
塑料(聚四氟乙烯)研磨器更加安全。
操作和打开组织研磨器时应当在生物安全柜内进行。
冰箱与冷柜的维护和使用冰箱与冷柜的维护和使用冰箱、低温冷柜和干冰柜应当定期除霜和清洁,应清理出所有在储存过程中破碎的安瓿和试管等物品。
清理时应戴厚橡胶手套并进行面部防护,清理后要对内表面进行消毒。
储存在冰箱内的所有容器应当清楚地标明内装物品的学名、储存日期和储存者的姓名。
未标明的或废旧物品应当高压灭菌并丢弃。
应当保存一份冻存物品的清单。
除非采用有效防爆措施,否则冰箱内不能放置易燃溶液并冰箱门上应明确标示。
装有冻干感染性物质安瓿的开启装有冻干感染性物质安瓿的开启当当打打开开装装有有冻冻干干物物的的安安瓿瓿时时必必须须小小心心,因因为为其其内内部部可可能能处处于于负负压压,瞬瞬间间进进入入的的空空气气可可能能使使一一些些物物质质扩扩散散进进入入空空气气。
安安瓿瓿应应该该在在生生物物安安全全柜柜内内打打开开,建建议议按按下下列列步步骤打开安瓿:
骤打开安瓿:
首先清除安瓿外表面的污染。
如如果果管管内内有有棉棉花花或或纤纤维维塞塞,可可以以在在管管上上靠靠近近棉棉花花或或纤纤维维塞的中部锉一痕迹。
塞的中部锉一痕迹。
用用一一团团酒酒精精浸浸泡泡的的棉棉花花将将安安瓿瓿包包起起来来以以保保护护双双手手,然然后后手持安瓿从标记的锉痕处打开。
手持安瓿从标记的锉痕处打开。
将顶部小心移去并按污染物处理。
如果塞子仍然在安瓿上,用消毒镊子除去。
缓慢向安瓿中加入液体来重悬冻干物,避免出现泡沫。
装有感染性物质安瓿的储存装有感染性物质安瓿的储存装有感染性物质的安瓿不能浸入液氮中,因为这样会造成有裂痕或密封不严的安瓿在取出时破碎或爆炸。
如果需要,安瓿应当储存在液氮上面的气相中。
感染性物质应储存在低温冰柜或干冰中。
当从冷冻储存器中取出安瓿时,实验室工作人员应当进行眼睛和手的防护。
以这种方式储存的安瓿在取出时应对外表面进行消毒。
样品的收集、标记和运输样品的收集、标记和运输始终遵循常规预防措施;
所有操作均要戴手套应当由受过培训的人员来采集病人或动物的血样。
在静脉抽血时,应当使用一次性的安全的抽真空设备取代传统的针头和注射器,因为这样可以使血液直接采集到带塞的运输管和或培养管中。
用完后自动废弃针头。
装有样品的试管应置于适当容器中运至实验室,在实验室内部转运也应这样说明书应当分开放置在防水袋或信封内。
用于显微观察的薄膜和涂片用于显微观察的薄膜和涂片用于显微观察的血液、唾液和粪便样品在固定和染色时,并不必杀死涂片上的所有微生物和病毒。
应当用镊子拿取这些东西,恰当储存,并经清除污染和或高压灭菌后再丢弃。
组织样品组织样品组织样品应当采用福尔马林固定。
小块样品,如针头活检样品,能够在几个小时内固定和消毒,但是较大样品则