感染性疾病病原体快速诊断PPT格式课件下载.ppt

感染性疾病病原体快速诊断PPT格式课件下载.ppt

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血常规：

WBC、DC影像学检查：

X-RAY、B超病原学检查：

染色、培养血清学检查：

抗原或抗体检测危重病人：

临床表现、危重病人：

临床表现、WBC+DCWBC+DC不典型不典型33WenenLIUWenenLIU感染的分类按病原学分类1.细菌感染（包括结核）2.真菌感染3.病毒感染4.支原体、衣原体按部位分类1.局部感染2.全身感染44WenenLIUWenenLIU临床希望第一时间知道的信息感染或非感染细菌感染或非细菌感染是结核感染或普通细菌感染酵母样真菌感染或丝状真菌感染白色假丝酵母或其他念珠菌感染曲菌感染或毛霉菌感染因为上述感染治疗方法不同55WenenLIUWenenLIU感染标志物细菌感染标志物白细胞计数与分类血沉C-反应蛋白（CRP）白介素-6降钙素元降钙素元内毒素内毒素真菌感染标志物:

GG试验、试验、GMGM试验试验结核感染证据：

夹层杯、夹层杯、T-SPOTT-SPOT66WenenLIUWenenLIU内容提要临床常见细菌感染快速诊断技术结核分枝杆菌的快速诊断技术123临床常见真菌的快速诊断技术77WenenLIUWenenLIU临床常见细菌感染快速诊断技术降钙素原检测内毒素检测分子诊断88WenenLIUWenenLIU降钙素原（ProcalcitoninPCT）降钙素原是正常人血清中存在的含116个氨基酸组成的糖蛋白，最初由甲状腺细胞产生，血清水平很低。

在非感染或病毒性感染疾病时保持非常低的血清水平，在细菌性感染时含量升高，并与感染程度和预后呈正相关。

PCT含量的变化稳定，并出现在疾病的早期（3-4h）。

短半衰期（24h）国外把PCT作为最敏感的感染标志。

正常血清水平:

100-150pg/ml99WenenLIUWenenLIU降钙素原PCT:

分子结构血清降钙素（CT）的前肽物质分子量：

14.5kDa由116个氨基酸组成的糖蛋白质无激素活性1111号染色体上号染色体上的单拷贝基因的单拷贝基因转录转录甲状腺滤泡细胞甲状腺滤泡细胞降钙素原前降钙素原前体体内源多肽酶内源多肽酶降钙素原降钙素原PCTPCT分解分解细胞内特殊细胞内特殊蛋白酶蛋白酶正常情况下正常情况下正常情况下正常情况下降降钙钙素素1010WenenLIUWenenLIULinscheidLinscheidP,etalP,etalCritCritCareMed04;

32:

1715-21CareMed04;

1715-21Endocrinology03;

144:

5578-84&

05;

146:

2699-708Endocrinology03;

2699-708在病毒感染时，大量产生的IFN-，将会抑制PCT的激活及产生.因此，病毒感染时，PCT的浓度将会保持在较低的水平BacterialInfectionBacterialInfection（e.g.Endotoxin（e.g.Endotoxin）IL-6IL-6IL-6IL-61111WenenLIUWenenLIU细菌感染后PCT快速升高KineticsofprocalcitonininiatrogenicsepsisKineticsofprocalcitonininiatrogenicsepsisBrunkhorstF.Metal,IntensCareMed1998,24:

888-892BrunkhorstF.Metal,IntensCareMed1998,24:

888-8921212WenenLIUWenenLIUPCT来源LeftLane:

LeftLane:

正常组正常组,在不在不存在感染的情况下，甲存在感染的情况下，甲状腺外状腺外CALCICALCI表达被抑表达被抑制，而主要局限于甲状制，而主要局限于甲状腺和肺的神经内分泌细腺和肺的神经内分泌细胞有一定程度的表达胞有一定程度的表达RightLane:

RightLane:

脓毒症组脓毒症组,在细菌感染时可诱导全在细菌感染时可诱导全身各种组织多种类型细身各种组织多种类型细胞胞CALCICALCI表达和表达和PCTPCT连连续性释放续性释放1313WenenLIUWenenLIUPCT动力学2-3h2-3h开始开始增加；

增加；

6-8h6-8h快速快速升高；

升高；

12h-4812h-48到达到达峰值；

峰值；

2-3d2-3d正常正常血浆浓度在血浆浓度在0.05ng/ml-0.05ng/ml-1000ng/ml1000ng/ml半半衰为衰为15-20h15-20h左左右右,且不受肾功能且不受肾功能影响影响1414WenenLIUWenenLIUPCT检测方法快速半定量法（PCT-Q）全自动快速定量法（VIDAS）1515WenenLIUWenenLIU快速半定量法（PCT-Q）样本样本：

200200ll血清血清/血浆血浆结果：

结果：

30min30min同胶体金免疫层析法，即在标准品上结合有胶体金的小鼠单克隆抗降钙素抗体和绵羊多克隆抗降钙素抗体，待检标本加上后，示踪元素即与标本中的PCT结合，形成一个“三明治式”的复合物，然后通过发光比色判断PCT浓度当PCT浓度0.5g/ml时，夹心复合物呈红色带，颜色深浅与样品中的PCT浓度成正比例，未结合的示踪物扩散到对照区，结合并产生了红色的对照带。

1616WenenLIUWenenLIU全自动快速定量法仪器：

法国梅里埃公司仪器：

法国梅里埃公司VIDASVIDAS全自动酶联荧光分析仪及配套全自动酶联荧光分析仪及配套试剂试剂标本要求：

静脉抗凝血标本要求：

静脉抗凝血注意无菌操作，使用新鲜标本，注意无菌操作，使用新鲜标本，如果如果44小时内不使用，应将标小时内不使用，应将标本放置本放置-20-20保存保存。

血浆中的血浆中的PCTPCT非常稳定，收集非常稳定，收集标本标本24h24h后，后，PCTPCT浓度在室温浓度在室温下大约下降下大约下降1212，在，在44大约大约下降下降661717WenenLIUWenenLIUPCT用于细菌感染和脓毒症诊断是一种非常有价值的标志物细菌感染/脓毒症诊断及严重程度判断脓毒症治疗效果监测及预后评估抗生素的有效管理1818WenenLIUWenenLIU细菌感染诊断及严重程度判断脓毒性休克严重脓毒症系统性感染（脓毒症）局部感染正常值PCT的浓度随感染的扩散和感染严重程度的加重而升高1919WenenLIUWenenLIU脓毒症患者治疗效果及预后监测（n=109）F.Stber,UniversityBonn,LectureatISICEM,Brussels2001通过PCT不断在体内衰减，反映出抗生素治疗策略的成功随着患者对抗生素治疗的响应，引起了PCT血中浓度水平的典型变化过程AB-antibioticsAB-antibiotics2020WenenLIUWenenLIU抗生素有效管理抗生素有效管理PCTPCT浓度浓度（ngng/ml/ml）临床意义临床意义0.050.05无细菌感染无细菌感染0.05-0.10.05-0.1非细菌感染非细菌感染0.1-0.250.1-0.25可能是局部细菌感染，不建议使用可能是局部细菌感染，不建议使用抗生素，抗生素，6-246-24小时内复查小时内复查0.25-0.50.25-0.5局部细菌感染，建议使用抗生素局部细菌感染，建议使用抗生素0.5-2.00.5-2.0严重细菌感染、脓毒症严重细菌感染、脓毒症2.0-10.02.0-10.0重症脓毒症重症脓毒症10.010.0重度脓毒症、脓毒性休克或重度脓毒症、脓毒性休克或MODSMODS2121WenenLIUWenenLIUPCT的临床应用急诊急诊住院病房住院病房外科手术外科手术血液科血液科内科内科ICUICU外科外科ICUICU儿科急诊儿科急诊儿科病房儿科病房儿科儿科ICUICU新生儿科新生儿科严重细菌感染或脓毒症的检严重细菌感染或脓毒症的检测（鉴别诊断）测（鉴别诊断）疾病或治疗反应的监测疾病或治疗反应的监测局部与全身性感染局部与全身性感染脓毒症的诊断和监测脓毒症的诊断和监测新生儿脓毒症的检测新生儿脓毒症的检测2222WenenLIUWenenLIU48hr生理性一过性峰值创伤后炎症综合症创伤后炎症综合症:

多发性创伤,大面积烧伤,大手术后（心脏心脏,移植移植,腹部腹部）使用致炎细胞因子治疗后使用致炎细胞因子治疗后（OKT3,注射TNF,IL-2,抗淋巴细胞球蛋白）某些肿瘤某些肿瘤（甲状腺髓样细胞癌,肺小细胞癌和支气管癌）长时间循环衰竭长时间循环衰竭（心源性休克,出血性休克,热休克）PCT水平增加但没有系统细菌感染的几种情况2323WenenLIUWenenLIU感染早期（-6-12小时后重复检测!

）亚急性心内膜炎局部感染细菌感染而PCT不升高的情况2424WenenLIUWenenLIU对PCT检测的影响受以下因素影响*甲状腺功能是功能性是功能性甲状腺甲状腺髓髓样样癌的癌的肿瘤标志物肿瘤标志物*肾功能严重肾严重肾功能功能受损受损者中水平者中水平较高较高不受以下因素影响*类固醇药物*自身免疫性疾病*年龄、性別*免疫功能低下状态:

肝硬化、HIV感染2525WenenLIUWenenLIU细菌内毒素革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖（LPS）和蛋白的复合物，细菌死亡或自溶后释放进入机体将会出现发热、血压降低、寒颤、引起DIC、内毒素败血症等一系列临床反应。

2626WenenLIUWenenLIU2727WenenLIUWenenLIU细菌内毒素检测原理：

仪器检测试管内反应物的光密度OD值，取当OD上升到0.02的点的时间作为反应时间，该点在反应曲线上的位置为浊度开始快速变化的时期，该取值能够快速、稳定的获得反应时间，从而判断内毒素的含量动态浊度法2828WenenLIUWenenLIU仪器和试剂BET-24A细菌内毒素分析仪MB-80微生物快速动态监测系统2929WenenLIUWenenLIU标本要求患者早上尚未进行药物静脉治疗时:

MB-80：

“无热源真空采血管”,静脉抗凝血，采血量2-4ml，30min内送检BET-24A：

抽取1mL静脉抗凝血，配1mL1号处理液其它体液如脑脊液胸腹水与血标本要求相同。

注意无菌操作3030WenenLIUWenenLIU内毒素活性定量检测意义G-所致脓毒症早期鉴别诊断指导抗生素正确使用判定抗感染治疗效果帮助判断患者的预后3131WenenLIUWenenLIU内毒素定量检测的适应症各种急、慢性病理性发热患者各种类型“中重度感染、肝病、休克、肠道疾病、脏器功能衰竭、大手术术后”患者慢性疾病长期卧床、免疫力低下患者急诊及ICU病房收治的生命体征不稳定的患者3232WenenLIUWenenLIU分子诊断技术检测致病菌PCR技术扩增16srRNA基因鉴定常见致病菌革兰阳性球菌革兰阴性杆菌mecA基因VanA/VanB基因PBP2b基因PCR扩增耐药基因特异性基因ESBLs基因AmpC基因碳青霉烯酶基因mecA：

耐甲氧西林葡萄球菌属（MRS）特异性基因VanAVanB：

耐万古霉素肠球菌（VRA）特异性基因PBP2b：

青霉素不敏感肺炎链球菌（pNSSp）特异性基因ESBLs基因：

主要包括TEM、SHV、CTX-M、OXAAmpC基因包括质粒介导型和染色体诱导型。

其中前者主要包括MOX、CMY、DHA、ACC、ACT、FOX等亚型，后者主