尿液蛋白质检查PPT资料.ppt
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定时留尿法报告方式:
定时留尿法(g/ml;
mg/24h)g/ml;
mg/24h)晨尿法晨尿法晨尿法晨尿法(mg/L)mg/L)随机留尿法随机留尿法随机留尿法随机留尿法(mg/mg/mmolmmolCr;
mg/gCr)Cr;
mg/gCr)nn国际上以尿白蛋白排泄率国际上以尿白蛋白排泄率国际上以尿白蛋白排泄率国际上以尿白蛋白排泄率2020mg/Lmg/L或尿总蛋或尿总蛋或尿总蛋或尿总蛋白白白白3030mg/24hmg/24h作为尿微量白蛋白的临界值。
作为尿微量白蛋白的临界值。
nn临床意义:
临床意义:
v尿微量白蛋白在糖尿病肾病中的应用尿微量白蛋白在糖尿病肾病中的应用v尿微量白蛋白在心血管疾病中的应用尿微量白蛋白在心血管疾病中的应用v尿微量白蛋白在炎症方面的应用尿微量白蛋白在炎症方面的应用v其他其他二、二、Bence-Jonesprotein:
v实质是免疫球蛋白轻链或其聚合物,单聚体分子量实质是免疫球蛋白轻链或其聚合物,单聚体分子量为为2.3万。
万。
v凝溶蛋白:
凝溶蛋白:
pH4.55.5,5656条件加热出现白色混条件加热出现白色混浊及凝固,浊及凝固,100100煮沸以后混浊消失或明显减退,再煮沸以后混浊消失或明显减退,再冷却时又可重新凝固。
冷却时又可重新凝固。
v蛋白电泳时可在蛋白电泳时可在22至至球蛋白区带间的某个部位球蛋白区带间的某个部位出现出现MM区带。
区带。
q对甲苯磺酸沉淀筛选实验:
灵敏度对甲苯磺酸沉淀筛选实验:
灵敏度3mg/Lq热沉淀法验证热沉淀法验证q乙酸纤维素膜电泳或者聚丙烯酰胺凝胶电泳:
乙酸纤维素膜电泳或者聚丙烯酰胺凝胶电泳:
M带带q免疫固定电泳:
区带电泳分离蛋白后,立即将浸有免疫固定电泳:
区带电泳分离蛋白后,立即将浸有特异抗特异抗L链血清的薄膜条直接放到预计出现异常蛋白链血清的薄膜条直接放到预计出现异常蛋白带的位置上,使之产生抗原抗体的复合物反应。
带的位置上,使之产生抗原抗体的复合物反应。
q免疫扩散实验:
用特异的免疫扩散实验:
用特异的L链血清进行免疫扩散实验。
链血清进行免疫扩散实验。
多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症三、三、2-microglobulinnn性质:
一种低分子量的蛋白质(性质:
一种低分子量的蛋白质(1.181.18万),是万),是万),是万),是细胞膜上完整组织相溶性抗原细胞膜上完整组织相溶性抗原细胞膜上完整组织相溶性抗原细胞膜上完整组织相溶性抗原HLAHLA的一部分。
的一部分。
放射免疫分析(检测方法:
放射免疫分析(RIARIA)、)、)、)、酶免疫分酶免疫分酶免疫分酶免疫分析(析(析(析(EIAEIA)nn参考值参考值参考值参考值:
血血血血22-M3.0mg/L-M3.0mg/L尿尿尿尿22-M0.2mg/LM0.2mg/Lnn临床意义:
肾小管疾病、血清临床意义:
肾小管疾病、血清22-M-M异常增高异常增高异常增高异常增高四、尿液血红蛋白、肌红蛋白及其代谢产物检查四、尿液血红蛋白、肌红蛋白及其代谢产物检查1.1.hemoglobinhemoglobinvv正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合,以复合物正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合,以复合物正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合,以复合物正常人血浆中游离血红蛋白与珠蛋白结合,以复合物的形式运转至单核的形式运转至单核的形式运转至单核的形式运转至单核-巨噬细胞系统被代谢,不能从尿液巨噬细胞系统被代谢,不能从尿液巨噬细胞系统被代谢,不能从尿液巨噬细胞系统被代谢,不能从尿液中排出。
中排出。
vv疾病时尿液中血红蛋白有两个来源:
疾病时尿液中血红蛋白有两个来源:
1.1.发生发生发生发生血管内溶血管内溶血管内溶血管内溶血血血血,超过珠蛋白的结合能力,游离血红蛋白从尿液中,超过珠蛋白的结合能力,游离血红蛋白从尿液中,超过珠蛋白的结合能力,游离血红蛋白从尿液中,超过珠蛋白的结合能力,游离血红蛋白从尿液中排出。
排出。
2.2.尿路(尤其是上尿路)出血尿路(尤其是上尿路)出血尿路(尤其是上尿路)出血尿路(尤其是上尿路)出血,红细胞在,红细胞在,红细胞在,红细胞在低渗或低渗或低渗或低渗或者高渗者高渗者高渗者高渗的环境下破坏逸出的血红蛋白。
的环境下破坏逸出的血红蛋白。
试纸法:
利用血红蛋白中利用血红蛋白中利用血红蛋白中利用血红蛋白中亚铁血红素亚铁血红素亚铁血红素亚铁血红素具有具有具有具有类过氧化物类过氧化物类过氧化物类过氧化物酶酶酶酶作用,在邻联甲苯胺等供氢体存在下,使过氧化物作用,在邻联甲苯胺等供氢体存在下,使过氧化物作用,在邻联甲苯胺等供氢体存在下,使过氧化物作用,在邻联甲苯胺等供氢体存在下,使过氧化物还原为水,而邻联甲苯胺被氧化成有色物质。
还原为水,而邻联甲苯胺被氧化成有色物质。
免疫测定方法:
利用利用利用利用抗人血红蛋白单克隆抗体抗人血红蛋白单克隆抗体抗人血红蛋白单克隆抗体抗人血红蛋白单克隆抗体临床意义:
血管内溶血血管内溶血血管内溶血血管内溶血泌尿道出血泌尿道出血泌尿道出血泌尿道出血2.myoglobin肌红蛋白是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚肌红蛋白是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚肌红蛋白是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚肌红蛋白是横纹肌、心肌细胞内的一种含亚铁血红素的蛋白质,分子量小,易通过肾小球。
铁血红素的蛋白质,分子量小,易通过肾小球。
测定方法:
纸片法:
原理与血红蛋白测定类似。
肌红蛋白能溶于肌红蛋白能溶于肌红蛋白能溶于肌红蛋白能溶于0.80.8饱和度的硫酸铵溶液中饱和度的硫酸铵溶液中饱和度的硫酸铵溶液中饱和度的硫酸铵溶液中免疫法:
利用单克隆抗体免疫法:
利用单克隆抗体ELISAELISA、3.hemosiderin当发生血管内溶血时,大部分血红蛋白随尿排出,其当发生血管内溶血时,大部分血红蛋白随尿排出,其当发生血管内溶血时,大部分血红蛋白随尿排出,其当发生血管内溶血时,大部分血红蛋白随尿排出,其中一部分血红蛋白被肾小管上皮细胞再吸收后在肾小管上中一部分血红蛋白被肾小管上皮细胞再吸收后在肾小管上中一部分血红蛋白被肾小管上皮细胞再吸收后在肾小管上中一部分血红蛋白被肾小管上皮细胞再吸收后在肾小管上皮细胞内分解形成血铁黄素,再随细胞脱落至尿中排出。
皮细胞内分解形成血铁黄素,再随细胞脱落至尿中排出。
PrussianPrussian反应,当尿中含有铁血黄素时,其反应,当尿中含有铁血黄素时,其反应,当尿中含有铁血黄素时,其反应,当尿中含有铁血黄素时,其中高铁离子与亚铁氰化钾作用,在酸性环境下,产生蓝中高铁离子与亚铁氰化钾作用,在酸性环境下,产生蓝中高铁离子与亚铁氰化钾作用,在酸性环境下,产生蓝中高铁离子与亚铁氰化钾作用,在酸性环境下,产生蓝色的亚铁氰化钾沉淀。
色的亚铁氰化钾沉淀。
注意事项:
1.1.避免铁污染;
避免铁污染;
2.2.清晨第一次尿阳性率较高清晨第一次尿阳性率较高清晨第一次尿阳性率较高清晨第一次尿阳性率较高临床意义:
血管内溶血、行进性血红蛋白尿。
4.porphyrin-氨基酮戊酸、卟胆原氨基酮戊酸、卟胆原氨基酮戊酸、卟胆原氨基酮戊酸、卟胆原尿卟啉尿卟啉尿卟啉尿卟啉粪粪粪粪卟啉卟啉卟啉卟啉原卟啉原卟啉原卟啉原卟啉+FeFe血红素血红素血红素血红素卟啉尿是指尿中排出过多的卟啉或者其前体卟啉尿是指尿中排出过多的卟啉或者其前体卟啉尿是指尿中排出过多的卟啉或者其前体卟啉尿是指尿中排出过多的卟啉或者其前体测定方法:
酸萃取后,紫外线进行检测酸萃取后,紫外线进行检测酸萃取后,紫外线进行检测酸萃取后,紫外线进行检测临床意义:
先天性卟啉病、肝性卟啉病先天性卟啉病、肝性卟啉病先天性卟啉病、肝性卟啉病先天性卟啉病、肝性卟啉病五、五、TammHorsfallproteinTHTH蛋白由蛋白由蛋白由蛋白由HenleHenle袢升支与远曲小管的上皮细胞的高尔袢升支与远曲小管的上皮细胞的高尔袢升支与远曲小管的上皮细胞的高尔袢升支与远曲小管的上皮细胞的高尔基复合体产生,是一种肾特异性蛋白质。
是构成管型基复合体产生,是一种肾特异性蛋白质。
是构成管型的一种重要蛋白。
的一种重要蛋白。
检测方法检测方法检测方法检测方法:
酶联免疫吸附法、放射免疫法:
酶联免疫吸附法、放射免疫法临床意义临床意义临床意义临床意义:
协助诊断上尿路疾患:
协助诊断上尿路疾患有助于泌尿系统结石形成机制的研究。
有助于泌尿系统结石形成机制的研究。
六、尿液酶测定六、尿液酶测定尿液酶的来源:
尿液酶的来源:
血液的酶:
淀粉酶、溶菌酶淀粉酶、溶菌酶肾实质的酶:
肾实质的酶:
肾小管刷状缘肾小管刷状缘(-GT、AAP、LAP、ALP、-GLU)、)、溶菌体溶菌体(NAG、ACP、-葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸苷酶)、苷酶)、胞浆胞浆(LDH)及线粒体及线粒体(AST)尿路及生殖系统的酶:
尿路及生殖系统的酶:
前列腺前列腺(ACP、NAG)、)、精