科研课题申请书Word文件下载.docx
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肿瘤抑制基因；
肝癌
（一）立项依据与研究内容
1、项目的立项依据
原发性肝癌是高度恶性的肿瘤，尽管采取积极手术治疗，但绝大多
数病人仍难免死于肿瘤复发及转移，其死亡率高居我国肿瘤死亡率
的第二位。
研究已表明肝癌的发生乙肝、丙肝感染及摄入黄曲霉素
污染的食物有密切关系,其发生发展与多种癌基因过度表达，以及
肿瘤抑制基因失活密切相关。
但目前对其发生发展的精确分子机制
尚不完全清
楚。
因此,进一步探索研究新的基因功能改变与肝癌发生发展及其
恶性特征的关系，对揭示其发生发展的精确分子机制、设计合理的
治疗药物及判断预后，
进一步提高我国肝癌的治疗水平具有重要意
义。
T-cadherin
分子属细胞粘附分子
cadherin
超家族。
Cadherin
超家
族分子为细胞表面糖蛋白，其功能主要包括调节钙介导的细胞粘附、
细胞极性及形态形成，以及参与细胞间的识别和信号传导机制
（1,2,3,4）。
经典的
分子如
E-cadherin
和
N-cadherin
由细
胞外钙结合区及跨膜区两部分组成，而T-cadherin因缺失经典
Cadherin分子所具有的跨膜区而经糖基磷脂酰肌醇分子附着于细胞
膜上（5）,故而命名
truncated-cadherin（即T-cadherin，又称
CDH13
或
H-cadherin）。
近年来对经典的
分子的深入研究
发现，E-，N-cadherin分子缺失或突变与多种肿瘤如肝癌、胃癌、
乳腺癌、肺癌的发生及转移特征密切相关（6，7，8,9,10）。
将E-
分子重新导入缺失
分子表达的肿瘤细胞，则肿
瘤细胞的增殖及侵犯能力显著受抑（11）。
近年已开始有
T-cadherin
分子在肝癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌、卵巢癌及皮肤鳞癌中表达
显著下降、缺失的报导（12，13，14，15,16,17,18），推测T-
分子在这些肿瘤中可能扮演肿瘤抑制基因角色,但尚无人对
其在不同肿瘤中的基因功能及其分子机制进行研究。
2003
年，申请
人（黄志勇）最新研究表明，将
基因导入缺失表达
T-
cadherin分子的大鼠脑胶质母细胞瘤C6细胞使其过度表达
分子，C6
细胞的增殖及侵袭能力显著受抑，首次证实
cadherin在大鼠脑胶质母细胞瘤中的肿瘤抑制基因功能，并进一步
揭示其抑制机制是
分子通过诱导
P21
CIP1/WAF1
表达
致使肿瘤细胞于细胞周期G2期阻滞。
该文发表于Molecularand
Cellular
Biology
2003,23:
566-578（19）。
这一研究发现为进一步研究
分子在肝癌中的功能、分子机制及临床意义奠定了坚实的
基础。
肿瘤抑制基因启动子甲基化导致基因失活在肿瘤的发病机制
中起着重要作用（20，21，22，23）。
基因在乳腺癌、结
直肠癌及肺癌中并未发生缺失突变，但由于其启动子异常甲基化导
致
基因失活，进而导致其蛋白表达水平显著下降或缺失
（13,16,24）。
基因位于染色体
16q24，肝癌的发生与染
色体
16q24
的缺失、突变密切相关（25）。
Riou
（2002）对位于染
的
13
个常常在肝癌中缺失表达
的基因的转录研究发现，T-cadherinmRNA
在HepG2,
PLC/PRF/C,TONG
和HA22TNGH
四种肝癌细胞株中缺失表达，但
基因本身并未发生缺失突变（12）。
Yu（2002）
进一步研究显示T-cadherin基因启动子在肝癌中高度甲基化，而
基因启动子在肝癌中不发生甲基化，表明在
细
胞粘附分子超家族中
基因启动子
甲基化在肝癌中具有高度特异性,且
基因启动子甲基化与
基因失活密切相关（26）。
这些研究表明
基
因启动子甲基化是T-cadherin基因在肝癌中失活的主要机制。
Takeuchi
在对皮肤鳞癌细胞株的研究中发现，与
2ug/ml
去甲基化
药
物
5-aza-2’-deoxycytidine
共孵
6
天能使皮肤鳞癌细胞株恢复
分子表达（17）。
但目前对
基因失活与肝癌恶性分化程度、肝内转移及复
发等恶性生物学特征的关系，以及应用去甲基化药物是否能诱导
分子在肝癌细胞株中重新表达，
并抑制肝癌细胞的增殖、侵袭及转移等恶性特征全世界尚无研究报
道。
本研究将进一步研究
在肝癌中的基因功能，调查缺
失表达
的肝癌细胞株重新表达
是否能抑制
肝癌细胞的增殖、侵袭及转移等恶性生物学特征，并在裸鼠肝癌模
型上加以证实。
同时，进一步研究其基因功能的分子机制。
在临床
切除的肝癌标本中研究
基因失活与肝癌恶性分化程度、
转移及复发等恶性生物学特征的关系，进一步揭示
基因
失活与临床肝癌预后的关系。
在肝癌细胞株及裸鼠肝癌模型上证实
是否去甲基化药物能重新诱导
分子表达，并抑制肝癌细
胞的增殖、侵袭及转移等恶性生物学特征，观察其潜在的治疗作用
和可能的毒副
作用。
由于国内外尚无类似研究报道，申请人具有研究T-cadherin
基因与
细胞恶性生物学特征的关系及其分子机制的丰富经验，
预期该研究成果能达国际先进水平。
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