认 识 实 习 报 告 生工文档格式.docx

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前言

实习目的：

了解典型发酵工厂的基本组成及企业各部门之间的协作关系；

通过对本专业领域典型工厂或生产车间的参观学习，加深对基础理论及专业基础理论课程的理解；

通过对部分典型发酵产品的生产过程参观学习，强化对设备、工程全局观的意识，并能够获得对后继专业理论课程的感性认识。

回顾并加深理解生物技术与生物工程原理、生物工程机械基础、生物化学、微生物学等基本内容。

实习时间

2012年11月19日--12月7日

实习单位

南京工业大学国家生化工程技术研究中心

百威英博啤酒有限公司南京分公司

实习准备

根据学校所给资料，对所参观实习的单位及公司进行了大体的了解，包括公司概况以及其主要产品。

进图书馆，利用馆藏资源，查阅相关产品的工艺流程以及生产环节中的控制点和影响的关键因素。

一、实习单位概况

1.南京工业大学国家生化工程技术研究中心

南京工业大学国家生化工程技术研究中心是于1996年4月经国家科学技术部批准依托南京工业大学组建而成的高新技术研发实体，以基因工程、酶、蛋白质工程、细胞工程及发酵工程等生物技术为主的生化工程领域的科学研究、研究成果的工程化、产业化开发。

中心的“化学生物学技术重点实验室”包括了仪器装备先进的基因工程、工业微生物、酶工程、生物物理（等离子注射等）、食品工程、分离工程以及现代仪器分析等实验室。

现代仪器分析实验室装备了国内最先进的LC/MS/MS系统、全自动多肽合成仪、基因解析软件、蛋白解析仪和平行计算系统等。

中心已建立了生物催化多样性的研究平台、生物催化剂的快速改造技术平台、生物催化技术研究平台、生物分离工程新技术研究平台和生物催化系统集成平台等较完整的工业生物技术研究平台以及不同规模的中试线，已建成了较完善的工业生物技术研究体系和研究团队，在生物质资源代替化石资源和生物基化学品的生物制造、生物材料、大宗化学品，精细化学品和技术装备等领域已取得了一定的成绩。

2.百威英博啤酒有限公司南京分公司。

百威英博是一家上市公司，总部位于比利时鲁汶。

百威英博是全球领先的酿酒制造商，也是全球五大消费品公司之一。

作为一家以消费者为中心、以销售为推动力的大型公司，百威英博旗下经营着300多个品牌，其中包括百威、时代（StellaArtois）、贝克啤酒等全球旗舰品牌.BudLight、Brahma、Quilmes、Michelob、哈尔滨啤酒、雪津、科罗娜、等本土明星品牌。

此外，公司拥有此公司50%的股份。

此公司是墨西哥领先的啤酒制造商，也是享誉全球的科罗娜啤酒品牌所有者。

百威英博对于传统以及品质的执着追求可以追溯到1366年成立于比利时鲁汶的DenHoorn酒厂和1860年成立于美国圣路易斯市的Anheuser&

Co啤酒公司。

DenHoorn酒厂酿造啤酒的悠久传统和Anheuser&

Co啤酒公司的领先意识都对今天的百威英博产生了巨大而深远的影响。

公司业务遍及全球30余个国家，拥有员工12万余名，多元化的业务版图使得百威英博得以集中发挥双方的综合优势，在发达和发展中国家市场均取得骄人的成绩。

百威英博的梦想是：

“酿造更美好的世界”。

根据2008年的统计，合并后的公司总收入达到392亿美元。

更多信息请登陆www.ab-世界领先的啤酒公司“百威英博的业务在全球主要分为6大区域，全球各地的消费者都可以享用我们生产的啤酒。

”百威英博公司概况：

百威英博公司是世界啤酒行业的领导者全球五大消费品制造公司之一全球销量位居前四的啤酒品牌中百威英博旗下拥有三个品牌：

百威、时代、贝克公司业务遍及30余个国家其中，在20多个市场中占据第一或第二的位置员工人数约12万余名根据2008年的统计，合并后的公司总收入达到392亿美元。

旗下拥有300余个品牌，包括百威啤酒（Budweiser）、时代啤酒（StellaArtois）、贝啤酒（Beck'

s）等全球旗舰品牌；

以及BudLight、博浪（Brahma）、Quilmes、Michelob、哈尔滨（Harbin）、雪津等地方性知名品牌。

百威英博将为打造最佳啤酒公司,酿造更美好的世界的梦想而奋斗。

百威英博中国概况：

全国拥有超过30个酒厂,遍布11个省：

黑龙江、吉林、辽宁、福建、江西、广东、江苏、浙江、湖南、湖北、河北品牌：

百威、哈尔滨、雪津、红石梁、双鹿、KK、金陵、白沙、金龙泉中国雇员总数近3万5千名南京英博金陵啤酒有限公司，创建于1958年的金陵啤酒是江苏省第一家啤酒生产企业，她依托名城，在几代市民的生活中占据着重要的地位。

在经历了近半个世纪的蓬勃发展，公司不仅注入了全球第一大啤酒集团——百威英博啤酒集团的雄厚资金和技术力量，更名为南京英博金陵啤酒有限公司，同时引进了国际领先的精良设备和技术以及营销管理经验。

现在生产能力达12万吨，年产销量、销售额、利税、市场占有率稳步增长并均在江苏省内名列前茅。

2000年金陵啤酒被推荐为“国家级优质产品”。

公司也于2002年通过了ISO9001质量体系认证。

金陵、亚力先后获得多项殊荣，金陵干啤酒更是多年稳居南京市场销售榜首。

现在南京人惊喜地看到了金陵啤酒的包装开始变得时尚而现代-“金陵纯爽”恰到好处地加入了南京城墙的元素而显得脱俗高雅。

南京人欣喜地尝到，金陵的口味开始变得多样而清爽-“9度金陵啤酒”在南京城第一个喊出清爽到底的领“鲜”主张，可以说，金陵啤酒已经脱胎换骨，浴火重生了。

金陵啤酒凭借古都金陵深厚的历史底蕴和丰富的文化元素，张扬自信，激发豪情，为城市个性注入活力，已成为南京一张亮丽的城市名片

二、产品生产工艺

2.1FDP的生产

2.1.1FDP背景介绍

近十多年来，日益富足的人民群众正把注意力越来越多的投向了对生活质量和身体健康的提高上。

而FDP作为一种新型的生物药品，其在治疗心血管病、糖尿病和肝炎上的广泛实用性使之成为当今世界各国竞相研究的热点。

FDP是1,6-二磷酸果糖（英文名称Fructose1,6-diphosphate）的英文缩写，是生物体细胞内糖代谢的一种中间产物，纯FDP的性状呈白色或类白色的结晶性粉末，易溶于水。

研究发现它可作用于细胞膜，调节糖代谢中若干酶活性，尤其是激活磷酸果糖激酶（PFK），聚增细胞内高能磷酸池，产生大量的ATP，促进钾离子内流，恢复细胞极化状态，从而有益于休克、缺血、缺氧、损伤体外循环和输血等状态下的细胞能量代谢以及对葡萄糖的利用，以促进细胞修复和改善功能。

上个世纪八十年代，意大利Foscama公司开发成功FDP静脉注射液，在临床上得到广泛运用，是治疗和急救新脑血管方面疾病的特效药之一。

近年来，随着制备工艺的不断改进，FDP的酶法合成及其应用受到受到世界上越来越多国家的关注。

因此，进一步开发新生产工艺，研制新盐类型、开发新剂型和新产品、开拓新应用领域具有十分重要和现实的意义。

可以预见，这种来自生物质的新型药物的生产及应用将会获得更大的发展，并且今后还能创造出巨大的经济效益和不可低估的社会价值。

2.1.2FDP生产工艺介绍

目前我们生产工艺是在啤酒酵母的作用下，通过糖酵解（EMP）途径将葡萄糖和磷酸盐转化为1,6-二磷酸果糖，再经过过滤、离子交换、脱色、浓缩、结晶、干燥、成品包装等获得最终产品。

具体过程见下图：

具体糖酵解途径（EMP，部分）见下图：

2.1.3生产注意

2.1.3.1转化反应温度对酶活的影响

温度对酶反应速度的影响是多方面的。

总体来说，主要两个方面：

一方面酶作为一种生物催化剂，具有普通无杨催化剂的一般特性，即温度上升使底物能量增加，分子碰撞概率增加，从而使反应速度加快。

通常反应温度每升高10度，反应速度便增加1-2倍；

另一方面，随着温度上升超过某一界限，酶蛋白开始变性，有活性的酶减少，从而降低了酶反应的速度。

反应的最适温度就是这两种效应平衡的结果。

结果见下图。

较好的生产温度应该控制在25～34°

C

2.1.3.2pH对酶转化的影响

　酶分子上有许多酸性、碱性氨基酸的侧链基团，pH值的改变底物分子（s）、中间产物（ES）甚至酶（E）分子活性部位催化基团的解离状态。

酶活性中心含有－COOH和－NH２基团，可分别解离为－COO－和－NH３＋。

当将OH－或H+加入有活性的酶液中时，pH值的变化必然会些起一个或两个基团的解离形式变化，从而影响酶的活性，其机理如图。

在不同pH条件下测定酶的活力，可发现在某一pH值时，酶的活力最大，这特定PH值称为最适pH值，偏离此值则酶活力显著下降。

2.1.3.3搅拌对酶转化反应的影响

反应初期，提高搅拌转速可以加快底物转化，但到反应中后期过高的搅拌速度反而使转化率降低，这是由于搅拌的剪切力对酶产生了机械损伤，便酶活下降，转化减慢，而静置反应由于酶与底物无法充分接触，转化率也较低，而采用间歇搅拌方式，即保证了酶和底物的良好接触，又可以减少由于搅拌导致的机械损伤，是一种比较适合的生产方式。

2.1.3.4底物浓度对酶的稳定性的影响

对酵母转化FDP中底物葡萄糖和磷酸盐浓度的影响进行了研究，结果见下图。

从以上结果可以看出：

磷酸盐在一定浓度范围内，FDP的生成速率随其浓度的增加而增大。

但是在磷酸盐加入量大于5.0g后，FDP生成速率在前期却随着磷酸盐浓度的增加而减少，这是因为磷酸盐在较高的浓度下对FDP的生成产生一定抑制作用，但随着磷酸盐的转化，这种抑制现象逐渐减弱，在经过足够长的时间后，最终的培养液中FDP含量仍高于较低浓度的培养液，但对于生产来说，无机磷酸盐的加入量在5.0g以上是有利的，因为反应时间较短,降低了产品的成本。

在反应中当葡萄糖的加入量达到8.0g/L时，4h内FDP的生成量最高。

同时从磷酸盐的转化率来看，此时无机磷的转化率也是最高的。

当进一步增加葡萄糖用量，FDP的产量及无机磷的转化率均呈下降趋势，此时葡萄糖对酵母生成FDP产生抑制作用。

2.1.4分离提取FDP

在FPD提取过程中需要采用过滤、离子交换、浓缩结晶、膜过滤（可选）、脱色、结晶、干燥等工艺获得最后产品

2.2核苷酸的生产

2.2.1核苷酸的背景意义

5’-核苷酸在农业、食品和医药行业有着广泛的用途。

尤其是在婴儿食品和医药领域的应用中，有着不可替代的功能。

在婴儿食品中，作为婴儿食品的添加剂其可以明显提高婴儿的免疫能力，促进肠道的成熟，促进脂蛋白和多不饱和脂肪酸的合成，减少婴儿感冒和腹泻等疾病的发生，有利于婴儿的正常生长和发育。

在医药领域，临床实验表明，%’（核苷酸参与人体代谢，促进内脏器官改进和恢复，改善骨髓造血功能，可作为治疗癌症病毒的辅助药物，是一种非常重要的医药原料。

%’（核苷酸可使白细胞过量增生，对于各种放射性物质或药物引起的白细胞下降、非特性血小板减少等症状有良好的疗效，也可用于急、慢性肝炎的治疗

2.2.2核苷酸的主要生产方法

2.2.2.1化学法

化学法生产5’-核苷酸，主要是以核苷为原料进行磷酸酯化反应。

一般常用的核苷磷酸化试剂主要是磷酸或者焦磷酸的活性衍生物，如磷酸的一氯和二氯衍生物，焦磷酸酰氯，双（对（硝基（苯焦磷酸等。

要在核苷的5’位的羟基上导入磷酸基而得到5’-核苷酸，必须在进行磷酸化反应之前预先以适当的保护基保护核苷上核糖的2’，3’位的羟基。

一般可以采用异丙叉基、卞基、乙酰基或苯亚甲基等基