淄博职业学院毕业论文Word文件下载.docx
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花生壳；
黄酮类；
提取；
分光光度法
目 录
摘要……………………………………………………………………………2
概述………………………………………………………………………………3
1试验材料与方法…………………………………………………………3
试验材料………………………………………………………………3
1.1.1原料…………………………………………………………………3
1.1.2试剂…………………………………………………………………3
仪器设备………………………………………………………………3
实验方法………………………………………………………………3
1.3.1总黄酮含量的测定………………………………………………………3
1.3.2原料的预处理………………………………………………………4
1.3.3提取方法…………………………………………………………………4
1.3.4样品制备流程……………………………………………………………4
2.预试验结果对比………………………………………………………………4
3试验结果与分析………………………………………………………………5
试验方案设计………………………………………………………………5
试验结果分析………………………………………………………………5
4结果与讨论……………………………………………………………………7
结果…………………………………………………………………………7
讨论…………………………………………………………………………7
参考文献…………………………………………………………………………8
谢辞………………………………………………………………………………9
概述
花生，长生果，豆科，一年生草本。
目前，其开发利用的主要是花生仁、花生红衣和花生根[1]，花生果壳大部分用作燃料或当作废渣弃去，造成自然资源的极大浪费，直接影响了花生的综合利用价值。
我国每年花生荚果产量约500万t，其中花生壳占140万t。
研究表明，花生壳中除了含有大量碳水化合物及粗纤维外，还有黄酮类化合物，该类化合物有很好的清除自由基的作用。
据报道，成熟的花生壳中有含量（质量含量，下同）为%～%的多酚类物质。
酚类物质是油脂的抗氧化剂，若花生壳中酚类物质超过%时，就显出抗氧化作用[2]。
因此，若把花生壳中的多酚类物质提出，即可获得天然的食品抗氧化剂。
近年来，有医学报道，花生壳中的黄酮类化合物质有降血压、降血脂和治疗冠心病的作用。
所以，从花生壳中提取的抗氧化成分不仅是油脂的防腐剂，而且还有保健作用，是一种多功能的食品添加剂。
1试验材料与方法
试验材料
1.1.1原料花生壳
1.1.2试剂
95%乙醇分析纯天津北方天医化学试剂厂
无水甲醇分析纯北方化工厂
无水乙醇分析纯天津北方天医化学试剂厂
固体NaOH天津市标准科技有限公司
（1:
1）HCl溶液烟台三合化学试剂有限公司
5%NaNO2溶液
10%Al（NO3）3
1.2仪器设备
粉碎机FFC-15山东即墨市双工机械厂制造
电子天平AR2130/C上海电子仪器厂
电热恒温水浴锅HWS-20龙口市先科仪器公司
旋转蒸发仪RE52CS上海亚荣生化仪器厂
循环水式多用真空泵SHB-BA95型郑州长城科工贸有限公司
真空干燥箱DZF-6050型上海精宏实验设备有限公司
紫外可见分光光度计721上海精密科学仪器有限公司
试验方法
1.3.1总黄酮含量的测定[3]
⑴芦丁标准曲线的制作
配制mL的芦丁溶液50mL，取不同体积的芦丁溶液于7个25mL容量瓶中，每个反应管中芦丁含量分别为，，，，，，。
各加入5%的NANO2溶液1mL，放置6min，再加入10%的AL（N03）3溶液1mL，放置6min，然后加入4%的NAOH溶液10mL，用蒸馏水定容，静置15min，以第一管做参比，在510nm处测吸光度，绘制标准曲线，得芦丁质量浓度与吸光度的关系曲线方程：
Y=+
R2=
⑵样品溶液的制备
分别称取不同方法下提取的干燥后的总黄酮物适量于25mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，摇匀溶解，分别吸取1mL置于25mL容量瓶中，在510nm处测吸光度A，然后由标准曲线方程计算得到黄酮的含量。
1.3.2原料的预处理
花生壳经清洗后，晾干，在50℃～60℃的温度下烘干2～3h，然后在常温下自然干燥，保存于干燥的环境下。
用粉碎机将花生壳粉碎，过40目筛。
干燥保存备用。
1.3.3提取方法
预试验是以75%的乙醇作为溶剂，在同样的温度（80℃），同样的时间（3h），同样的溶剂比（1:
30）和pH值（pH=3）条件下用回流浸提和直接浸提来提取黄酮，对比哪种方法提取的黄酮含量高。
⑴回流浸提法
称花生壳粉5g于250mL圆底烧瓶中，用1:
30的料液比加入150mL70%的乙醇溶液，调pH=3（经查阅资料知在酸性条件下提取率高），在80℃下回流浸提3h，真空抽滤，滤液经减压蒸馏（35℃）回收溶剂，浓缩至干，用无水乙醇将干燥物洗出，真空干燥至恒重。
⑵直接提取法
称花生壳粉5g于250mL锥形瓶中，用1:
30的料液比加入150mL70%的乙醇溶液，调pH=3，在80℃下直接浸提3h，真空抽滤，滤液经减压蒸馏（35℃）回收溶剂，浓缩至干，用无水乙醇将干燥物洗出，真空干燥至恒重。
1.3.4样品制备流程滤渣
↑
花生壳→粉碎→称量（）→回流浸提→趁热抽滤→滤液真空旋转蒸发
→浓缩粗提液→无水乙醇洗出→真空干燥
1.3.5试验方案设计
选用乙醇（浓度分别为60%，70%，80%）、甲醇（浓度分别为60%，75%，90%）两种不同浓度的不同溶剂作为提取剂来进行试验。
由于料液比对提取效果影响不大，固定料液比为1：
30。
选择乙醇浓度（%）、提取时间（h）、提取温度（℃）和pH值四个因素作为正交试验的考察因素，提取率（提取物中黄酮的含量%）作为试验指标，进行正交试验。
试验因素与水平见表2（乙醇为提取剂）、表3（甲醇为提取剂）。
表2乙醇试验因素与水平表
乙醇浓度（%）
提取时间（h）
提取温度（℃）
pH值
1
60
2
70
3
80
4
90
5
表3甲醇试验因素与水平表
甲醇浓度（%）
75
2.试验结果与分析
预试验结果
按1.3.3方法进行实验，结果见表1。
表1不同提取方法的比较
提取方法
乙醇回流浸提法
乙醇直接浸提法
提取物总量（g）
0．183
总黄酮含量（%）
提取率（%）
经对比，回流浸提法提取率虽然低，但是总黄酮含量高，由于本试验是以总黄酮含量作为考察指标，因此，选用回流浸提法进行正式试验。
在预试验中，由于粉碎的太细，纤维物质影响浸提使提取物颜色成为深红棕色，所以正式试验选用过完40目的粗粉末。
试验结果分析
正交试验设计与结果分析见表4（乙醇为提取剂）、表5（甲醇为提取剂）
表4乙醇正交试验设计及结果表L9（34）
A（浓度%）
B（时间h）
C（温度℃）
D（pH）
提取量（g）
黄酮含量（%）
1（60）
1
（2）
2（3）
3（4）
1（70）
2（80）
3（90）
3（5）
6
2（70）
7
8
9
3（80）
K1
K2
K3
k1
k2
k3
极差
由上表可知,乙醇四种因素最佳组合为浓度为70%，t=4h，T=90℃，pH=3。
黄酮含量为%。
因素影响依次是浓度>
温度>
时间>
pH。
表5甲醇正交试验设计及结果表L9（34）
2（75）
由上表可知,甲醇四种因素的最佳组合为浓度为90%，t=3h，T=80℃，pH=5。
各因素影响依次是浓度>
pH>
温度。
对比上述两个表的结论,可以得到,花生壳中总黄酮含量的最佳提取剂是乙醇，最佳提取工艺是70%乙醇，温度在90℃，pH=3时提取4h。
黄酮的含量为%。
3结论与讨论
结论
⑴通过预试验对比了回流浸提法和直接浸提法，乙醇回流浸提法黄酮含量为%，乙醇直接浸提法黄酮含量为%。
试验确定了用回流浸提法效果好，因此正试验中采用回流浸提法来提取花生壳中的总黄酮。
⑵花生壳中总黄酮含量的最佳提取剂是乙醇，最佳提取工艺是70%乙醇，温度在90℃，pH=3时提取4h。
讨论
⑴用乙醇提取花生壳中的抗氧化成分，影响因素有温度、时间、酸度、提取剂浓度和溶质溶剂比，考虑到固液比对提取效果影响不大，试验只讨论了前四种因素的影响，通过正交试验确定了最佳提取工艺为浓度为70%，浸提时间为4h，温度为90℃，pH值为3时提取效果比较好。
⑵预实验
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